2025年统编版选择性必修3生物上册月考试卷

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①小鼠胚胎干细胞（ES细胞）可由原肠胚的内细胞团细胞分离培养获得。

②造血干细胞具有分化出多种血细胞的能力；可用于治疗白血病。

③囊胚的滋养层细胞具有发育的全能性。

④胚胎干细胞具有发育的全能性；能分化为成年动物体内任何一种组织细胞。

⑤试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术A.①②③B.②③④C.③④⑤D.②④⑤4、杨树被根瘤农杆菌感染后会增生并长出瘤状物，称为冠瘿，冠瘿内的冠瘿碱是一种含氮有机物，是根瘤农杆菌生存的唯一碳源和氮源。冠瘿的形成是由于根瘤农杆菌携带有天然的Ti质粒，其结构如图所示。下列说法错误的是（）A.Ti质粒上的生长素基因可在杨树生长发育过程中发挥作用B.Ti质粒上的T-DNA区域，至少含有一个限制酶的酶切位点C.冠瘿碱合成基因在根瘤农杆菌细胞中表达并分泌到细胞外D.根瘤农杆菌内Ti质粒的存在，决定了其冠瘿碱代谢基因侵染植物的范围5、斑马鱼和人类基因有着87%的相似性，每条雌鱼每次排卵300枚左右，体外受精后胚胎发育同步性好，胚体透明且发育速度快，是科研上常用的模式脊椎动物之一、下列说法错误的是（）A.用适当的酶处理斑马鱼胚胎的滋养层，可获得胚胎干细胞B.排卵多、体外受精等都是斑马鱼作为模式脊椎动物的优点C.斑马鱼的透明胚胎有利于观察药物对其体内器官发育的影响D.利用斑马鱼进行实验对于了解人类胚胎发育具有重要的参考价值6、大树移栽、古树名木复壮和树木急救时，常需要给植物“打针输液”以补充水和无机盐，人们称之为“植物吊瓶”。下列相关描述，正确的是（）A.输液时通常使用0．9%的NaCl济液B.冬天给植物输液时需要补充更多的水分、有利于植物度过寒冬C.利用“植物吊瓶”将营养物质直接输入植物组织细胞，使细胞代谢正常进行D.大树移栽时可剪掉部分叶片，有利于减少植物体水分的散失7、与啤酒、葡萄酒并称世界三大古酒的黄酒是中国特产，即墨老酒是黄酒中的珍品，按照“黍米必齐、曲糵（指发芽的谷粒）必时、水泉必香、陶器必良、湛炽（浸泡和蒸煮）必洁、火剂必得”的古代造酒六法（古遗六法）酿制而成。下列关于黄酒发酵的叙述，错误的是（）A.“黍米”中所含物质能为微生物提供碳源和能源B.“曲糵”中含有酿造黄酒所需的酵母菌，酿酒过程中酵母菌呼吸产生C.“陶器必良”的目的是防止陶器气密性不够导致黄酒变质D.“湛炽必洁”的目的是灭菌，确保发酵过程中无杂菌干扰8、红酸汤是苗族的传统食品，它颜色鲜红、气味清香、味道酸爽，其制作过程类似于泡菜的制作。下图是以番茄和辣椒为原料的红酸汤制作流程图，下列有关叙述正确的是（）

A.红酸汤中的酸味物质主要是醋酸B.装坛时不装满的原因是为了促进微生物的繁殖C.适当延长发酵时间能加深酸汤的红色，增浓酸味D.红酸汤的制作中随着发酵时间延长，亚硝酸盐逐渐积累9、小鼠单克隆抗体会使人产生免疫反应，科学家将小鼠抗体上结合抗原的区域“嫁接”到人的抗体上，经过这样改造的抗体诱发免疫反应的强度就会降低很多。下列说法正确的是（）A.对小鼠单克隆抗体的改造属于细胞工程的范畴B.对“嫁接”小鼠单克隆抗体的高级结构的研究是成功的关键C.天然蛋白质的产生是由基因→蛋白质，蛋白质工程的思路是由蛋白质→基因D.产生人鼠单克隆抗体的技术本身是中性的，技术不会产生安全性问题评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)10、下列关于人早期胚胎发育过程中桑椹胚和囊胚的叙述中，正确的是（）A.囊胚与桑椹胚相比，每个细胞内DNA总量增加B.囊胚期出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变C.囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起D.桑椹胚的形成在卵巢，囊胚的形成在输卵管11、营养缺陷性菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去合成某种成长因子的能力；只能在补充了相应的生长因子的基本培养基中才能正常生长的变异菌株。某研究小组对酵母菌用紫外线照射后将其接种到甲培养皿的培养基上，一段时间后将甲培养皿的菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙；丙两培养皿的培养基中，进一步培养得到如下图所示结果。

