2025年粤人版选择性必修3生物下册月考试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年粤人版选择性必修3生物下册月考试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共5题，共10分)1、下列有关DNA连接酶的说法，正确的是（）A.DNA连接酶和限制酶的作用恰好相反，DNA连接酶可以将限制酶切开的双链DNA片段“缝合”起来B.DNA连接酶和DNA聚合酶一样能连接单链DNA片段C.EcoliDNA连接酶可以连接有平末端的DNA片段，也能连接有黏性末端的DNA片段D.T4DNA连接酶只能连接有平末端的DNA片段2、有关生物技术的安全性的叙述，不合理的是（）A.转基因农作物对于解决粮食、能源等问题起到了积极作用，同时也存在一定风险B.转基因耐储藏番茄延长了番茄的货架期，对环境不存在任何安全性问题C.有关农业转基因生物安全法规的制定既维护了消费者的权益，又最大程度地保证了转基因技术的安全性D.生物技术虽然推动了社会的发展，但应科学控制、合理使用3、在做“分离分解尿素的细菌”实验时，A同学从对应培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述不正确的是（）A.A同学出现这种结果的原因是土样不同B.可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染C.让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误D.B选项的实验思路遵循了实验的对照原则，C选项也有对照实验4、CD47是一种跨膜糖蛋白；它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌；结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1．6~5倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。下列说法错误的是（）

A.多次进行步骤①的目的是获得更多分泌抗CD47抗体的浆细胞B.步骤②后可筛选出既能产生抗CD47抗体又能大量增殖的细胞C.实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱D.对照组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于实验组可验证上述推测5、在实验室培养微生物需要人工为微生物提供各种营养和适宜的环境条件。下列关于培养基配制的说法正确的是（）A.培养基中必须要添加琼脂B.培养基中需要碳源、氮源、水和无机盐齐全C.培养基需要进行灭菌处理D.配制培养细菌的培养基，需要将pH调至酸性评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)6、在纪录片《舌尖上的中国》中多次讲到了利用不同微生物发酵来制作美味食品。桑葚果实富含多种营养成分及黄酮类化合物（一般难溶或不溶于水，易溶于乙醇等有机溶剂），目前以桑葚为原料开发的桑葚酒深受大众欢迎。酱豆是人们利用大豆制作的一道地方美食，具体做法如下：大豆煮熟→霉菌发酵→加入蔬菜→加盐、加调味酒和香辛料→乳酸发酵。下列相关内容的叙述，错误的是（）A.桑葚酒制作时榨出的果汁需经过高压蒸汽灭菌后，才能装进发酵瓶密闭发酵B.若要提取桑葚中的黄酮苷，可以采用萃取的方法C.酱豆最后在环境温暖、氧气充足的条件下发酵形成D.酱豆中有机物的种类和含量均减少7、生物兴趣小组的三位同学吃冰激凌后有两人严重腹泻，他们怀疑冰激凌中大肠杆菌超标。卫生部门规定1000mL自来水37℃培养48h后大杆菌菌落数不能超过3个，于是他们设计实验对此冰激凌进行检测。下列实验操作，不合理的是（）A.再去小店买一个同样品牌的同种冰激凌，然后配制伊红美蓝培养基（该培养基可用来鉴别大肠杆菌），灭菌、倒平板B.取10mL刚融化的冰激凌作为原液进行梯度稀释、稀释倍数为1×10～1×105C.取各个稀释浓度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法进行接种，每个浓度涂3个平板，共培养18个平板，在适宜温度下培养48hD.统计菌落数目，以菌落数代表大肠杆菌数会导致统计结果比实际值偏小8、下图表示动物细胞培养的基本流程。有关叙述正确的是（）

A.在C瓶中进行的细胞培养称为原代培养B.培养瓶D可以通过松盖处理满足细胞培养的气体环境需要C.培养瓶D无需放置在CO2培养箱中，但需要保持恒温D.D瓶细胞出现接触抑制时，用胰蛋白酶处理，再用离心法收集细胞分瓶培养9、某实验小组利用下图所示质粒和目的基因来构建基因表达载体，将目的基因导入大肠杆菌细胞并表达。下列叙述正确的是（）

