2024年北师大版选择性必修3生物下册月考试卷含答案

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A.引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入B.复性温度过高会导致引物不能与模板牢固结合，PCR扩增效率下降C.第3轮PCR，引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因D.第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/22、检验水样中大肠杆菌常用滤膜法；其操作流程如下图。EMB培养基为伊红美蓝培养基。下列对实验操作的分析，错误的是（）

A.实验检验前，滤杯、滤瓶、镊子和培养皿均可用干热灭菌法灭菌处理B.配制EMB培养基时，应满足大肠杆菌所需营养物质及调节pH为微碱性C.EMB培养基属于选择培养基，只有大肠杆菌能正常生长并形成黑色菌落D.根据培养基上黑色菌落数目，可计算出一定体积水样中大肠杆菌的数量3、胚状体是在植物组织培养的哪一阶段上获得的（）A.愈伤组织的形成中B.再分化C.形成完整植株D.脱分化4、下列说法中正确的是（）A.将大豆种子用60Co处理后，筛选出一株杂合子抗病植株连续自交若干代，则其纯合抗病植株的比例逐代下降B.抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦，此实践活动包含基因工程技术C.育种专家在稻田中发现一株十分罕见的“一秆双穗”植株，经鉴定该变异性状是由基因突变引起的，将该株水稻的花粉离体培养后即可获得稳定遗传的高产品系D.最简捷的育种方法是杂交育种，快速育种时常选用单倍体育种5、科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失的小鼠进行基因治疗，其技术流程如图所示。下列相关叙述错误的是（）

A.ES细胞具有发育的全能性，能分化为成年个体的各种组织细胞B.步骤①中，应选择培养至MII中期的卵母细胞作为受体细胞C.步骤③中，需要构建含有干扰素基因的基因表达载体D.可以用DNA分子杂交技术来检测目的基因是否转录出了mRNA评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)6、2020年7月20日，国际医学权威期刊《柳叶刀》上发表了新冠病毒疫苗II期临床试验的成果。该试验是由陈薇院士等人领衔的团队开展的研究，试验中使用的疫苗是一种腺病毒载体重组新冠病毒疫苗(基因重组疫苗)。试验结果表明，单次接种疫苗28天后，99．5%的受试者产生了特异性抗体，95．3%受试者产生了中和抗体，89%的受试者产生了特异性T细胞免疫反应。这表明，陈薇团队研发的新冠疫苗可为健康人群提供“三重保护”，将新冠病毒“拒之门外”。下列叙述正确的是（）A.该疫苗的制备需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶B.受试者接受重组新冠病毒疫苗的接种后，体内能产生分泌特定抗体的效应T细胞C.主要通过检测受试者体内新冠病毒抗体的含量来评价试验的有效性D.新冠肺炎康复患者可以不注射该疫苗7、为有效防范由各类生物因子、生物技术误用滥用等引起的生物性危害，生物安全已纳入国家安全体系。下列不符合生物技术的安全性和伦理问题的是（）A.利用生物技术改造工程菌获得大量的抗生素B.克隆技术可应用到器官移植但不能进行人体克隆C.中国反对生物武器，但在特殊情况下可以生产生物武器D.基因编辑技术不仅可用于疾病预防领域研究，也可用于编辑婴儿8、土壤被称为“微生物的天然培养基”。科学工作者要从土壤中分离或鉴定需要的微生物，需要配制选择培养基，再通过接种、培养、纯化、筛选等技术获得微生物。下列关于培养基对微生物的分离或鉴定的叙述，正确的是（）A.从土壤中分离出酵母菌和霉菌，需要配制含青霉素的培养基，在灭菌后将培养基调至酸性B.从土壤中分离出纤维素的分解菌，需要配制含纤维素为唯一碳源的培养基且加刚果红C.以尿素为唯一氮源的培养基，采用稀释涂布平板法可分离出分解尿素的分解菌D.从土壤中分离固氮微生物需要配制不含氮源的培养基，且培养条件要适宜9、白地霉侵染是导致柑橘酸腐病的主要原因，实验证明桔梅奇酵母通过分泌普切明酸对白地霉具有生物防治能力。已知铁是真菌生长的必需元素，是胞内重要酶活性中心的组成部分。普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁螯合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+形成稳定红色复合物。研究配制的含有不同浓度FeCl3的培养基如下表所示。实验结果为随FeCl3浓度增大，抑菌圈红色加深但变窄，如下图所示。相关叙述正确的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水琼脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、维生素，琼脂不是营养物质B.白地霉采用了平板划线法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.结果表明，FeCl3浓度增大，普切明酸与Fe3+结合的数量减少D.结果表明，FeCl3能降低桔梅奇酵母对白地霉的防治效果10、研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌，下列相关表述正确的是（）A.培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利B.这种培养基是一种选择培养基C.利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤D.相对于未被污染的土壤，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌11、图甲为培育转基因生物时选用的载体，图乙是含有目的基因的一段DNA序列，图中标注了相关限制酶的酶切位点。下列叙述错误的是（）

