2025年新高考生物一轮复习：动物细胞工程（练习）（学生版+解析）

第40讲动物细包工程

目录

01模拟基础练

【题型一】动物细包培养技术

【题型二】动物体细包核移植技术和克隆

【题型三】动物细包融合与单克隆抗体的制备

【题型四】干细包工程

02重难创新练

03真题实战练

题型一动物细包培养技术

1.下列关于动物细包培养和植物组织培养的叙述，正确的是（）

A.植物通过光合作用自养，因此，在植物组织培养的培养基中不需要添加有机物

B.植物组织培养利用了细包的全能性，动物细包培养也利用了该原理

C.植物组织培养在再分化时需在有光条件下进行，动物细包培养对光照无要求

D,植物组织培养和动物细包培养均可用于检测有毒物质

2.Vero细包是非洲绿猴肾细包，易于培养，生物安全性高，对多种病毒的感染敏感，是很多病毒培养的理

想基质。培养Vero细包能广泛地用于人和动物疫苗的生产，下列有关叙述错误的是（）

A.贴壁生长的细包需用胰蛋白酶处理后再进行离心收集

B.培养正常的Vero细包时，在培养瓶上可形成多层细包

C.定期更换培养基能及时去除代谢废物并提供营养物质

D.培养动物细包的气体环境中CO2的作用是维持培养液的pH

3.由于肝脏器官的短缺，肝细包移植被作为肝移植的替代策略。用海藻酸盐微胶囊包裹可增殖人肝细包获

得类器官（eLO）,并用于移植是治疗肝衰竭的一种有前途的策略。下列叙述错误的是（）

A.供体肝组织需先用胰蛋白酶将其分散，再进行原代培养

B.开放式培养肝细包，有利于细包代谢产生CO2及时溢出

C.异体移植细包会发生免疫排斥，用海藻酸盐包裹有利于形成免疫保护屏障

D.若eLO与空微囊治疗组的效果相当，可证明微胶囊包裹不影响肝细包功能

题型二动物体细包核移植技术和克隆

4.W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟制备乳腺生物反应器来获得大量W,基本过程如图

所示。下列相关叙述错误的是（）

W①表达导入山羊胚筛选山羊胚

基因一载体―"胎成纤一"胎成纤［份重山

维细胞维细胞竺构一1

山羊卵_胚

母细胞

A.①过程构建的表达载体含有组织特异性启动子

B.②过程通常在显微镜下进行去核、注入等操作

C.该过程培养的山羊所有组织细包均能分泌W

D.该过程利用了转生态、胚胎移植等工程技术

5.猪繁殖与呼吸综合征（又称“猪蓝耳病”）是造成养猪业重大损失的主要疾病之一，CD163生态表达的蛋

白质是猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的关键受体，某团队通过生态工程和细包核移植技术成功培育了

CD163生态敲除大白猪。下列有关说法错误的是（）

A.生态敲除应选择猪胚胎成纤维细包的连续细包系作为重组DNA的受体细包

B.对经筛选的阳性转化细包进行克隆化培养后作为供体细包进行细包核移植

C.采用电融合方法可促进核供体和受体细包的融合及重组细包的分裂发育

D.可从克隆猪仔耳组织提取DNA进行相关检测确定CD163生态是否成功敲除

6.大熊猫是我国的国宝，尽管采取了许多保护措施，但由于其繁殖能力及幼仔成活率均较低，数量仍然非

常少。有科学家尝试采用体细包核移植技术来克隆大熊猫。下列相关叙述错误的是（）

A.在体细包核移植过程中，普遍使用的去核方法是显微操作法

B.用体细包核移植技术克隆大熊猫，体现了动物细包具有全能性

C.由于体细包分化程度高，因而体细包核移植难度明显高于胚胎细包核移植

D.在保护濒危物种方面，体细包核移植技术有望增加濒危物种的存活数量

题型三动物细包融合与单克隆抗体的制备

7.卡其霉素是一种细包毒素，对肿瘤细包和正常细包均具有杀伤力。抗体一药物偶联物（ADC）通过细包

毒素与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细包的选择性杀伤，其作用机制如图所示。下列叙述正确的是（）

