2025年新科版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

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A.过程①需用纤维素酶和果胶酶进行去壁处理B.过程②利用了细胞膜的流动性原理实现a和b的融合C.猕猴桃新品种的培育体现了植物细胞的全能性D.新品种的培育属于杂交育种3、A种植物细胞和B种植物细胞的结构如图所示（仅显示细胞核）；将A；B两种植物细胞去掉细胞壁后，诱导二者的原生质体融合，形成单核的杂种细胞，若经过组织培养得到了杂种植株，则该杂种植株是（）

A.二倍体，基因型是DdYyRrB.三倍体，基因型是DdYyRrC.四倍体，基因型是DdYyRrD.四倍体，基因型是DDddYYyyRRrr4、下列关于哺乳动物早期胚胎发育的叙述，错误的是（）A.由受精卵发育为囊胚的过程中每个细胞的核质比逐渐增大，胚胎中DNA总量逐惭增加B.胚胎发育至囊胚期即开始了细胞分化，细胞分化是基因选择性表达的结果C.囊胚从透明带中伸展出来称为孵化，这之前属于卵裂期D.滋养层细胞在囊胚期已发育成胎膜和胎盘并可用于性别鉴定5、对某一线性DNA分子用一系列限制酶进行酶切处理，根据酶切的电泳分析结果，对照酶切片段大小的数据进行逻辑推理，然后确定各酶切片段的排列顺序和各酶切位点的相对位置，即可绘出限制性酶切图谱。下表是某小组进行的相关实验。根据表中数据分析，下列限制性酶切图谱正确的是（）。已知一线性DNA序列共有5000bp第一步水解产物/bp第二步水解产物/bpA酶切割2100将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割19002001900200140080060014008006001000100010001000500500500500B酶切割2500将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割19006001900600130080050013008005001200100020012001000200经A酶和B酶同时切割1900100080060050020019001000800600500200

A.B.C.D.评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)6、下图表示选用具有同一外源目的基因对某品种奶牛进行遗传特性改造的三种途径；下列有关叙述正确的是（）

A.获得奶牛1通常采用显微注射法导入外源基因B.奶牛2体内不同组织细胞的基因组成一定相同C.成功获得奶牛1、2、3表明三个受体细胞都具有全能性D.奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养7、下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程；下列相关叙述正确的是（）

A.用胰蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞B.生物反应器内应控制好适宜的温度，并冲入纯氧保证细胞呼吸C.培养液中的支架提供了更多的细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长D.“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，减少环境污染8、下图是我国科学家制备小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞的相关研究流程；其中Oct4基因在维持胚胎干细胞全能性和自我更新中发挥极其重要的作用。下列叙述正确的是（）

A.受精卵发育过程中桑椹胚前的细胞都是全能性细胞B.推测Oct4基因的表达有利于延缓衰老C.过程③胚胎干细胞细胞核大、核仁明显D.从卵巢中获取的卵母细胞可直接用于过程①9、驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的柠檬型香气，从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述，错误的是（）A.驱蚊草的培育属于细胞工程育种，优点是克服了远缘杂交不亲和的障碍B.驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或电刺激等方法C.驱蚊草培育过程不同于植物组织培养，无细胞脱分化和再分化的过程D.驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术，育种原理是基因突变10、近年来；全人源化单克隆抗体技术发展迅速，利用转基因鼠技术进行全人源化单克隆抗体的制备流程如图所示，下列说法正确的是（）

A.该技术能降低单克隆抗体药物的免疫排斥反应B.过程①②采用核移植技术，体现了动物细胞核的全能性C.过程⑧要经过选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测等过程D.体外培养B细胞也可以大量获得针对该抗原的单克隆抗体11、转基因作物的推广种植，大幅度提高了粮食产量，取得了巨大的经济效益和生态效益硕果累累的转基因成果在带给人们喜悦的同时，也促使人们关注转基因生物的安全性问题。下列有关转基因作物的安全性的叙述，正确的是（）A.转入抗性基因的植物可能成为“入侵物种”，影响生态系统的稳定性B.抗性基因可能会随花粉传播到田间近缘野生植物体内，造成基因污染C.若目的基因来自自然界，则培育出的转基因植物不会有安全性问题D.大面积种植抗虫棉，有可能会导致棉铃虫群体中相关抗性基因频率增大12、黄粉虫可以吞食；降解塑料；利用黄粉虫肠道微生物对白色污染进行生物降解，是一种绿色环保的处理工艺。下图是从黄粉虫肠道中分离、纯化目的微生物的过程，相关叙述正确的是（）