A.若通过PCR技术提取该目的基因，应该选用引物a和引物cB.构建表达载体时应选用BamHⅠ和HindⅡ这两种限制酶C.图乙中一个DNA分子在PCR仪中经过四轮复制得到所需目的基因的分子数为8个D.只利用含四环素的培养基就可以直接筛选出成功导入表达载体的受体细胞评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)12、回答下列问题。

（1）目前人类对基因________及基因间的________________尚缺乏足够的认识，要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的；况且人类的____________病，既与基因有关，又与环境和________________有关。

（2）生物武器种类包括__________、________、__________，以及经过___________的致病菌等。

（3）1998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申了在任何情况下_____________、_____________、______________生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。13、第一步：______14、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以将_____________水解成_________________和________________。15、胚胎工程。

胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，由______、______、______、胚胎冷冻保存技术和______技术等组成的现代生物技术。16、细胞产物的工厂化生产。

组织培养技术除了在农业上的应用外，还广泛应用于另一个重要的领域，即______。17、研究表明，转基因抗虫棉的大面积种植有效遏制了棉铃虫害，也显著地降低了化学农药的使用量｡但是，科研人员也发现，棉田中一种体型很小的盲蝽蟓却容易爆发成灾｡有人认为这与大面积种植转基因抗虫棉有关｡我们应如何看待这种观点_____？如果回答问题有困难，可以请教老师或通过互联网寻找答案。评卷人得分四、判断题(共4题，共28分)18、培养动物细胞一般使用液体培养基，培养基通常需要加入血清等一些天然成分。()A.正确B.错误19、通过体细胞核移植技术已经获得了多种克隆动物，该技术的成功率已经很高。（选择性必修3P54）()A.正确B.错误20、蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误21、生殖性克隆和治疗性克隆两者有着本质的区别。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共12分)22、甘蔗是华南地区一种重要的经济作物。某研究团队从甘蔗根际土壤中分离出了几种固氮菌；实验方案如下。

回答下列问题：

（1）Ashby培养基的营养成分主要包括水、无机盐_________等。实验中第一次在Ashby培养基上接种的方法是________，在Ashy平板上进行多次接种的目的是_________________________

（2）固氮菌能产生固氮酶。为评估固氮酶的活性，可以检测____________．

（3）研究发现，上述固氮菌还能产生IAA。取一定体积的固氮菌菌液离心，获得上清液，现欲测定上清液中IAA的含量，请利用以下试剂，写出实验思路。_______

供选试剂：标准的1g/L的IAA母液，蒸馏水，S试剂(与IAA反应显红色，且颜色深浅与IAA浓度成正相关）23、干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病；患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。下图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题：

(1)利用RNA通过①过程获得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。为了针对性获得cDNA，应如何设计逆转录第一步时的DNA引物______，设计引物的目的是______。

