2025年沪科版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年沪科版选择性必修3生物下册阶段测试试卷33考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、生物工程是一门生物科学与工程技术有机结合而兴起的一门综合性的科学技术，近些年来发展迅猛，硕果累累，下列关于生物工程的说法，不正确的是（）A.植物体细胞杂交和动物细胞融合技术的原理是一样的，植物组织培养和动物细胞培养技术的原理是不同的B.从理论上讲，基因工程和细胞工程都可以定向改造生物的遗传物质和克服远缘杂交不亲和的障碍C.基因工程的工具酶有限制酶、DNA连接酶等，细胞工程的工具酶有纤维素酶、胰蛋白酶等D.通过基因工程和发酵工程可以生产出乙肝疫苗、胰岛素、某些种类的单克隆抗体2、分离纤维素分解菌的实验过程中操作错误的是（）A.经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B.富集培养这一步可以省略，但所得的纤维素分解菌较少C.经稀释培养后，可用刚果红染色并进行鉴定D.对照组可用等量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上3、通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（）

①大肠杆菌②霉菌③放线菌④固氮细菌A.④②③B.④①②C.④③②D.①②③4、新冠抗原快速检测试剂盒原理如下：胶体金垫上有胶体金标记的抗体1（足量，可移动，聚集后会呈红色），在检测线(T)上有抗体2，这两种抗体都能与抗原结合。抗抗体1抗体（抗体3）位于质控线(C)上，可与多余的抗体1结合。下列叙述正确的是（）

A.制备这3种抗体都需要用新冠病毒作为抗原B.单抗细胞株的获得利用了动物细胞核的全能性C.若检测呈阳性，则T、C线都显色，共发生3种抗原—抗体特异性反应D.杂交瘤细胞经小鼠腹腔内培养后，可从小鼠血液中获取大量单克隆抗体5、下列有关哺乳动物的受精卵形成过程的叙述正确的是（）

①获能精子与卵子相遇时释放多种酶。

②获能精子与卵子相遇时释放的酶可溶解透明带；卵细胞膜。

③卵子与精子结合前已完成减数分裂Ⅱ

④精子和卵子的细胞核经过相关生理过程；分别形成雄原核和雌原核。

⑤精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入透明带A.①②⑤B.②③④C.①④⑤D.②④⑤6、下列关于育种的描述中，不正确的是（）A.选择育种是一种古老的育种方法，它的局限性在于进展缓慢，可选择的范围有限B.人工诱变是创造动植物新品种和微生物新类型的重要方法，突出优点是可以提高突变率C.对于基因工程或分子生物学实验室向外排放转基因细菌等必须严加管制D.将两匹奔跑速度快、耐力持久的种马交配，所生小马一定能继承“双亲”的特征，不仅跑得快，而且耐力持久评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)7、下列防止生物武器的措施，正确的是（）A.通过立法，禁止生物武器的生产和扩散B.捕杀敌人投放的带菌的小动物C.大力发展生物武器，以牙还牙D.根据生物武器的类型采取相应措施8、我国科学家提出的异种克隆大熊猫实验技术路线如下图。相关叙述错误的是（）

A.科学家通过对母兔注射孕激素，进行超数排卵处理以获得更多的卵母细胞B.异种重构囊胚在体外培养时，为保证无毒无菌环境，往往需要在培养液中加入维生素C.囊胚由滋养层细胞和内细胞团构成，后者将来可发育成胎儿的各种组织D.兔子宫提供的生理环境与大熊猫差异大，异种重构囊胚可能不能正常发育出大熊猫幼仔9、B基因存在于水稻基因组中；其仅在体细胞（2n）和精子中正常表达，但在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，设计了如下实验，培育转基因植株。以下鉴定筛选转基因植株的方式正确的是（）

A.将随机断裂的B基因片段制备成探针进行DNA分子杂交B.以Luc基因为模板设计探针进行DNA分子杂交C.以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与从卵细胞提取的mRNA杂交D.检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光10、下列关于DNA粗提取与鉴定的实验叙述不正确的是（）A.获取鸡血时，容器中应先加入适量的NaCl溶液以防止血液凝固B.由于DNA对高温耐受性差，故提取时需加入95%的冷酒精C.可用木瓜蛋白酶纯化过滤后研磨液中的DNAD.向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中缓缓加蒸馏水，当出现析出物时停止加水11、抗体的结构分为V区（识别并结合抗原的区域）和C区（抗体的支架），鼠源抗体具有外源性，会被人体免疫系统当作抗原而清除。用人抗体的C区替换鼠源抗体的C区，保留鼠单抗的V区，可构建人一鼠嵌合抗体，操作流程如图所示。下列相关说法错误的是（）