A.图中的质粒用酶A切割后，会产生4个游离的磷酸基团B.在构建重组质粒时，可用酶A和酶C切割质粒和目的基因C.成功导入目的基因的大肠杆菌可在含四环素的培养基中生长D.若用酶B和酶C切割，可以避免质粒的自身环化10、大肠杆菌能在基本培养基上生长；X射线照射后产生的代谢缺陷型大肠杆菌不能在基本培养基上生长，但可以在完全培养基上生长。利用夹层培养法可筛选代谢缺陷型大肠杆菌，具体的操作是：在培养皿底部倒一层基本培养基，冷凝后倒一层含经X射线处理过的菌液的基本培养基，冷凝后再倒一层基本培养基。培养一段时间后，对首次出现的菌落做好标记。然后再向皿内倒一层完全培养基，再培养一段时间后，会长出形态较小的新菌落。下列说法正确的是（）A.X射线诱发染色体变异进而导致大肠杆菌代谢缺陷B.首次出现的菌落做标记时应标记在皿盖上C.夹层培养法可避免细菌移动或菌落被完全培养基冲散D.形态较小的新菌落可能是代谢缺陷型大肠杆菌11、玉米秸秆转化为绿色能源酒精是解决能源危机的措施之一，具体的工艺流程如图所示。下列叙述正确的是（）

A.用酸或碱预处理有利于酶与底物充分接触，提高催化效率B.步骤③中，酵母菌在发酵初期更多分布在发酵液的上层C.随培养次数的增加，分离出的菌落类型越少表示纯度越高，其遗传基因型越稳定D.发酵过程中酒精浓度升高会抑制酵母菌代谢活动，同时使发酵液pH降低，发酵停止12、发酵工程与农业、食品工业、医药工业及其他工业生产有着密切的联系。下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的是（）A.啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成B.食品添加剂虽能改善食品的口味、色泽和品质，但会降低食品的营养C.将乙肝病毒的抗原基因转入酵母菌，再结合发酵工程可生产乙肝疫苗D.利用放线菌产生的井冈霉素防止水稻枯纹病是生物防治的有效手段评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)13、一般包括______、______等技术14、体细胞核移植技术存在的问题：

克隆动物存在着健康问题、表现出______缺陷等。15、平板划线法是通过____________在_______________培养基表面______________的操作，将__________的菌种______________分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由____________繁殖而来的肉眼可见的_______________，这就是_______________________。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的______________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到_____________培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成____________，从而能在培养基表面形成___________________。16、1.基因检测引发的伦理问题。

（1）基因身份证：基因身份证指把个人的_____和_____检测出来；记录在磁卡上，而做成的个人基因身份证。

（2）基因检测引发的争论①_____②_____③_____④_____⑤_____⑥_____

。项目。

反对。

支持。

技术方面。

目前人类对①及基因间的相互作用尚缺乏足够的认识；通过基因检测达到②的目的是很困难的；基因检测结果会给受检者带来巨大的③。

通过基因检测可以对遗传性疾病及早采取④；适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。

道德方面。

基因资讯的泄露造成⑤；如个人婚姻困难；人际关系疏远，更明显的是造成一支遗传性失业大军。

对于基因歧视现象；可以通过正确的科学知识传播；⑥教育和立法得以解决。

2.试管婴儿与设计试管婴儿的比较①_____②_____③_____④_____

。项目。

设计试管婴儿。

试管婴儿。

技术手段。

胚胎移植前①（填“需要”或“不需要”）进行遗传学诊断这一环节。

②（填“需要”或‘不需要”）进行遗传学诊断。

实践应用。

用于白血病；贫血病等遗传性疾病的预测。

解决不孕不育问题。

联系。

二者都是③受精；体外进行早期胚胎发育，再进行胚胎移植，从生殖方式上都为④

17、统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____________。这是因为______________________。因此，统计结果一般用而不是用活菌数来表示。除了上述的活菌计数法外，______________也是测定微生物数量的常用方法。18、最常用的载体是______，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有______能力的_____。19、醋酸菌的最适生长温度为____________________℃。20、常用的转化方法：

将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是_______，其次还有______和______等。

将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是_______。此方法的受体细胞多是_______。

将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是_______，最常用的原核细胞是_____，其转化方法是：先用______处理细胞，使其成为______，再将______溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。21、_______mol/L浓度下，DNA溶解度最大。评卷人得分四、判断题(共3题，共18分)22、胚胎发育早期，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积也增加。()A.正确B.错误23、我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。（选择性必修3P108）()A.正确B.错误24、生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。（选择性必修3P106）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共12分)25、下图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图；请据图回答：