(2)为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位点。

(3)③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是______，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加_______的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加______的培养基（B）上培养，收集_______菌落进一步纯化后将菌体破碎处理；筛选得到SSB蛋白。

(4)将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，则后续实验内容应为抽取小鼠血液_______。24、我国有近一亿公顷的盐碱地，大部分植物无法在此生存，而耐盐植物藜麦却能生长。通过研究藜麦叶片结构后发现，其表皮有许多盐泡细胞，该细胞体积是普通表皮细胞的100倍以上，里面没有叶绿体，Na+和Cl-在盐泡细胞的转运如下图所示。请回答问题。

（1）据图推测，藜麦的耐盐作用机制是通过_________的方式，将Na+和Cl-运送到表皮盐泡细胞的________（细胞器）中储存起来；从而避免高盐对其他细胞的影响。

（2）下表为藜麦盐泡细胞和其他几种普通植物的叶肉细胞膜中部分蛋白的相对表达量。其中______（填下列选项字母）更可能是藜麦，理由是_______________________。

。

ABCDNa+载体蛋白812511Cl-载体蛋白2646葡萄糖转运蛋白38286668（3）藜麦根系从土壤中吸收盐分是主动运输还是被动运输？有同学设计实验进行了探究。

①实验步骤：

a．取甲、乙两组生长发育基本相同的藜麦幼苗植株，放入适宜浓度的含有Na+、Cl-的溶液中。

b．甲组给予正常的细胞呼吸条件，乙组加入______________。

c．一段时间后测定两组植株根系对Na+、Cl-的吸收速率。

②预测实验结果及结论：若乙组_______________；说明藜麦从土壤中吸收盐分的方式是主动运输。

（4）研究人员尝试将藜麦中的耐盐基因转移到其他植物体内，从而培育新型耐盐植物。若要从分子水平上检测耐盐基因是否成功转入受体细胞，请写出两种常用的检测方法_________、___________。从经济价值和生态价值角度考虑，培育耐盐植物的主要意义是_______________（写出两条）。25、三氯生是一种抑菌物质，具有优异的贮存稳定性，可以替代抗生素用于基因工程中筛选含目的基因的受体细胞。已知fabV（从霍乱弧菌中发现的烯脂酰ACP还原酶）基因可以使大肠杆菌抵抗三氯生。

(1)通过PCR方法扩增fabV基因时，先要根据_____设计两种特异性引物序列，以确保Taq酶从引物的3′端延伸DNA链，至少需要经过_____次扩增才能获得8个双链等长的目的基因。

(2)基因工程的核心步骤是_____；某科研团队将可以受温度调控的基因插入上述选出的重组质粒中，构建了温度调控表达质粒（如图2）。其中C基因在低温下会抑制P2，R基因在高温下会抑制P1，如果将lacZ基因和GFP（绿色荧蛋白）基因插入图2质粒中，使得最后表现为低温下只表达GFP蛋白，而高温下只表达lacZ蛋白。则lacZ基因插在_____之间，GFP基因的插入位置及注意点是_____。

(3)若以大肠杆菌为受体细胞，筛选上述插入了GFP基因的受体细胞的依据是：大肠杆菌能在含_____的培养基上生长，且_____。评卷人得分六、综合题(共2题，共6分)26、CRISPR/Cas9基因编辑技术荣获2020年度诺贝尔化学奖；CRISPR/Cas9系统由Cas9蛋白和一条向导RNA构成。向导RNA中含20个碱基的识别序列，可以和目标DNA的靶位点结合，在向导RNA引导下，Cas9将DNA双链切断（如图1所示）。水稻是世界上最重要的粮食作物之一，供养了世界将近50%的人口。由子囊菌引起的稻瘟病，是水稻生产上最严重的病害之一，常常导致水稻产量严重损失。为研究水稻OsERF922基因与稻瘟病抗性的关系，我国科研工作者利用CRISPR/Cas9技术获得了水稻OsERF922基因敲除植株。请回答下列问题：

