2025年人教新课标选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年人教新课标选择性必修3生物上册阶段测试试卷905考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共8题，共16分)1、甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸；科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如图。相关叙述正确的是。

A.过程①注射相应抗原后应立即从小鼠脾脏中提取细胞甲B.过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性C.过程③、④的筛选方法相同，细胞丙、丁遗传物质相同D.过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖2、在动物细胞培养的过程中；贴壁的细胞不一定都能增殖并形成克隆（单个细胞繁殖形成的细胞群体），而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞，这一特点可用于测定动物细胞的增殖能力。大致流程如图，相关叙述正确的是（）

A.出现接触抑制后，细胞克隆停止增殖B.克隆细胞与接种的细胞的遗传信息一定相同C.需采用固体培养基培养才能形成细胞克隆D.胰蛋白酶可使细胞分散成单层利于计数3、荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量；其原理是：在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成（如图）。下列说法不正确的是（）

A.若循环次数相同，荧光值越高，证明新冠病毒感染程度越高B.该技术需要用到一对引物，且引物之间的碱基序列不能互补C.该技术中DNA聚合酶只能从引物的3'端开始延伸DNA链D.该技术的原理是DNA的体外复制，需要用到解旋酶和Taq酶4、生物武器种类多样，下列不太可能用于制造生物武器的是（）A.病毒B.毒品C.致病菌D.生化毒剂5、产脂肪酶细菌可用于含油废水处理。科研人员用射线照射从土壤中分离的菌株，反复筛选后获得产酶能力提高的菌株，具体流程如图。相关叙述正确的是（）

A.步骤①取土壤样品溶于无菌水中制成菌悬液B.步骤②的固体平板可以是以脂肪为唯一氮源的培养基C.步骤②射线照射可引起细菌基因突变或染色体变异D.步骤③透明圈越大的菌落，其脂肪酶活性一定越高6、下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（）A.用自然生长的茎进行组培须用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒B.培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换C.组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石带菌量低且营养丰富D.不带叶片的菊花幼茎切段可以通过器官发生的途径形成完整的菊花植株7、以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是（）

A.催化①过程的酶是RNA聚合酶B.④过程发生的变化称为复性C.催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都必须能耐高温D.如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链DNA中，A与U之和也占该DNA碱基含量的40%8、将诱导多能干细胞（iPSc）移植给急性心肌梗死小鼠，检测发现小鼠心肌电生理指标逐渐恢复正常。下列说法合理的是（）A.该实验中仅需正常小鼠作为对照组B.与高度分化的细胞相比，iPSc的分化潜能较弱C.选择病鼠自身细胞获得iPSc再移植可避免免疫排斥D.此结果说明可将iPSc移植用于治疗人类缺血性心肌病评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)9、关于现代生物工程技术应用的安全性，下列说法正确的是（）A.对待生物武器的态度应明确而坚定，即坚决禁止生物武器B.中国对于克隆人的态度是不反对治疗性克隆，但禁止生殖性克隆人C.对转基因植物外源DNA要进行认真选择，避免产生对人体有害的或过敏的蛋白质D.转基因生物出现了安全性问题，不一定要马上停止实验10、良种试管牛的繁殖过程是用激素促进甲牛多排卵，然后把卵母细胞在体外与人工采集的乙牛的精子进行受精，在特定培养基上培育成胚胎，再把胚胎送入经过激素处理的丙牛的子宫内，孕育成试管牛。下列相关叙述正确的是（）A.“用激素促进甲牛多排卵”的激素是孕激素B.产生试管牛的生殖方式属于有性生殖C.甲牛、乙牛对试管牛核基因的贡献相同D.该技术可应用于加速优良种畜的繁殖11、生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类；研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲；乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示，下列说法正确的是（）