A.富集培养基中含有酵母膏、蛋白胨、琼脂等，蛋白胨能提供所需的碳源、氮源和维生素B.分离、纯化目的微生物的选择培养基中需加入PVC塑料膜作为唯一碳源C.将转接至固体斜面培养基上的不同菌落置于4℃的冰箱长期保存D.与传统填埋、焚烧相比，黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解不会造成二次污染13、甲流试剂盒中的抗血凝素单克隆抗体能与甲流病毒的血凝素蛋白（HA）特异性结合，发挥诊断作用。利用小鼠制备抗HA单克隆抗体的流程如图，下列叙述正确的是（）

A.制备抗HA单克隆抗体使用的B淋巴细胞取自注射过HA的小鼠脾脏B.在特定的选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡C.放入96孔板的细胞为多种杂交瘤细胞，均能产生所需抗体D.将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗HA单克隆抗体14、2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR—Cas9基因编辑技术，用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术培育出5只克隆疾病猴。下列相关叙述错误的是（）A.克隆猴基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎都成功发育为克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物D.可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)15、请回答下列有关生物技术的安全性和伦理问题：

（1）一些持支持态度的科学家认为，由于不同物种间存在__________，同时花粉的传播距离和__________有限；转基因农作物很难与其它植物杂交，因而不大可能对生物多样性造成威胁。

（2）在转基因生物或产品研究过程中，绝大多数科学家都能自觉遵守科学研究道德。例如，把重组DNA的转移限制在遗传上具有___________的生物上；对外源DNA进行认真选择，避免能够表达出对人体有毒性或过敏的___________．

（3）一些持反对态度的科学家认为，由于克隆技术尚不成熟，现在就做克隆人很可能孕育出有严重缺陷的孩子。但是支持克隆人的科学家则认为，一些技术问题可以通过胚胎分级、______和__________等方法得到解决。

（4）对于克隆技术，中国政府的态度是___________．但不反对___________。16、（1）致病菌：第二次世界大战期间，侵华日军在中国领土上修建了几十座_____工厂，曾用数千名中国人做实验，还曾在中国20多个地区使用了_____；造成了几十万中国老百姓死亡。日本战败投降时，侵华日军又一次把培养的细菌释放出来，在中国造成传染病大流行。

（2）生化毒剂：如_____分子可以阻滞神经末梢释放_____；从而引起肌肉麻痹。

（3）病毒：如_____病毒；在年轻人普遍都没有接种天花疫苗的情况下，若有人用天花病毒或某些动物的痘病毒作为生物武器，后果不堪设想。

（4）基因重组致病菌：这些致病菌是人类的_____致病菌，可让大批受感染者突然发病，而又无药可医。17、动物细胞融合的意义：克服了______，成为研究_____、_____、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。18、功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中______部位的两个核苷酸之间的______断开，因此具有______。19、目的：使目的基因在受体细胞中_____，并且可以______，使目的基因能够______作用。20、大多数蛋白质不能忍受60—80℃的高温，而DNA在_________℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解或破坏_______，食盐能____________细胞膜。21、利用DNA和蛋白质等其它成分在___________中的溶解度不同，选择适当的盐浓度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。22、在我国市场上究竟有多少种转基因产品呢？一位同学带着这样的问题，进行了调查并将结果归纳成下图｡

