2025年人教版选择性必修3生物下册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年人教版选择性必修3生物下册月考试卷454考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共5题，共10分)1、1978年，科学家将人体内能够产生胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并在大肠杆菌内获得成功表达。按照该方法生产的胰岛素已广泛用于市场。下列叙述正确的是（）A.人的胰岛素基因可与大肠杆菌DNA重组的基础是两者具有相似的物质组成和分子结构B.人的胰岛素基因只存在于胰岛组织细胞中，故只能从胰岛组织细胞中获取胰岛素基因C.人的胰岛素基因在大肠杆菌中表达出的肽链，需经大肠杆菌的内质网和高尔基体加工才能降血糖D.人的胰岛素基因中的遗传信息在大肠杆菌中的传递过程只有DNA→RNRNA→蛋白质2、下列生物学实验操作，能够顺利达到实验目的的是A.在固体培养基上涂布稀释的大肠杆菌培养液获得单菌落B.在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通入无菌空气制作果酒C.土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上筛选分解尿素的细菌D.在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液3、关于基因工程下列说法中不正确的有（）

①限制酶主要是从真核生物中分离纯化出来的②DNA连接酶都是从原核生物中分离得到的③所有限制酶识别的核苷酸序列均由6个核苷酸组成④不同限制酶切割DNA的位点不同⑤有的质粒是单链DNAA.①③④⑤B.①②③⑤C.②③④⑤D.①③④⑤4、利用酵母菌、醋酸菌和毛霉进行发酵的适合温度分别是（）A.30~35℃、18~35℃、15~18℃B.18~25℃、30~35℃、15~18℃C.18~35℃、20~35℃、15~18℃D.30~35℃、20~35℃、15~18℃5、第一只克隆猫“大蒜”的出生标志着我国在克隆领域的一大进步，下图为获得克隆猫的基本流程图，下列叙述错误的是（）

A.动物细胞培养过程中，需定期更换培养液以防止培养过程中细胞代谢产物积累B.A猫卵母细胞去核的目的是使克隆猫的遗传物质主要来自有价值的供体细胞细胞核C.将早期胚胎移植到代孕猫时一般选择发育良好、形态正常的桑甚胚或原肠胚D.对受体C猫进行同期发情处理以便接受外源胚胎评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)6、如图为苹果酒的发酵装置示意图；下列叙述错误的是（）

A.发酵过程中酒精的产生速率越来越快B.集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的CO2C.发酵过程中酵母种群呈“J”型增长D.若发酵液表面出现菌膜，最可能原因是发酵瓶漏气7、如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图；有关叙述正确的是（）

A.在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH后高压蒸汽灭菌B.步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素C.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力D.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落8、如表为不同动物受精卵发育成胚胎进入子宫的时间（小时）；依据题表分析正确的是（）

。动物种类2细胞4细胞8细胞16细胞桑葚胚进入子宫时受精卵的发育天数和发育阶段小鼠24～3838～5050～6060～7068～803牛27～4244～6546～9096～120120～1444～5马2430～3650～607298～1066A.小鼠胚胎进入子宫时的发育程度比牛的高B.体外马胚胎移植到子宫时选择16细胞阶段C.受精卵发育的阶段顺序为2-4-8-16-桑葚胚D.2-4-8-16细胞发育阶段进行的是有丝分裂9、有一个婴儿在出生后保留了脐带血，在以后他生长发育过程中如果出现了某种难治疗的疾病，就可以通过血液中的干细胞来为其治病。关于这个实例说法不正确的是（）A.用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病，需要激发细胞的所有全能性B.用脐带血中的干细胞能够治疗这个孩子所有的疾病C.如果要移植用他的干细胞培育出的器官，需要用到细胞培养技术D.如果要移植用他的干细胞培育出的器官，应该长期给他使用免疫抑制药物10、下列关于DNA粗提取与鉴定的实验叙述不正确的是（）A.获取鸡血时，容器中应先加入适量的NaCl溶液以防止血液凝固B.由于DNA对高温耐受性差，故提取时需加入95%的冷酒精C.可用木瓜蛋白酶纯化过滤后研磨液中的DNAD.向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中缓缓加蒸馏水，当出现析出物时停止加水评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)11、回答下列问题。

（1）目前人类对基因________及基因间的________________尚缺乏足够的认识，要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的；况且人类的____________病，既与基因有关，又与环境和________________有关。