（1）泡菜是乳酸菌发酵的产物，乳酸菌的代谢类型是___________________。制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜，原因是____________________________。

（2）将盐与清水按照一定的比例配制盐水，待盐水煮沸冷却后，注入装好原料的泡菜坛中，同时加入一定量的“老汁”(陈泡菜水)。将盐水煮沸冷却的目的是____________________；加入“老汁”的作用是____________________________。

（3）测定亚硝酸盐含量的方法是_________________。即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与____________________________发生重氮化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合后形成_______________色的染料，然后将显色反应后的样品与已知浓度的____________进行目测比较，大致估算出亚硝酸盐的含量。26、【生物技术实践】

科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白；这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。

（1）分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的______________、大小及形状不同，在电场中的________不同而实现分离。

（2）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供_________和_______________。

（3）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的_____________；确定该蛋白质的抗菌效果。

（4）细菌培养常用的接种方法有_______和___________。实验结束后，对使用过的培养基应进行_____________处理。27、干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病；患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。下图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题：

(1)利用RNA通过①过程获得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。为了针对性获得cDNA，应如何设计逆转录第一步时的DNA引物______，设计引物的目的是______。

(2)为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位点。

(3)③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是______，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加_______的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加______的培养基（B）上培养，收集_______菌落进一步纯化后将菌体破碎处理；筛选得到SSB蛋白。

(4)将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，则后续实验内容应为抽取小鼠血液_______。28、研究者改造与肠道共生的大肠杆菌；口服该工程菌后激活机体特异性免疫，实现肿瘤的预防和治疗。

(1)部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡（OMV）；如图1．OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白。

研究者利用含图2所示元件的表达载体转化大肠杆菌制备工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，提高树突状细胞_____OMV的能力。

(2)为研究上述工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应的效果，研究者用健康小鼠进行如下实验：。组别第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小时后，饮用含阿拉伯糖的水结果检测第1组空载体+第12天，每组随机取5只小鼠等量的脾脏细胞与黑色素瘤细胞共培养，检测杀伤率，结果如图3．第2组ClyA-Fc+第3组ClyA-OVA+第4组第5组

注：“+”；“-”代表是否饮用；

口服工程菌12小时后其在肠道内存在数量较多。

①第4、5组的操作是_____。图3结果说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，理由是_____。

②为进一步验证上述结论，研究者进行如下实验：先加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，再加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，检测荧光细胞的数目，若第5组_____为最大值；则上述结论成立。

A．带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物。

B．带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体。

C．第1-5组小鼠脾脏细胞。

③肿瘤患者术后极易复发，研究者重复上表实验，并在第3次口服工程菌后第50天给小鼠注射黑色素瘤细胞。目的是_____。

(3)该工程菌的研发为不同肿瘤的精准治疗和预防提供了可能。依据本研究，设计针对肺癌治疗的工程菌表达载体元件：_____。评卷人得分六、综合题(共4题，共32分)29、自然界中某些细菌可通过代谢将原油转化为稳定无害的终产物；科学家为获得能有效修复原油污染土壤的工程菌展开相关研究。

（1）获得能降解原油的目标菌可从_______取样，样品经____________（无菌水/蒸馏水）稀释后涂布于以原油为唯一碳源的固体培养基上培养；分离纯化后获得目标菌A。

（2）目标菌A成膜性差，不能有效控制原油向深层土壤渗透。研究人员将假单胞菌的bdlA基因（约1300bp）导入目标菌A体内；尝试构建成膜性好的工程菌。

①假单胞菌遭受环境压力时，会分泌大量胞外复合物将自身包裹于其中形成细菌聚集膜样物（生物被膜），体现了生物对环境的___________。

②图1为bdlA基因与pX系列质粒连接构建的重组质粒模式图，为初步检测构建是否成功，可选用限制酶____________对其切割，并对酶切产物及重组质粒进行凝胶电泳检测，结果如图2。据图可初步判断重组质粒构建成功，依据是____________。

（3）上述方法获得的两种工程菌命名为KT2和KT5，在不同时间测定实验组中工程菌及对照组中___________的生物被膜总量相对值，结果如图3所示。该结果表明__________。