对该同学的调查和归纳结果，有人表示认同，有人提出质疑｡质疑者认为：目前我国市场上根本没有大豆､玉米或甜菜的转基因产品｡我们的观点是什么_____？23、蛋白质工程在生物制药上有广泛的应用。如果已经确认某种新蛋白质可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已经确认，如何通过蛋白质工程生产这种新药？如果回答有困难，可以向老师请教或通过互联网查找答案。_____评卷人得分四、实验题(共3题，共24分)24、人的血清白蛋白（HSA）在临床上需求量很大；通常从人血中提取，但由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重，如果应用基因工程等技术，将人的血消白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下：

I．采用良种供体奶牛的卵母细胞和精子；通过体外受精，形成受精卵；

II．将人血消白蛋白基因导入奶牛受精卵；形成重组细胞；

III．电脉冲刺激重组细胞；促使其形成早期胚胎；

Ⅳ．将胚胎移植到受体母牛的子宫中；最终发育成转基因小牛。

请回答下列问题：

（1）实验步骤Ⅰ中，受精时，防止多精入卵的生理反应包括____________________。

（2）实验步骤Ⅱ中，需先构建基因表达载体，将HSA基因与__________等调控组件重组在一起；再导入奶牛受精卵。

（3）实验步骤Ⅲ中，进行动物早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加__________。培养过程需要定期更换培养液，目的是__________。

（4）实验步骤Ⅳ中，应选择性别为__________的奶牛胚胎进行移植；对早期胚胎（如囊胚）进行性别鉴定的常用方法是____________________。移植前还需要检测目的基因是否成功导入受精卵，检测方法是采用__________技术。25、苹果树腐烂病是由黑腐皮壳菌引起的；是限制苹果产量的重要因素之一。生产上主要以化学药剂防治该病。为开发生物防治途径，科研人员拟从土壤中分离筛选出能抑制黑腐皮壳菌生长的枯草芽孢杆菌，实验流程图如图1：

（1）①中木糖和硝酸钾的作用分别是______________。

（2）②→③中梯度稀释的目的是_____________________________________________。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培养基中水分过快蒸发之外，还有______________。

（4）现有经纯化后获得的4个枯草芽孢杆菌品系，为探究哪个品系对黑腐皮壳菌的抑制效果更好，科研人员在如图2平板中的A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1～B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系，在适宜条件下培养3﹣5天后，通过观察_________________________筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。

图2

（5）在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在______________的平板进行计数。该方法所得结果往往比实际细菌的数目要少，原因是__________________________________。26、T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通过污染饲料引起畜禽中毒反应。CYP3A是猪体内降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导CYP3A基因表达水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（选填“初级”或“次级”）代谢产物，主要以_____方式进入猪细胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因启动子上游的两个调控序列，为研究T-2毒素诱导CYP3A基因表达的机理，研究者首先将不同调控序列分别和CYP3A基因启动子及荧光素酶基因（LUC基因）连接构建表达载体，再分别导入猪肝细胞，然后向各组猪肝细胞培养液中加入_____，适宜条件下进行培养；24h后检测LUC酶活性，计算启动子活性相对值，结果如图1所示。据图可知，B1和B2调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1两种蛋白均参与T-2毒素对CYP3A的诱导；B2是Spl的结合位点。研究者推测，NF-Y通过与B1结合，与Sp1共同调控CYP3A基因的表达。

①为证明Bl是NF-Y的结合位点，研究者依据B1序列制备了野生型和突变型探针，分别与猪肝细胞核蛋白提取物混合，实验分组及结果如图2．据实验结果推测，第4组出现阻滞带的原因是_____，进而推测第5组结果产生的原因是_____。

②研究者设计实验进一步证明了NF-Y和Spl通过互作共同发挥调控功能，实验设计思路是：增大或缩小B1和B2两者之间的距离，检测CYP3A基因的启动子活性。据此分析，实验假设是_____。评卷人得分五、综合题(共2题，共20分)27、人乳铁蛋白（hLF）对细菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人员开展人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体构建及转染研究，主要流程如下图，图中AseI、NheI、SalI、BamHI代表相关限制酶切点，neor为新霉素抗性基因；BLG基因为B乳球蛋白基因，GFP基因为绿色荧光蛋白基因。请回答：