A.倒成平板后直接培养可判断有无污染B.倒成平板后需要进行灭菌处理C.图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选12、下列关于植物基因工程应用的说法，正确的是（）A.将某种含必需氨基酸多的蛋白质导入植物体中以提高该植物体内氨基酸的含量B.植物基因工程可用来培育高产、稳产、品质优良和抗逆性强的作物C.利用基因工程可以改造植物细胞的基因，使其能够生产人类所需要的药物D.通过植物基因工程培育的抗虫植物必然可以抗病毒13、下图为某个基因的部分片段，关于该结构的叙述，错误的是（）

A.①所圈定的部位是腺嘌呤B.DNA连接酶作用于②处C.限制酶作用于③处D.解旋酶作用于④处14、将苏云金杆菌的Bt基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如图所示(KanR为卡那霉素抗性基因)。下列相关叙述正确的是（）

A.可使用含卡那霉素的培养基来筛选含重组质粒的农杆菌B.过程①必须用同种限制酶切割含Bt基因的DNA和Ti质粒C.过程③将棉花细胞与农杆菌混合培养能使T-DNA进入棉花细胞D.过程④和过程⑤的培养基中添加的激素的浓度不同15、基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（）

A.若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列B.扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'－端进行子链合成C.导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞D.利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上16、自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。以下叙述正确的是（）

A.步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍B.自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数C.步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中D.步骤④所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)17、醋酸菌是一种____________细菌。醋酸生成反应式是_____________________。18、酵母菌是______________微生物。酵母菌进行有氧呼吸的反应式如下：______________________；酵母菌进行无氧呼吸的反应式如下：_________________。19、_________℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在_______________℃。20、假设PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在30次循环后，反应物中大约有个这样的_______个DNA片段，一共需要加入______________个引物。21、为了避免外源DNA等因素污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行_____________。而使用的缓冲液并在__________℃存储。22、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。23、动物细胞培养的条件：_____、_____、_____、_____等。评卷人得分四、判断题(共2题，共6分)24、雄性动物刚刚排出的精子并不具有受精能力，必须获能后才具备受精能力()A.正确B.错误25、要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造氨基酸序列来完成。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共28分)26、甘蔗是华南地区一种重要的经济作物。某研究团队从甘蔗根际土壤中分离出了几种固氮菌；实验方案如下。

回答下列问题：

（1）Ashby培养基的营养成分主要包括水、无机盐_________等。实验中第一次在Ashby培养基上接种的方法是________，在Ashy平板上进行多次接种的目的是_________________________

（2）固氮菌能产生固氮酶。为评估固氮酶的活性，可以检测____________．

（3）研究发现，上述固氮菌还能产生IAA。取一定体积的固氮菌菌液离心，获得上清液，现欲测定上清液中IAA的含量，请利用以下试剂，写出实验思路。_______

供选试剂：标准的1g/L的IAA母液，蒸馏水，S试剂(与IAA反应显红色，且颜色深浅与IAA浓度成正相关）27、下图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图；请据图回答：

（1）泡菜是乳酸菌发酵的产物，乳酸菌的代谢类型是___________________。制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜，原因是____________________________。

（2）将盐与清水按照一定的比例配制盐水，待盐水煮沸冷却后，注入装好原料的泡菜坛中，同时加入一定量的“老汁”(陈泡菜水)。将盐水煮沸冷却的目的是____________________；加入“老汁”的作用是____________________________。

（3）测定亚硝酸盐含量的方法是_________________。即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与____________________________发生重氮化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合后形成_______________色的染料，然后将显色反应后的样品与已知浓度的____________进行目测比较，大致估算出亚硝酸盐的含量。28、玉米是重要的粮食作物；其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白，由P基因编码，在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白转基因玉米，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图所示，请回答下列问题：

(1)强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被_______识别并结合，驱动基因的持续转录，如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，可获得该基因_______突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用_______酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。T-DNA在该实验中的作用是_______。

(2)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行组织培养，培养基中需加入_______进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，使植物的光合作用和_______受到干扰；从而引起植物细胞死亡。

(3)愈伤组织是一种相对没有分化的_______团，经液体悬浮培养叮以分散成胚性细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成_______；再继续发育成转基因玉米株系。