A.与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞为能分泌抗体的浆细胞B.用选择性培养基可筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞C.为获得结构正确的嵌合抗体，受体细胞应选用大肠杆菌D.人一鼠嵌合抗体在保留抗体特异性的同时外源性下降12、转座子是一段可移动的DNA序列，这段DNA序列可以从原位上单独复制或断裂下来，插入另一位点。转座子可在真核细胞染色体内部和染色体间转移，在细菌的拟核DNA、质粒或噬菌体之间自行移动。有的转座子中含有抗生素抗性基因，可以很快地传播到其他细菌细胞。下列推测合理的是A.转座子不能独立进行DNA复制B.转座子可造成染色体变异或基因重组C.转座子可用于基因工程的研究D.细菌的抗药性可来自转座子或者自身的基因突变评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)13、酶是细胞合成的生物催化剂。随着生物科学技术的发展；酶已经走出实验室，走进人们的生产和生活。请回答下面有关酶的问题：

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成________，____________将脂肪水解为甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是____________。

（2）果胶酶包括_____________________________；生产中如果要固定果胶酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分离原理：需要用__________法去除相对分子质量大的杂质蛋白，以纯化酶；利用_________________________法对酶进行纯度鉴定。14、目的：使目的基因在受体细胞中_____，并且可以______，使目的基因能够______作用。15、PCR技术的DNA体外复制环境有DNA解旋酶、耐热DNA聚合酶、DNA母链、4种脱氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能够从引物的________端开始连接脱氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物长度通常为____个核苷酸。16、对于DNA的粗提取而言，就是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在__________方面的差异，提取DNA，去除杂质。（人教P54）17、随着现代生物技术的飞速发展；转基因动物；克隆动物和试管动物相继问世，请回答下列问题：

（1）转基因动物、克隆动物和试管动物培育过程中都要用到的生物技术包括______。

（2）核移植是动物克隆的第一步，包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用处于______（填时期）的______为受体细胞。

（3）在“试管动物”的培育过程中，常采用______（填激素名称）处理可使雌性个体一次排出多枚卵母细胞。从雄性个体采集的精子需______后才能进行受精作用；防止多精入卵的两道屏障依次为______；卵细胞膜反应。

（4）若考虑环境承载力，转基因动物、克隆动物和试管动物不宜放置到自然环境中，这遵循了生态工程的______原理。18、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成______，然后放在适宜的______中，让这些细胞______。19、沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌；被感染了沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染的食品，会使人发生食物中毒。沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死。肉桂精油是从肉桂树中提炼获得的，具有不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发的特性，能抑制沙门氏菌的繁殖。回答下列问题：

（1）培养沙门氏菌时要进行无菌操作，常用的灭菌方法有________（答出两种）。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板________（填“倒置”或“正置”）。单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是________。

（2）从鸡粪便取样，经选择培养后需要经过一系列________才能将样品涂布到鉴别培养基上。对获得的沙门氏菌常采用________的方法长期保存。

（3）根据题干信息，为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中储存、加工食品的方法是________。

（4）根据肉桂精油的化学特性，可采用________法来提取，提取过程中影响精油品质的因素有________。评卷人得分四、判断题(共3题，共30分)20、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。()A.正确B.错误21、蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误22、“设计试管婴儿”与“试管婴儿”相比在植入前需要对胚胎进行遗传学诊断。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共16分)23、最新调查显示手机每平方厘米就驻扎了12万个细菌；这个数字足以令马桶坐垫上的细菌队伍汗颜。某生物兴趣小组的同学，利用手机表面的细菌进行了相关的培养研究。

（1）为研究手机表面微生物的种类；用稀释涂布平板法进行细菌的纯化和分离。下面的四种菌落分布情况中，哪些选项是通过稀释涂布平板法得到的_____

（2）研究小组用琼脂扩散法测定玫瑰精油对手机表面细菌的抑制情况。该方法的操作步骤如下：首先制备牛肉膏蛋白胨平板，用涂布器将5种细菌分别接种到5个平板上，得到细菌平板。然后制备直径为5mm的滤纸圆片，采用_____灭菌法处理，将灭菌的滤纸片部分放入适宜浓度的玫瑰精油中，对照组放入_____中，浸泡10min，后将滤纸片放在5个细菌平板表面。最后将平板放入恒温培养箱中倒置培养48小时。通过测量_____来检测玫瑰精油对5种细菌的抑制效果。24、多发性硬化症是一种由纤维蛋白渗入大脑引发的神经系统疾病。科研人员欲应用生物工程技术治疗该病。请回答下面有关问题。

（1）研究人员将纤维蛋白作为_________注射到小鼠体内，激活了小鼠的________免疫，进而制备出抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）。该项技术属于_______范畴（填写下面正确选项）。