(1).向导RNA和Cas9蛋白形成的复合物，在功能上接近于限制酶，但是它比限制酶更具备的优势是___________________________。

(2).利用CRISPR/Cas9技术获得了水稻OsERF922基因敲除植株实验步骤如下：根据OsERF922基因序列，选择合适的___________________，设计向导RNA，然后利用PCR反应得到向导RNA对应的DNA片段，将该片段连接到CRISPR/Cas9载体上，得到CRISPR/Cas9基因表达载体；CRISPR/Cas9基因表达载体应该具备的能力是：__________________________________________________。将CRISPR/Cas9基因表达载体导入____________________，并用它侵染水稻细胞；再将被侵染成功的水稻细胞通过__________________技术；最终获得OsERF922基因敲除水稻植株。

(3).前人研究表明，下调OsERF922基因的表达能提高植物与防御相关的一些基因（如植物抗毒素生物合成酶）的表达量，据此推测OsERF922基因敲除水稻植株对稻瘟病的抵抗力会_________________（“增强”或者“减弱”）。要证明此推测，请简要写出实验思路：________________。27、如图所示；请据图回答下面的问题。

（1）淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合”在一起，说细胞膜具有_____特点。此过程中，常用的生物诱导剂为_____，该杂交细胞的特点是_____。

（2）杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基成分有何主要不同？_____。

（3）单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原（病原体或癌变细胞等）并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了_____。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、D【分析】【分析】

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

2；PCR反应过程是：变性→复性→延伸。

3；结果：上述三步反应完成后；一个DNA分子就变成了两个DNA分子，随着重复次数的增多，DNA分子就以2n的形式增加．PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。

【详解】

A；引物中设计两种限制酶识别位点；可以配合载体的限制酶识别位点，帮助目的基因定向定点插入运载体，避免发生自身环化，A正确；

B；PCR技术中；复性是指引物结合到互补DNA链；复性温度过高会引起碱基之间的氢键断裂，导致引物不能与互补DNA链（模板）牢固结合，DNA扩增效率下降，B正确；

C；第3轮PCR；引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因，C正确；

D、第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA只有1个，而子代DNA有23=8个；故含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/8，D错误。

故选D。

【点睛】2、C【分析】【分析】

1；将已知体积的水过滤后；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。伊红美蓝培养基属于鉴别培养基，在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现黑色，带金属光泽。可以根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。

【详解】

A；干热灭菌法的工具为干热灭菌箱；160～170℃下加热1～2h，能耐高温、需要保持干燥的物品可以使用干热灭菌法，如滤杯、滤瓶、镊子和培养皿等，A正确；

B；培养基中除了含有水、碳源、氮源和无机盐；还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求，故配制EMB培养基时，应满足大肠杆菌生长所需条件，B正确；

C；伊红美蓝培养基属于鉴别培养基；大肠杆菌代谢产物会和伊红美蓝发生反应，使菌落呈现黑色，C错误；

D；将已知体积的水过滤后；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养，可以根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量，D正确。

故选C。

【点睛】3、B【分析】【分析】

植物组织培养过程的顺序是离体植物器官；组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织；再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。

【详解】

植物体的根；茎、叶细胞一般都具有全能性；在一定的营养和激素条件下，可以脱分化形成愈伤组织。将愈伤组织转接到含有不同激素成分的培养基上，就可以诱导其再分化生成胚状体，所以胚状体是在植物组织培养的再分化阶段形成的，B正确，ACD错误。

故选B。

【点睛】4、D【分析】【分析】

常见的育种方法总结：

1；杂交育种原理：基因重组（通过基因分离、自由组合或连锁交换；分离出优良性状或使各种优良性状集中在一起）。

2；诱变育种原理：基因突变；方法：用物理因素（如X射线、γ射线、紫外线、激光等）或化学因素（如亚硝酸、硫酸二乙脂等）来处理生物，使其在细胞分裂间期DNA复制时发生差错，从而引起基因突变，举例：太空育种、青霉素高产菌株的获得。