(4)影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及_______等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是_______。29、有研究表明CDKN2B基因与小鼠的寿命有关；科学家将该基因导入小鼠体内，统计其寿命是否高于正常小鼠。图1表示CDKN2B基因与相关限制酶酶切位点，该基因转录出的mRNA碱基序列与A链的碱基序列相同（T；U视为相同的碱基），图2为质粒简图，请回答下列有关问题：

（1）科学家首先采用PCR技术对目的基因进行扩增。PCR过程中每一循环有两次升温一次降温，其中降温的目的是_______________________________________________________。

（2）科学家在构建基因表达载体过程时，目的基因应插在___________和___________之间才能正常表达。单独使用限制酶HindⅢ分别切割目的基因和载体后产生黏性末端。携带CDKN2B基因的重组质粒成功导入细胞后，发现约一半的细胞中没有检测到CDKN2B蛋白，原因是___________。为了避免这种现象的发生，应对以上方法进行改进，改进措施为___________。

（3）若想让一个转入了目的基因的受精卵发育成多个个体，可以采用___________技术，操作时应注意做到_______________________________________________________。评卷人得分六、综合题(共3题，共12分)30、纸片扩散法（K-B法）是药敏试验的一种常用方法；其原理是将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，培养一段时间后在纸片周围会形成透明的抑菌圈。请回答下列问题：

(1)药敏试验的目的是_______，因变量是________。

(2)K-B法接种测试菌的方法是______，获得纯培养物的关键是_____。接种后的平板在培养时倒置的原因是______。

(3)某研究小组将含有相同浓度抗生素Ⅰ~Ⅳ的四个纸片分别贴放在生长有测试菌的琼脂平板上，在合适的温度条件下孵育16h，结果如图所示。

MIC是药敏试验中评价抗生素药效的常用指标，其定义为某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。对该测试菌而言，抗生素Ⅰ的MIC______（选填“大于”“小于”或“等于”）抗生素Ⅲ的MIC；在相关实验操作均严谨规范的情况下，在含有抗生素Ⅳ的纸片周围出现了较大的抑菌圈，但抑菌圈中存在有个别菌落。试对上述现象的成因做出分析：_____。31、水稻根部一般没有根瘤菌；在种植时常需要施加氮肥。科学家想利用基因工程技术来减少施用氮肥的生产成本及可能造成的环境污染，他们提出了以下两种方案。

方案一把根瘤菌的固氮相关基因导入水稻根系微生物中；使微生物能在根系处固氮，从而减少氮肥的施用量。

方案二直接将固氮相关基因导入水稻细胞中；建立水稻的“小型化肥厂”，让水稻直接固氮，这样就可以免施氮肥了。

(1)请评估这两种方案哪种更容易实现。______

(2)如果两个方案都实现的话，你认为哪种更值得推广？请说出你的理由______。32、新冠肺炎疫情暴发以来；在党中央的关怀下，全国人民共同努力，疫情防控取得重大战略成果，很多新冠肺炎患者康复，这些康复者的血清中含有相应的抗体，可帮助患者更快地清除病毒，是治疗新冠肺炎的有效方法。但目前康复者的血清来源较少，不能满足临床需求，理论上可采用基因工程或动物细胞工程的方法获得相应抗体。请回答下列有关问题：

（1）传统抗体的制备是向生物体内反复注射某种抗原；使生物体产生抗体，从动物的__________中分离所需抗体，但用这种方法提取的抗体，具有_______________（至少写出两点）等缺点，现在逐步被单克隆抗体取代。

（2）单克隆抗体制备时需要从康复者的脾脏中分离出B淋巴细胞；在体外将其与_________细胞进行融合，常见的融合方法有电激；聚乙二醇、______________等，然后再经筛选、培养等步骤大量获得。

（3）科学家不断探索寻求制备新冠病毒抗体的方法；某科研小组欲利用基因工程技术制备新冠病毒抗体，其大致流程如下图：

①抗体基因确定后；可通过PCR技术特异性地快速扩增，PCR技术扩增目的基因的前提条件是________________________。基因表达载体的组成除了目的基因外，还必须有______________以及标记基因等。