A．基因工程B．细胞工程C．胚胎工程D．蛋白质工程。

（2）制备5B8的基本流程如下：从注射了纤维蛋白的小鼠脾脏中获取________，与小鼠的骨髓瘤细胞进行融合。然后用特定的__________筛选符合要求的杂交瘤细胞后；再通过克隆；检测、筛选、培养等环节，最终从小鼠腹水中提取到5B8。

（3）活性氧（ROS）是氧分子正常代谢的副产物；当吞噬细胞中大量产生ROS并释放时，会毒害周围神经元。NADPH氧化酶是催化细胞内产生ROS的主要酶。为研究5B8的作用机制，研究者检测了经5B8处理后吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，结果如图一；图二。

①作为标准参照的GADPH蛋白表达量稳定且含量丰富，可排除_________对实验结果的影响。

②综合两幅图的检测结果，通过对比_______组可知，纤维蛋白可以______________，使其对神经元产生毒害；而通过对比______组结果发现:5B8能_________。

③经临床实验证实，单克隆抗体5B8确实对多发性硬化症有明显疗效。请根据上述结果分析其具有疗效的原因____________________。25、黄曲霉和寄生曲霉是常见的真菌，多见于发霉的粮食、粮制品及其它霉腐的有机物上。黄曲霉素是由黄曲霉和寄生曲霉等产生的代谢产物，具有极强的毒性和致癌性。科研人员用黄曲霉素Bl（AFB1）的结构类似物——豆香素（C9H6O2）筛选出能高效降解AFB1的菌株；具体过程如下图所示，其中序号代表过程。

（1）为了筛选到AFB1降解菌，可选的采样地点是_____。

（2）在筛选AFB1降解菌时，1号培养基的碳源是_____，过程③所需要的工具是_____。2号培养基加入琼脂的目的是_____。

（3）在此过程中，鉴定不同菌落降解AFB1能力的方法是_____。

（4）菌体对有机物的降解途径有胞外分泌物降解和菌体吸附降解两种。对降解菌的发酵液进行离心，发现上清液中AFB1的残留率明显低于菌悬液的。经检测发现上清液中存在多种蛋白质，为验证蛋白质K是降解AFB1的有效成分，科研小组设计了实验过程，如下表。表中①、②、③分别表示_____（用“+”或“-”表示）。如果验证成功，则④与⑤的大小比较关系是_____。不同处理或测定试管甲试管乙培养过降解菌的上清液①②一段时间后，分别加入含AFB1的培养基蛋白质K水解酶+③测定培养基中AFB1含量④⑤

表中“＋”表示添加，“-”表示不添加，甲乙试管所加物质的量均相同。26、四尾栅藻是一种淡水藻类；繁殖快；适应性强，可作为制备生物柴油的重要原料之一。为提高四尾栅藻油脂含量，研究人员将从含油量高的紫苏中获得的二酰甘油酰基转移酶基因（DGAT1）与pBI121质粒构建表达载体，经转化成功获得高产油脂四尾栅藻，主要研究过程如下图，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGAT1-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGAT1基因为依据设计的一对引物，1acZ基因编码产物在X-ga1和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。请回答下列问题。

(1)过程①中需要的酶有____________，过程②应选用的限制酶是____________和____________。

(2)研究中，在保存DGAT1基因时，将克隆载体导入大肠杆菌的优点有____________。

①稳定保存②准确复制③快速表达④方便取用。

(3)过程③经转化的大肠杆菌通过____________（方法）接种到培养基上继续培养。为筛选获得目标菌株，培养基应加入的成分有____________。

(4)为检测表达载体转化四尾栅藻的情况及确定目的基因是否表达，研究人员进行了如下实验，请完成下表。实验步骤简要操作过程初筛培养经转化后的四尾栅藻接种于含①____________的BG11固体培养基并放置于人工气候箱培养，一段时间后观察其生长情况②____________在BG11固体培养基上分别挑取数个单藻落接种至BG11液体培养基中光照摇床培养，编号备用PCR验证收集四尾栅藻藻体，提取基因组DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R为引物，进行PCR验证，未转化的四尾栅藻作对照油脂含量测定利用索氏抽提法分别测定③____________的油脂含量结果处理统计并比较PCR验证结果及藻体中油脂的含量评卷人得分六、综合题(共2题，共14分)27、单克隆抗体最主要的优点在于它的特异性强；灵敏度高；并可大量制备。制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞融合技术。回答下列问题：

(1)制备单克隆抗体首先需要获得能分泌抗体的浆细胞和具有______________能力的骨髓瘤细胞。诱导这两种细胞进行融合所依据的生物学原理是______________。

(2)细胞融合后，需用特定的选择性培养基进行第一次筛选，经筛选获得的细胞产生的抗体还不能确定是单克隆抗体，这是因为______________。再经克隆化培养和抗体检测后，最终获得的杂交瘤细胞具有的特点是______________。