3；单倍体育种原理：染色体变异；方法与优点：花药离体培养获得单倍体植株，再人工诱导染色体数目加倍，优点：明显缩短育种年限，原因是纯合体自交后代不发生性状分离。

4；多倍体育种：原理：染色体变异；方法：最常用的是利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗。秋水仙素能抑制有丝分裂时纺缍丝的形成，能得到染色体数目加倍的细胞。如八倍体小黑麦的获得和无籽西瓜的培育成功都是多倍体育种取得的成就。

5；基因工程育种原理：DNA重组技术（属于基因重组范畴）方法：按照人们的意愿；把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。操作步骤包括：提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达等。举例：能分泌人类胰岛素的大肠杆菌菌株的获得，抗虫棉，转基因动物等。

【详解】

A、杂合子抗病植株连续自交若干代，杂合子在第n代所占比例为Fn=则其纯合抗病植株的比例为（1-）1/2；其纯合抗病植株的比例逐代上升，A错误；

B；抗虫小麦与矮秆小麦杂交；通过基因重组获得抗虫矮秆小麦，没有用到基因工程技术，B错误；

C；将该株水稻的花粉离体培养后还需诱导染色体加倍；再筛选才能获得稳定遗传的高产品系，C错误；

D；最简捷的育种方法是杂交育种；快速育种时常选用单倍体育种，D正确。

故选D。5、D【分析】分析图：①表示核移植过程；②表示早期胚胎培养过程；③表示将目的基因导入ES细胞。

【详解】

A；胚胎干细胞具有发育的全能性；能分化为成年动物体内任何一种组织细胞，A正确；

B；由于卵母细胞含有易于细胞核表达的物质；步骤①中，应选择培养至减数第二次分裂中期的卵母细胞作为受体细胞，B正确；

C；将目的基因导入受体细胞前；需要构建含有目的基因（干扰素基因）的表达载体，C正确；

D；从转基因生物中提取的是mRNA；同样用标记的基因作为探针，与mRNA杂交，若显示出了杂交带，则表明目的基因已经转录出mRNA，此项技术称为分子杂交技术，检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，采用DNA分子杂交技术，D错误。

故选D。二、多选题(共6题，共12分)6、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已经发展了三代：

第一代疫苗指的是灭活疫苗和减毒活疫苗；通过体外培养病毒，然后用灭活的病毒刺激人体产生抗体，它是使用最为广泛的传统疫苗；

第二代疫苗又称为亚单位疫苗；是通过基因工程原理获得的具有免疫活性的病原特异性结构蛋白，刺激人体产生抗体；

第三代疫苗是核酸疫苗；又称基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是将编码某一抗原蛋白的基因作为疫苗，注射到人体中，通过正常的人体生理活动产生抗原蛋白，诱导机体持续作出免疫应答产生抗体。

【详解】

A；该疫苗是基因重组疫苗；需要将腺病毒载体和新冠病毒的基因进行连接，所以该疫苗的制备需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶，A正确；

B；受试者接受重组新冠病毒疫苗的接种后；体内能产生分泌特定抗体的浆细胞，B错误；

C；主要通过检测受试者体内新冠病毒抗体的含量来评价试验的有效性；C正确；

D；新冠肺炎康复患者体内产生了新冠病毒抗体和和相应的记忆细胞；可以不注射该疫苗，D正确。

故选ACD。7、C:D【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

2；对待转基因技术的利弊；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。

【详解】

A；可以通过生物合成法、全化学合成法、半化学合成法来产生抗生素；其中生物合成法中可以通过工程菌制造法来产生，A正确；

B；克隆技术是可以克隆器官的；但是不可以人体克隆，禁止生殖性克隆，B正确；

C；中国声明：在任何情况下；不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C错误；

D；基因编辑技术可用于疾病预防领域研究；但不能用于编辑婴儿，D错误。

故选CD。8、B:C:D【分析】【分析】

选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基。具有只允许特定的微生物生长；而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能。