下列分析正确的是（）A.接种到甲培养皿采用的是稀释涂布平板法B.甲、丙两培养皿中的培养基是基本培养基C.甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少D.甲、乙、丙三个培养皿都可能存在营养缺陷型12、用XhoI和SalI两种限制性内切核酸酶分别单独酶切同一种DNA片段；酶切位点及酶切产物的琼脂糖凝胶电泳结果如图。以下叙述错误的是（）

A.XhoI和SalI两种酶识别的核糖核苷酸序列不同B.泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物C.泳道②中的酶切产物可用DNA连接酶拼接成一个重组DNA分子D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA13、下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，不正确的是（）A.用蒸馏水使家兔的红细胞吸水涨破，可获取富含DNA的滤液B.植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水胀破，释放DNAC.DNA不溶于95%的冷酒精，但可溶于2mol/L的NaCl溶液D.鉴定DNA时，将丝状物加入二苯胺试剂中并进行沸水浴，冷却后观察现象14、筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后；得到如图所示的两个菌落，培养平板经稀碘液处理，出现了以菌落为中心的透明圈。相关叙述正确的是。

A.培养基中的淀粉也可为微生物提供氮源B.两个菌落中的微生物为同一种微生物C.两个菌落中的微生物均能将淀粉酶分泌至细胞外D.透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该微生物分解淀粉的能力越大15、基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（）

A.若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列B.扩增目的基因时，利用耐高温的DNA连接酶从引物a、b的3'-端进行子链合成C.导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞D.利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上16、杨梅果实风味独特，酸甜适中，具有很高的营养价值，关于杨梅发酵叙述错误的是（）A.传统制作杨梅酒时应将原料杨梅果汁进行高压蒸汽灭菌B.缺少糖源和氧气时，醋酸菌可直接将乙醇转化成乙酸C.杨梅酒以杨梅为主要原料在酵母菌线粒体中发酵生成D.果酒发酵时酸性和缺氧环境会抑制杂菌生长17、克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法两种。前者是用微型注射针将供体细胞的细胞核吸出注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合。世界首例体细胞克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园的一只野生北极狼的皮肤样本，卵母细胞来自一只处于发情期的母犬，代孕母体则是一只比格犬。下列叙述错误的是（）A.克隆北极狼的性状由野生北极狼、发情期的母犬和比格犬的基因共同决定B.相比之下，透明带下注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小C.供体细胞注入卵母细胞透明带内后，就可自行进入卵母细胞D.细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程中发生了基因重组18、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)19、载体具备的条件：①_____。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③______。20、_______mol/L浓度下，DNA溶解度最大。21、细胞产物的工厂化生产。

组织培养技术除了在农业上的应用外，还广泛应用于另一个重要的领域，即______。22、基因工程是蛋白质工程的关键技术；蛋白质工程是基因工程的延伸。有人对基因工程和蛋白质工程的关系进行了比较，并归纳为下表。

基因工程与蛋白质工程的比较。比较项目蛋白质工程蛋白质工程原理中心法则中心法则区别过程获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→合成DNA→表达出蛋白质实质定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需要的生物类型或生物产品（基因的异体表达）定向改造蛋白质的分子结构以生产人类所需要的蛋白质定向改造蛋白质的分子结构以生产人类所需要的蛋白质结果生产自然界中已有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质联系蛋白质工程是第二代基因工程