（1）过程①中，不能从人肌肉细胞中提取RNA用于RT-PCR，是因为_______________。在RT—PCR过程中，加入的引物需在5’端添加_______________两种限制酶的识别序列；以便于hLF基因插入pEB中。

（2）过程②中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是_______________。

（3）将转染后的山羊乳腺上皮细胞先置于含新霉素的培养液中培养，能够存活的细胞应该是导入_______________的细胞，再利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞中_______________；以筛选出转染成功的细胞。

（4）要获得转基因山羊，还需要将成功表达hLF的乳腺上皮细胞的细胞核移植到山羊去核卵母细胞中，再借助_________________技术孕育出羊羔。28、研究发现；新冠病毒外壳中的S蛋白具有很强的抗原性，可利用其制作疫苗。人类已通过基因工程合成S蛋白基因，并采用仓鼠乳腺细胞表达系统来获取产物S蛋白，其过程如图所示。

回答下列问题：

(1)可利用PCR技术特异性地快速扩增S蛋白基因，该反应需要在一定的_____中才能进行，且需要引物等。已知DNA复制子链的延伸方向是5'→3'，应该选用图甲中_____（填字母）作为引物。若S蛋白基因扩增了4次，则需要_____个引物，该过程可以在_____中自动完成，完成以后，常采用_____来鉴定PCR的产物。

(2)基因工程的核心工作是_____，其目的是_____。图乙中过程④⑦分别涉及_____、_____技术。早期胚胎的_____阶段开始出现细胞分化，其中的细胞分化去向是_____。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、A【分析】【分析】

我国对克隆人持四部态度是在任何情况；任何场合、任何条件下都不赞成、不允许、不支持、不接受生殖性克隆人。但可设计试管婴儿满足医疗所需。

【详解】

A；克隆人会引发一系列伦理问题；中国禁止生殖性克隆人，A正确；

B；我国不支持生殖性克隆；但其他形式用于治疗的克隆技术可进行，B错误；

C；克隆可用于科研；如用于治疗而进行的设计试管婴儿技术，C错误；

D；“多莉”之死患由严重的肺病导致的；D错误。

故选A。2、D【分析】【分析】

题图分析；表示植物体细胞杂交过程，过程①表示酶解法去除细胞壁获得细胞原生质体的过程，过程②表示原生质体融合的过程，过程③表示再生出新的细胞壁的过程。

【详解】

A；由分析可知；过程①是利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得细胞原生质体的过程，因为植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，A正确；

B、过程②是原生质体融合的过程，可采用离心、振动、电刺激、聚乙二醇为诱导剂等方法，原生质体a和b的融合过程依赖细胞膜的流动性；B正确；

C；猕猴桃新品种的培育利用了植物体细胞杂交技术和植物组织培养技术；该过程中运用了植物细胞全能性的原理，C正确；

D；由题干信息可知；毛花猕猴桃为二倍体，软枣猕猴桃为四倍体，二者为不同的物种，不能通过杂交育种完成新品种的培育，图中运用的技术是植物体细胞杂交技术，D错误。

故选D。

【点睛】3、C【分析】【分析】

植物体细胞杂交利用的原理是细胞膜的流动性；细胞的全能性，其操作流程为：首先获得植物的体细胞，而后去除细胞壁以获得原生质体，然后利用离心；电刺激、聚乙二醇等试剂诱导原生质体融合，当该原生质体再生出新的细胞壁意味着杂种细胞诱导成功，而后对杂种细胞进行植物组织培养技术，获得杂种植株，该过程的意义是克服远缘杂交不亲和的障碍。

【详解】

据图可知，A物种基因型为Dd，属于二倍体，B物种的基因型为YyRr，也属于二倍体。植物细胞融合后形成的杂种细胞含有两个亲本的遗传物质，基因型为DdYyRr；属于异源四倍体，即C正确。

