2024年沪教版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

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A.过程①注射相应抗原后应立即从小鼠脾脏中提取细胞甲B.过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性C.过程③、④的筛选方法相同，细胞丙、丁遗传物质相同D.过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖2、有关PCR技术，下列叙述不正确的是（）A.是聚合酶链式反应，是以DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术B.在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似C.PCR反应只需在一定的缓冲溶液中提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸D.PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性、延伸3、在治疗大面积烧伤时，通常采用烧伤病人的健康皮肤进行体外培养并移植。下列有关叙述错误的是（）A.实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间，以免损伤细胞B.实验中要将培养瓶置于适宜浓度的CO2培养箱，目的是刺激细胞呼吸C.实验中贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖D.培养后期，细胞数量减少的主要原因是营养物质不足及有害代谢产物积累4、胃癌是我国发病率很高的一种恶性疾病；制备抑制癌细胞增殖的单克隆抗体对治疗胃癌具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体的制备过程如图所示；以下说法正确的是（）

A.诱导骨髓瘤细胞与甲融合，可用的诱导因素有灭活的病毒、电激、紫外线照射B.在乙、丙及骨髓瘤细胞中，乙、丙经培养后均可获得大量的抗胃癌单克隆抗体C.图中给实验小鼠注射的人的胃癌细胞是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原D.用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长；未融合细胞均不能生长5、某同学选用新鲜成熟的葡萄制作果酒和果醋，下列相关叙述正确的是（）A.果酒发酵时，每日放气需迅速，避免空气回流入发酵容器B.果酒发酵时，用斐林试剂检测葡萄汁中还原糖含量变化，砖红色沉淀逐日增多C.果醋发酵时，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时D.果醋发酵时，用重铬酸钾测定醋酸含量变化时，溶液灰绿色逐日加深6、干细胞的组织再生修复能力可用于肺纤维化的治疗，这主要是通过外泌体实现的。外泌体为包含了复杂RNA和蛋白质的膜泡，参与细胞间通讯。研究人员让肺纤维化模型小鼠分别将生理盐水、肺干细胞（LSC）外泌体、间充质干细胞（MSC）外泌体吸入肺部。结果表明，吸入LSC外泌体治疗后，肺纤维化减少近50%，吸入MSC外泌体治疗后减少了32.4%。有关说法错误的是（）A.与MSC外泌体相比，LSC外分泌体独有的因子可能更好的促进肺部的修复B.外泌体含有在细胞之间进行特异性信息交流的物质C.与干细胞相比，外泌体可以减弱免疫排斥反应D.从实验结果分析，同时使用两种外泌体比单独使用的效果更好7、许多食品的生产需要借助微生物发酵过程，下列叙述正确的是（）A.泡菜生产过程中亚硝酸盐随腌制时间逐渐积累B.制作泡菜时有时会长一层白膜能增加其独特的风味C.糖源充足时醋酸菌可以利用乙醇在厌氧条件下生产醋酸D.利用乳酸菌可将含较多抗生素的牛奶制作成含有抗生素的酸奶8、高寒藏药材川西獐牙菜能有效治疗肝炎，其野生资源匮乏且难以建立快速繁殖系。紫外线照射能随机破坏染色体结构，使其发生断裂，使染色体上某些片段转移到其他染色体上。研究人员利用胡萝卜与川西獐牙菜进行体细胞杂交，流程如下图。下列分析错误的是（）

A.过程②中可用PEG诱导两个亲本原生质体的融合B.过程③杂种细胞经脱分化、再分化形成愈伤组织C.此种体细胞杂交技术可以克服远缘杂交不亲和的障碍D.此种方法存在变异的不定向性，可在③④过程中进行筛选评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)9、下列关于生物技术与伦理问题的观点，不正确的是（）A.利用体外受精技术筛选早期胚胎性别，设计试管婴儿B.基于科学和理性讨论转基因作物的安全性问题C.通过基因筛查禁止重大疾病基因携带者就业D.大量引入国外转基因作物与本地近缘作物品种杂交10、下图表示形成cDNA并进行PCR扩增的过程。据图分析；下列叙述错误的是（）