【详解】

A；青霉素能杀死细菌；对真菌无影响，因此，从土壤中分离出酵母菌和霉菌，需要配制含青霉素的培养基，且调试pH需要在灭菌前，A错误；

B；纤维素分解菌含纤维素水解酶能利用纤维素；其他微生物不能利用纤维素，刚果红和纤维素形成红色复合物，纤维素被分解后出现透明圈，所以能分离和筛选纤维素的分解菌，B正确；

C、分解尿素的分解菌能合成脲酶，把尿素分解成NH3，NH3再转化NO3-、NH4+被植物利用；其他微生物细胞中不能合成脲酶，不能利用尿素，在以尿素为唯一氮源的培养基上不能生长，C正确；

D、固氮菌能利用空气中N2；其他微生物不能利用，因此需要配制不含氮源的培养基进行筛选，且培养条件要适宜，D正确。

故选BCD。9、A:D【分析】【分析】

1；培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。

2；微生物常见的接种的方法：

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、维生素；琼脂是凝固剂的一种，并不是营养物质，在培养液中加入琼脂可以使液体培养基成为琼脂固体培养基，A正确；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接种都采用了涂布平板法；B错误；

C、随培养基中FeCl3浓度的增加，普切明酸与Fe3+的结合增强；抑菌圈的红色加深，C错误；

D、普切明酸与Fe3+形成红色复合物，但随培养基中FeCl3浓度的增加，抑菌圈变窄，说明FeCl3能降低桔梅奇酵母对白地霉的防治效果；D正确。

故选AD。10、B:C:D【分析】【分析】

在微生物学中；将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。

【详解】

A；培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水；将出现失水过多而死亡的现象，对生长不利，A错误；

B；这种培养基以石油为唯一碳源；只有石油降解菌可在该培养基上正常存活，因此是一种选择培养基，B正确；

C；被石油污染的土壤通气性极差；利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤，C正确；

D；根据生物与其生存环境相适应的特点；未被污染的土壤中几乎不含石油分解菌，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌，D正确。

故选BCD。11、B:D【分析】【分析】

分析题图：构建表达载体时；不能选用限制酶BamHⅠ，否则会导致两种抗性基因都被破坏，因此应该选择Bc1I和HindⅢ这两种限制酶，根据引物的延伸方向，所用的引物为图乙中引物a和引物c。

【详解】

A；PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合；根据引物的延伸方向，所用的引物为图乙中引物a和引物c，A正确；

B；根据图甲可知；BamHⅠ会导致两种抗性基因都被破坏，同时为防止目的基因自身环化，因此只能选BclI和HindⅢ两种限制酶切割，B错误；

C；图乙中一个DNA分子在PCR仪中经过四轮复制可得到16个DNA片段；其中所需目的基因的分子数为8个，C正确；

D；由于选择BclI和HindⅢ这两种限制酶；破坏了氨苄青霉素抗性基因，但没有破坏四环素抗性基因，因此应该先用含四环素的培养基筛选出含有基因表达载体和普通质粒的大肠杆菌，再用含氨苄青霉素的培养基筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养基加氨苄青霉素含普通质粒的大肠杆菌能生存，而含重组质粒的不能生存，从而筛选出成功导入表达载体的受体细胞，D错误。

故选BD。三、填空题(共6题，共12分)12、略

【分析】【分析】

【详解】

（1）人类对基因的结构；基因间的相互作用尚缺乏足够的认识；人类的多基因病，既与基因有关，又与环境和生活习惯有关。

（2）生物武器种类包括致病菌；病毒、生化毒剂、以及经过基因重组的致病菌。

（3）1998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申了在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器。【解析】①.结构②.相互作用③.多基因④.生活习惯⑤.致病菌⑥.病毒⑦.生化毒剂⑧.基因重组⑨.不发展⑩.不生产⑪.不储存13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因的获取14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术性别控制16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞产物的工厂化生产。17、略