（4）若要将以上工程菌用于原油污染土壤的修复，举一例说明下一步还应进行哪些方面的研究__________?30、自新冠疫情发生以来；人类消耗了大量的一次性口罩，这些口罩不及时处理会对环境造成一定的污染。某科研人员欲筛选出能高效降解一次性口罩(主要成分是由C；H两种元素组成的聚丙烯纤维)的细菌，设计了如下图所示的流程。回答下列问题：

(1)土壤是微生物的天然培养基，该培养基能为微生物的生长提供的四大营养物质分别是碳源、_____________。

(2)通过相关实验来选择较合适的土壤样品，该实验的自变量是_____________，因变量是_____________。

(3)图中“甲”指的是_____________，将分离纯化得到的不同菌种分别接种到鉴别培养基上，鉴别培养基以_____________为唯一碳源；并加入了能与之结合的显色染色剂，从而方便挑选菌群。

(4)分离纯化聚丙烯纤维降解菌时，为了使培养皿上出现的菌落尽可能都是单菌落，应采用的方法是_____________。采用该方法的原因是_____________。31、如图是利用发酵技术获得产品的过程图；①；②都表示这一过程中的步骤或者操作，根据该图以及学过的相关知识回答问题：

(1)写出数字标号处的操作：①________________；②________。其中②的目的是防止发酵过程中混入________；进而影响生产的效率，甚至导致发酵失败。

(2)配制培养基时，一般要保证培养基中具有几类基本成分，分别是碳源、氮源、__________、________。

(3)在发酵过程中，我们要不间断地监测发酵罐中的情况，了解发酵进程，必要时要添加营养物质，同时要严格控制发酵条件，如温度、________、________等，因为环境条件的改变，不仅影响菌种的生长繁殖，而且可能会影响____________的形成。

(4)为了进一步保持发酵液的无菌环境，我们在培养基中加入了青霉素，则该培养基不能用来培养________（填“细菌”或“真菌”）类微生物，而且要注意在最后处理发酵液的时候，不能将发酵液直接排到自然水体，其原因是：①发酵液中富含________，可能会导致水体富营养化而出现水华等；②发酵液中加入的青霉素可能会导致自然界的细菌出现________种群，对人类的健康不利。32、新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合；侵入人体，引起肺炎。图1为病毒侵入后，人体内发生的部分免疫反应示意图。单克隆抗体可阻断病毒的黏附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。图2为筛选；制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。请据图回答下列问题。

(1)图1中人体内抗原呈递细胞吞噬病毒，并将病毒的抗原暴露在细胞表面，被____细胞表面的受体识别后激活该细胞。

(2)B细胞识别入侵的病毒后，在细胞因子作用下，经过细胞的___，形成__细胞。

(3)为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原学检查，检测病毒的__；采集血液样本主要用于血清学检查，检测__。

(4)据图2所示，研制抗S蛋白单克隆抗体，需先注射___免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞；再提取激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合，用HAT培养基筛选获得。

___细胞。因为同一种抗原可能激活__细胞，还需继续筛选才能获得分泌单克隆抗体的细胞株。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、A【分析】【分析】

DNA连接酶：（1）根据酶的来源不同分为两类：EcoliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端；但连接平末端时的效率比较低。（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。

【详解】

A；DNA连接酶和限制酶的作用恰好相反；限制酶可将DNA双链片段切断，而DNA连接酶可以将限制酶切开的双链DNA片段“缝合”起来，A正确；

B；DNA连接酶不能连接单链DNA片段；DNA聚合酶是将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，B错误；

C；EcoliDNA连接酶只能连接有黏性末端的DNA片段；C错误；

D、T4DNA连接酶既可以连接有黏性末端的DNA片段；也可以连接有平末端的DNA片段，D错误。

故选A。2、B【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题包括：（1）食物安全：滞后效应；出现过敏源、食物的营养成分改变等；（2）生物安全：基因扩散导致对生物多样性的威胁；（3）环境安全：对生态系统稳定性及环境的影响。