（2）生物武器种类包括__________、________、__________，以及经过___________的致病菌等。

（3）1998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申了在任何情况下_____________、_____________、______________生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。12、功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中______部位的两个核苷酸之间的______断开，因此具有______。13、酵母菌是______________微生物。酵母菌进行有氧呼吸的反应式如下：______________________；酵母菌进行无氧呼吸的反应式如下：_________________。14、基因工程操作一般经历如下四个步骤：_____。15、沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌；被感染了沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染的食品，会使人发生食物中毒。沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死。肉桂精油是从肉桂树中提炼获得的，具有不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发的特性，能抑制沙门氏菌的繁殖。回答下列问题：

（1）培养沙门氏菌时要进行无菌操作，常用的灭菌方法有________（答出两种）。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板________（填“倒置”或“正置”）。单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是________。

（2）从鸡粪便取样，经选择培养后需要经过一系列________才能将样品涂布到鉴别培养基上。对获得的沙门氏菌常采用________的方法长期保存。

（3）根据题干信息，为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中储存、加工食品的方法是________。

（4）根据肉桂精油的化学特性，可采用________法来提取，提取过程中影响精油品质的因素有________。16、植物繁殖的新途径。

微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。

作物脱毒：采用______组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒______）

人工种子：以植物组织培养得到的______、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经_____包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，______；方便储藏和运输。

人工种子的结构包括：______、_____和______。17、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。18、最后检测目的基因是否翻译成______，方法是从转基因生物中提取______，用相应的______进行______。评卷人得分四、判断题(共1题，共5分)19、蛋白质工程是一项难度很大的工程，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往十分复杂。（选择性必修3P95）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共10分)20、科学家的发现给人类的生活带来了无限的想象；他们采集了某深海海域的沉积物样品，分离；鉴定得到其中的深海放线菌，以期获得具有前景的抗生素替代品。据此回答下列问题：

(1)研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究，取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后取菌液通过_______________法接种到高氏一号（加数滴质量分数为10%的酚）培养基表面以获得单菌落。

(2)通过PCR技术扩增分离得到的放线菌的16SrRNA基因可进行菌株的种属鉴定。PCR技术中起关键作用的酶是_____________。该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR产物一般可通过_________________鉴定。

(3)科学家还将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中。2~3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态、具有活跃的分裂能力，它们就是iPS细胞。在这个实验过程中，逆转录病毒的作用是_______________如何证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用？请写出实验设计思路______________评卷人得分六、综合题(共3题，共9分)21、近年来；非洲猪瘟(ASF）在我国多地蔓延，给家猪养殖业造成了巨大损失。目前控制该病主要依靠快速；准确的诊断方法，尽早发现、处理，防止扩散。某研究团队通过相关生物学技术制备了非洲猪瘟病毒(ASFV）核心蛋白p54的单克隆抗体。相关实验过程如下。

回答下列问题：

（1）步骤①中获取目的基因的方法是_______________________。若ASFVp54基因序列中无限制酶切位点，为确保ASFVp54基因与pET28a载体正确连接，在步骤①中应该____________________

（2）步骤②中最常用的转化方法是用___________________处理细胞。步骤④处理的目的是_________________

（3）获得杂交瘤细胞后，在注入小鼠腹腔中之前还应进行_____________________

（4）利用ASFVP54单克隆抗体能快速、准确诊断ASF的原因是_________________________22、苹果酒风味清爽；且具有保健养生的功效。用新鲜苹果榨取果汁并制作果酒的简要流程如下：

（1）过程①榨取的果汁往往比较浑浊，解决的方法是________________________________________________________________。

（2）过程②分离酵母菌应使用________培养基（从功能分）。过程③固定化酵母细胞常采用________法，如果希望反复使用这些固定化酵母细胞，一定要______________________。

（3）过程④完成后，可以用________检测发酵产物中是否有酒精产生。若要进一步检测所得果酒中酵母菌的密度，接种可采用____________法。

（4）刚制作的果酒放置一段时间后，有时会出现酸味，其原因是容器密闭不严，醋酸菌进行将果酒转变成________。23、新型冠状病毒是一种RNA病毒；其表面的棘突蛋白（简称S蛋白）是主要的病毒抗原。单克隆抗体既可作为诊断试剂，又可阻断病毒的黏附和入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。制备抗S蛋白单克隆抗体的流程如下图，请回答下列问题：