上表的比较是否正确？如果有不妥之处，尝试进行修改。_________23、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。24、我国是一个爱好和平的国家，也是曾经遭受生物武器伤害的国家。我国政府对生物武器的态度是什么？我们为什么认同这种态度？__________25、干细胞的应用：有着_____能力及_____的干细胞，与组织、器官的发育、_____和_____等密切相关。评卷人得分四、判断题(共1题，共8分)26、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等。（选择性必修3P111）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共16分)27、研究者改造与肠道共生的大肠杆菌；口服该工程菌后激活机体特异性免疫，实现肿瘤的预防和治疗。

(1)部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡（OMV）；如图1．OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白。

研究者利用含图2所示元件的表达载体转化大肠杆菌制备工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，提高树突状细胞_____OMV的能力。

(2)为研究上述工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应的效果，研究者用健康小鼠进行如下实验：。组别第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小时后，饮用含阿拉伯糖的水结果检测第1组空载体+第12天，每组随机取5只小鼠等量的脾脏细胞与黑色素瘤细胞共培养，检测杀伤率，结果如图3．第2组ClyA-Fc+第3组ClyA-OVA+第4组第5组

注：“+”；“-”代表是否饮用；

口服工程菌12小时后其在肠道内存在数量较多。

①第4、5组的操作是_____。图3结果说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，理由是_____。

②为进一步验证上述结论，研究者进行如下实验：先加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，再加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，检测荧光细胞的数目，若第5组_____为最大值；则上述结论成立。

A．带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物。

B．带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体。

C．第1-5组小鼠脾脏细胞。

③肿瘤患者术后极易复发，研究者重复上表实验，并在第3次口服工程菌后第50天给小鼠注射黑色素瘤细胞。目的是_____。

(3)该工程菌的研发为不同肿瘤的精准治疗和预防提供了可能。依据本研究，设计针对肺癌治疗的工程菌表达载体元件：_____。28、三氯生是一种抑菌物质，具有优异的贮存稳定性，可以替代抗生素用于基因工程中筛选含目的基因的受体细胞。已知fabV（从霍乱弧菌中发现的烯脂酰ACP还原酶）基因可以使大肠杆菌抵抗三氯生。

(1)通过PCR方法扩增fabV基因时，先要根据_____设计两种特异性引物序列，以确保Taq酶从引物的3′端延伸DNA链，至少需要经过_____次扩增才能获得8个双链等长的目的基因。

(2)基因工程的核心步骤是_____；某科研团队将可以受温度调控的基因插入上述选出的重组质粒中，构建了温度调控表达质粒（如图2）。其中C基因在低温下会抑制P2，R基因在高温下会抑制P1，如果将lacZ基因和GFP（绿色荧蛋白）基因插入图2质粒中，使得最后表现为低温下只表达GFP蛋白，而高温下只表达lacZ蛋白。则lacZ基因插在_____之间，GFP基因的插入位置及注意点是_____。

(3)若以大肠杆菌为受体细胞，筛选上述插入了GFP基因的受体细胞的依据是：大肠杆菌能在含_____的培养基上生长，且_____。评卷人得分六、综合题(共3题，共15分)29、RGA是一种具有抑制植物生长作用的蛋白质；生长素能通过赤霉素使RGA降解，无赤霉素时，生长素不能引起RGA降解。研究者向拟南芥赤霉素合成缺陷型突变体中转入绿色荧光蛋白（GFP）基因与RGA基因的融合基因，获得转基因拟南芥植株，借助荧光显微镜可以观察转基因拟南芥幼苗根尖细胞中GFP—RGA融合蛋白的表达情况。回答下列问题：

（1）融合基因是将两个或多个基因首尾相连，置于同一套调控序列控制之下而构建的。调控序列包括能驱动基因转录出mRNA的________和能使转录在所需要的地方停下来的_______。在GFP—RGA融合基因中，GFP基因的作用是作为______基因。

（2）构建融合基因需要____________等工具酶，将融合基因导入拟南芥细胞时常用_______法。

（3）转融合基因拟南芥细胞具有________性，因而通过_____技术能使其发育成转基因植株。根据题意，写出从细胞或个体水平检测融合基因是否导入成功的方法_________________。