【详解】

A；转基因农作物对于解决粮食、能源等问题起到了积极作用；同时也存在一定风险，如在食品安全方面可能会出现营养成分改变等现象，A正确；

B；转基因耐储藏番茄延长了番茄的货架期；但其对环境也可能存在安全性问题，如造成基因污染，B错误；

C；有关农业转基因生物安全法规的制定既维护了消费者的权益；又最大程度地保证了转基因技术的安全性，消费者对转基因产品有知情权和选择权，C正确；

D；生物技术虽然推动了社会的发展；但应科学控制、合理使用，故我国出台了一系列相关法规和政策，D正确。

故选B。3、A【分析】【分析】

1；生物实验应遵循对照原则、等量原则、单一变量原则和控制无关变量原则。

2；A同学的实验结果可能是培养基污染造成的；还可能是A同学实验操作过程中污染造成的，也可能是与其他同学所取土壤样品不同造成的，关键是设法排除影响结果的因素。

【详解】

A；A同学出现这种结果的原因可能是土样不同；也可能是操作中污染造成的，A错误；

B；A同学的实验结果可能是培养基污染造成的；可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染，B正确；

C；让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验；如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误，C正确；

D；B、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则；D正确。

故选A。

【点睛】4、D【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；多次向免疫动物注射抗原（CD47）的目的是使刺激小鼠特异性免疫；使动物小鼠产生大量的效应B淋巴细胞即浆细胞，A正确；

B；经步骤②将脾脏中的B细胞和骨髓瘤细胞融合；经选择后可以获得既能产生抗CD47抗体又能大量增殖的细胞，B正确；

C；动物细胞培养应放在二氧化碳培养箱；C正确；

D；根据单一变量原则可知应设置不加单克隆抗体的巨噬细胞+肿瘤细胞的共培养体系为对照；抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，没有抗体抑制，CD47对巨噬细胞有抑制作用，对照组中吞噬细胞的吞噬指数显著低于实验组可验证上述推测，D错误。

故选D。5、C【分析】【分析】

培养基一般含有水；碳源、氮源、无机盐。培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。如培养乳酸杆菌时需添加维生素；培养霉菌时需将pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性。液体状态的培养基称为液体培养基，配制成的固体状态的称为固体培养基，在液体培养基中加入凝固剂琼脂后，就制成固体培养基。获得纯净的培养物关键是防止外来杂菌的入侵。

【详解】

A；固体培养基需加入琼脂；液体培养基不用加入，A错误；

B、培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐。培养某些微生物时，可以缺少部分物质，如培养自养微生物，可以不加碳源，其利用空气中CO2；培养固氮微生物；可以不加氮源，其利用空气中氮气，B错误；

C；获得纯净的培养物关键是防止外来杂菌的入侵。培养基需要进行高压蒸汽灭菌；C正确；

D；配制培养细菌的培养基；需要将pH调至中性或微碱性，D错误。

故选C。二、多选题(共7题，共14分)6、A:C:D【分析】【分析】

根据题意可知；酱豆制作时，首先要利用霉菌进行发酵，霉菌等微生物产生的酶可以将大分子物质分解成小分子物质，最后进行乳酸发酵时所需的乳酸菌是厌氧生物，需要在无氧条件下进行。

【详解】

A；桑葚酒制作时榨出的桑葚汁不能进行高压蒸汽灭菌；否则会杀死桑葚表皮上的酵母菌菌种，A错误；

B；因桑葚中的黄酮苷一般难溶或不溶于水；易溶于乙醇等有机溶剂，所以提取桑葚中的黄酮苷可采用萃取的方法，B正确；

C；酱豆制作最后是进行乳酸发酵；乳酸发酵中的乳酸菌为厌氧型生物，故乳酸发酵应在无氧条件下进行，C错误；

D；在微生物的作用下；大豆所含的蛋白质、脂肪等大分子物质被分解成易于吸收的小分子物质，同时微生物的呼吸要消耗大豆中的营养物质，并形成多种中间产物，所以酱豆中有机物的种类增加，含量减少，营养价值增加，D错误。

故选ACD。

【点睛】7、A:B:C【分析】【分析】

1；微生物常见的接种的方法：平板划线法和稀释涂布平板法；稀释涂布平板法可用于微生物的计数。

2；稀释涂布平板法统计菌落数目的原理：①当样品的稀释度足够高时；培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌；②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。

【详解】

A；若只对一个冰激凌进行检测；样品太少则不能确定是某个冰激凌的质量问题还是这个品牌冰激凌的质量问题，正确的做法是再去小店随机买多个同样品牌的同种冰激凌，A错误；

B、测定细菌的数量，一般选用104、105、106倍的稀释液进行培养，应取10mL刚融化的冰激凌作为原液进行梯度稀释、稀释倍数为1×10～1×106；B错误；

C；实验应该设置对照；取各个稀释浓度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法进行接种，每个浓度涂3个平板，再取一个平板接种等量无菌水（作为对照），共培养19个平板，在适宜温度下培养48h，当对照组无菌落生长时，选择菌落数在30-300的平板进行计数，C错误；