(1)步骤①必须给小鼠注射__________________，目的是__________________________；取小鼠的脾脏剪碎后用酶处理一段时间，再加入培养液可制成单细胞悬液。

(2)步骤④诱导融合操作后，体系中出现多种类型细胞的原因是____________________。

(3)步骤⑤培养的结果是__________________；还需进行步骤⑥的原因是______________________。

(4)步骤⑥含多次筛选，筛选依据的基本原理是_______________________________，选出的杂交瘤细胞的特点是_____________________________________________________________。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、A【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；人的胰岛素基因是DNA上的某一片段；与大肠杆菌DNA的分子组成和结构相同，这是两者能重组的基础，A正确；

B；人的不同细胞是由同一个受精卵分裂、分化形成的；所含有的基因相同，故胰岛素基因广泛存在于各种组织细胞中，B错误；

C；大肠杆菌属于原核生物；无内质网和高尔基体，C错误；

D；胰岛素基因导入大肠杆菌后；会跟随大肠杆菌的DNA进行复制、转录、翻译，故其遗传信息传递过程还应有DNA→DNA，D错误。

故选A。

【点睛】2、A【分析】【详解】

在固体培养基上涂布稀释后的菌液能够得到单个菌落，A正确；在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通入无菌空气，有利于酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，不利于制作果酒，B错误；牛肉膏蛋白胨培养基不能筛选出分解尿素的细菌，应在以尿素为唯一氮源的培养基上筛选尿素分解菌，C错误；在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，土样中的微生物全部被杀死，不能用于制取土壤稀释液，D错误。3、B【分析】【分析】

基因工程的工具：

（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；

（2）DNA连接酶：根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶；T4DNA连接酶；

（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

①限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的；①错误；

②DNA连接酶既可以从原核生物中分离得到，如E•coliDNA连接酶从大肠杆菌中分离得到，也可以从病毒中分离得到，如T4DNA连接酶能从T4噬菌体（病毒）中分离得到；②错误；

③限制酶识别特定的核苷酸序列；但不一定均由6个核苷酸组成，③错误；

④由于限制酶能识别特定的核苷酸序列并有特定的切割位点；所以不同限制酶切割DNA的位点不同，④正确；

⑤质粒是双链环状DNA分子；⑤错误。

所以不正确的有①②③⑤。

故选B。

【点睛】4、B【分析】【分析】

果酒和果醋发酵：①将葡萄汁装入发酵瓶；要留要大约13的空间，并封闭充气口。②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃~25℃，时间控制在10~12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行。及时的监测。③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30℃~35℃，时间控制在前7~8d左右，并注意适时通过充气口充气。

【详解】

利用酵母菌进行果酒制作的适宜温度是18~25℃；利用醋酸菌进行醋酸发酵的适宜温度是30～35℃；利用毛霉进行腐乳制作的适宜温度是15~18℃；B正确。

故选B。5、C【分析】【分析】

生物体通过无性繁殖所生成的群体或个体称为克隆；由动物体内一个细胞经过无性生殖过程进而发育形成的动物个体为克隆动物。体细胞克隆即取出一个双倍体细胞核移入一个去核的卵细胞，并在一定条件下进行核卵重组，再植入代孕母体中发育成新个体的过程。

【详解】

A；动物细胞培养时；需要定期更换培养液，以便清除细胞代谢产物，A正确；

B；对卵母细胞去核的目的是保证核遗传物质主要来自供体细胞；B正确；

C；将早期胚胎移植到代孕猫时一般选择发育良好、形态正常的桑甚胚或囊胚；C错误；

D；胚胎移植时需进行同期发情处理；使受体和供体处于相同的生理状况，有利于完成胚胎移植，D正确。

故选C。二、多选题(共5题，共10分)6、A:B:C【分析】【分析】

【详解】

A；酵母菌首先进行有氧呼吸；而后进行无氧呼吸，发酵过程中由于营养物质的减少、有害代谢产物的积累，pH的改变，酒精的产生速率逐渐减慢，A错误；

B、集气管中的气体是酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸产生的CO2；B错误；

C；发酵过程中酵母种群呈“S”型增长；而后减少，C错误；

D；若酵液表面出现菌膜；属于醋酸菌，需氧型微生物，可能是发酵瓶漏气引起的，D正确。

故选ABC。

【点睛】7、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；在配制步骤②、③的培养基时；为避免杂菌污染，应先调pH值后再进行高压蒸汽灭菌，A正确；