(3)体外培养杂交瘤细胞时，所需CO2的主要作用是______________；另外，应定期更换培养液，以便清除细胞代谢产物，防止______________。

(4)有人提出，将经特定抗原刺激的B细胞的细胞核移植到去核骨髓瘤细胞中来产生单克隆抗体，此方法______________（填“能”或“不能”）获得既能分泌抗体、又能无限增殖的细胞，原因是______________。28、作为检验医学实验室的诊断试剂；单克隆抗体广泛应用于肿瘤等疾病的诊断。神经纤毛蛋白-1（NRP-1）是一种多功能糖蛋白，在多种肿瘤组织中呈高水平表达，可与血管内皮生长因子结合促进肿瘤血管的形成，使肿瘤体积增大。科研人员通过制备NRP-1单克隆抗体，开展对小鼠的乳腺癌肿块进行靶向治疗的研究。分析回答下列问题：

(1)制备单克隆抗体需要进行动物细胞融合，该技术常用的诱导融合方法有__________（写出两种）。动物细胞融合利用了细胞膜的结构特点__________。

(2)该单克隆抗体的特异性是由于___________接受了NRP-1（神经纤毛蛋白-1）的刺激，分离得到该细胞，将其与骨髓瘤细胞诱导融合后得到__________。选择__________的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔中；可以从腹水中提取到大量的NRP-1单克隆抗体。

(3)单克隆抗体具有特异性强、___________和__________的优点，能跟__________发生特异性结合。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、A【分析】【分析】

植物体细胞杂交；基因工程都能打破物种之间的生殖隔离；培育作物新品种。植物体细胞杂交时，需要采用纤维素酶和果胶酶去壁；动物细胞培养时，需要采用胰蛋白酶对组织进行消耗处理，获得单个细胞；基因工程需要限制酶和DNA连接酶。试管婴儿培育过程涉及到体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术。利用动物细胞工程技术中的动物细胞融合技术和动物细胞培养技术可以大量生产特异性强、纯度高的单克隆抗体。

【详解】

A；植物体细胞杂交包括两大步骤；一是细胞融合，其原理是细胞膜的流动性，二是植物组织培养，其原理是植物细胞的全能性，动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性和细胞的增殖，A错误；

B；基因工程和细胞工程都可以定向改造生物的遗传性状；B正确；

C；植物体细胞杂交时；需要采用纤维素酶和果胶酶去壁；动物细胞培养时，需要采用胰蛋白酶对组织进行消耗处理，获得单个细胞；基因工程需要限制酶和DNA连接酶，C正确；

D；利用基因工程和发酵工程可以生产生物药品；如乙肝疫苗、胰岛素、单克隆抗体等，D正确。

故选A。

【点睛】2、A【分析】【分析】

纤维素分解菌的筛选实验流程为：土壤取样；选择培养、梯度稀释、将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上、挑选产生透明圈的菌落。

【详解】

A；经选择培养后；再经梯度稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上，A错误；

B；富集培养的目的是扩大分解纤维素分解菌的数量；所以这一步可以省略，但所得的纤维素分解菌较少，B正确；

C；经稀释培养后；纤维素分解菌可以用刚果红染色进行鉴别，刚果红可以将纤维素染成红色，但不能将其分解产物染色，C正确；

D；设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物；可用等量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上，D正确。

故选A。

【点睛】3、A【分析】选择培养基的原理是：不同微生物在代谢过程中所需要的营养物质和环境不同；有的适于酸性环境，有的适于碱性环境；不同微生物对某些化学药品的抵抗力不同。利用这些特点，我们便可配制出适于某些微生物生长而抑制其他微生物的选择培养基。例如从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；为培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐。