②人体合成的抗体需要膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性，与大肠杆菌作为受体细胞相比，选择酵母菌作为受体细胞的优势是_____________________________。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、D【分析】【详解】

A.过程①注射相应抗原后应经过一段时间；使小鼠产生浆细胞，再从小鼠脾脏中提取细胞甲，A项错误；

B.过程②诱导细胞融合；利用了细胞膜的流动性，B项错误；

C.过程③筛选杂交瘤细胞；过程④筛选能产生单一抗体的杂交瘤细胞，二者方法不同，C项错误；

D.过程⑤无论在体内还是体外进行；细胞丁都可大量增殖，D项正确；

因此，本题答案选D。2、A【分析】【分析】

动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A；在动物细胞培养的过程中；当出现接触抑制后，细胞克隆停止增殖，A正确；

B；克隆细胞与接种的细胞的遗传信息不一定相同；B错误；

C；需采用液体培养基培养才能形成细胞克隆；C错误；

D；胰蛋白酶可使细胞分散成单个；从而利于计数，D错误。

故选A。3、D【分析】【分析】

PCR技术：

（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

（2）原理：DNA复制。

（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

（4）条件：模板DNA；四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；循环次数相同时；荧光值越高证明感染的新冠病毒越多，感染程度越高，A正确。

B；PCR技术用到的引物之间的碱基序列不能互补；以免影响引物与模板链的结合，B正确；

C；DNA聚合酶只能从引物的3'端开始延伸DNA链；C正确；

D；PCR技术用的原理是DNA的体外复制；其中双链分开靠的是加热，不需要解旋酶，D错误；

故选D

【点睛】4、B【分析】【分析】

生物武器种类：包括致病菌；病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等．把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。

【详解】

由分析可知：生物武器的种类有病毒；致病菌、生化毒剂等；不包括毒品。

B错误；ACD正确。

故选B。5、A【分析】【分析】

碳源的作用：①构成生物体细胞的物质和一些代谢产物；②既是碳源又是能源（有机碳源）。无机碳源：CO2、NaHCO3；有机碳源：糖类；脂肪酸、花生饼粉、石油等。

【详解】

A；土壤样品中包含目的菌株；可取土壤样品溶于无菌水中制成菌悬液，再通过平板划线法或稀释涂布平板法接种到固定培养基上进行筛选，A正确；

B；组成脂肪的化学元素有C、H、O；要筛选可以产生脂肪酶的细菌，需要用以脂肪作为唯一碳源的固体培养基，B错误；

C；细菌是原核生物；没有成形的细胞核和染色体，不会发生染色体变异，C错误；

D；透明圈大的菌落；酶活性不一定大，因此对初筛选的透明圈大的菌落要进行发酵培养，进一步对发酵液进行酶活性检测，D错误。

故选A。

【点睛】6、D【分析】【分析】

植物组织培养技术：1；过程：离体的植物组织；器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）．2、原理：植物细胞的全能性．3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。

【详解】

A；自然生长茎段的消毒属于外植体消毒；先用70%酒精，再用无菌水清洗，再用5%次氯酸钠消毒处理，最后再用无菌水清洗，A错误；

B；培养瓶用专用封口膜封口的目的是防止杂菌污染；并不影响气体交换，B错误；

C；组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石比较松软；持水性也较好，有利于幼苗的生根和叶片的生长，C错误；

D；不带叶片的菊花茎的切段可通过植物组织培养分化出芽和根这种器官发生的途径形成完整的菊花植株；D正确。

故选D。7、B【分析】【分析】

根据题意和图示分析可知：①是由RNA形成单链DNA的过程；为逆转录过程，②是以单链DNA合成双链DNA的过程，是DNA分子复制过程；③④⑤是多聚酶链式反应扩增DNA片段，③是变性；④是复性、⑤是延伸阶段；RNA单链A+U的碱基比例与逆转录形成的DNA分子中A+T的碱基比例相同。