故选C。

【点睛】4、D【分析】【分析】

胚胎发育过程：

（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；

（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；

（3）囊胚：细胞开始分化；其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）；

（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层；下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔（细胞分化在胚胎期达到最大限度）。

【详解】

A；从受精卵到囊胚的发育为卵裂期；卵裂期因细胞有丝分裂导致细胞数量增加，但胚胎总体积并不增大，所以每个细胞的核质比增大，胚胎中DNA因细胞数量的增加而增加，A正确；

B；胚胎发育至囊胚时即开始了细胞分化；细胞分化的实质是基因的选择性表达，B正确；

C；胚胎的早期发育在透明带内进行的阶段称为卵裂期；囊胚发育到一定阶段会被从透明带内挤压出来，这一过程称为孵化，C正确；

D；囊胚分为内细胞团和滋养层；其中滋养层将发育为胎膜和胎盘，但这发生在囊胚期之后，D错误。

故选D。5、B【分析】【分析】

限制性核酸内切酶（限制酶）主要是从原核生物中分离纯化出来的；能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

【详解】

分析表格中的数据：线性DNA序列共有5000bp（2100+1400+1000+500=5000），经A酶切割后形成2100bp、1400bp、1000bp、500bp共4个片段，说明酶A有3个切割位点；如果用B酶切割形成了2500bp、1300bp、1200bp三个片段；所以B酶有2个酶切位点；

如果先用A酶处理再经B酶切割后，2100bp被切割成了1900bp和200bp，1400bp被切割成了800bp和600bp，1000bp和500bp没有被切割；说明酶B的酶切位点位于酶A之间。

因此限制性酶切图谱是：

故选B。二、多选题(共9题，共18分)6、A:D【分析】【分析】

分析题图：奶牛1的培育采用了基因工程技术；早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛2的培育采用可基因工程技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛3的培育采用了核移植、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。

【详解】

A；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；A正确；

B；奶牛2的培育过程中；在囊胚阶段注入了含有外源基因的受体细胞，因此其体内不同组织细胞的基因型可能不同，B错误；

C；奶牛3表明受体细胞的细胞核具有全能性；C错误；

D；结合分析可知；奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养，D正确。

故选AD。7、A:C:D【分析】【分析】

用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2。“人造牛肉”的培养不仅产量高；并可以减少成本和降低环境污染。

【详解】

A；胰蛋白酶处理动物组织；可以使组织分散成单个细胞，利于动物细胞培养，A正确。

B、动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2；B错误。

C；动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。所以细胞贴附瓶壁的培养瓶或培养皿的内表面光滑；无毒，易于贴附，如果想得到大量的产物，可以增大细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长，C正确。

D；人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产；同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，D正确。

故选ACD。8、A:B:C【分析】【分析】

分析图示可知；将卵子去核，然后注入Oct4转基因小鼠的精子，用氧化锶激活，可使该换核的细胞形成雄原核，并分裂分化形成单倍体囊，最终形成孤雄单倍体胚胎干细胞。

【详解】

A；由于桑椹胚期的细胞没有出现分化；桑椹胚前的细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，是全能性细胞，A正确；

B；从题干可知；Oct4基因在维持胚胎干细胞全能性和自我更新中发挥极其重要的作用，可推测Oct4基因的表达有利于延缓衰老，B正确；

C；过程③胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；体积较小，细胞核大，核仁明显，C正确；

D；卵巢中取出来的是未成熟的卵细胞；要进行培养到减数第二次分裂的中期才能受精，不能直接用于过程①，D错误。

故选ABC。

【点睛】9、C:D【分析】【分析】

植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，使用化学方法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合，不能用灭活的病毒诱导。可根据植物细胞的质壁分离和复原鉴定杂种细胞是否再生细胞壁，从而确定原生质体融合是否完成。植物体细胞杂交的意义：在克服远源杂交不亲和的障碍；培育作物新品种方面所取得的重大突破。

【详解】

A；驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的；采用了植物体细胞杂交技术，属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍，A正确；