A.①过程所需的原料是脱氧核苷酸B.②过程所需的酶必须耐高温C.③过程需要解旋酶破坏氢键D.④过程的引物对之间不能互补配对11、荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量，也可用于RNA病毒的核酸检测。其原理是：先由病毒的RNA逆转录得到cDNA，然后对得到的DNA进行PCR扩增。在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每个DNA分子扩增一次，就有一个荧光分子生成（如图）。Ct值（循环阈值）的含义为：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。下列说法错误的是（）

A.扩增过程中引物先于探针结合到模板DNA上B.若最初该反应体系中只有逆转录而来的一个DNA分子，经n次循环后，需要消耗荧光探针2n-1个C.C值越大表示被检测样本中病毒数目越多D.若样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解，检测结果可能为阴性12、下表有关基因表达的选项中；能够表达的有（）

。基因表达的细胞表达产物A细菌抗虫蛋白基因抗虫棉叶肉细胞细菌抗虫蛋白B人酪氨酸酶基因正常人皮肤细胞人酪氨酸酶C动物胰岛素基因大肠杆菌工程菌细胞动物胰岛素D兔血红蛋白基因兔成熟红细胞兔血红蛋白A.AB.BC.CD.D13、下列关于DNA粗提取与鉴定、DNA片段的扩增及电泳鉴定的原理的叙述正确的是（）A.利用DNA不溶于酒精，但蛋白质均溶于酒精的原理，可分离DNA与蛋白质B.利用在一定温度下DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色的原理对粗提取的DNA进行鉴定C.PCR技术利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合D.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理14、下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。下列说法正确的是（）

A.若能在细菌B中检测到人的生长激素基因，则说明该基因工程项目获得成功B.将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的就是导入了重组质粒的细菌C.将人的生长激素基因与质粒A结合的过程共形成了4个磷酸二酯键D.将重组质粒导入细菌B之前，可以用Ca2+处理细菌B评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)15、体细胞核移植技术存在的问题：

克隆动物存在着健康问题、表现出______缺陷等。16、虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物质)、_________________(提供氮元素的物质)和__________________。17、_________℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在_______________℃。18、对于DNA的粗提取而言，就是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在__________方面的差异，提取DNA，去除杂质。（人教P54）19、生态工程的设计所依据的是______和______原理评卷人得分四、实验题(共1题，共6分)20、研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂——内皮抑素；它能有效地抑制血管增生。下面是获得重组内皮抑素的方法，请分析回答下列问题。

（1）将人的内皮抑素基因导入大肠杆菌细胞中，能合成人的内皮抑素，其原因是_____________________________________________________________。

（2）扩增的目的基因与pUC18质粒(如下图所示)都用EcoRⅠ和BamHⅠ进行双酶切；然后用DNA连接酶进行连接，构建重组质粒。

双酶切避免了目的基因与载体__________连接；还减少了目的基因与目的基因；载体与载体的连接，提高了重组质粒的比例。

（3）大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因，LacZ基因便可表达出β半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和Xgal时，Xgal便会被β半乳糖苷酶水解成蓝色物质，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入的物质有_____________________和氨苄青霉素。成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成____________颜色的菌落，原因是__________________。

（4）从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养；获得粗提表达产物。将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板，37℃培养。将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中，72h后在显微镜下观察细胞存活情况并统计(或记录)活的内皮细胞数目，实验结果如下表所示。

。粗提表达产物浓度/(μg·mL－1)0246810活的内皮细胞数目(×102)126210．50．5实验结果说明_____________________________________________________。评卷人得分五、综合题(共2题，共6分)21、EPO是促红细胞生成素的英文简称；是一种激素样物质，可促进体内新红细胞生成。人类已可通过基因工程合成EPO基因，并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物，其过程如下。请回答下列问题：

（1）从人体组织中提取EPO的mRNA；通过反(逆)转录得到_____________，再通过PCR技术获得大量EPO基因。PCR反应体系中至少含有模板，原料；引物、__________、能量等。