【详解】

A；①过程为逆转录过程；故催化①过程的酶是逆转录酶，A错误；

B；④为复性过程；发生的变化是引物与互补DNA链结合，B正确；

C；催化②过程（DNA复制）需要的酶是DNA聚合酶；催化⑤过程（DNA单链延伸）的酶是耐高温DNA聚合酶--Taq酶，⑤过程进行的温度是70℃，因此催化⑤过程的DNA聚合酶耐高温，C错误；

D；根据碱基互补原则A-T；U-A，如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链DNA中，A与T之和也占该DNA碱基含量的40%，DNA中不含有U，D错误。

故选B。8、C【分析】【分析】

诱导多能干细胞（iPSc）是类似胚胎干细胞的一种细胞；是具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。

诱导多能干细胞（iPSc）来源于生物自身的体细胞的诱导；诱导过程无需破坏胚胎，不会因为伦理问题限制在医学上的应用，再移植回可生物体内，可避免免疫排斥反应。

【详解】

A；为了说明诱导多能干细胞（iPSc）移植给急性心肌梗死小鼠的影响；该实验需正常小鼠作为对照组，也需要急性心肌梗死小鼠为对照，A错误；

B；诱导多能干细胞可分化形成多种组织细胞；与高度分化的细胞相比，iPSc的分化潜能较强，B错误；

C；诱导多能干细胞（iPSc）来源于病鼠自身的体细胞的诱导；再移植回可病鼠体内可避免免疫排斥，C正确；

D；诱导多能干细胞（iPSc）可分化为心肌细胞；从而使急性心肌梗死小鼠的心肌电生理指标逐渐恢复正常，缺血性心肌病和急性心肌梗病因不同，不能通过增加心肌细胞得以治疗，D错误。

故选C。二、多选题(共8题，共16分)9、A:B:C【分析】【分析】

1.生物武器是利用生物战剂杀伤人员；牲畜、毁坏植物的武器。生物武器又是生物制剂、载体和分散手段的综合利用。生物武器自诞生以来；给人类的生存安全构成了严重威胁。

2.转基因生物的安全性问题包括食物安全；生物安全和环境安全。

3.“治疗性克隆”将使人胚胎干细胞（简称ES细胞）造福于人类的一种非常重要的途径。治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎；体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞；肌肉细胞和血细胞），用于治疗。