【分析】【详解】

生物之间存在（种间）竞争多关系，该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间共同以棉花为食，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓的食物等资源充足，故大量繁殖，爆发成灾。【解析】该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间存在竞争关系，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓大量繁殖四、判断题(共4题，共28分)18、A【分析】【分析】

液体培养基主要是模拟动物体内环境；动物体细胞是生活在组织液当中，而且细胞要直接从组织液里获得营养和排出废物。所以液体培养基相当于组织液的液体环境。

【详解】

为了保证细胞培养时营养物质和生长因子的供给，培养基中需添加一定量的动物血清等天然成分，可以补充合成培养基中缺乏的物质，故该表述正确。19、B【分析】【详解】

目前；用体细胞核移植技术得到克隆动物的成功率还很低。

故错误。20、A【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。

故正确。21、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治疗性克隆两者有着本质区别；最重要的体现在目的不同。

【详解】

治疗性克隆：是指把克隆出来的组织和器官用于治疗疾病，这种用于医疗目的的使用克隆技术制造胚胎称为治疗性克隆。生殖性克隆：处于生殖的目的使用克隆技术在实验室制造人类胚胎。治疗性克隆和生殖性克隆最重要的差别是目的不同。五、实验题(共4题，共12分)22、略

【分析】【分析】

培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质，培养基中一般含有水；碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。固氮微生物可利用空气中的氮气，故培养基无需再加入氮源。纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。

【详解】

（1）固氮菌可利用空气中的氮气作为氮源，所以Ashby培养基的营养成分主要包括水；无机盐、碳源等；不需要额外加入氮源。将土壤稀释液进行梯度稀释后再接种的方法为稀释涂布平板法，在Ashy平板上进行多次接种的目的是提高固氮菌的纯度。

（2）固氮酶的活性越大；单位时间内的固氮量越大，所以为评估固氮酶的活性，可以检测单位时间内的固氮量。

（3）S试剂可与IAA反应显红色；且颜色深浅与IAA浓度成正相关，所以可用蒸馏水对IAA母液进行梯度稀释，加入S试剂制成标准显色液，往上清液中加入S试剂，与标准显示液进行比色，与上清液颜色相近的标准显示液中IAA的浓度计为上清液中IAA的浓度。

【点睛】

本题考查固氮菌的培养和筛选，意在考查考生对所学知识的灵活应用能力。【解析】碳源稀释涂布平板法提高固氮菌的纯度单位时间内的固氮量用蒸馏水对IAA母液进行梯度稀释，加入S试剂制成标准显色液，往上清液中加入S试剂，与标准显示液进行比色，与上清液颜色相近的标准显示液中IAA的浓度计为上清液中IAA的浓度23、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。研究人员一般先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞；使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。

【详解】

（1）利用RNA通过①过程（逆转录）获得cDNA需要逆转录酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。逆转录第一步以mRMA为模板合成DNA单链；新链与模板链反向平行，由于新链只能由5'端向3'端延伸，所以逆转录第一步的引物应与mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互补配对，即用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物；设计引物的目的是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。

（2）对逆转录得到的cDNA扩增时；引物的5'端结合母链的3'端之后DNA聚合酶开始扩增DNA。为确保其与pET41a质粒定向连接，应使用不同种的限制酶切割质粒和目的基因，由图可知，使用EcoRI酶会破环SSB基因，故应在相应引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位点。

（3）由题图分析可知：质粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破坏了氯霉素抗性基因，所以成功组装的重组质粒不能在添加了氯霉素的培养基上生长，③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌；目的是使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态，然后分别将处理后的大肠杆菌先接种在添加卡那霉素的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加氯霉素的培养基（B）上培养，收集能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，经筛选即可得到SSB蛋白。

（4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，如果该蛋白有抗原性，会引起机体的免疫反应，产生相应抗体。则后续实验内容应为抽取小鼠血液提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。【解析】(1)逆转录用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物