【详解】

①大肠杆菌属于细菌；需要氮源，青霉素能抑制大肠杆菌生长；酚也能抑制细菌的生长，在题干中所给三种培养基上，大肠杆菌都无法生长；

②霉菌：属于真菌；需要氮源。酚可以抑制细菌，故霉菌不能在缺乏氮源和加入10%的酚的培养基上生长，能在加入青霉素的培养基上生长；

③放线菌：需要氮源；青霉素可以抑制放线菌，故放线菌不能在缺乏氮源和加入青霉素的培养基上生长，可在加入10%的酚的培养基上生长；

④固氮细菌：属于细菌；能利用空气中的氮气，能在缺乏氮源的培养基上生长；青霉素和酚能抑制细菌，故固氮细菌不能在加入青霉素和加入10%的酚的培养基上生长。

综上所述；A正确，BCD错误。

故选A。4、C【分析】【分析】

根据题意分析：抗体1；抗体2；这两种抗体都能与抗原结合，都需要新冠病毒作为抗原。

【详解】

A；根据题意分析；抗体1、抗体2都能与抗原结合，需要用新冠病毒作为抗原，而抗体3是以抗体1作为抗原，A错误；

B；单抗细胞株的获得利用了动物细胞培养技术；B错误；

C；根据题意可知；该试剂盒含有3中抗体，若检测呈阳性，则T、C线都显色，共发生3种抗原—抗体特异性反应，C正确；

D；杂交瘤细胞经小鼠腹腔内培养后；可从小鼠腹水中获取大量单克隆抗体，D错误。

故选C。5、C【分析】【分析】

1、受精作用过程：a、顶体反应：精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠；b；透明带反应：顶体酶可将透明带溶出孔道；精子穿入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应（它是防止多精子入卵受精的第一道屏障）；c、卵细胞膜反应：精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程（它是防止多精子入卵受精的第二道屏障）；d、精子尾部脱落，原有核膜破裂形成雄原核，同时卵子完成减二分裂，形成雌原核；e、雌、雄原核融合形成合子。2、胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

【详解】

①精子与卵子接触；释放多种酶，以溶解卵细胞膜外的结构（如透明带等），①正确；

②获能精子与卵子相遇时释放的酶可溶解放射冠；透明带；②错误；

③卵子与精子结合前已完成减数分裂Ⅰ；③错误；

④受精过程中；精子的核变成雄原核；卵子的核成为雌原核，④正确；

⑤透明带反应是指当精子越过放射冠；进入透明带并接触卵细胞膜的瞬间，卵子发出指令，产生阻止后续的精子进入透明带的生理反应，⑤正确。

故选C。6、D【分析】【分析】

1；四种育种方法：

。

杂交育种。

诱变育种。

单倍体育种。

多倍体育种。

方法。

（1）杂交→自交→选优。

辐射诱变；激光诱变、化学药剂处理。

花药离体培养；秋水仙素诱导加倍。

秋水仙素处理萌发的种子或幼苗。

原理。

基因重组。

基因突变。

染色体变异（染色体组先成倍减少；再加倍，得到纯种）

染色体变异（染色体组成倍增加）

2；转基因技术是指按照人们的意愿；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

【详解】

A；选择育种是一种古老的育种方法；它的局限性在于进展缓慢，可选择的范围有限，A正确；

B；由于基因突变能产生新的基因；所以人工诱变是创造动植物新品种和微生物新类型的重要方法，它突出的优点是可以提高突变率，加速育种工作的进程，B正确；

C；转基因生物的外源基因与细菌或病毒杂交；重组出有害的病原体，故对于基因工程或分子生物学实验室向外排放转基因细菌等必须严加管制，C正确；

D；将两匹奔跑速度快、耐力持久的种马交配；其原理是基因重组，变异是不定向的，所以不一定能够获得跑得快、耐力持久的小马，D错误。

故选D。二、多选题(共6题，共12分)7、A:B:D【分析】【分析】

生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。

生物武器的特点：1、单位面积效应大；2、有特定的伤害对象；3、具有传染性；4、危害时间久；5、不易被发现和鉴定；6、使用者本身易受伤害；7、生物武器造价低，技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。

生物武器的局限性：1；生物武器主要指病原微生物；所以它们的生存、繁殖、死亡易受环境条件（如温度）的影响。2、还受地形、风向等多种条件影响。3、生物武器使用时不易控制，使用不当可危害本方安全。

【详解】

生物武器是多种多样的；对于不同的生物武器应用不同的防治方法，但总的原则是禁止生物武器的生产和扩散，因此ABD正确，C错误。

故选ABD。8、A:B【分析】【分析】

分析图解：异种克隆大熊猫的培育首先通过核移植技术获得重组细胞；然后经过早期胚胎培养获得异种重构囊胚，再利用胚胎移植技术将重构囊胚移植如代孕兔体内。

【详解】

A；科学家通过对母兔注射促性腺激素；进行超数排卵处理以获得更多的卵母细胞，A错误；

B；异种重构囊胚在体外培养时；往往需要在培养液中加入抗生素，从而保证无毒无菌环境，B错误；

C；囊胚由滋养层细胞和内细胞团构成；其中滋养层细胞将来发育为胎盘和胎膜，内细胞团将来发育成胚胎的各种组织，C正确；

D；目前；异种重构囊胚在代孕兔的子宫内能正常着床，但是不能正常发育生产出大熊猫幼仔，很可能是代孕兔提供的营养物质不能让异种重构囊胚正常发育，D正确。

故选AB。

【点睛】9、B:C:D【分析】【分析】

分析题图：图中①表示将目的基因导入农杆菌；②表示采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞，之后再采用植物组织培养技术获得转基因植株。

【详解】

A；探针是指用放射性同位素（或荧光分子）标记的含有目的基因DNA片段；因此要以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针，而不是将随机断裂的B基因片段制备成探针，A错误；

B；可用DNA分子杂交技术；即以Luc基因为模板设计探针进行DNA分子杂交，B正确；

C；用标记的目的基因作探针与mRNA杂交；即以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与从卵细胞提取的mRNA杂交，C正确；

