PCR岗位技能考核试题及答案

PCR岗位技能考核试题

一、选择题

1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是（）［多选题］*

A、目的基因V

B、引物V

C、四种脱氧核昔酸V

D、DNA聚合酶等V

E、mRNA

F、核糖体

2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为（）［单选题］*

A、0.3-lmmol/L

B、0.5-lmmol/L

C、0.3-2mmol/L

D、0.5-2mmol/LV

3、多重PCR需要的引物对为（）［单选题］*

A、一对引物

B、半对引物

C、两对引物

D、多对引物V

4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核昔酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其

特异性决定因素为（）［单选题］*

A、模板

B、引物V

C、dNTP

D、镁离子

5、在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增（）［单选题］*

A、TaqDNA聚合酶加量过多

B、引物加量过多

C、A、B都可V

D、缓冲液中镁离子含量过高

6.PCR技术的发明人是（）［单选题］*

A、MullisV

B、史蒂文.沙夫

C、兰德尔.才木

7.PCR产物短期存放可在（）保存。［单选题］*

A、4℃V

B、常温

C、-80℃

D、局温

8.PCR产物长期储存最好置于（X［单选题］*

A、4℃

B、常温

C-、20℃V

9.PCR的基本反应过程包括（）［单选题］*

A、变性、退火、延伸V

B、变性、延伸

C、变性、退火

10.在实际工作中，基因扩增实验室污染类型包括（）［单选题］*

A.试剂污染和标本间交叉污染

B扩增产物的污染

C.天然基因组DNA的污染

D.A、B、C都可能V

11、PCR技术于哪一年发明（）［单选题］*

A、1983年V

B、1971年

C、1987年

D、1993年

12.TaqDNA聚合酶酶促反应最快最适温度为（）［单选题］*

A、37℃

B、50-55℃

C、70-75℃V

D、80-85℃

13.以下哪种物质在PCR反应中不需要（）［单选题］*

A、TaqDNA聚合酶

B、dNTPs

C、镁离子

D、RNA酶V

14.PCR检测中，经过n个循环的扩增，拷贝数将增加（）［单选题］*

A、n

B、2n

C、2AnV

D、nA2

15.PCR基因扩增仪最关键的部分是（）［单选题］*

A、温度控制系统V

B、荧光检测系统

C、软件系统

D、热盖

16.以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则（）［单选题］*

A、各区合并V

B、注意风向

C、因地制宜

D、方便工作

17.PCR实验室一般包括（）［单选题］*

A.试剂准备区

B标本制备区

C.扩增区和产物分析区

D.A、B、C都含V

18.PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是

否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（1［单选题］*

A、白细胞DNA

B、病毒蛋白质

C、血浆抗体

D、病毒核酸V

19.如果反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后,DNA分子的数量将达到（）个。

［单选题］*

A、100x30

B、100x30x2

C、100x300

D、100x2A30V

20.PCR扩增产物的分析方法主要有（）［单选题］*

A、凝胶电泳分析法

B、点杂交法

C、荧光探针定量PCR法

D、A、B、C都是V

21、阳性室内质控品出现假阴性失控的常见原因分析（）［多选题］*

A、核酸提取中的随机误差，如核酸提取中的丢失，有机溶剂的去除不彻底，标本中扩增抑制物的残留，

所用耗材如离心管有PCR抑制物等V

B、仪器的问题，如扩增仪孔间温度的不一致性，孔内温度与所示温度的不一致性等V

C、试剂的问题，如Taq酶和/或反转录酶的失活，探针的纯度及标记效率和核酸提取试剂的效率等V

22.阴性室内质控品出现假阳性失控的常见原因分析（）［多选题］*

A、扩增产物的污染V

B、临床标本的核酸提取过程中发生的样本间的交叉污染V

C、移液枪头等关键耗材污染V

D、试剂污染V

E、仪器故障

23.出现实验室污染怎么办？（）［多选题］*

A、开窗通风V

B、用次氯酸钠溶液清洗地面，实验台、墙面V

C、增加紫外灯照射时间，

D、用核酸清除剂空中喷雾等方法去除V

E、每天进行上述过程，直到污染消除V

24.生物安全柜、超净工作台、通风柜的区别（）［多选题］*

A、生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护工

作人员、实验室环境以及实验品，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计

的。V

B、超净工作台是为了保护试验品或产品而设计的通过吹过工作区域的垂直或水平层流空气防止试验品

或产品受到工作区域外粉尘或细菌的污染。一旦微生物样品放置于工作区域，层流空气将把带有微生物介质

的空气吹向前台工作人员而产生危险。V

C、通风柜是为在化学实验过程中清除腐蚀性化学气体和有毒烟雾而设计的。分为外接管道通风柜和净

气型通风柜，净气型通风柜主要用于保护实验室人员免受有毒化学气体和烟雾吸入危害，也可用于防止粉末

吸入危害V

D、通风柜和超净工作台不属于生物安全柜,不可使用在涉及微生物材料的实验或生产过程中V