D；因为当两个或多个细胞连在一起时；平板上观察到的只是一个菌落，故统计菌落数目，以菌落数代表大肠杆菌数会导致统计结果比实际值偏小，该说法合理，D正确。

故选ABC。8、A:B:D【分析】【分析】

动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A；将动物组织分散为单个细胞制成细胞悬液中进行的第一次培养为原代培养；因此在C瓶中进行的细胞培养称为原代培养，A正确；

BC、进行动物细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，以满足细胞培养的气体环境需要，其中氧气是细胞呼吸必需的，CO2是为了维持培养液的pH；B正确；C错误；

D；D瓶细胞出现接触抑制时；应用胰蛋白酶处理使其分散为单个细胞，再用离心法收集细胞分瓶以进行传代培养，D正确。

故选ABD。9、A:D【分析】【分析】

分析题图：图中质粒和外源DNA都含有限制酶A；B、C的识别序列和切割位点；若用酶A切割会同时破坏质粒上的两个抗性基因。

【详解】

A；质粒中含有2个酶A的酶切位点；所以切割后会产生4个游离的磷酸基团，A正确；

B；如果用酶A和酶C同时切割质粒；会破坏质粒的标记基因，B错误；

C；根据B项分析；需要用酶B和酶C切割质粒和目的基因，导致四环素抗性基因被破坏，所以不能在含四环素的培养基中生长，C错误；

D；若用酶B和酶C切割；产生不同的黏性末端，可避免质粒自身环化，D正确。

故选AD。10、C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；大肠杆菌是原核生物；没有染色体，A错误；

B；首次出现的菌落做标记时应标记在皿底上；B错误；

C；夹层培养法不需要对大肠杆菌进行再次接种；可避免细菌移动或菌落被完全培养基冲散，C正确；

D；由于代谢缺陷型大肠杆菌不能在基本培养基上生长；所以形态较小的新菌落可能是代谢缺陷型大肠杆菌，D正确。

故选CD。11、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸秆生产燃料酒精是利用微生物进行生物发酵的过程；所利用的微生物为酵母菌，通过酒精发酵将葡萄糖转化为酒精，玉米秸秆中含有的糖类主要是纤维素，因此需要先将纤维素水解成葡萄糖，再进行发酵。

【详解】

A；由于纤维素组成成分复杂、结构稳定；生物降解时难以迅速进行，常用酸或碱进行预处理，初步打断纤维素内部的化学键，降低聚合度，利于酶与底物充分接触，提高催化效率，A正确；

B；在有氧的条件下酵母菌进行出芽生殖；上层培养液与空气接触部位氧气较多，短时间内酵母菌更多分布在发酵液的上层，B正确；

C；在选择培养基中经多次培养；分离出的菌落类型越少表示纯度越高，其遗传基因型越稳定，C正确；

D、发酵液pH下降是因为产生了CO2；D错误。

故选ABC。12、C:D【分析】【分析】

发酵工程的基本环节：选育菌种：性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来；也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。发酵罐内发酵：这是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量；产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。分离、提纯产物：如果是发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取恰当的提取、分离和纯化措施来获得产品。

【详解】

A；啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成；因此啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成，A错误；

B；食品添加剂能改善食品的口味、色泽和品质；可以增加食品的营养，B错误；

C；通过基因工程技术；将乙肝病毒的抗原基因转入酵母菌，再结合发酵工程可生产乙肝疫苗，C正确；

D；利用放线菌产生的井冈霉素防止水稻枯纹病；不会对环境造成污染，是生物防治的有效手段，D正确。

故选CD。三、填空题(共9题，共18分)13、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体14、略

