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文档简介
DBS江苏省卫生和计划生育委员会发布I1食品安全地方标准婴幼儿配方乳粉中α-乳白蛋白的测定凝胶色谱法本标准规定了用凝胶色谱法测定婴幼儿配方乳粉中α-乳白蛋白2.1α-乳白蛋白(α-Lac2.2β-乳球蛋白(β-Lactoglobulin)是指乳以盐酸胍为变性剂,以2-巯基乙醇为还原剂,断开蛋白质中的硫-硫(S-S)4.2.1磷酸二氢钠(NaH2PO4)。4.2.2磷酸氢二钠(Na2HPO4)。4.2.3乙二胺四乙酸(EDTA,C10H16N2O84.2.6盐酸胍(CH6ClN3)。4.3试剂配制4.3.1缓冲溶液有必要,用氢氧化钠(4.2.4)或盐酸(4.2.5)将pH调节到7.5±0.1。将溶液转移至1000mL容量瓶,用4.3.2流动相称取573g盐酸胍,置于1000mL广口锥形瓶中,添加100mL缓冲溶液(4.3.1),再用水将该溶液稀释到约900mL,同时不停搅拌,用氢氧化钠溶液(4.2.4将pH调节到7.5±0.1。将溶液转移至1000mL容量瓶中,并用水定容至刻度。过0.45µm滤4.3.3标准溶液配制准确称取25mg(精确到0.1mg)α-乳白蛋白标准品和25mg(精确到0.1mg)β-乳球蛋白标准品,置分别移取混合标准储备液0.05mL、0.1mL、0.5mL、1mL、2mL至10m至刻度,配成浓度为0.0125、0.025、0.125、注2:标准溶液中加入β-乳球蛋白是为确保β-乳球蛋白和α-乳5.1高效液相色谱仪(配泵头清洗装置、紫外检测器或二极管矩阵根据样品的蛋白质含量,称取含有10mg蛋白质的乳粉样品(精确到0.1mg),置于10mL刻度试管中,加入8mL流动相,使样品完全溶解,如需超声应保持样品温度不高于30℃,G3000SWXL(7.8mm×300mm)或相当者;使用时将236.2.4检测器:紫外检测器或二极管矩阵检测器,检测CV100m1000XCV100m1000X——试样中α-乳白蛋白(以牛α-乳白蛋白计)的含量C——从标准工作曲线得到的试样测定液中α-乳白m——试样质量,g。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值4DBS32/011—2016(资料性附录)-at意意律图A.1α-乳白蛋白标准品的液相色谱图(RT:36.图A.2样品中α
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