B；要筛选出能高效分解尿素细菌；所选用的培养基要以尿素为唯一氮源，但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮源，因此步骤③所用的培养基中不能含有牛肉膏蛋白胨，B错误；

C；步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种；形成相互对照试验，比较细菌分解尿素的能力，C正确；

D；步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散；可以获得单细胞菌落，D正确。

故选ACD。8、A:C:D【分析】【分析】

分析表格：不同动物胚胎发育的时间及进入子宫的时间不同；小鼠在胚胎发育3天进入子宫，牛在胚胎发育4-5天进入子宫，马在胚胎发育6天进入子宫。

【详解】

A；小鼠胚胎在发育3天进入子宫；此时处于桑椹胚时期，牛在胚胎发育4-5天进入子宫，此时处于16细胞时期，故小鼠胚胎进入子宫时的发育程度比牛的高，A正确；

B；马在胚胎发育6天进入子宫；此时大概处于囊胚期，故体外马胚胎移植到子宫时选择囊胚期，B错误；

C；由表格信息可知；受精卵发育的阶段顺序为2-4-8-16-桑椹胚-囊胚期，C正确；

D；2-4-8-16细胞发育阶段进行的是有丝分裂；不改变遗传物质，D正确。

故选ACD。9、A:B:D【分析】【分析】

脐带血中的干细胞分化程度低；全能性较高，能分裂分化形成多种组织，因此可以用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病，如果是自体器官移植不会发生免疫排斥反应，所以自体移植后不需要用免疫抑制药物，但用脐带血中的干细胞不能治疗所有疾病。

【详解】

A；用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病；不需要激发细胞的所有全能性，因为培养的目标是特定的器官，A错误；

B；用脐带血中的干细胞不能治疗这个孩子所有的疾病；如传染性疾病等，B错误；

C；如果要移植用他的干细胞培育出的器官；需要用细胞培养技术，然后发育成器官用于移植，C正确；

D；自体器官移植不会发生免疫排斥反应；因此，如果要移植用他的干细胞培育出的器官，不需要给他使用免疫抑制药物，D错误。

故选ABD。

【点睛】10、A:B:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的实验原理：1；DNA的溶解性（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精．利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性．洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。3、DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

【详解】

A；柠檬酸钠可以防止血液凝固；因此获取鸡血时，容器中应先加入柠檬酸钠以防止血液凝固，加入适量的NaCl溶液目的是维持血细胞的形态，A错误；

B；DNA对高温的耐受性比蛋白质强；DNA不溶于冷酒精，而其他杂质可溶于酒精，则用体积分数为95%的冷酒精能提纯DNA，B错误；

C；木瓜蛋白酶能分解蛋白质；但不能分解DNA，因此可用木瓜蛋白酶纯化过滤后研磨液中的DNA，C正确；

D；当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时；DNA的溶解度最低，DNA析出量最大，因此向溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液中缓缓加蒸馏水，直至析出物不再增加为止，D错误。

故选ABD。三、填空题(共8题，共16分)11、略

【分析】【分析】

【详解】

（1）人类对基因的结构；基因间的相互作用尚缺乏足够的认识；人类的多基因病，既与基因有关，又与环境和生活习惯有关。

（2）生物武器种类包括致病菌；病毒、生化毒剂、以及经过基因重组的致病菌。

（3）1998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申了在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器。【解析】①.结构②.相互作用③.多基因④.生活习惯⑤.致病菌⑥.病毒⑦.生化毒剂⑧.基因重组⑨.不发展⑩.不生产⑪.不储存12、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】特定磷酸二酯键特异性13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】兼性厌氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO214、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。15、略

【分析】【分析】

微生物实验中常用的灭菌方法有干热灭菌；高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌；其中对于培养基一般用高压蒸汽灭菌，对于接种环一般用灼烧灭菌，对于培养皿等可以用干热灭菌。培养基放入培养箱中需要倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，即将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，当菌落长成后将试管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6个月都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上；对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中装入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后放在-20℃的冷冻箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法，如玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，常采用蒸馏法提取；对于如橘皮精油，其主要储存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法提取。

【详解】

（1）微生物培养中常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法；灼烧灭菌法、干热灭菌法等。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板倒置；可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，因此单个细菌在平板上会形成菌落，通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物。