B；要获得天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体；需要采用酶解法（纤维素酶、果胶酶），诱导天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体的融合可采用化学法（PEG等试剂）或物理法（电刺激等），B正确；

C；驱蚊草培育过程不同于植物组织培养；但需要采用植物组织培养技术，因此有细胞脱分化和再分化的过程，C错误；

D；驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术；育种原理是染色体数目变异，D错误。

故选CD。10、A:C【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取B淋巴细胞，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞，最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；利用转基因鼠技术进行全人源化单克隆抗体；能降低单克隆抗体药物的免疫排斥反应，A正确；

B；过程①②利用的是转基因技术；B错误；

C；融合后的细胞需要用选择培养基筛选获得杂交瘤细胞；还要经过克隆化培养、（专一性）抗体检测等，C正确；

D；B细胞在体外培养条件下不能无限增殖；体外培养B细胞不能获得大量的单克隆抗体，D错误。

故选AC。11、A:B:D【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题包括：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；转基因生物具有某些特殊性质；他们在某地区的竞争能力较强，可能成为“外来入侵物种”，威胁生态系统中其他生物的存在，从而影响生态系统的稳定性，A正确；

B；转基因作物的基因可以通过花粉传播到田间近缘野生植物体内；该近缘物种在通过授粉会造成基因进一步扩散和污染，B正确；

C；即使目的基因来自自然界；培自出的转基因植物仍然可能会有潜在的安全性向题，C错误；

D；大面积种植转基因抗虫棉；有可能会导致棉铃虫群体中相关抗性基因频率增加，D正确。

故选ABD。12、B:D【分析】【分析】

1；分离菌株的思路:

(1)自然界中目的菌株的筛选:

①依据：根据它对生存环境的要求；到相应的环境中去寻找。

②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的TaqDNA聚合酶；就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。

(2)实验室中目的菌株的筛选:

①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养；温度、pH等）；同时抑制或阻止其他微生物生长。

2；统计菌落数目的方法：

(1)稀释涂布平板法（间接）：

①当样品的稀释庋足够高时；培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。

②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。

(2)利用显微镜直接计数。

【详解】

A；富集培养基为液体培养基；不应含有琼脂，A错误；

B；分离、纯化能降解PVC塑料膜的微生物的选择培养基中需加入PVC塑料膜作为唯一碳源；B正确；

C；转接至固体斜面培养基上的不同菌落置于4℃的冰箱临时保存；对于需要长期保存的菌种，可用甘油管藏的方法，C错误；

D；如果对白色污染进行传统填埋、焚烧容易造成二次污染；黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解不会，D正确。

故选BD。13、A:B:D【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；抗原与抗体的结合具有特异性；为制备抗HA单克隆抗体，则使用的B淋巴细胞应取自注射过HA的小鼠脾脏，A正确；

B；在特定的选择培养基上；未融合的亲本细胞（B淋巴细胞类型、骨髓瘤细胞类型）和融合的具有同种核的细胞（B淋巴细胞-B淋巴细胞型和骨髓瘤-骨髓瘤细胞型）都会死亡，B正确；

C；将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后；放入96孔板，不一定都能产生所需抗体，还需进行抗体阳性检测，C错误；

D；据图可知；图中细胞群a在加入HA抗原后呈阳性，说明细胞群a产生了抗HA抗原的抗体，故将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗HA单克隆抗体，D正确。

故选ABD。14、B:D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

【详解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的体细胞通过克隆技术（属于无性繁殖）获得的；所以其基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰，A正确；

B；经基因编辑后形成的胚胎不一定都能发育成克隆疾病猴；B错误；

C；克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物；C正确；

D；不能利用该技术进行克隆人的研究；D错误。

故选BD。

【点睛】三、填空题(共9题，共18分)15、略

【分析】1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

3；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）；生物安全主要是指转基因生物释放到环境中，可能会对生物多样性构成潜在的风险和威胁。

【详解】

（1）一些持支持态度的科学家认为；由于不同物种间存在生殖隔离，同时花粉的传播距离和存活时间有限，不会造成转基因农作物与其它植物的杂交，因而也不太可能对生物多样性造成威胁。