（4）将成功导入融合基因的拟南芥赤霉素合成缺陷型幼苗均分成甲、乙、丙三组，对其进行下表所示处理，已知GFP—RGA融合蛋白中，GFP随RGA的分解而分解，预期能观察到绿色荧光的是______________组。

。组别甲组乙组丙组处理保持完整去幼芽、幼叶去幼芽、幼叶+生长素用适宜浓度的赤霉素溶液处理4h后；用荧光显微镜观察幼苗根尖是否出现绿色荧光。

用适宜浓度的赤霉素溶液处理4h后；用荧光显微镜观察幼苗根尖是否出现绿色荧光。

30、今年席卷全球的“新冠肺炎”病原体是一种新型的冠状RNA病毒；目前最为快速有效的检测手段是RT-PCR核酸检测。RT-PCR的过程包括反转录作用从RNA合成cDNA，再以cDNA为模板进行扩增，过程如下图所示，据此分析下列问题：

(1)传统PCR技术的原理是____________________。

(2)在RT-PCR中每一步都有酶的参与，上图中过程1中的关键酶是__________；PCR中的关键酶是__________，该酶的作用特点是____________________。31、家禽的谷物饲料中富含纤维素；但家禽消化道中缺少能降解纤维素的酶，降低了家禽对饲料的吸收与利用。乳酸杆菌是动物胃肠道中的优势有益菌之一，枯草芽孢杆菌可产生降解纤维素的一种酶，这种酶由W基因编码。研究人员将W基因转入乳酸杆菌，规模化生产后将其添加于饲料，以提高家禽的养殖效率。

(1)乳酸杆菌与家禽的种间关系属于____________，组成纤维素的单体是____________，枯草芽孢杆菌产生的纤维素降解酶是一种____________（选填“胞外”或“胞内”）酶。

(2)要在乳酸杆菌中表达W基因；需使用图1中的质粒为载体。图2为克隆得到的含W基因的DNA片段，W基因以乙链为转录模板链。

①启动子往往具有物种特异性，在图1质粒中插入W基因，其上游启动子应选择____________（填字母）。

A．枯草芽孢杆菌启动子B．乳酸杆菌启子C．农杆菌启动子。

②下表是几种限制酶的识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点。限制酶EcoRIBamHIKpnIMfeIHindⅢ识别序列及切割位点

为获得能正确表达W基因的重组质粒，应选用限制酶____________切割图1中的质粒，选用限制酶____________切割图2中含W基因的DNA片段。所得重组质粒转化乳酸杆菌后，使用含_____________的培养基筛选，以得到转入W基因的乳酸杆菌。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、B【分析】【分析】

1；生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等．把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。

2；生物武器的特点：1、单位面积效应大；2、有特定的伤害对象；3、具有传染性；4、危害时间久；5、不易被发现和鉴定；6、使用者本身易受伤害；7、生物武器造价低；技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。

【详解】

A；转基因生物具有安全性问题；但要靠确凿的证据和严谨的逻辑思维来思考转基因技术的影响，不能因噎废食，A正确；

B；治疗性克隆也会面临伦理问题；所以要对治疗性克隆有效监控和严格审查，B错误；

C；我国政府对生物武器采取的态度是不发展、不生产、不储存生物武器；并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C正确；

D；我国允许生殖性克隆动物；但禁止生殖性克隆人，D正确。

故选B。2、C【分析】【分析】

治疗性克隆是利用胚胎干细胞克隆人体器官；供医学研究，解决器官移植供体不足问题等。生殖性克隆，即通常所说的克隆人。治疗性克隆与生殖性克隆的技术路线是一样的。

【详解】

A；生殖性克隆；即通常所说的克隆人，得到了新个体，A正确；

B；我国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验；涉及到伦理道德问题，我国对生殖性克隆持坚决反对意见，B正确；