（2）①过程构成了基因表达载体；内部包括不可缺少的组成部分，其中_____________能驱动基因的转录。

（3）采用_____________技术，将重组表达载体导入小鼠受精卵中，将受精卵移入发育培养液中继续培养。当胚胎发育至____________时期，可向受体移植。但是移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行_________。22、经过基因工程改造的；能生产人胰岛素的大肠杆菌是一种特殊的“工程菌”。所用运载体（普通质粒）结构如下图左；目的基因如下图右。回答下列问题：

(1)该过程中最重要的环节是基因表达载体的构建，方法是选用____________（填“X”或“Y”）限制酶同时处理质粒和目的基因，再用____________处理使之成为重组质粒。构建好的基因表达载体中含有启动子，启动子是指____________。

(2)将上述重组质粒导入大肠杆菌时，应选用____________处理大肠杆菌；使其成为感受态细胞。

(3)将目的基因导入受体菌时；常出现三种情况：未转化的细菌；含空载体（普通质粒）的细菌、含重组质粒的细菌。下图是含人胰岛素基因的重组质粒的“工程菌”的筛选示意图。

上图中的____________（用图中字母作答）菌落为含有目的基因的“工程菌”。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、D【分析】【详解】

A.过程①注射相应抗原后应经过一段时间；使小鼠产生浆细胞，再从小鼠脾脏中提取细胞甲，A项错误；

B.过程②诱导细胞融合；利用了细胞膜的流动性，B项错误；

C.过程③筛选杂交瘤细胞；过程④筛选能产生单一抗体的杂交瘤细胞，二者方法不同，C项错误；

D.过程⑤无论在体内还是体外进行；细胞丁都可大量增殖，D项正确；

因此，本题答案选D。2、C【分析】【分析】

PCR技术：

1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2；原理：DNA复制。

3；前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；

5；过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；聚合酶链式反应；是用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术，A正确；

B；在用PCR技术扩增DNA时；DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似，B正确；

C；PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行；需提供DNA模板、一对引物、四种脱氧核苷酸及热稳定DNA聚合酶等，C错误；

D；PCR一般经历三十多次循环；每次循环均分为变性、复性和延伸三个阶段，D正确。

故选C。

【点睛】3、B【分析】【分析】

动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A；需要对所取人体组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理；细胞膜上也含有蛋白质，所以实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间，以免损伤细胞，A正确；

B、实验中要将培养瓶置于适宜浓度的CO2培养箱；维持pH平衡，B错误；

C；动物细胞培养过程中大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长；当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制，C正确；

D；由于营养物质不足及有害代谢产物积累；所以在培养后期，细胞数目减少，D正确。

故选B。

【点睛】4、C【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体；诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心；振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。单克隆抗体的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞)；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；两次抗体检测：专一抗体检验阳性。

【详解】

A；据图分析；甲细胞为浆细胞，诱导浆细胞与骨髓瘤细胞融合（动物细胞融合）常用的方法有灭活的病毒、PEG、电激等，而紫外线照射不是诱导动物细胞融合的手段，A错误；

B；在乙、丙及骨髓瘤细胞中；乙、丙经培养后，丙可以产生大量的抗胃癌单克隆抗体，而乙不一定获得大量的抗胃癌单克隆抗体，B错误；

C；图中给实验小鼠注射的人的胃癌细胞相当于抗原；可以与抗人体胃癌抗体特异性结合，C正确；

D；用特定的选择培养基对乙进行筛选；融合产生的杂交瘤细胞可以生长，而其他融合细胞和未融合细胞不能生长，D错误。

故选C。5、C【分析】【分析】

参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；酒精发酵是利用酵母菌的无氧呼吸；随着果酒发酵的进行，装置内会产生气体（二氧化碳），容器内压强大于外界，所以空气不会回流，A错误；

B；果酒发酵时；发酵液中的葡萄糖不断被消耗，因此用斐林试剂检测葡萄汁中还原糖含量变化，砖红色沉淀逐日减少，B错误；

C；以酒精为底物进行醋酸发酵；酒精与氧气发生反应产生醋酸和水，几乎没有气泡产生，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时，C正确；