【解析】遗传和生理15、略

【解析】①.接种环②.琼脂固体③.连续划线④.聚集⑤.逐步稀释⑥.一个细胞⑦.子细胞群体⑧.菌落⑨.梯度稀释⑩.琼脂固体⑪.单个细胞⑫.单个的菌落16、略

【分析】【分析】

1.基因检测可以把人体内的致病基因和易感基因检测出来；通过采取一定的预防措施预防遗传病的发生，但同时可能会带来基因歧视等伦理道德方面的问题。

2.设计试管婴儿不同于试管婴儿；试管婴儿是为了解决不孕不育的问题，而设计试管婴儿是为了解决器官移植方面的医疗问题。

【详解】

1.（1）基因身份证是指把每个人的致病基因和易感基因都检测出来；并记录在磁卡上，这样到医院看病时，只要带上这种身份证，医生就可以“对证”治疗。

（2）反对基因检测的人认为：目前人类对基因结构及基因间相互作用尚缺乏足够的认识；要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的；况且人类的多基因病，既与基因有关，又与环境和生活习惯有关，有某种致病基因的人不见得就会患病。但是，基因检测结果本身就已经足以给受检者带来巨大的心理压力。个人基因资讯的泄露所造成的基因歧视，势必造成奇特的失业大军，即遗传性失业大军。个人基因资讯被暴露之后，还会造成个人婚姻困难；人际关系疏远等严重后果。支持基因检测的人认为：通过基因检测可以对遗传性疾病及早采取预防措施，适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。对于基因歧视现象，可以通过正确的科学知识传播、伦理道德教育和立法得以解决。

2.设计试管婴儿需要因而具有特定的性别或遗传性状；因此胚胎移植前需要进行遗传学诊断这一环节，而试管婴儿是为了解决不孕不育问题，不需要考虑婴儿的性别等问题，不需要进行遗传学诊断。二者的共同点是：两者都是体外受精，并进行体外早期胚胎培养，都要经过胚胎移植，都是有性生殖。

【点睛】

1.基因与疾病的关系：具有致病基因的个体不一定患遗传病；因为生物的性状还受到环境因素的影响；没有致病基因也可能患病，因为基因表达的蛋白质，在加工或修饰过程中出现错误，也会出现症状。

2.明确设计试管婴儿和试管婴儿目的的不同是解答本题的关键之一。【解析】致病基因易感基因基因结构预防疾病心理压力预防措施基因歧视伦理道德需要不需要体外有性生殖17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落菌落数18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】质粒自我复制双链环状DNA分子19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】30～3520、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术受精卵繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少大肠杆菌Ca2+感受态细胞重组表达载体DNA分子21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】0．14四、判断题(共3题，共18分)22、B【分析】【详解】

胚胎发育早期；细胞数量不断增加，但胚胎总体积不变或略有缩小。

故错误。23、A【分析】【详解】

生殖性克隆存在伦理道德等方面的问题，我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。本说法正确。24、A【分析】【详解】

生殖性克隆，即通常所说的克隆人，通过克隆技术产生独立生存的新个体，即通常所说的克隆人，该说法正确。五、实验题(共4题，共12分)25、略

【分析】【分析】

1；泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌；代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。

2；泡菜的制作过程：按照清水与盐的质量比为4：1的比例配制盐水；将盐、水煮沸冷却。将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发酵时间长短受室内温度的影响。

3；泡菜中的亚硝酸盐含量可以用比色法测定；即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，重氮盐与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

（1）

乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型；制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料；这是因为新鲜的蔬菜亚硝酸盐的含量低。

（2）

将盐水煮沸冷却的目的是煮沸的目的是除去盐水中的空气和杀菌；冷却的目的是防止高温杀死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活动不受影响）；加入“老汁”的作用是“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短时间内成为优势菌。

（3）

测定亚硝酸盐含量的方法是比色法。即在盐酸酸化条件下；亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合后形成玫瑰红色的染料，然后将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，大致估算出亚硝酸盐的含量。

【点睛】

本题考查制作泡菜，要求考生识记制作泡菜的原理和过程，理解用比色法测定亚硝酸盐的含量，意在考查考生的识记能力和分析能力。【解析】（1）异养厌氧型亚硝酸盐的含量低。

（2）煮沸的目的是除去盐水中的空气和杀菌；冷却的目的是防止高温杀死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活动不受影响）“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短时间内成为优势菌。