C；克隆技术分生殖性克隆和治疗性克隆；治疗性克隆还是可以实施的；

D；治疗性克隆是利用胚胎干细胞等细胞诱导产生人们所需的特定的细胞、组织和器官；供医学研究或治疗疾病，D正确。

故选D。3、D【分析】【分析】

1；干细胞在形态上：体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上；具有发育的全能性。

2；另外在体外培养的条件下；胚胎干细胞可以增殖且不发生分化。

3；干细胞按分化潜能可分为全能干细胞（如胚胎干细胞可以分化形成所有的成体组织细胞；甚至发育成为完整的个体）、多能干细胞（具有多向分化的潜能，可以分化形成除自身组织细胞外的其他组织细胞，如造血干细胞、神经干细胞、间充质干细胞、皮肤干细胞等）和专能干细胞（维持某一特定组织细胞的自我更新，如肠上皮干细胞）三种类型。

【详解】

①小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的内细胞团细胞分离培养获得；①错误；

②造血干细胞属于专能干细胞；能分化成各种血细胞，通过移植造血干细胞，可治疗白血病，自体干细胞移植通常不会引起免疫排斥反应，②正确；

③胚囊的滋养层细胞能形成胎膜和胎盘；内细胞团具有发育全能性，③错误；

④胚胎干细胞体积小；细胞核大，具有发育的全能性，能分化为成年动物体内任何一种组织细胞，④正确；

⑤试管婴儿首先进行体外受精获得受精卵；然后利用早期胚胎培养将受精卵培养到桑椹胚或囊胚阶段再进行胚胎移植，⑤正确。综上所述，D正确，ABC错误。

故选D。4、C【分析】【分析】

由题意可知；由于农杆菌的Ti质粒中含有生长素合成基因；细胞分裂素基因，当野生型农杆菌感染植物体后，农杆菌的Ti质粒中含有生长素合成基因、细胞分裂素合成基因表达，产生了生长素和细胞分裂素，生长素促进细胞伸长、细胞分裂素促进细胞分裂，因此植物产生瘤状结构。

【详解】

A；结合分析可知；野生型农杆菌感染植物体后，农杆菌的Ti质粒中含有生长素合成基因、细胞分裂素合成基因表达，产生了生长素和细胞分裂素，生长素促进细胞伸长、细胞分裂素促进细胞分裂，因此植物产生瘤状结构，A正确；

B；Ti质粒上的T-DNA区域；至少含有一个限制酶的酶切位点，以便于切割后与目的基因结合，构建基因表达载体，B正确；

C；T-DNA上的冠瘿碱合成基因在农杆菌中不表达；在植物细胞中可以表达，故根瘤农杆菌不会形成冠瘿，而杨树被根瘤农杆菌感染后会形成冠瘿，C错误；

D；结合题意“冠瘿的形成是由于根瘤农杆菌携带有天然的Ti质粒”；且Ti质粒上有T-DNA，可以将目的基因整合到宿主细胞内，故根瘤农杆菌内Ti质粒的存在，决定了其冠瘿碱代谢基因侵染植物的范围，D正确。

故选C。5、A【分析】【分析】

为了获得大量斑马鱼胚胎细胞；可用胰蛋白酶处理斑马鱼囊胚的内细胞团分散成单个细胞，取分散细胞作为初始材料进行原代培养。

【详解】

A；胚胎干细胞是一类全能型细胞；囊胚期的细胞开始出现分化，其中内细胞团细胞具有全能性，而滋养层细胞不具有全能性，故处理斑马鱼胚胎的滋养层，不能获得大量胚胎干细胞，A错误；

B；排卵多（便于生物学统计）、体外受精（便于观察和计数）等都是斑马鱼作为模式脊椎动物的优点；B正确；

C；斑马鱼的透明胚胎；有利于观察药物对其体内器官发育的影响，C正确；

D；题干信息“斑马鱼和人类基因有着87%的相似性”；故利用斑马鱼进行实验获得的结论大多数情况下也适用于人类，D正确；

故选A。6、D【分析】【分析】

无机盐即无机化合物中的盐类，旧称矿物质，在生物细胞内一般只占鲜重的1%至1.5%，人体已经发现20余种，其中大量元素有钙Ca、磷P、钾K、硫S、钠Na、氯Cl、镁Mg，微量元素有铁Fe、锌Zn、硒Se、钼Mo、氟F、铬Cr；钴Co、碘I等。虽然无机盐在细胞、人体中的含量很低；但是作用非常大。