（2）从鸡粪便取样；经选择培养后，如果要将样品涂布到鉴别培养基上，需要经过一系列梯度稀释。对获得的沙门氏菌进行长期保存常采用甘油管藏法。

（3）根据题干信息；沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死，因此为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中可采取低温储存；高温加工方法进行处理。

（4）根据题意；肉桂精油不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发，故可采用水蒸气蒸馏法进行提取，提取过程中蒸馏的温度、时间都会影响精油品质。

【点睛】

本题主要考查现代生物科技的原理和运用，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力，能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法倒置在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征梯度稀释甘油管藏低温储存、高温加工水蒸气蒸馏蒸馏的温度、时间16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】茎尖极少或没有）胚状体人工薄膜不受季节的限制人工种皮；胚状体和人工胚乳。

（2）17、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交四、判断题(共1题，共5分)19、A【分析】【详解】

蛋白质工程是一项难度很大的工程，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往十分复杂，并且蛋白质的结构具有多样性，这也在一定程度上增加了蛋白质工程的难度，故说法正确。五、实验题(共1题，共10分)20、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

【详解】

（1）分析题意可知；研究人员取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后可通过稀释涂布平板法接种到培养基表面以获得单菌落。

（2）PCR技术是一项通过体外控制温度扩增DNA的技术，该技术中由于温度较高，起关键作用的酶是耐高温DNA聚合酶；PCR扩增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析题意，该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是：引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的；PCR产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定：凝胶中的DNA分子通过染色；可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。

（3）分析题意，科学家将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，该过程中逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞；分析题意，实验目的是iPS细胞的产生不是由于培养基的作用，故实验的自变量是外源基因的有无，因变量是IPS细胞的产生情况，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故可设计实验如下：将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用。【解析】(1)稀释涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高温DNA聚合酶引物能与16SrRNA基因特异性结合（引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的）琼脂糖凝胶电泳。

(3)逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞。将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用六、综合题(共3题，共9分)21、略

【分析】【分析】

1；若已知目的基因的序列；可人工合成目的基因。为使目的基因与运载体进行连接，需使目的基因两端有运载体上存在的限制酶识别序列。

2；目的基因导入大肠杆菌细胞常用感受态细胞制备法。

3；杂交瘤细胞制备后需进行克隆化培养和抗体检测；以便产生足够多的杂交瘤细胞和单克隆抗体。

【详解】

（1）步骤①利用查询出的ASFVp54基因序列合成ASFVp54基因；属于人工合成法中的化学合成法。应该用相同的限制酶对目的基因和运载体进行酶切，以便进行正确的连接，故若ASFVp54基因序列中无限制酶切位点，为确保ASFVp54基因与pET28a载体正确连接，在目的基因的合成过程中应该在ASFVp54基因编码区两侧加入pET28a载体上存在的两种限制酶识别序列。

（2）将基因表达载体导入大肠杆菌细胞的常用方法是感受态细胞制备法，即用Ca2+处理大肠杆菌细胞；使之处于易于吸收环境中DNA分子的状态。过程④将ASFVp54蛋白注入到小鼠体内是为了诱导小鼠产生能够分泌抗ASFVp54抗体的B淋巴细胞。

（3）获得杂交瘤细胞后；在注入小鼠腹腔中之前还应进行克隆化培养和抗体检测，以便产生足够多的可产生ASFVp54蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。

（4）单克隆抗体具有特异性强；灵敏度高的特点，故利用ASFVP54单克隆抗体能有针对性的找到抗原，从而快速；准确诊断ASF。

【点睛】

本题考查基因工程、细胞工程的相关知识，要求学生能够利用所学知识分析问题。【解析】人工（化学）合成在ASFVp54基因编码区两侧加入pET28a载体上存在的两种限制酶识别序列Ca2+诱导小鼠产生能够分泌抗ASFVp54抗体的B淋巴细胞克隆化培养和抗体检测ASFVp54单克隆抗体特异性强，灵敏度高22、略

【分析】【分析】

分析题图：①是榨取果汁的过程；②是分离酵母菌；需要采用特定的选择培养基；③是酵母细胞的固定化过程，如果希望反复使用这些固定化酵母细胞，一定要避免其他微生物的污染；④是利用固定化酵母细胞发酵产生酒精，可以用酸性的重铬酸钾来检测。

（1）

过程①榨取的