抗体

药物

接头

A.制备单克隆抗体时要向实验动物注射卡其霉素

B.ADC中抗体的作用是特异性识别杀伤肿瘤细包

C.用于生产单克隆抗体的杂交瘤细包不能传代培养

D.ADC能实现精准识别，减少对正常细包的损伤

8.下图为制备抗新冠病毒单克隆抗体的流程图。通过过程③获得杂交瘤细包，通过过程④获得能够产生特

定抗体的杂交瘤细包。下列相关叙述错误的是（）

一

小鼠骨髓瘤细胞阈运性竺凹一群嚣翼胞

②混合③HAT④克隆化培养

并促融培养基

淋巴细胞

A.图中过程①获得的淋巴细包，有的不能产生抗新冠病毒的抗体

B.图中过程②利用了细包膜具有一定的流动性的结构特点

C.图中过程③使用的HAT培养基，属于固体培养基和选择培养基

D.图中过程④以新冠病毒的抗原物质为试剂，筛选抗体检测呈阳性的细包

9.某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够

刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗

S单克隆抗体，过程如图。下列说法正确的是（）

培养骨髓瘤细胞

A.用胃蛋白酶处理，使贴壁生长的骨髓瘤细包分散开

B.单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白

C.细包融合后，第一次筛选需用96孔板培养以获得单一类型杂交瘤细包

D.抗体由浆细包分泌，其化学本质大多数为蛋白质，少数为RNA

题型四干细包工程

10.诱导多能干细包（iPSC）可分化成类似间充质干细包（iMSC）oiMSC能合成和分泌V蛋白，用于治疗

骨关节炎等疾病。下列叙述错误的是（）

A,可用病毒作为载体将某些生态转入小鼠成纤维细包以诱导产生iPSC

B.iPSC在适宜条件下培养，需添加特定的物质才能使其转化为iMSC

C.利用96孔板筛选转化成功的iMSC,需稀释至每孔至多1个细包，并添加V蛋白

D.iMSC培养液需定期更换，并维持适宜温度、PH、渗透压和气体环境等条件

11.泪液分泌不足或蒸发太快，以及睑板腺分泌的油脂不足均会导致干眼症。科学家用诱导多能干细包（iPS

细包）制成了与泪腺相似的组织，该研究成果有望带动对重症干眼症治疗方法和药物的研究。下列有关叙

述正确的是（）

A.泪腺属于内分泌腺，除了分泌泪液，还能分泌有关激素

B.泪液分泌不足导致内环境的成分减少，进而引发干眼症

C.来源于病人的iPS细包形成的泪腺组织不会引起病人的免疫排斥

D.iPS细包具有发育的全能性，可以从囊胚的内细包团中分离获得

12.科学家利用黑鼠成纤维细包获得多能干细包（iPS）,并利用该细包培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，