（3）比色法对氨基苯磺酸玫瑰红标准显色液26、略

【分析】【详解】

（1）电泳法分离蛋白质；是根据蛋白质分子的电荷；大小及形状不同，在电场中的迁移速度不同而实现分离。

（2）牛肉膏和蛋白胨中蛋白质较多；可作为碳源和氮源。

（3）加入抗菌蛋白的培养基中；金黄色葡萄球菌应该不能生长或生长很少，未加入抗菌蛋白的培养基中金黄色葡萄球菌应该能生长，菌落较多。

（4）平板划线法、稀释涂布平板法都能使接种的菌种在固体培养上充分分散，对使用过的培养基应进行灭菌处理，是为了防止细菌扩散污染。【解析】①.电荷（带电情况）②.迁移速度③.碳源④.氮源⑤.数量⑥.平板划线法⑦.稀释涂布平板法（稀释混合平板法）⑧.灭菌27、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。研究人员一般先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞；使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。

【详解】

（1）利用RNA通过①过程（逆转录）获得cDNA需要逆转录酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。逆转录第一步以mRMA为模板合成DNA单链；新链与模板链反向平行，由于新链只能由5'端向3'端延伸，所以逆转录第一步的引物应与mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互补配对，即用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物；设计引物的目的是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。

（2）对逆转录得到的cDNA扩增时；引物的5'端结合母链的3'端之后DNA聚合酶开始扩增DNA。为确保其与pET41a质粒定向连接，应使用不同种的限制酶切割质粒和目的基因，由图可知，使用EcoRI酶会破环SSB基因，故应在相应引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位点。

（3）由题图分析可知：质粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破坏了氯霉素抗性基因，所以成功组装的重组质粒不能在添加了氯霉素的培养基上生长，③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌；目的是使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态，然后分别将处理后的大肠杆菌先接种在添加卡那霉素的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加氯霉素的培养基（B）上培养，收集能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，经筛选即可得到SSB蛋白。

（4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，如果该蛋白有抗原性，会引起机体的免疫反应，产生相应抗体。则后续实验内容应为抽取小鼠血液提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。【解析】(1)逆转录用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物

使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的。

(4)提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体28、略

【分析】【分析】

树突状细胞为抗原呈递细胞；可识别；摄取和传递抗原信息。

【详解】

（1）细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白；而OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。所以，ClyA基因的作用为表达出细菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，进而融合基因可以被免疫细胞识别。Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，进而提高树突状细胞识别；摄取和传递抗原信息的能力。

（2）①根据表格和柱状图可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐渐增加部件，且第4组和第5组工程菌都是完整的，即第4组:ClyA-OVA-Fc第5组:ClyA-OVA-Fc，但是第4组饮用含阿拉伯糖的水，进而激活融合基因的表达；第5组不饮用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表达。所以，第3；5组含有OVA，在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高；1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低。

②小鼠脾脏细胞具有免疫细胞；可在抗原刺激下引起特异性免疫。带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物可引起小鼠脾脏细胞发生特异性免疫，故先加入第1-5组小鼠脾脏细胞和带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物进行保温，判断特异性免疫的强度；

故选AC。

再加入带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体；目的是检测OVA抗原肽复合物是否能够产生特异性细胞毒性T细胞。

故选B。

若第5组同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比越多；说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，结论成立。

③肿瘤患者术后极易复发；说明特异性免疫功能减弱。所以，可多次注射黑色素瘤细胞，进而研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

（3）本实验中融合基因里面有OVA（黑色素瘤细胞特异性抗原），所以只需将OVA替换为肺癌细胞特异性抗原即可。即将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因。【解析】(1)表达ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面识别；摄取。

(2)第4组:ClyA-OVA-Fc和-第5组:ClyA-OVA-Fc和+第3；5组含有OVA；在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高;1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低ACB同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

(3)将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因六、综合题(共4题，共32分)29、略

【分析】【分析】

如图：图片右边M是Marker；标记大小的；1；2号泳道是两个质粒全长；3、4号泳道是酶切后目的基因和质粒的大小。

【详解】

（1）能降解原油的目标菌存在于原油污染土壤；为避免杂菌污染应用无菌水稀释。

（2）①假单胞菌形成生物被膜；是生物对环境的适应。

②两种重组质粒含有的目的基因应该一致，用Csp45I、XbaI对重组质粒切割；看切下的目的基因是否一致，初步判断重组质粒构建是否成功。

（3）本实验的对照组应该是导入普通质粒的目标菌A。实验结果表明在36t/h时KT2和KT5两种工程菌的生物被膜量相对值显著提高。

（4）若要将以上工程菌用于原油污染土壤的修复；下一步还应进行许多研究，如：如何扩大培养。

【点睛】

本题主要考查目的菌的筛选、转基因技