D；重铬酸钾用于检测酒精；不能用于测定醋酸含量，D错误。

故选C。6、D【分析】【分析】

胚胎干细胞存在于早期胚胎中；具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。成体干细胞是成体组织或器官内的干细胞，包括骨髓中的造血干细胞；神经系统中的神经肝细胞和睾丸中的精原干细胞。

【详解】

A；有题干可知；吸入MSC外泌体的小鼠肺纤维化减少了32.4%，吸入LSC外泌体治疗后，肺纤维化减少近50%，因此与MSC外泌体相比，LSC外沁体独有的因子可能更好的促进肺部的修复，A正确；

B；由题干“外泌体为包含了复杂RNA和蛋白质的膜泡；参与细胞间通讯”可知，外泌体含有在细胞之间进行特异性信息交流的物质，B正确；

C；外泌体具有更低的免疫原性,可以避免产生免疫排斥反应,大大提高安全性；C正确；

D；该实验中并没有将两种外泌体同时使用的实验组；因此无法推测同时使用两种外泌体比单独使用的效果更好，D错误。

故选D。7、B【分析】【分析】

泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下；乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。亚硝酸盐随腌制时间先增加后下降。

醋酸菌为好氧细菌。

抗生素抑制原核生物的生长繁殖。

【详解】

A；泡菜生产过程中亚硝酸盐随腌制时间先增加后下降；A错误；

B；制作泡菜时有时会长一层白膜（酵母菌）；酵母菌发酵产生醇香味，能增加其独特的风味，B正确；

C；醋酸菌为好氧细菌；不能再无氧条件下发酵，C错误；

D；抗生素不利于原核生物的生长繁殖；含抗生素的牛奶不能进行乳酸菌发酵，D错误。

故选B。8、B【分析】【分析】

据图分析；①表示去除植物细胞壁制备原生质体的过程，②表示原生质体融合，③是脱分化，④是再分化。

【详解】

A；②是原生质体融合的过程；该过程可用PEG（聚乙二醇）诱导融合，A正确；

B；过程③是杂种细胞形成愈伤组织的过程；表示脱分化，B错误；

C；此种体细胞杂交技术可以克服远缘杂交不亲和的障碍；使远缘杂交成为可能，C正确；

D；此种方法中愈伤组织分裂旺盛；容易突变，存在变异的不定向性，可在③脱分化和④再分化过程中进行筛选，D正确。

故选B。二、多选题(共6题，共12分)9、A:C:D【分析】【分析】

1；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

2；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；我国不允许利用体外受精技术筛选早期胚胎性别；A错误；

B；基于科学和理性讨论转基因作物的安全性问题；B正确；

C；通过基因筛查禁止重大疾病基因携带者就业；不符合伦理道德，C错误；

D；大量引入国外转基因作物与本地近缘作物品种杂交；可能造成基因污染，D错误。

故选ACD。10、B:C【分析】【分析】

PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程；其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。

PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：

①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后；使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；

②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后；温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；

③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在72℃；DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下；以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链，重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

【详解】

A；①过程为逆转录；所需的原料是脱氧核苷酸，A正确；

B；②过程由DNA单链合成DNA双链过程所需要的DNA聚合酶不需要耐高温；B错误；

C；③过程为变性；温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链，不需要DNA解旋酶破坏氢键，C错误；

D；④过程为复性；温度降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条DNA单链结合，但引物对之间不能互补配对，D正确。

故选BC。11、A:B:C【分析】【分析】

多聚酶链式反应扩增DNA片段：

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

2；PCR反应过程是：变性→复性→延伸。

【详解】

A；基因扩增过程中需要特定的引物；该引物的作用是定位基因的位置，与模板链结合并为子链的延伸提供起点，扩增过程中引物和探针应同时结合到模板DNA上，A错误；

B、若最初该反应体系中只有逆转录而来的一个DNA分子，每个DNA分子需要1个探针，扩增n次，可得到2n个DNA分子，则共需要消耗2n-1个探针；B错误；

C；由题可知C值越大；该反应管内的荧光信号到达设定阈值经历的循环数越大，即每次循环出现的荧光信号越少。每次循环出现的荧光信号越少，代表被检测样本中的病毒数目越少，C错误；