二、判断题

1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间取得平衡。

对V

错

2、在PCR反应中,dATP在DNA扩增中可以提供能量，同时作为DNA合成的原料。

对V

错

3、DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋。

对V

错

4、PCR反应中，复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。

对V

错

5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。

对V

错

6、PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等。

对V

错

7、PCR技术需在体内进行。

对

错V

8、PCR反应体系中的缓冲液相当于细胞中的体液。

对V

错

9、核酸的复制是由5'-3'方向进行的。

对V

错

10、配对的碱基总是A与T和G与C。

对V

错

11、HBsAg转阴性后一段时间才出现可检测的HBsAb,此段间隔期称之为“窗口期"。

对V

错

12、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR的探针。

对V

错

13、PCR反应体系中Mg2+的作用是促进TaqDNA聚合酶活性。

对V

错

14、若标本中含有蛋白变性剂（如甲醛），PH、离子强度、Mg2+等有较大改变都会影响Taq酶活性。

对V

错

15.每个子代DNA分子中均保留一条亲代DNA链和一条新合成的DNA链，这种复制方式称之为半保

留复制。()［单选题］*

对V

错

16.发生溶血的标本对PCR结果没影响。

对

错V

17."平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和。

对V

错

18.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)就是在应用PCR方法检测RNA病毒时，以RNA为模板，在逆

转录酶的作用下形成cDNA链，然后以cDNA为模板进行正常的PCR循环增。

对V

错

19.在定量PCR中，72P这一步对荧光探针的结合有影响，故去除，实际上55℃仍可充分延伸，完成

扩增复制。

对V

错

20.PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面。

对V

错

21.PCR方法检测GBS-DNA检测的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为95.05%、98.74%、

92.31%和99.21%。

对V

错

22.使用无菌拭子取生殖道、直肠样本进行GBS核酸检测。

对V

错

23.GBS核酸样本在2(-8℃保存条件下必需7天内检测完成。

对V

错

24.使用无菌拭子取生殖道、直肠样本进行GBS核酸检测。

对V

错

25.内标对照CT值＞38或未检出，说明样本中含有PCR反应的抑制物，建议重新进行

样本提取。

对V

错

26.20、睡氯匹定、氯叱格雷、普拉格雷通过抑制ADP受体，而发挥抗血小板的作用。

对V

错

27.氯毗格雷治疗可明显改善经皮冠状动脉介入治疗术(PQ)术后患者的主要心血管预后，但仍有

5%~15%的患者在1年内会出现包括死亡、心肌梗死和脑卒中在内的临床终点事件。与CYP2C19基因多

态性有关。

对V

错

28.氯叱格雷属于前体药物，15%通过肝脏代谢后生成活性硫醇代谢物。

对V

错

29.CYP2C19基因分型检测可以使用肝素抗凝管采血。

对

错V

30.CYP2cl9*2:是指5号外显子的第681位发生G-A突变；CYP2cl9*3:是指4号外显子的第636

位发生G-A突变。

对V

错

31.CYP2C19基因型为*1/*3(*2GG;*3GA),为中代谢，临床可以考虑增加用药剂量或更

换其它抗血小板药物。

对V

错

32抗血小板药物相关基因检测结合血栓弹力图实施个体化药物治疗，如果发现基因型与表型存在矛盾,

制定个体化给药方案时，应以基因型为主。

对

错V

33.亚甲基四氢叶酸还原酶MTHFR是体内叶酸代谢当中的关键酶。

对V

错

34.血清中同型半胱氨酸的升高与MTHFR、MTR、MTRR酶的活性降低有关。

对V

错

35.中国人群中，约29%的人MTHFR基因为677TT型。

对V

错

36.MTHFRC677T发生纯合突变(TT型)后酶的活性仅有正常的30%.

对V

错

37.用于MTHFR基因检测的标本常温条件下可以保存3天。

对V

错

38.核酸包括两种类型:脱氧核糖核酸(ATCG)和核糖核酸(AUCG)。

对V

错

39.根据遗传中心法则,遗传信息的流动方向为：DNAoRNA今蛋白质。

对V

错

40.核酸样品含量可根据260nm处波长的吸光度算出。

对V

错

41.核酸样品纯度可根据(260/280nm)处波长的吸光度比值算出。

对V

错

42.Taq酶是决定PCR特异性的关键因素。

对

错V

43.PCR中，全血样本采集一般使用EDTA或枸椽酸盐抗凝，不使用肝素抗凝。

对V

错

44.Taqman探针两端标记有:荧光基团和淬灭基团。

对V

错

45.dNTPs呈颗粒状，保存不当容易变性失活。

对V

错

46.PCR基本反应过程包括:变性、退火、延伸。

对V

错

47.核酸基本结构单位是:核苜酸，其组成包括碱基、核糖或脱氧核糖和磷酸。

对V

错

48.DNA双链中:碱基A-T之间以两个氢键相连，G-C以三个氢键相连。

对V

错

49.核酸的解链