【详解】

A；对待生物武器的态度应明确而坚定；即在任何情况下都不发展、不生产、不储存生物武器，坚决禁止生物武器，A正确；

B；中国对于克隆人的态度是禁止生殖性克隆人；但不反对治疗性克隆，B正确；

C；对转基因植物外源DNA要进行认真选择；避免产生对人体有害的或过敏的蛋白质，C正确；

D；一旦发现转基因生物出现了安全性问题；要马上停止实验，并销毁重组生物，D错误。

故选ABC。10、B:C:D【分析】【分析】

良种试管牛的繁殖过程：对供体和受体的选择和处理（同期发情处理；超数排卵处理）；配种或进行人工授精、对胚胎的收集检查培养或保存、进行胚胎移植。

【详解】

A；处理供体甲牛的激素可能是促性腺激素；使其超数排卵，A错误；

B；产生试管牛的过程中经过了两性生殖细胞的融合过程；因此试管牛产生的生殖方式属于有性生殖，B正确；

C；母本甲牛提供卵细胞、父本乙牛提供精子；试管牛细胞核中基因一半来源于父方，一半来源于母方，C正确；

D；体外受精和早期胚胎发育、胚胎移植等技术可以缩短繁殖周期；增加一生繁殖的后代数量，即该技术可充分发挥优良雌性个体的繁殖潜力，D正确。

故选BCD。

【点睛】11、A:D【分析】【分析】

培养基的概念及营养构成。

（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出的供其生长繁殖的营养基质。

（2）营养构成：各种培养基一般都含有水；碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。

【详解】

A；平板上不含任何生长因子；若倒成平板后直接培养，出现菌落说明已被杂菌感染，因为该嗜热菌不能在缺乏生长因子的培养基中生长，A正确；

B；制备平板时；先灭菌再倒平板，B错误；

C；图中菌落生活在乙丙区域之间；说明同时需要乙和丙，C错误；

D；不同菌种所需生长因子不同；可利用生长图形法筛选菌种，D正确。

故选AD。12、B:C【分析】【分析】

基因工程是指按人们的意愿；进行严格的设计，并通过体外重组DNA分子和转基因技术，获得人们需要的新的生物类型和生物产品。其基因改变的方向是认为决定的。

【详解】

A；科学家将必需氨基酸含量多的的蛋白质相关基因导入植物中；或者改变这些氨基酸合成途径中某种关键酶的活性，以提高氨基酸的含量，A错误；

B；可以将某些比如抗逆性、高产等基因导入植物体内；培育出高产、稳产、品质优良和抗逆性强的作物，B正确；

C；利用基因工程可以改造植物细胞的基因；使其能够生产人类所需要的药物，比如紫草宁等药品，C正确；

D；用基因工程培育的抗虫植物只含有抗虫特性；但不能抗病毒，D错误。

故选BC。13、A:C:D【分析】【分析】

题图分析：该图为某个基因的部分片段；①不但包括腺嘌呤．还包括侧链上的磷酸的脱氧核糖，为腺嘌呤脱氧核苷酸；②是磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键；③是碱基之间的氢键；④是含氮碱基和脱氧核糖之间的化学键。

【详解】

A；图示为DNA结构模式图；图中①所圈定的部位是腺嘌呤脱氧核苷酸，A错误；

B；DNA连接酶能使两个脱氧核苷酸之间的化学键②磷酸二酯键形成；B正确；

C；删去；图中没有⑤，限制酶作用于磷酸二酯键。

D；解旋酶作用于碱基对之间的氢键③处；使氢键断开，D错误。

故选ACD。

【点睛】14、A:C:D【分析】【分析】

据图分析，过程①表示基因表达载体的构建过程，需用DNA连接酶将目的基因和运载体（质粒）连接形成重组Ti质粒。过程②表示将目的基因导入微生物细胞（农杆菌），需要用Ca2+处理；使其成为感受态细胞，使其易吸收周围环境中的DNA分子。农杆菌侵染棉花后，将自身的Ti质粒上的T-DNA整合到棉花细胞的DNA上，然后利用棉花细胞进行植物组织培养，获得抗虫棉。

【详解】

A、KanR为卡那霉素抗性基因；成功导入质粒的农杆菌具有卡那霉素抗性而普通农杆菌没有，因此可使用含卡那霉素的培养基来筛选含重组质粒的农杆菌，A正确；

B；为使目的基因DNA片段和质粒DNA片段在切口处的黏性末端匹配；需要选择能切出相同黏性末端的限制酶来进行切割，可以是同种限制酶，也可以是不同限制酶，但是必须要能产生相同黏性末端，B错误；

C；棉花细胞与农杆菌混合后；农杆菌在侵染棉花细胞时，可将自身的Ti质粒上的T-DNA整合到棉花细胞的DNA上，C正确；

D；植物组织培养时；培养基中生长素浓度高于细胞分裂素，可以诱导根的分化；若是细胞分裂素高于生长素浓度，则诱导芽的分化，从图上可知，④过程分化出芽，⑤过程分化形成根，继而形成试管苗，因此④和⑤中的培养基用到的激素的浓度不同，D正确。

故选ACD。15、C:D【分析】【分析】

将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因；启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

【详解】

A；启动子是位于DNA上RNA聚合酶的结合部位；mRNA是由基因启动子后面的序列编码而来的，若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列，A正确；

B、引物的延伸方向为3'端，扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'－端进行子链合成；B正确；

C；导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞；而是受精卵或早期胚胎细胞，C错误；

D；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物细胞中染色体的DNA上，D错误。

故选CD。16、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法。

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步骤①土样应取自表层的土壤，步骤③中的稀释梯度分别为10，100，1000倍，所以土壤悬浮液稀释了1000倍，A正确；