D；如果样本内的病毒RNA被降解；会导致无法检测出样本内的正确病毒数目，D正确。

故选ABC。12、A:B:C【分析】【分析】

基因工程的原理是基因重组；把一种生物的基因转入另一种生物后，目的基因可以在受体细胞中表达出相应的蛋白质。

【详解】

A；细菌抗虫蛋白基因可通过转基因技术转入棉花体内；在棉花的叶肉细胞中表达产生细菌抗虫蛋白，使棉花具有抗虫能力，A正确；

B；正常人皮肤细胞中含有人酪氨酸酶基因；人酪氨酸酶基因能够表达产生人酪氨酸酶，B正确；

C；动物胰岛素基因可通过转基因技术转移到大肠杆菌体内；在大肠杆菌工程菌细胞中合成动物胰岛素，C正确；

D；兔属于哺乳动物；其成熟的红细胞中没有细胞核和众多细胞器，所以不可能表达出血红蛋白，D错误。

故选ABC。

【点睛】13、B:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。

（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可将DNA与蛋白质分离，A错误；

B；在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色，B正确；

C；PCR是一种体外扩增DNA片段的技术；利用了DNA热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合，包括：高温变性（解链）→低温复性→中温延伸三个步骤，C正确；

D；由于同性相斥、异性相吸；带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，D正确。

故选BCD。14、C:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；检测到细菌B合成人的生长激素才能说明获得成功；A错误；

B；根据题意；细菌B不含有质粒A及其上的基因，即没有抗氨苄青霉素基因；质粒含抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，基因发生重组时抗四环素基因被破坏，抗氨苄青霉素基因被保留，故在含氨苄青霉素的培养基上能生长的是导入了普通质粒或者重组质粒的细菌，B错误；

C；将人的生长激素基因与质粒A结合的过程连接两个切口；该过程共形成4个磷酸二酯键，C正确；

D、将目的基因导入细菌时，需要用Ca2+处理细菌；使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的生理状态，D正确。

故选CD。

【点睛】三、填空题(共5题，共10分)15、略

【解析】遗传和生理16、略

【解析】①.水②.碳源③.氮源④.无机盐17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2018～2518、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】物理和化学性19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】生态学工程学四、实验题(共1题，共6分)20、略

【分析】【分析】

此题考查了基因工程技术；目的基因的获得方法有三种：从基因文库中获取；PCR技术扩增、人工合成法；基因表达载体中的LacZ基因被插入灭活。

（1）

将人的内皮抑素基因导入大肠杆菌细胞中；能合成人的内皮抑素，其原因是各种生物共用一套密码子，且蛋白质的合成都经过转录和翻译过程。

（2）

双酶切后；目的基因两端的黏性末端不同，被切开的运载体两端的黏性末端也不同，这样可以避免目的基因与载体反向连接，还能减少目的基因与目的基因；载体与载体的连接，还减少了目的基因和质粒的自身连接，提高了重组质粒的比例。

（3）

大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因；LacZ基因便可表达出β半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和Xgal时，Xgal便会被β半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖；氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入的物质有IPTG、Xgal和氨苄青霉素，要使其形成菌落还要加入琼脂形成固体培养基。因为重组质粒的LacZ基因中插入了目的基因，使LacZ基因不能表达出β﹣半乳糖苷酶，所以成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成白色菌落。

（4）

由表中数据可知；粗提表达产物浓度越高，活的内皮细胞数目越少，说明重组内皮抑素（或粗提表达产物）能够抑制毛细血管内皮细胞的增殖。

【点睛】

本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生的理解应用能力和信息转化能力，属于中等难度题。【解析】（1）各种生物共用一套密码子；且蛋白质的合成都经过转录和翻译过程。

（2）反向(任意)

（3）IPTG；Xgal、琼脂白重组质粒的LacZ基因中插入了目的基因；使LacZ基因不能表达出β－半乳糖苷酶。

（4）重组内皮抑素(或粗提表达产物)能够抑制毛细血管内皮细胞的增殖五、综合题(共2题，共6分)21、略

【分析】【分析】

基因工程技