D；检测目的基因是否翻译成蛋白质；由图可知B基因与Luc基因连接形成B-Luc融合基因，因此可通过Luc基因表达，检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光，D正确。

故选BCD。10、A:B:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的实验原理：1；DNA的溶解性（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精．利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性．洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。3、DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

【详解】

A；柠檬酸钠可以防止血液凝固；因此获取鸡血时，容器中应先加入柠檬酸钠以防止血液凝固，加入适量的NaCl溶液目的是维持血细胞的形态，A错误；

B；DNA对高温的耐受性比蛋白质强；DNA不溶于冷酒精，而其他杂质可溶于酒精，则用体积分数为95%的冷酒精能提纯DNA，B错误；

C；木瓜蛋白酶能分解蛋白质；但不能分解DNA，因此可用木瓜蛋白酶纯化过滤后研磨液中的DNA，C正确；

D；当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时；DNA的溶解度最低，DNA析出量最大，因此向溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液中缓缓加蒸馏水，直至析出物不再增加为止，D错误。

故选ABD。11、A:B:C【分析】【分析】

1；骨髓瘤细胞为无限增殖的细胞；分裂能力强，制备单克隆抗体的过程中还需该杂交细胞具备分泌特异性抗体的功能，而浆细胞为能够分泌抗体的细胞，故与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞为能分泌抗体的浆细胞。

2；骨髓瘤细胞与B淋巴细胞在融合的过程中可能会出现多种融合结果；如骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合，B淋巴细胞与B淋巴细胞融合，而实验需要的是骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的细胞，需要用选择性培养基进行筛选，但只能筛选出能杂交瘤细胞，而要筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞则需要进行专一性抗体检测。

【详解】

A；与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞取自脾脏；不一定是能分泌抗体的浆细胞，A错误；

B；骨髓瘤细胞与B淋巴细胞在融合的过程中可能会出现多种融合结果；如骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合，B淋巴细胞与B淋巴细胞融合，而实验需要的是骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的细胞，需要用选择性培养基进行筛选，但是只能筛选出能杂交瘤细胞，而要筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞则需要进行专一性抗体检测，B错误；

C；抗体为分泌蛋白；需要内质网和高尔基体对其进行加工，大肠杆菌为原核生物，无高尔基体和内质网，为获得结构正确的嵌合抗体，受体细胞不应该选用大肠杆菌，C错误；

D；结合题干“鼠源抗体具有外源性；会被人体免疫系统当作抗原而清除。用人抗体的C区替换鼠源抗体的C区，保留鼠单抗的V区，可构建人一鼠嵌合抗体”可知，该抗体不是原本的鼠源抗体，保留了其V区，但是其中还有一部分来自于人本身，使得人一鼠嵌合抗体在保留抗体特异性的同时外源性下降，D正确。

故选ABC。12、B:C:D【分析】【分析】

本题考查DNA复制；生物变异的相关知识；意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。

【详解】

根据题干中“转座子是一段可移动的DNA序列；这段DNA序列可以从原位上单独复制或断裂下来”，说明转座子可以独立进行DNA复制，A错误；根据题干中“转座子可在真核细胞染色体内部和染色体间转移”，说明转座子可造成真核生物染色体变异或基因重组，B正确；根据题干中“转座子可在细菌的拟核DNA；质粒或噬菌体之间自行移动”，说明转座子可用于基因工程的研究，C正确；根据题干中“有的转座子中含有抗生素抗性基因，可以很快地传播到其他细菌细胞”，说明细菌的抗药性可来自转座子或者自身的基因突变，D正确。

【点睛】

可遗传的变异有三种来源：基因突变、染色体变异和基因重组：

（1）基因突变是基因结构的改变；包括碱基对的增添；缺失或替换。

（2）基因重组的方式有同源染色体上非姐妹单体之间的交叉互换和非同源染色体上非等位基因之间的自由组合，另外，外源基因的导入也会引起基因重组。

（3）染色体变异是指染色体结构和数目的改变。三、填空题(共7题，共14分)13、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸。

2；果胶酶能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。

【详解】

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

（2）果胶酶并不特指某一种酶；而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶；在果汁生产过程中如果要固定果胶酶，最好采用化学结合和物理吸附法固定化，这是因为酶分子小，体积小的酶容易从包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分离原理：需要用凝胶色谱法去除相对分子质量大的杂质蛋白；以纯化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对酶进行纯度鉴定。

【点睛】

本题考查腐乳制作和酶提取等知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶碱性蛋白酶和碱性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶化学结合法和物理吸附凝胶色谱（分配色谱）聚丙烯酰胺凝胶电泳14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】稳定存在遗传至下一代表达和发挥15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2种引物DNA或RNA20—3016、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】物理和化学性17、略