流程如图所示，图中①~⑨表示过程。下列相关叙述正确的是（）

A.过程①需在含95%Ch加5%CC）2混合气体环境中培养体细包

B.过程②中诱导因子的作用是促使黑鼠成纤维细包分化成iPS细包

C.过程③采用的是显微注射法，过程⑧之前需用激素制剂处理白鼠

D.由于克隆鼠与黑鼠供体所含的遗传物质相同，故两者性状完全相同

㈤2

一、单选题

1.植物组织培养是将植物组织或细包接种到培养基中，然后在人工控制的条件下进行培养，使其形成完整

植株的过程。植物组织培养有多种，如原生质体培养、悬浮细包培养、花药培养、组织培养、器官培养等，

其中最常见的是愈伤组织培养。下列叙述错误的是（）

A.对植物细包和动物细包进行培养时，都用到了固体培养基

B.在进行植物体细包杂交时，需要经历原生质体的培养阶段

C.愈伤组织是未分化的薄壁组织，没有特定的结构和功能，全能性强

D.动物细包培养和植物组织培养最终的目的不都是获得完整个体

2.在保护粤东黑猪猪种遗传资源各项生物技术中，体细包核移植技术因具有继承亲本性状完整、实验周期

短、保种效力强的优点而备受关注，下图为部分相关操作流程。据图分析正确的是（）

从屠宰场母猪获取的卵巢，处理

后，39P、5%C02,条件下培养

里车黑猪

小耳花猪将供体细胞注入剪下粤东黑猪的猪

去核的卵母细胞耳组织，进行培养

通过显微操

作去核将重构胚移入同期发情

处理的杜洛克母猪体内

A.卵母细包需在卵巢中成熟后再移除核

B.5%CO2的主要作用是维持培养液的pH

C.重构胚的遗传物质完全来自粤东黑猪

D.该技术证明了动物体细包具有全能性

3.科学家将两株不同的杂交瘤细包A和B融合形成双杂交瘤细包AB.双杂交瘤细包AB能够悬浮在培养

基中生长繁殖，产生的双特异性抗体AB结构如图所示。下列叙述正确的是（）

A.用选择培养基即可筛选出双杂交瘤细包AB

B.培养双杂交瘤细包时，需提供CO2维持培养液的渗透压

C.双杂交瘤细包进行传代培养时，需使用胰蛋白酶分散处理

D.抗体AB与抗体A、B相比，可增强对靶细包的杀伤效果

4.在科学研究和制药等领域，经常要进行动物细包培养。体外培养动物细包时，需要为细包分裂和生长提

供营养。下列相关叙述正确的是（）

A.培养基中添加的葡萄糖主要用于细包合成糖原

B.必须添加非必需氨基酸细包才能正常生长分裂

C.培养基中不添加脂质，细包中也会合成新的脂质

D.直接添加大量DNA有助于细包快速的分裂增殖

5.体外动物细包培养制造出的细包培养肉是一种人造肉，具有营养可控、结构仿真、口感真实的特点。其

主要生产流程如下图，图中的微载体是一种固体的细包生长基质，其表面能使细包贴附。下列叙述正确的

是（）

A.①过程可用机械的方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶等处理的方法获得细包悬液

B.③过程中加入微载体为细包提供更大附着面积，使细包间不出现接触抑制，产量增加

C.③④过程需使用经灭菌处理的培养液，培养细包时既要提供02也要提供CO2

D.肌肉干细包属于成体干细包，能够分化成特定的细包和组织，具有全能性

6.郑州大学第一附属医院研究团队首次完成了去ECM0化的“人造子宫”动物实验。医生将胎龄4个月的胎

羊从母体中取出，并将其脐动脉和脐静脉与母体颈部的动脉和静脉相连，建立起一个类似于ECM0的并体

循环。下列叙述错误的是（）

A.“人造子宫”能为胎羊细包提供氧气和营养物质，运走代谢废物

B.“人造子宫”作为液体屏障，能保护胎羊免受外界环境的直接干扰

C.“人造子宫”能与胎羊细包进行物质和信息的双向交流

D.该实验证明维持稳态仅需分子水平上的调节，不需进行器官、系统水平上的调节

7.研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。据图分析，以下叙述错

误的是（）

A.实验前需要给小鼠甲多次注射病毒A,增加分泌抗病毒A抗体的浆细包比例

B.取小鼠甲胸腺剪碎并用胰蛋白酶处理一段时间，可使其分散并制成单细包悬液

C.筛选1所用的培养基属于选择培养基，多次传代后只有杂交瘤细包能够生存

D.筛选2需对杂交瘤细包进行单克隆培养后进行抗原抗体杂交反应阳性鉴定

8.科研人员将人体细包的细包核植入兔的去核卵母细包中，融合形成杂种细包后，培养至囊胚期，从中分

离出的胚胎干细包能长期增殖并保持不分化的状态。下列叙述错误的是（）

A.进行上述操作通常选择MII期的卵母细包并去掉其核膜包被的细包核

B.可通过电融合法形成杂种细包，再用电刺激、乙醇处理等方法激活使细包分裂

C.从囊胚的内细包团中分离出的胚胎干细包比原肠胚细包全能性高

D.体外培养胚胎干细包需加入血清等天然成分，并需要提供无菌、无毒的条件

9.细包在癌变过程产生肿瘤抗原，其中一部分抗原与肿瘤细包内的MHC分子结合后呈递在细包表面。T

细包通过受体识别肿瘤细包表面与MHC结合的肿瘤抗原，进而杀死肿瘤细包。研究发现，肿瘤细包可下调

MHC表达实现“免疫逃逸”。科研人员将嵌合抗原受体（CAR）表达于T细包表面，获得的CAR-T细包回

注患者体内，可以克服“免疫逃逸”。CAR-T细包杀伤肿瘤细包过程如下图，下列叙述正确的是（）

颗粒酶

o'a*穿孔素

肿瘤

T细胞•:•:•细胞细胞

A.体外扩增CAR-T细包应用了细包具有全能性的原理

B.CAR-T细包通过CAR识别肿瘤细包的过程可能不依赖肿瘤细包的MHC

C.CAR-T细包分泌穿孔素等使肿瘤细包坏死，体现了免疫系统的免疫监视功能

D.使用健康志愿者T细包制备CAR-T细包，比用患者自身T细包的抗癌能力强

10.2024年6月26日用多人干细包培育的三维大脑模型面世。科学家将来自5个捐赠者的干细包，浸泡在

一种精确配制的混合溶液中，培育出首个包含多人细包的3D大脑模型。下列相关叙述错误的是（）

A.在精确配制的混合溶液中干细包可被定向诱导分化成脑部细包

B.精确配制的混合溶液中的糖类是干细包分化的主要能源物质

C.干细包分化后，细包内蛋白质数量会改变，但核酸数量不变

D.该研究可探索大脑发育机制及人脑对新药物和新疗法的反应等

、多选题

11.研究发现，免疫抑制受体TREM2（髓系细包触发受体2）在肿瘤免疫逃逸过程中发挥了重要作用，TREM2

抗体有望提高肿瘤治疗的效果。下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列有关叙述错误的是（）

同B淋巴

国细胞

/©

特定培养专一抗体检测

④

SP2/0细胞基筛选

③

A.SP2/0细包能在体外大量增殖，步骤②中融合的细包都有此特性

B.步骤②常用的方法有PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导融合法等