使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的。

(4)提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体24、略

【分析】【分析】

物质跨膜运输的方式包括自由扩散；协助扩散、主动运输；自由扩散不需要载体和能量；协助扩散需要载体，但不需要能量；主动运输需要载体，也需要能量；自由扩散和协助扩散是由高浓度向低浓度运输，是被动运输。

【详解】

（1）由图中信息可知Na+和Cl-的运输需要借助载体蛋白；同时逆浓度梯度运输，为主动运输。钠离子和氯离子进入表皮细胞后储存在液泡中，从而避免高盐对其它细胞的影响。

（2）由题干信息可知盐泡表皮细胞吸收钠离子和氯离子；同时细胞内无叶绿体，则细胞膜表面钠离子和离子载体蛋白含里较多，由于细胞不能产生有机物供能，故所需能量只能通过其他细胞转运的葡萄糖分解提供，故葡萄糖转运蛋白含量也较多(细胞内无叶绿体，营养依靠外部细胞），所以D更可能是藜麦的盐泡细胞。

（3）①主动运输和被动运输的区别在于是否需要ATP；故ATP为自变量（细胞呼吸条件），所以甲组应给予正常呼吸条件，乙组应完全抑制其细胞呼吸；

②一段时间后观察两组植株对钠离子和氯离子的吸收速率；若乙组植株根系对钠离子；氯离子的吸收速率明显小于甲组吸收速率或基本不吸收，则说明其吸收盐分的方式为主动运输。

（4）可用DNA分子杂交技术检测目的基因是否成功转入受体细胞；如可用耐盐基因制作成的探针进行DNA分子杂交（或用该探针进行RNA分子杂交），或用基因测序法进行检测。通过大面积种植多种耐盐植物，可提高土地利用率；减缓土壤盐碱化程度；改善盐碱地的生态环境、减少温室气体的释放、提高生物多样性。

【点睛】

本题主要考查物质运输的方式，意在考查考生对各种运输方式的区分和实验的设计分析能力。【解析】主动运输液泡D三种载体蛋白的含量均相对较高。盐泡细胞从表皮细胞通过主动运输吸收大量Na+、Cl-，需要较多两种离子的载体蛋白。盐泡细胞中没有叶绿体，不能生产有机物供能，细胞所需能量只能通过其他细胞转运的葡萄糖分解提供，因此葡萄糖转运蛋白需要量也较高细胞呼吸抑制剂（或阻断ATP产生的物质）吸收速率明显小于甲组吸收速率或基本不吸收用耐盐基因制作成的探针进行DNA分子杂交（或用该探针进行RNA分子杂交）基因测序、PCR等通过大面积种植多种耐盐植物，提高土地利用率；减缓土壤盐碱化程度、改善盐碱地的生态环境、减少温室气体的释放、提高生物多样性。25、略

【分析】【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因DNA分子杂交技术；

②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；

③检测目的基因是否翻译成蛋白质抗原一抗体杂交技术。

④个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

2；图1中①-④依次为目的基因的获取、表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测。

（1）

PCR是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，需要Taq酶，但Taq酶不能从头开始合成DNA，前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物，因此需要根据目的基因fabV基因的两端按碱基互补配对原则设计引物。至少需要经过4次扩增才能获的8个双链等长的目的基因。

（2）

基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，题干信息显示C基因在低温下会抑制P2，R基因在高温下会抑制P1，说明P2启动子在高温下可以启动转录；P1启动子在低温下可以启动转录。题目显示高温下只表达lacz蛋白，则lacZ基因要插在“高温下不被抑制”的启动子的后面，即P2→T2之间；GFP基因要低温下表达，则插入位置要在P1→T1之间；且不破坏C基因和R基因。

（3）

因为fabV（从霍乱弧菌中发现的烯脂酰ACP还原酶）基因可以使大肠杆菌抵抗三氯