【分析】【分析】

1；动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物；

2；早期胚胎培养的培养液成分；除无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，并需添加动物血清等天然成分。

【详解】

（1）转基因动物；试管动物和克隆动物分别在体外得到早期胚胎后；都要通过胚胎移植获得新个体。

（2）核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易，而体细胞分化程度高，全能性不易表达；核移植常用的减数第二次分裂中期的去核卵母细胞作为受体细胞，其中去核的目的是避免原细胞核中遗传物质对克隆动物的影响，保证克隆动物的核遗传物质来自供体细胞。

（3）促性腺激素处理可促使雌性个体超数排卵；即使良种母牛一次排出多枚卵母细胞。精子需要经过获能处理才能受精；防止多精入卵的两道屏障依次为透明带反应；卵细胞膜反应。

（4）要考虑环境承载力；处理好生物与环境的协调与平衡，这体现了生态工程的协调与平衡原理。

【点睛】

本题考查细胞工程、胚胎工程和生态工程的有关知识，意在考查考生理解能力、获取信息的能力和综合运用能力。【解析】胚胎移植（或胚胎的早期培养和胚胎移植）胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易MⅡ中期去核卵母细胞促性腺激素获能透明带反应协调与平衡18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】组织单个细胞培养基生长和繁殖19、略

【分析】【分析】

微生物实验中常用的灭菌方法有干热灭菌；高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌；其中对于培养基一般用高压蒸汽灭菌，对于接种环一般用灼烧灭菌，对于培养皿等可以用干热灭菌。培养基放入培养箱中需要倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，即将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，当菌落长成后将试管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6个月都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上；对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中装入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后放在-20℃的冷冻箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法，如玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，常采用蒸馏法提取；对于如橘皮精油，其主要储存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法提取。

【详解】

（1）微生物培养中常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法；灼烧灭菌法、干热灭菌法等。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板倒置；可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，因此单个细菌在平板上会形成菌落，通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物。

（2）从鸡粪便取样；经选择培养后，如果要将样品涂布到鉴别培养基上，需要经过一系列梯度稀释。对获得的沙门氏菌进行长期保存常采用甘油管藏法。

（3）根据题干信息；沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死，因此为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中可采取低温储存；高温加工方法进行处理。

（4）根据题意；肉桂精油不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发，故可采用水蒸气蒸馏法进行提取，提取过程中蒸馏的温度、时间都会影响精油品质。

【点睛】

本题主要考查现代生物科技的原理和运用，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力，能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法倒置在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征梯度稀释甘油管藏低温储存、高温加工水蒸气蒸馏蒸馏的温度、时间四、判断题(共3题，共30分)20、A【分析】【详解】

蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的，是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。故该说法正确。21、A【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。

故正确。22、A【分析】【分析】

“设计试管婴儿”在植入前需要对胚胎进行遗传学诊断；而“试管婴儿”是解决不孕不育等问题，不需要进行遗传学诊断。

【详解】

“设计试管婴儿”与“试管婴儿”相比在植入前需要通过多种技术手段对胚胎进行遗传学诊断；以便选择合适的设计出来的试管婴儿。

故正确五、实验题(共4题，共16分)23、略

【分析】【分析】

1；微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经溶化的培养基倒入培养皿制成平板、划线接种、在恒温箱里培养。在线的开始部分；微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过适量稀释后，均匀涂布在固体培养基表面，经培养后可形成单个菌落。

2；常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。

【详解】

（1）培养微生物的培养基一般含有水；碳源、氮源和无机盐；在除上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

（2）制备固体培养基的基本步骤有：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。等平板冷却凝固后；应将平板倒置，这样做的目的是，防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面对培养基造成污染，又可以避免培养基中的水分过快的挥发。

（3）由图和分析可知；A；B、C为通过稀释涂布平板法得到的菌落（菌落分布较均匀），D为通过平板划线法得到的菌落（菌落分布在线条上）。

故选ABC。

（4）为保持滤纸的干燥；灭菌时应用干热灭菌法，不宜采用高压蒸汽灭菌法。将灭菌的滤纸片分别放入适宜浓度的玫瑰精油和无菌水中（对照）浸泡10min，再将滤纸片放在5个细菌平板表面，最后将平板放入恒温箱中倒置培养48h。通过测量透明圈直径(抑菌圈直径)可判断玫瑰精油对5种供试细菌的抑制效果，抑菌圈越大，说明抑制作用越强。

【点睛】

本题考查微生物的培养、筛选、琼脂扩散法测定玫瑰精油的抑菌情况等知识，要求识记培养基的成分、筛选方法，熟练掌握实验步骤。【解析】ABC干热无菌水透明圈的直径（大小）24、略

【分析】【分析】

单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。（6）单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，能大量制备。