C.通过步骤③即可获得所需的杂交瘤细包，步骤⑤⑥是克隆化培养过程

D.制备的TREM2单克隆抗体特异性强，能精准杀死免疫逃逸的肿瘤细包

12.科研人员在制备杂交瘤细包的基础上，获得了能够产生双特异性抗体（BsAb）的双杂交瘤细包。BsAb

可以同时结合两种抗原，拓展了抗EGFR（表皮生长因子受体）单克隆抗体的临床应用范围，其原理如图所

A.利用选择培养基筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细包

B.BsAb能与T细包表面抗原CD3结合，激活T细包发挥细包免疫

C.制备杂交瘤细包时，可以用胃蛋白酶处理获得单个细包

D.一种抗原部分结构改变后可能会出现原双特异性抗体中一种单抗失效

13.下图为我国科学家获得克隆猴“中中”和“华华”的具体过程。研究发现，重构胚中生态A的正常表达是

克隆成功的关键；重构胚生态组中大量被甲基化的组蛋白H3会抑制核的全能性；组蛋白H3的乙酰化能使

小鼠克隆成功率提高5倍以上。下列叙述正确的是（）

注：Kdm4d为组蛋白去甲基化酶；TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。

A.细包a指的是培养到MII期的卵母细包，通过显微操作去掉的是完整细包核

B.用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是促进两细包融合，也可用电融合法促融

C.Kdm4d可使H3去甲基化，TSA可使H3保持乙酰化，进而促进了生态A的正常表达

D.“中中，，和“华华”的培育用到了体细包核移植技术，培育过程属于有性生殖

14.克隆动物常用的核移植方法主要有细包质内注射法和透明带下注射法。前者是用微型注射针将供体细

包核吸出并注入去核卵母细包质内；后者是直接将供体细包注入去核卵母细包透明带内，然后促使两个细

包融合。“中中”和“华华”是两只出生在我国的克隆猴,如图是它们的培育流程简图。下列说法正确的是（）

昭祠则►雨丽I—里麦造殖毒短暂处理

卵母细胞［_^»法核卵母细胞

I克隆小猴片生I代孕母猴熟胎移植雨眼——■

A.以克隆猴为模型研发新型药物可以有效缩短研发进程

B.供体细包注入去核卵母细包透明带内后需经诱导才能形成重构胚

C.“中中，，和“华华，，的遗传性状由图中的胎猴和母猴共同决定

D.相比之下，细包质内注射法对供体细包核和卵母细包的损伤更小

15.据第三次全国大熊猫野外种群调查，全世界野生大熊猫不足1600只，因此，如何保护和繁殖大熊猫是

亟待解决的问题。现设计如图所示繁殖过程，下列叙述正确的是（）

熊

A.用促性腺激素处理雌性大熊猫促进排卵，卵子培养至MI期才能参与受精

B.在形成早期胚胎的过程中，依次经历了卵裂、囊胚、原肠胚等几个阶段

C.胚胎移植需对供体和受体进行同期发情处理，通常选桑甚胚、囊胚期移植

D.培育克隆熊猫采用的技术有细包核移植、胚胎移植等

三、非选择题

16.I.生命孕育的过程是神奇和复杂的。胚胎发育时，母体通过形成透明纤维层，防止胚胎细包植入过深而

损伤子宫内膜；胚胎的胎盘细包则分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG）,抑制母体淋巴细包的活动；此后胎儿

为了获得更多的养料，还会导致母体的血压升高，促进更多血液流入子宫，以获得更多的营养。

（DHCG可通过肾小球从尿液中排出。用抗HCG单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒"，在妊娠第8天就

可以通过检查尿液作出诊断。请简述利用从经HCG免疫的小鼠体内采集的B淋巴细包（简称B淋巴细包）、

小鼠骨髓瘤细包制备抗HCG单克隆抗体的主要流程：（用箭头和文字表示）。

H.黄曲霉毒素（AFB）是黄曲霉（一种真菌）产生的具有极强致癌力的小分子代谢产物。为准确检测食品中

残留的AFB,科研人员拟将AFB单抗固定在一种新材料上，制备为“检测探针”。已知材料M稳定性、发光

性能等方面有明显优势，但它很难与抗体结合；物质P可以提高材料M对抗体的亲和力。制备检测探针的

流程如图1,探针发光性能与物质P的浓度关系如图2。

2i

♦曾一♦

材料M材料MPMP-抗AFB

单抗探针0.60.81.01.2

物质P的浓度(mg/mL)

图1图2

样品和探针的移动方向

样品和探针

混合后滴加+AFB

丫抗AFB单抗的抗体

加样处吸水垫

图3

(2)依据图2结果，科研人员选择物质P的浓度为作为生产检测探针的条件，原因是0

(3)科研人员制备定量检测AFB的免疫试纸，如图3。试纸的T线处固定的物质是AFB,C线处固定的物质

是抗AFB单抗的抗体。在加样处滴加的样液会向有扩散经过T线和C线。

若加样处，滴加只含“MP-AFB单抗探铲，的样液，能检测到荧光的线为(填“T线”、“C线”或“T线和

C线”)；若滴加样液中含有MP-AFB单抗探针和高浓度的AFB,T线的发光性为(填“发荧光”或“不

发荧光")。

(4)单克隆抗体除了上述功能，还有什么作用？。

17.猴痘是由猴痘病毒(MPXV)引起的人畜共患病。A29L蛋白是MPXV的囊膜蛋白，参与识别宿主细包，

促使病毒与宿主细包融合。研究员为制备抗MPXVA29L单克隆抗体，进行了如下实验。请回答下列问题:

(1)图中过程①是给小鼠注射,从而获得已免疫的B淋巴细包；为使该细包与骨髓瘤细包进行融合，可

在A中加入化学物质,一段时间后，A中除融合的杂交瘤细包外，还应该有0

(2)在培养皿B中加入了特定的选择培养基，其目的是。将从B中获得的细包在96孔板上进行,

经多次筛选，就可在C中获得足够数量的能产生抗MPXVA29L的杂交瘤细包。将能产生抗MPXVA29L的

杂交瘤细包进行大规模培养，除图中方法外，还可以进行。

（3）本研究得到的抗MPXVA29L单克隆抗体的用途有

一、单选题

1.（2024.重庆.高考真题）自然条件下，甲、乙两种鱼均通过体外受精繁殖后代，甲属于国家保护的稀有物

种，乙的种群数量多且繁殖速度较甲快。我国科学家通过下图所示流程进行相关研究，以期用于濒危鱼类

的保护。下列叙述正确的是（）

A.诱导后的iPGCs具有胚胎干细包的特性

B.移植的iPGCs最终产生的配子具有相同的遗传信息

C.该实验中，子一代的遗传物质来源于物种甲

D.通过该实验可以获得甲的克隆

2.（2024・吉林・高考真题）从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细包进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检