B；自生固氮菌是异养型生物；可用血细胞计数板或稀释涂布平板法来计数土壤悬浮液中的菌体数，B错误；

C；步骤②需充分振荡20min；主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；

D；步骤④为稀释涂布平板法接种；所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源，利用的是空气中的氮气，D正确。

故选ACD。三、填空题(共7题，共14分)17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】好氧C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】兼性厌氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO219、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2018～2520、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2030×22030×2－221、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】高压灭菌—2022、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。23、略

【分析】略【解析】营养无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压气体环境四、判断题(共2题，共6分)24、A【分析】【详解】

雄性动物刚刚排出的精子并不具有受精能力，必须获能后才具备受精能力，精子获能的过程不是获得能量的过程，是获得受精能力的过程，可在获能液或受精液中完成，故正确。25、B【分析】【详解】

要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造基因中的碱基序列来完成，因为基因能指导蛋白质的生物合成，故说法错误。五、实验题(共4题，共28分)26、略

【分析】【分析】

培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质，培养基中一般含有水；碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。固氮微生物可利用空气中的氮气，故培养基无需再加入氮源。纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。

【详解】

（1）固氮菌可利用空气中的氮气作为氮源，所以Ashby培养基的营养成分主要包括水；无机盐、碳源等；不需要额外加入氮源。将土壤稀释液进行梯度稀释后再接种的方法为稀释涂布平板法，在Ashy平板上进行多次接种的目的是提高固氮菌的纯度。

（2）固氮酶的活性越大；单位时间内的固氮量越大，所以为评估固氮酶的活性，可以检测单位时间内的固氮量。

（3）S试剂可与IAA反应显红色；且颜色深浅与IAA浓度成正相关，所以可用蒸馏水对IAA母液进行梯度稀释，加入S试剂制成标准显色液，往上清液中加入S试剂，与标准显示液进行比色，与上清液颜色相近的标准显示液中IAA的浓度计为上清液中IAA的浓度。

【点睛】

本题考查固氮菌的培养和筛选，意在考查考生对所学知识的灵活应用能力。【解析】碳源稀释涂布平板法提高固氮菌的纯度单位时间内的固氮量用蒸馏水对IAA母液进行梯度稀释，加入S试剂制成标准显色液，往上清液中加入S试剂，与标准显示液进行比色，与上清液颜色相近的标准显示液中IAA的浓度计为上清液中IAA的浓度27、略

【分析】【分析】

1；泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌；代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。

2；泡菜的制作过程：按照清水与盐的质量比为4：1的比例配制盐水；将盐、水煮沸冷却。将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发酵时间长短受室内温度的影响。

3；泡菜中的亚硝酸盐含量可以用比色法测定；即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，重氮盐与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

（1）

乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型；制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料；这是因为新鲜的蔬菜亚硝酸盐的含量低。

（2）

将盐水煮沸冷却的目的是煮沸的目的是除去盐水中的空气和杀菌；冷却的目的是防止高温杀死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活动不受影响）；加入“老汁”的作用是“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短时间内成为优势菌。

（3）

测定亚硝酸盐含量的方法是比色法。即在盐酸酸化条件下；亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合后形成玫瑰红色的染料，然后将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，大致估算出亚硝酸盐的含量。

【点睛】

本题考查制作泡菜，要求考生识记制作泡菜的原理和过程，理解用比色法测定亚硝酸盐的含量，意在考查考生的识记能力和分析能力。【解析】（1）异养厌氧型亚硝酸盐的含量低。

（2）煮沸的目的是除去盐水中的空气和杀菌；冷却的目的是防止高温杀死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活动不受影响）“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短时间内成为优势菌。

（3）比色法对氨基苯磺酸玫瑰红标准显色液28、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点；能驱动基因的转录；如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，则会破坏该基因，获得该基因沉默（失活）突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，则需要强启动子和P基因不被破坏，因此应优先选用BamHⅠ和SacⅠ酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此T-DNA在该实验中的作用是将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上。