【详解】

A；给动物输液时通常使用0．9%的NaCl溶液；以与体内的渗透压相等，而植物细胞内渗透压并不等于0．9%，A错误；

B；冬天植物代谢慢；对水的需求量小，给植物输液时补充更多的水分容易使植物结冰，冻伤，不利于植物度过寒冬，B错误；

C；利用“植物吊瓶”不将营养物质直接输入植物组织细胞；C错误；

D；叶片中存在气孔；是水分子通过蒸腾作用散失的通道，大树移栽时可剪掉部分叶片，有利于减少植物体水分的散失，D正确。

故选D。7、D【分析】【分析】

果酒的制作离不开酵母菌；酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。

【详解】

A；“黍米”富含有机物；其中所含物质能为微生物提供碳源和能源，A正确；

B、在黄酒制作过程中需要酵母菌，在酿酒过程中，酵母菌先进行有氧呼吸，大量增殖，后进行无氧呼吸，产生酒精，酵母菌呼吸过程均有产生；B正确；

C；“陶器必良”的目的是防止陶器气密性不够导致好氧杂菌大量繁殖；从而使黄酒变质，C正确；

D；“湛炽必洁”的目的是消毒；D错误。

故选D。8、C【分析】【分析】

红酸汤制作需要用到乳酸菌；乳酸菌是一种厌氧菌，在无氧的条件下，乳酸菌发酵产生乳酸，使得菜品有一股特别的风味提升菜品的口感。

【详解】

A；红酸汤制作过程中用到的微生物主要是乳酸菌；红酸汤中的酸味物质主要是乳酸，A错误；

B；装坛时坛口留有一点空间而不装满的目的是防止番茄发酵后液体膨胀外溢；B错误；

C；适当延长发酵时间乳酸菌产生的乳酸更多；酸味更浓，更多的红色素溶解在发酵液中，能加深酸汤的红色，C正确；

D；亚硝酸盐含量随着发酵时间的延长而先增加后减少；D错误。

故选C。9、B【分析】【分析】

对蛋白质分子的设计和改造是通过蛋白质工程来实现的。蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。

【详解】

A；对小鼠单克隆抗体的改造是要产生一种自然界不存在的蛋白质；属于蛋白质工程，A错误；

B；蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构；因此对“嫁接”小鼠单克隆抗体的高级结构的研究是成功的关键，B正确；

C；蛋白质工程的思路是由蛋白质→基因→蛋白质；C错误；

D；转基因作为一项技术本身是中性的；但由其生产的产品是否安全不得而知，还需要经过一系列的安全性评价才能确定，D错误。

故选B。二、多选题(共9题，共18分)10、B:C【分析】【分析】

胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；由桑椹胚发育到囊胚进行的是有丝分裂；形成的每个细胞内DNA总量不变，A错误；

B；囊胚期细胞出现了细胞分化；但细胞分化的实质是基因的选择性表达，因此其遗传物质未发生改变，B正确；

C；囊胚期内细胞团和滋养层细胞的差异不是DNA复制水平上的差异；而是转录水平上的差异，即基因的选择性表达，C正确；

D；受精卵在输卵管中形成；后在子宫中发育，故胚胎发育的早期不可能在卵巢，D错误。

故选BC。11、A:C【分析】【分析】

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

【详解】

A；甲培养皿的菌落均匀分布；接种方法应为稀释涂布平板法，A正确；

B；甲、丙培养基菌落数目多；包括野生型酵母菌菌株和某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿菌株是某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿的培养基是基本培养基，甲和丙是加入了同种营养成分的培养基，B错误；

C；由于基因突变具有不定向性；接种到甲培养皿的酵母菌可能还有其他营养缺陷型，且有些菌落不一定由一个酵母菌形成，所以，甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少，C正确；

D；乙培养皿的培养基是基本培养基；形成的菌落只可能是野生型菌落，D错误。

故选AC。12、A:D【分析】【分析】

1；DNA一般是双螺旋结构；限制酶可以识别特定的脱氧核苷酸序列；并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割。