测细包数目，结果如图。下列叙述正确的是（）

日

。

4•

)

、

皿

S柒

思

A.传代培养时，培养皿需密封防止污染

B.选取①的细包进行传代培养比②更合理

C.直接用离心法收集细包进行传代培养

D.细包增长进入平台期可能与细包密度过大有关

3.（2024・浙江•高考真题）某动物细包培养过程中，细包贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过

程如图。

下列叙述错误的是（）

A.①加消化液的目的是使细包与瓶壁分离B.②加培养液的目的是促进细包增殖

C.③分装时需调整到合适的细包密度D.整个过程需要在无菌、无毒条件下进行

4.（2023・天津・高考真题）多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。下图列举了几项技

术成果。

/①试管动物（如：高产试管奶牛）

胚胎移植/

早期胚胎》受体子宫彳＞②克隆动物（如:克隆猴）

、③转基因动物（如：乳汁中含人干扰素的山羊）

下列叙述正确的是（）

A.经胚胎移植产生的后代与受体均保持一致

B.①需获得MII期的去核卵母细包

C.②能大幅改良动物性状

D.③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良

5.（2024•海南・高考真题）海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进而

获得该种植株。动物细包融合技术可将骨髓瘤细包和产生特定抗体的B淋巴细包融合形成杂交瘤细包，进

而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是（）

A.利用的原理均是细包的全能性

B.使用的培养基均需添加葡萄糖和血清

C.培养时的温度和pH均相同

D.产生的愈伤组织细包或杂交瘤细包均具有增殖能力

6.（2024・福建・高考真题）我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该成果

属于单克隆抗体在临床上的应用。下列叙述错误的是（）

A.该试剂盒的研制过程应用了动物细包融合技术

B.该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合

C.该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤

D.该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测

二、多选题

7.（2024•江苏・高考真题）从牛卵巢采集卵母细包进行体外成熟培养，探究高温对卵母细包成熟的影响，结

A.猴的成纤维细包和胚胎干细包功能不同，但具有相同的生态组

B.囊胚细包②③都由细包①分裂分化形成，但表达的生态都不同

C.移植前细包和囊胚的培养都要放在充满CO?的培养箱中进行

D.移植后胚胎的发育受母体激素影响，也影响母体激素分泌

三、非选择题

10.(2023・重庆•高考真题)妊娠与子宫内膜基质细包的功能密切相关。某研究小组通过如图所示的实验流

程获得了子宫内膜基质细包，以期用于妊娠相关疾病的研究。

肿瘤细胞|

|人皮肤组织卢涡成纤维细胞卜

(D手术获得的皮肤组织需在低温下运至实验室，低温对细包中各种蛋白质的作用为—.O

(2)过程①中，诱导形成PS细包时，需提高成纤维细包中4个生态的表达量，可采用—技术将这些生态导

入该细包。这4个生态的主要作用为：M生态促进增殖，S生态和C生态控制干细包特性，K生态抑制凋

亡和衰老。若成纤维细包形成肿瘤细包，最有可能的原因是一生态过量表达。

(3)培养iPS细包时，应对所处环境定期消毒以降低细包被污染风险。可用紫外线进行消毒的是(多选)。

A.培养基B.培养瓶C.细包培养室D.CO2培养箱

(4)过程②中，iPS细包经历的生命历程为—oPCR技术可用于检测子宫内膜基质细包关键生态的mRNA

水平，mRNA需经过才能作为PCR扩增的模板。

11.(2024・广东•高考真题)某些肿瘤细包表面的PD-L1与细包毒性T细包(CTL)表面的PD-1结合能抑制

CTL的免疫活性，导致肿瘤免疫逃逸。免疫检查点疗法使用单克隆抗体阻断PD-L1和PD-1的结合，可恢复

CTL的活性，用于肿瘤治疗。为进一步提高疗效，研究者以黑色素瘤模型小鼠为材料，开展该疗法与化疗

的联合治疗研究。部分结果见图。

S

1U

区

及

麒

痣

(

CTL□活化的CTL®

(

自

麒

一

，

宾

t>D

氐­

12勺

•6

2

S5X

x)

)面

矮

、

解0

片

影

a。

l

)O£

卫

合

联

化疗免疫检里

法

疗

查点疗法

回答下列问题：

(1)据图分析，疗法的治疗效果最佳，推测其原因是o

(2)黑色素瘤细包能分泌吸引某类细包靠近的细包因子CXCL1.为使CTL响应此信号，可在CTL中导入—

生态后再将其回输小鼠体内，从而进一步提高治疗效果。该生态的表达产物应定位于CTL的(答位

置)且生态导入后不影响CTL的能力。

(3)某兴趣小组基于现有抗体一药物偶联物的思路提出了两种药物设计方案。方案一：将化疗药物与PD-L1

单克隆抗体结合在一起。方案二：将化疗药物与PD-1单克隆抗体结合在一起。你认为方案(填“一”