【详解】

（1）抗体参与体液免疫；科研人员将纤维蛋白作为抗原注射到小鼠体内，激活体液免疫过程，制备出抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）。该项技术为单克隆抗体的制备，属于细胞工程范畴，即B正确，ACD错误。

故选B。

（2）制备抗纤维蛋白的单克隆抗体5B8的基本技术流程为：先从注射了纤维蛋白的小鼠脾脏中获取的相应的B细胞（能产生特定的抗体）与小鼠的骨髓瘤细胞融合获得杂交细胞；用特定的选择培养基进行筛选；获得杂交瘤细胞；对杂交瘤细胞进行克隆和抗体检测，获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞；获得的杂交瘤细胞在体外环境或小鼠腹腔内培养；然后从细胞培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体5B8。

（3）①活性氧（ROS）是氧分子正常代谢的副产物；NADPH氧化酶是催化细胞内产生ROS的主要酶。由于细胞中GAPDH蛋白表达量稳定且含量丰富，在实验中可作为标准参照，排除实验操作等无关变量对结果的影响。

②对比1和2组检测结果；细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量升高，说明纤维蛋白提高了吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，使其对神经元产生毒害。通过对比1；2、3组结果发现，经5B8处理后，NADPH氧化酶和ROS的含量会下降，说明5B8能减轻纤维蛋白对NADPH氧化酶和ROS的含量的影响，使两种物质含量下降。

③由第②题可知；经5B8处理后，NADPH氧化酶和ROS的含量会下降，说明单克隆抗体588与纤维蛋白结合，可以降低吞噬细胞NADPH氧化酶的量，进而降低ROS产量，从而减小对神经元的伤害，因此单克隆抗体5B8对多发性硬化症有明显疗效。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程和抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）的作用机理，意在考查考生对所学知识的理解和应用能力。【解析】抗原体液B相应的B淋巴细胞；选择培养基无关变量（如实验操作等）1和2提高吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量1、2、3组（2、3组）减轻纤维蛋白对NADPH氧化酶和ROS含量的影响，使两种物质含量下降单克隆抗体5B8与纤维蛋白结合，可以降低吞噬细胞NADPH氧化酶的量，进而降低ROS产量，从而减小对神经元的伤害，起到治疗多发性硬化症的作用。25、略

【分析】【分析】

筛选能高效降解AFB1的菌株的一般步骤是：取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。筛选时需要使用以香豆素（C9H6O2）为唯一碳源的选择培养基。

【详解】

（1）黄曲霉素Bl（AFB1）一般来自发霉的粮食；粮制品及其它霉腐的有机物上；在霉烂的食品中富含AFB1，其中可能含有较多的AFB1降解菌，因此为了筛选到AFB1降解菌，可以从霉变的玉米或粮食采样。

（2）豆香素（C9H6O2）可以为AFB1降解菌提供碳源；所以1号培养基的碳源是豆香素，筛选微生物的培养基一般是固体培养基，培养基中需要加入一定量的琼脂，目的是作为凝固剂，以制备固体培养基。筛选微生物可以采用稀释涂布平板法，因此过程③所需要的工具是涂布器（无菌玻璃刮铲）。

（3）鉴定不同菌落降解AFB1能力的方法是准备含有等量黄曲霉素的液体培养基若干瓶；将挑取不同菌落放置在不同的瓶子中，一段时间后，测量剩余黄曲霉素的量。通过比较各瓶中黄曲霉素的剩余量得出结论。

（4）根据题意试管甲；乙分别作为实验组和对照组；自变量是有无蛋白质K，可以通过在两试管中加入或不加蛋白质K水解酶来控制自变量，故③表示不添加（－）。两组实验的无关变量要一致，①、②都表示添加（+）培养过降解菌的上清液（含有降解菌的分泌物）。由于试管甲中蛋白质K被加入的蛋白质K水解酶分解，因此试管甲对应的培养基中AFB1不能被降解，含量高，而试管乙中培养基中AFB1被蛋白质K降解，含量低，即④大于⑤。

【点睛】

本题主要考查微生物的培养和应用，解题关键是掌握微生物的培养、筛选、分离的方法，能够根据题目提供的信息回答问题。【解析】霉变的玉米或粮食豆香素涂布器（无菌玻璃刮铲）形成固体培养基，形成菌落准备含有等量黄曲霉素的液体培养基若干瓶，将挑取不同菌落放置在不同的瓶子中，一段时间后，测量剩余黄曲霉素的量++-④大于⑤26、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本工具：限制性内切核酸酶；识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。DNA连接酶，将两个DNA片段连接起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键。载体，将外源基因送入受体细胞。

2；基因工程的基本过程：目的基因的筛选与获取；基因表达载体的构建，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测和鉴定。

【详解】

（1）过程①包括逆转录和PCR，逆转录需要反转录酶的参与，PCR过程需要耐高温的DNA聚合酶。限制酶的作用是识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开，对比几种限制