2；图1中SaLl有3个识别位点；能将DNA片段切成4段，Xhol有2个识别位点，能将DNA片段切成3段。

【详解】

A；限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列；不同的限制酶能识别不同的脱氧核苷酸序列，A错误；

B；Sall将DNA片段切成4段；Xhol将DNA片段切成3段，根据电泳结果可知泳道①为Sall，泳道②为XhoⅠ，B正确；

C；同种限制酶切割出的DNA片段；具有相同的粘性末端，再用DNA连接酶进行连接，可以构成重组DNA，C正确；

D；限制酶切割双链DNA；酶切后的DNA片段仍然是双链DNA，D错误。

故选AD。13、A:B:D【分析】【分析】

1；DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；

2；DNA不溶于酒精溶液；但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精；

3；DNA的鉴定：在沸水浴条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

【详解】

A；兔属于哺乳动物；哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核，吸水涨破，得不到含DNA的滤液，A错误；

B；植物材料需先用洗涤剂溶解细胞膜；B错误；

C；DNA不溶于95%的冷酒精和0.14mol/L的NaCl溶液；而溶于2mol/L的NaCl溶液，C正确；

D；将丝状物溶于2mol/L的NaCL溶液后加入二苯胺试剂；沸水浴冷却后呈蓝色，D错误。

故选ABD。

【点睛】14、C:D【分析】【分析】

该选择培养基中的唯一碳源是淀粉；只有能利用淀粉的微生物才能存活。利用淀粉的微生物分解淀粉后，会产生以菌落为中心的透明圈。

【详解】

A.淀粉只含有C；H、O三种元素；因此培养基中的淀粉不能为微生物提供氮源，A错误；

B.两个菌落的周围均有透明圈；说明两个菌落中的微生物都能分解淀粉，但不一定为同一种微生物，B错误；

C.两个菌落的周围均有透明圈；说明两个菌落中的微生物均能产生淀粉酶并将淀粉酶分泌至细胞外，C正确；

D.透明圈是由于培养基中的淀粉被微生物产生的淀粉酶分解后而产生的；因此透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该微生物分解淀粉的能力越大，D正确。

故选CD。15、B:C:D【分析】【分析】

将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因；启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

【详解】

A；mRNA是由基因启动子后面的序列编码而来的；若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列，A正确；

B、扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'-端进行子链合成；B错误；

C；导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞；而是受精卵或早期胚胎细胞，C错误；

D；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上，将基因转入动物细胞常用显微注射法，D错误。

故选BCD。16、A:B:C【分析】【分析】

果酒制作的原理：在无氧条件下；酵母菌能进行酒精发酵。果醋制作的原理：当氧气；糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；传统发酵原料无需严格灭菌；高压蒸汽会破坏菌种，A错误；

B；醋酸菌是好氧菌；氧气充足，糖源充足时，将糖分解成乙酸，缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇转化成乙醛，再将乙醛变为乙酸，B错误；

C；酒精的生成场所在细胞质基质；C错误；

D；果酒发酵过程产生的酸性和缺氧环境抑制了杂菌生长；D正确。

故选ABC。17、A:C:D【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物个体。

【详解】

A；克隆北极狼的供体细胞来自野生北极狼；卵母细胞来自发情期的母犬，因此性状由野生北极狼、发情期的母犬的基因共同决定，比格犬只是代孕母体，不提供遗传物质，A错误；

B；透明带下注射法不抽取供体细胞的细胞核；操作简单且对供体细胞核损伤小，同时注射的位置是卵母细胞外的透明带，然后诱导两个细胞融合，对卵母细胞的损伤小，B正确；

C；供体细胞注入卵母细胞透明带内后；还需要电融合法等诱导才能使供体细胞进入卵母细胞形成重构胚，C错误；

D；细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程是有丝分裂过程；而基因重组发生在减数分裂过程，D错误。

故选ACD。18、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。三、填空题(共7题，共14分)19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】能在受体细胞中复制并稳定保存具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】0．1421、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞产物的工厂化生产。22、略

【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，其结果是生产自然界没有的蛋白质。【解析】蛋白质工程的结果是生产自然界没有的蛋白质23、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。24、略