或“二”)可行，理由是O

12.(2024.宁夏四川.高考真题)某种病原体的蛋白质A可被吞噬细包摄入和处理，诱导特异性免疫。回答

下列问题。

(1)病原体感染诱导产生浆细包的特异性免疫方式属于O

(2)溶酶体中的蛋白酶可将蛋白质A的一条肽链水解成多个片段，蛋白酶切断的化学键是o

(3)不采用荧光素标记蛋白质A,设计实验验证蛋白质A的片段可出现在吞噬细包的溶酶体中，简要写出实

验思路和预期结果o

第40讲动物细包工程

目录

01模拟基础练

【题型一】动物细包培养技术

【题型二】动物体细包核移植技术和克隆

【题型三】动物细包融合与单克隆抗体的制备

【题型四】干细包工程

02重难创新练

03真题实战练

题型一动物细包培养技术

1.下列关于动物细包培养和植物组织培养的叙述，正确的是（）

A.植物通过光合作用自养，因此，在植物组织培养的培养基中不需要添加有机物

B.植物组织培养利用了细包的全能性，动物细包培养也利用了该原理

C.植物组织培养在再分化时需在有光条件下进行，动物细包培养对光照无要求

D.植物组织培养和动物细包培养均可用于检测有毒物质

【答案】B

【分析】植物组织培养：①原理：植物细包的全能性；②培养基：MS培养基（固体），通常需要加入生长

素和细包分裂素诱导；③主要过程：脱分化和再分化；④培养目的：快速繁殖或获得脱毒苗等。

【详解】A、在分化形成叶片之前植物细包不能进行光合作用，因此植物组织培养的培养基中需要加入糖类

等有机物，A正确；

B、植物组织培养利用了细包的全能性，但动物细包培养利用的原理是细包增殖，B错误；

C、植物组织培养再分化阶段必须给予光照，但愈伤组织的形成一般不需要光照，动物细包培养对光照无要

求，C正确；

D、植物组织培养不能用于检测有毒物质，动物细包培养可用于检测有毒物质，D错误。

故选B。

2.Vero细包是非洲绿猴肾细包，易于培养，生物安全性高，对多种病毒的感染敏感，是很多病毒培养的理

想基质。培养Vero细包能广泛地用于人和动物疫苗的生产，下列有关叙述错误的是（）

A.贴壁生长的细包需用胰蛋白酶处理后再进行离心收集

B.培养正常的Vero细包时，在培养瓶上可形成多层细包

C.定期更换培养基能及时去除代谢废物并提供营养物质

D.培养动物细包的气体环境中CO2的作用是维持培养液的pH

【答案】B

【分析】动物细包培养过程：取动物组织块-剪碎组织-用胰蛋白酶处理分散成单个细包一制成细包悬液

一转入培养液中（原代培养）一放入二氧化碳培养箱培养一贴满瓶壁的细包用酶分散为单个细包，制成细

包悬液一转入培养液（传代培养）一放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】A、贴壁生长的细包需用胰蛋白酶处理成为单个细包后，再进行离心收集，A正确；