（2）在转基因生物或产品研究过程中；为保证转基因生物的安全，要把重组DNA的转移限制在遗传上具有特定缺陷的生物上；对外源DNA进行认真选择，避免能够表达出对人体有毒性或过敏的蛋白质等等。

（3）坚持克隆人的科学家则认为；一些技术问题可以通过胚胎分级；基因诊断和染色体检查等方法得到解决。

（4）中国政府对于克隆技术的态度是禁止生殖性克隆；但不反对治疗性克隆。

【点睛】

本题难度一般，属于考纲中识记、理解层次的要求，结合基因工程的应用，综合考查了基因工程、试管婴儿和转基因生物的安全性问题，并且深入考查了相关基础知识，要求考生能够构建一定的知识网络．面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。【解析】①.生殖隔离②.存活时间③.特定缺陷④.蛋白质⑤.基因诊断⑥.染色体检查⑦.禁止生殖性克隆人⑧.治疗性克隆16、略

【分析】【详解】

（1）早在第二次世界大战中；侵华日军就组建了从事细菌战的731部位和100部队，并在中国领土上修建了几十座细菌武器工厂，大量培养鼠疫；霍乱、伤寒、炭疽和菌痢等一系列能使人致命的传染性疾病。曾用数千名中国人做实验，还曾在中国20多个地区使用了细菌武器，造成了几十万中国老百姓死亡。日本战败投降时，侵华日军又一次把培养的细菌释放出来，在中国造成传染病大流行。

（2）某些国家或恐怖组织大量生产肉毒杆菌毒素；肉毒杆菌毒素分子可以阻滞神经末梢释放乙酰胆碱，从而引起肌肉麻痹。

（3）1978年天花就已经在地球上消灭；但是某些国家至今保留着天花病毒菌株，今天，在年轻人普遍都没有接种天花疫苗的情况下，若有人用天花病毒或某些动物的痘病毒作为生物武器，后果不堪设想。

（4）目前，有一些国家对重组基因技术制造全新的致病菌表现了极大的兴趣，这些人类从来没有接触过的致病菌，可以让大批受感染者突然发病，而又无药可医。【解析】①.细菌武器②.细菌武器③.肉毒杆菌毒素④.乙酰胆碱⑤.天花⑥.从未接触过17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】远缘杂交的不亲和性细胞遗传细胞免疫、18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】特定磷酸二酯键特异性19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】稳定存在遗传至下一代表达和发挥20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80细胞膜溶解21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不同浓度的NaCL溶液DNA杂质22、略

【分析】【详解】

目前我国市场上的转基因食品，从原料来源看，进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品，国内生产的有棉籽油和番木瓜，故我国市场上有大豆等的转基因产品。【解析】目前我国市场上的转基因食品，从原料来源看，进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品，国内生产的有棉籽油和番木瓜。23、略

【分析】【详解】

蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步骤进行。该蛋白质的氨基酸序列已知，因此通过蛋白质工程，生产该蛋白质新药的基本过程为：根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药。【解析】根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药四、实验题(共3题，共24分)24、略

【分析】1；体外受精过程包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、体外受精；其中卵母细胞的采集和培养的方法：

（1）主要方法是：用促性腺激素处理；使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精。

（2）第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞。

（3）第三种方法：是直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞；叫活体采卵。

2；受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。

【详解】

（1）受精时；往往一个卵母细胞只能和一个精子结合，透明带反应是阻止多精入卵的第一道屏障，卵细胞膜反应是阻止多精入卵的第二道屏障。

（2）该实验是利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白；因此实验步骤Ⅱ中构建基因表达载体时，需要先将HSA基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，再导入奶牛受精卵。

（3）动物早期胚胎的体外培养时；培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类；维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和动物血清。培养过程需要定期更换培养液，清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。