（2）由图可知；G418抗性基因位于Ti质粒的T-DNA上，随T-DNA一起整合到玉米细胞染色体DNA上，因此将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行植物组织培养，培养基中需加入G418进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，其中叶绿体是光合作用的场所，线粒体是细胞有氧呼吸的主要场所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代谢）受到干扰，从而引起植物细胞死亡。

（3）愈伤组织是一种相对没有分化的薄壁细胞团；经液体悬浮培养可以分散成胚性单细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成胚状体，再继续发育成转基因玉米株系。

（4）影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及玉米的基因型等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是防止杂菌污染。【解析】(1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞的染色体DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代谢

(3)薄壁细胞胚状体。

(4)玉米的基因型防止杂菌污染29、略

【分析】【分析】

1；PCR扩增的过程是：目的基因DNA受热变性后解链为单链；引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。

2；构建基因表达载体过程时；目的基因应插在启动子和终止子之间才能正常表达。

【详解】

（1）PCR过程中每次循环两次升温（变性和延伸）和一次降温（复性）；其中降温（复性）的目的是让两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。

（2）基因表达载体包括标记基因；目的基因；启动子和终止子，科学家在构建基因表达载体过程时，目的基因应插在启动子和终止子之间才能正常表达。单独使用限制酶HindⅢ切割目的基因和载体后，由于部分基因反向连接，导致携带CDKN2B基因的重组质粒成功导入细胞后，约一半的细胞中没有检测到CDKN2B蛋白。为了避免这种现象的发生，可以同时用两种酶进行切割，由于SmaⅠ会破坏CDKN2B基因，不能选用该酶切割，HindⅢ会破坏质粒的两种标记基因，不能选用该酶切，PstⅠ和EcoRⅠ能切下完整的CDKN2B基因，并不会破坏抗四环素基因基因，因此为了避免这种现象的发生，可以同时用PstⅠ、EcoRⅠ分别对目的基因和载体进行酶切。

（3）来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质；因此要让一个受精卵发育成多个个体，可采用胚胎分割技术，然后经移植获得多胎。分割时应注意将囊胚的内细胞团均等分割。

【点睛】

本题考查基因工程和胚胎分隔技术相关知识，掌握基因工程和胚胎分割操作步骤是解决本题的关键。【解析】让两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合启动子终止子部分基因反向连接同时用PstⅠ、EcoRI分别对目的基因和载体进行酶切胚胎分割将囊胚的内细胞团均等分割六、综合题(共3题，共12分)30、略

【分析】【分析】

平板划线法操作过程：①将接种环放在火焰上灼烧；直到接种环烧红。②在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞。③将试管口通过火焰。④将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。⑤将试管通过火焰，并塞上棉塞。⑥左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养皿。⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三；四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。⑧将平板倒置放入培养箱中培养。

【详解】

（1）结合题干；将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，培养一段时间后在纸片周围会形成透明的抑菌圈，根据抑菌圈的大小可以检测测试菌对抗菌药物的敏感程度，以指导临床合理选用抗菌药物，故药敏试验的目的是检测测试菌对抗菌药物的敏感程度，以指导临床合理选用抗菌药物，因变量是抑菌圈的大小。

（2）据图可知K-B法接种测试菌的方法是稀释涂布平板法；获得纯培养物的关键是防止杂菌污染。接种后的平板在培养时需要倒置，原因是既可以减少培养基中的水分过快地蒸发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

（3）MIC是某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度，抑菌圈越大，MIC越小，对图中测试菌而言，抗生素Ⅰ的抑菌圈较小，其MIC大于抗生素Ⅲ的MIC．在相关实验操作均严谨规范的情况下，在含有抗生素Ⅳ的纸片周围出现了较大的抑菌圈，但抑菌圈中存在有个别菌落，原因可能是抗生素Ⅳ对于野生型测试菌具有较强的抑制作用，但测试