B、培养正常的Vero细包时会出现接触抑制现象，不会形成多层细包，B错误；

C、代谢产物积累会导致细包生长受阻，定期更换培养基能及时去除代谢废物并提供营养物质，C正确；

D、培养动物细包的气体环境中C02的作用是维持培养液的pH,故动物细包培养时的气体条件是95%的空

气+5%的CO2,D错误。

故选B。

3.由于肝脏器官的短缺，肝细包移植被作为肝移植的替代策略。用海藻酸盐微胶囊包裹可增殖人肝细包获

得类器官（eLO）,并用于移植是治疗肝衰竭的一种有前途的策略。下列叙述错误的是（）

A.供体肝组织需先用胰蛋白酶将其分散，再进行原代培养

B.开放式培养肝细包，有利于细包代谢产生C02及时溢出

C.异体移植细包会发生免疫排斥，用海藻酸盐包裹有利于形成免疫保护屏障

D.若eLO与空微囊治疗组的效果相当，可证明微胶囊包裹不影响肝细包功能

【答案】A

（分析】取动物组织块-用机械法或胰蛋白酶和胶原蛋白酶处理分散成单个细包一制成细包悬液一转入培

养液中进行原代培养一悬浮生长的细包直接离心收集制成细包悬液，贴满瓶壁的细包用胰蛋白酶分散为单

个细包，离心制成细包悬液一分瓶转入培养液进行传代培养。

【详解】A、供体肝组织要用机械法或胰蛋白酶和胶原蛋白酶处理分散成单个细包，再进行原代培养，A正

确；

B、开放式培养肝细包，有利于细包代谢吸收。2以及产生的C02及时溢出，防止C02积累在培养液中，改

变培养液pH,B正确；

C、异体移植细包会发生免疫排斥，用海藻酸盐包裹形成能够防止免疫系统识别，C正确；

D、若海藻酸盐微胶囊包裹可增殖人肝细包获得类器官（eLO）与空微囊治疗组的效果相当，说明空微囊也

可以治疗肝衰竭，不能证明微胶囊包裹不影响肝细包功能，D错误。

故选A。

题型二动物体细包核移植技术和克隆

4.W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟制备乳腺生物反应器来获得大量W,基本过程如图

所示。下列相关叙述错误的是（）

W①表达导入山羊胚筛选山羊胚

基因匚-载体*胎成纤----胎成纤-

维细胞维细胞构不

2胚羊

山羊卵_

母细胞

A.①过程构建的表达载体含有组织特异性启动子

B.②过程通常在显微镜下进行去核、注入等操作

C.该过程培养的山羊所有组织细包均能分泌W

D.该过程利用了转生态、胚胎移植等工程技术

【答案】B

【分析】生态工程技术的步骤：①目的生态的获取，主要有三种方法：生态文库、PCR技术扩增、人工合

成；②生态表达载体构建，表达载体组成：启动子+目的生态+终止子+标记生态；③目的生态导入受体细包，

动物细包（受体）采用显微注射技术导入，植物细包（受体）采用农杆菌转化法或生态枪法或花粉管通道

法导入，微生物细包（受体）采用感受态细包法导入；④目的生态检测与鉴定，采用分子检测、个体生物

学水平鉴定。

【详解】A、①过程构建的表达载体含有组织特异性启动子，即RNA聚合酶的识别和结合部位，A正确；

B、②为核移植，通常在显微镜下进行去核、注入等操作，B正确；

C、该过程培养的山羊只有乳腺细包能分泌W,C错误；

D、通过生物工程技术制备山羊乳腺生物反应器过程中应用到了转生态（W生态导入山羊胚胎成纤维细包）、

核移植（胚胎成纤维细包和卵母细包形成重构胚）和胚胎移植（重构胚移入山羊体内）等工程技术，D错

误。

故选B„

5.猪繁殖与呼吸综合征（又称“猪蓝耳病”）是造成养猪业重大损失的主要疾病之一，CD163生态表达的蛋

白质是猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的关键受体，某团队通过生态工程和细包核移植技术成功培育了

CD163生态敲除大白猪。下列有关说法错误的是（）

A.生态敲除应选择猪胚胎成纤维细包的连续细包系作为重组DNA的受体细包

B.对经筛选的阳性转化细包进行克隆化培养后作为供体细包进行细包核移植

C.采用电融合方法可促进核供体和受体细包的融合及重组细包的分裂发育

D.可从克隆猪仔耳组织提取DNA进行相关检测确定CD163生态是否成功敲除

【答案】A

【分析】克隆动物是先将含有遗传物质的供体细包的核移植到去除了细包核的卵细包中，利用微电流刺激

等使两者融合为一体，然后促使这一新细包分裂繁殖发育成胚胎，当胚胎发育到一定程度后，再被植入动

物子宫中使动物怀孕，便可产下与提供细包核者生态相同的动物。这一过程中如果对供体细包进行生态改

造，那么无性繁殖的动物后代生态就会发生相同的变化。

【详解】A、克隆动物是先将含有遗传物质的供体细包的核移植到去除了细包核的卵细包中，A正确；

B、对经筛选的阳性转化细包（说明已经敲出CD163生态）进行克隆化培养后作为供体细包进行细包核移

植，B正确；

C、将两种细包进行电融合，电融合的作用除了促进细包融合，同时起到了激活重组细包发育的作用，C

正确；

D、克隆猪是由一个细包发育而来的，可从克隆猪仔任何组织提取DNA进行相关检测确定CD163生态是否

成功敲除，D错误。

故选A„

6.大熊猫是我国的国宝，尽管采取了许多保护措施，但由于其繁殖能力及幼仔成活率均较低，数量仍然非

常少。有科学家尝试采用体细包核移植技术来克隆大熊猫。下列相关叙述错误的是（）

A.在体细包核移植过程中，普遍使用的去核方法是显微操作法

B.用体细包核移植技术克隆大熊猫，体现了动物细包具有全能性

C.由于体细包分化程度高，因而体细包核移植难度明显高于胚胎细包核移植

D.在保护濒危物种方面，体细包核移植技术有望增加濒危物种的存活数量

【答案】B

【分析】1、动物细包核移植：是将动物的一个细包的细包核，移入一个已经去掉细包核的卵母细包中，使

其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成一个新的个体。用核移植方法得到的动物称为克

隆动物。哺乳动物核移植可以分为胚胎细包核移植和体细包核移植。由于动物胚胎细包分化程度低，表现

全能性相对容易，而动物体细包分化程度高，表现全能性十分困难，因此动物体细包核移植的难度明显高

于胚胎细包核移植。体细包核移植过程中通过显微操作去核。

2、动物体细包核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存

活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。

【详解】A、在体细包核移植过程中，采集的卵母细包需培养到减数第二次分裂中期时，用显微操作去核法

去除卵母细包的核，A正确；

B、用体细包核移植技术克隆大熊猫，体现了动物细包的细包核具有全能性，不能体现细包具有全能性，B

错误；

C、相对于胚胎细包，体细包分化程度高，全能性不容易恢复，因此利用体细包进行核移植的难度明显大于

胚胎细包的核移植，C正确；

D、动物体细包核移植技术的应用前景包括加速家畜遗传改良进程；培养可用于移植的组织、器官；体细包

核移植技术还可以保护濒危物种，增加动物存活数量，D错误。

故选Bo

题型三动物细包融合与单克隆抗体的制备

7.卡其霉素是一种细包毒素，对肿瘤细包和正常细包均具有杀伤力。抗体一药物偶联物（ADC）通过细包

毒素与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细包的选择性杀伤，其作用机制如图所示。下列叙述正确的是（）