【分析】【详解】

我国是一个爱好和平的国家，也是曾经遭受生物武器伤害的国家，如在抗日战争中就遭受到了日军发动的细菌战的伤害，由于生物武器致病能力强、攻击范围广，因而我们深知生物武器不仅能对我国、甚至会对整个人类造成毁灭性的灾难，因此我国政府在1998年6月重申了我国对生物武器的态度，即为不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。【解析】我国是一个爱好和平的国家，由于生物武器致病能力强、攻击范围广，生物武器不仅能对我国、甚至会对整个人类造成毁灭性的灾难，因此我国政府在1998年6月重申了我国对生物武器的态度，即为：

在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。25、略

【分析】略【解析】自我更新分化潜能再生修复四、判断题(共1题，共8分)26、A【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等。故该说法正确。五、实验题(共2题，共16分)27、略

【分析】【分析】

树突状细胞为抗原呈递细胞；可识别；摄取和传递抗原信息。

【详解】

（1）细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白；而OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。所以，ClyA基因的作用为表达出细菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，进而融合基因可以被免疫细胞识别。Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，进而提高树突状细胞识别；摄取和传递抗原信息的能力。

（2）①根据表格和柱状图可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐渐增加部件，且第4组和第5组工程菌都是完整的，即第4组:ClyA-OVA-Fc第5组:ClyA-OVA-Fc，但是第4组饮用含阿拉伯糖的水，进而激活融合基因的表达；第5组不饮用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表达。所以，第3；5组含有OVA，在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高；1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低。

②小鼠脾脏细胞具有免疫细胞；可在抗原刺激下引起特异性免疫。带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物可引起小鼠脾脏细胞发生特异性免疫，故先加入第1-5组小鼠脾脏细胞和带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物进行保温，判断特异性免疫的强度；

故选AC。

再加入带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体；目的是检测OVA抗原肽复合物是否能够产生特异性细胞毒性T细胞。

故选B。

若第5组同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比越多；说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，结论成立。

③肿瘤患者术后极易复发；说明特异性免疫功能减弱。所以，可多次注射黑色素瘤细胞，进而研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

（3）本实验中融合基因里面有OVA（黑色素瘤细胞特异性抗原），所以只需将OVA替换为肺癌细胞特异性抗原即可。即将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因。【解析】(1)表达ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面识别；摄取。

(2)第4组:ClyA-OVA-Fc和-第5组:ClyA-OVA-Fc和+第3；5组含有OVA；在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高;1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低ACB同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

(3)将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因28、略

【分析】【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因DNA分子杂交技术；

②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；

③检测目的基因是否翻译成蛋白质抗原一抗体杂交技术。

④个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

2；图1中①-④依次为目的基因的获取、表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测。

（1）

PCR是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，需要Taq酶，但Taq酶不能从头开始合成DNA，前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物，因此需要根据目的基因fabV基因的两端按碱基互补配对原则设计引物。至少需要经过4次扩增才能获的8个双链等长的目的基因。

（2）

基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，题干信息显示C基因在低温下会抑制P2，R基因在高温下会抑制P1，说明P2启动子在高温下可以启动转录；P1启动子在低温下可以启动转录。题目显示高温下只表达lacz蛋白，则lacZ基因要插在“高温下不被抑制”的启动子的后面，即P2→T2之间；GFP基因要低温下表达，则插入位置要在P1→T1之间；且不破坏C基因和R基因。

（3）

因为fabV（从霍乱弧菌中发现的烯脂酰ACP还原酶）基因可以使大肠杆菌抵抗三氯生；大肠杆菌能在含三氯生的培养基上生长，说明大肠杆菌插入重组质粒，且依据是低温下有绿色荧光高温下无绿色荧光。

【点睛】

本题考查基因工程相关知识点，要求学生熟练掌握基因工程的原理、步骤及相关的目的，形成知识网络，结合题目要求解决相关问题。【解析】(1)目的基因（fabV基因）两端碱基序列4

(2)基因表达载体的构建P2→T2插在P1→T1之间；且不破坏C基因和R基因。

(3)三氯生低温下有绿色荧光，高温下无绿色荧光六、综合题(共3题，共15分)29、略

【分析】【分析】

基因工程的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将