（4）血清白蛋白要从乳汁中提取；只有雌性奶牛才能产生乳汁，因此胚胎移植时，必须选取雌性奶牛的胚胎进行移植；对早期胚胎（如囊胚）进行性别鉴定的常用方法是取滋养层细胞进行染色体检查或DNA分析；移植前还需要检测目的基因是否成功导入受精卵，通常采用DNA分子杂交技术进行检测。

【点睛】

解答本题的关键是掌握体外受精、受精过程、基因工程等知识，要求考生识记体外受精技术的过程及方法、受精作用的过程、基因工程的操作步骤及应用，并能够联系实际答题。【解析】透明带反应和卵细胞膜反应乳腺蛋白基因的启动子激素和动物血清清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害雌性取滋养层细胞进行染色体检查或DNA分析DNA分子杂交25、略

【分析】【分析】

微生物的分离：①利用该分离对象对某一营养物质的“嗜好”；专门在培养基中加入该营养物质，使该微生物大量增殖。这些物质主要是一些特殊的碳源；氮源，如纤维素可用来富集纤维素分解微生物，尿素可用来富集尿素分解微生物。②利用该分离对象对某种抑制物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物质，经培养后，由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制，而分离对象却可趁机大量增殖，使之在数量上占优势。如筛选酵母菌和霉菌，在培养基中加入青霉素，因青霉素可抑制细菌和放线菌的细胞壁的合成，从而抑制两类微生物的生长，而酵母菌和霉菌正常生长增殖。

【详解】

（1）微生物的生长需要碳源；氮源、水和无机盐；①中木糖含有C、H、O元素，故能提供碳源，硝酸钾中含有N元素，可以提供氮源和无机盐。

（2）分离筛选枯草芽孢杆菌需要得到单菌落；②→③中梯度稀释的目的是将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培养基中水分过快蒸发之外；还可以防止冷凝水落入培养基造成污染。

（4）分析题意可知，A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1~B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系；在适宜条件下培养3－5天，由于枯草芽孢杆菌能抑制黑腐皮壳菌生长，通过观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离），就能筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。

（5）在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落，故该方法所得结果往往比实际细菌的数目要少。

【点睛】

本题考查微生物的分离和计数的相关知识，意在考查考生利用所学知识解决实际问题的能力，难度中等。【解析】提供碳源，提供氮源和无机盐将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落防止冷凝水落入培养基造成污染观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离）30～300当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落26、略

【分析】【分析】

图1可知：T-2毒素是一种常见的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导其表达水平升高，当用两种调控序列同时连接启动子，启动子的活性最高。

图2可知：野生型探针能与NF-Y结合；突变型探针不能与NF-Y结合，NF-Y抗体一定能与NF-Y结合。

【详解】

（1）初级代谢产物一般是霉菌生命活动所必需的，大多存在于细胞内。次级代谢产物不是霉菌生命活动必需的，并且分泌到体外，故T-2毒素是霉菌的次级代谢产物。T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由扩散的方式进入细胞。

（2）实验的自变量是有无调控序列；根据单一变量原则，对照组的目的是为了排除无光变量的影响，除了没有调控序列，其他处理和实验组相同，所以对照组和实验组猪肝细胞均导入含CYP3A基因启动子及LUC基因的表达载体，然后向各组猪肝细胞培养液中加入加入等量T-2毒素，适宜条件下进行培养。从图中信息可知，缺失两个调控序列和对照组活性一致，缺失一个比对照组活性略强，两个都存在活性最高，说明这两个调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件。故缺失两个调控序列或其中任一个，T-2毒素都不能诱导启动子活性明显增强。

（3）①实验的目的是要验证NF-Y能与B1结合；根据第2组和第3组结果，依据B1序列制备的NF-Y结合位点野生型探针能与NF-Y结合，根据第4组结果，突变型探针不能与NF-Y结合。第5组加入了NF-Y抗体，一定能与NF-Y结合。故可以解释为：结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。第5组，NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针；NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。

②假设NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离，故增大或缩小B1和B2两者之间的距离都会降低CYP3A基因的启动子的活性。【解析】(1)次级自由扩散。

(2)等量的T-2毒素缺失两个调控