抗体

药物

接头

ADC

A.制备单克隆抗体时要向实验动物注射卡其霉素

B.ADC中抗体的作用是特异性识别杀伤肿瘤细包

C.用于生产单克隆抗体的杂交瘤细包不能传代培养

D.ADC能实现精准识别，减少对正常细包的损伤

【答案】A

【分析】据图分析：抗体与靶细包膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把药物（细包毒素）一并带进靶

细包，引起靶细包溶酶体膜的破裂，最后导致细包凋亡，实现了对肿瘤细包的选择性杀伤。

【详解】A、制备单克隆抗体时不需要向实验动物注射细包毒素，而是注射目标抗原，以刺激动物体内产生

特异性抗体，A正确；

B、在ADC中，抗体的主要作用是特异性识别和结合肿瘤细包，而不是杀伤细包，B错误；

C、杂交瘤细包可以进行传代培养，是产生单克隆抗体的关键，C错误；

D、抗体-药物偶联物（ADC）通过抗体的特异性识别功能，可以精确地靶向结合肿瘤细包，从而减少对正

常细包的损伤，D错误。

故选Ao

8.下图为制备抗新冠病毒单克隆抗体的流程图。通过过程③获得杂交瘤细包，通过过程④获得能够产生特

定抗体的杂交瘤细包。下列相关叙述错误的是（）

免疫处理小鼠骨髓瘤细胞盟国吧约一群舞鬻

②混合③HAT④克隆化培养

并促融培养基

A.图中过程①获得的淋巴细包，有的不能产生抗新冠病毒的抗体

B.图中过程②利用了细包膜具有一定的流动性的结构特点

C.图中过程③使用的HAT培养基，属于固体培养基和选择培养基

D.图中过程④以新冠病毒的抗原物质为试剂，筛选抗体检测呈阳性的细包

【答案】B

【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫

能力的B淋巴细包。利用动物细包融合技术将B淋巴细包和骨髓瘤细包融合，单克隆抗体制备过程中的两

次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细包；第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗

体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细包。

【详解】A、图中过程①从小鼠脾脏获得的淋巴细包有多种，有的不能产生抗新冠病毒的抗体，A正确；

B、图中过程②细包融合利用了细包膜具有一定的流动性的结构特点，B正确；

C、图中过程③使用的HAT培养基，属于液体培养基和选择培养基，C错误；

D、图中过程④以新冠病毒的抗原物质为试剂，进行克隆化培养和抗体检测，筛选抗体检测呈阳性的细包,

D错误。

故选Bo

9.某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够

刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗

S单克隆抗体，过程如图。下列说法正确的是（）

筛选单

一类型

杂交瘤

细胞

单克隆

抗体A

筛选单

一类型单克隆

杂交瘤抗体B

培养骨髓瘤细胞细胞

瘤细胞

A.用胃蛋白酶处理，使贴壁生长的骨髓瘤细包分散开

B.单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白

C.细包融合后，第一次筛选需用96孔板培养以获得单一类型杂交瘤细包

D.抗体由浆细包分泌，其化学本质大多数为蛋白质，少数为RNA

【答案】B

【分析】杂交瘤细包制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免

疫的B淋巴液细包；诱导B细包和骨髓瘤细包融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细包；进行抗体检测，

筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细包；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从

培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】A、胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,多数动物细包培养的适宜pH为7.2~7.4,所以不能用胃蛋白

酶处理使贴壁生长的骨髓瘤细包分散开，应使用胶原蛋白酶或胰蛋白酶，A正确；

B、由题意可知，由于蛋白S含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体,

所以单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白，B正确；

C、细包融合后，第一次筛选需用特定的选择性培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细包和融合

的具有同种核的细包都会死亡，只有融合的杂种细包才能生长，C错误；

D、抗体由浆细包分泌，其化学本质为蛋白质，D错误。

故选Bo

题型四干细包工程

10.诱导多能干细包（iPSC）可分化成类似间充质干细包（iMSC）oiMSC能合成和分泌V蛋白，用于治疗

骨关节炎等疾病。下列叙述错误的是（）

A.可用病毒作为载体将某些生态转入小鼠成纤维细包以诱导产生iPSC

B.iPSC在适宜条件下培养，需添加特定的物质才能使其转化为iMSC

C.利用96孔板筛选转化成功的iMSC,需稀释至每孔至多1个细包，并添加V蛋白

D.iMSC培养液需定期更换，并维持适宜温度、PH、渗透压和气体环境等条件

【答案】B

【分析】1、胚胎干细包简称ES或EK细包，是由早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细包，iPS与ES细

包一样，可通过定向诱导分化修补某些功能异常的细包来治疗疾病。科学家已尝试采用多种方法来制备iPS

细包，包括借助载体将特定生态导入细包中，直接将特定蛋白导入细包中或者用小分子化合物等来诱导形

成iPS细包。iPS细包最初是由成纤维细包转化而来的，后来发现