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…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页,总=sectionpages22页第=page11页,总=sectionpages11页2024年华师大新版选修1生物上册月考试卷917考试试卷考试范围:全部知识点;考试时间:120分钟学校:______姓名:______班级:______考号:______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共7题,共14分)1、下列关于蛋白质性质的叙述中,不会影响到蛋白质的泳动速度的是A.蛋白质分子的大小B.蛋白质分子的密度C.蛋白质分子的形状D.蛋白质分子的等电点2、某研究小组欲研究被石油污染过的土壤中细菌的数量,并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是A.称取和稀释被污染的土壤时应在火焰旁B.用以石油为唯一碳源的培养基进行筛选C.分离菌种时可采用稀释涂布平板法接种D.对细菌进行计数时宜采用平板划线法接种3、下列有关分解纤维素的微生物的分离的叙述,不正确的是()A.纤维素酶的发酵方法有液体发酵法和固体发酵法B.对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后无需再进行其他实验C.纤维素酶的测定方法,一般是对所产生的葡萄糖进行定量的测定D.纤维素酶是一种复合酶4、以下关于植物克隆的说法正确的是A.从茎尖、腋芽开始的植物组培可以不经过愈伤组织B.离体组织为起点的胚胎发生途径,可以不经过脱分化和再分化C.针对茎尖开始的发芽培养基包含相对较少的BA和相对较多的NAAD.在植物组培的继代培养中,将一直保留其原有的遗传特性5、下列关于胡萝卜素的叙述,正确的是()A.胡萝卜素的化学性质不稳定,易挥发B.胡萝卜素易溶于乙醇,微溶于石油醚C.所有胡萝卜素都包含有多个碳碳双键D.胡萝卜素的提取效率与颗粒含水量成正比6、酶制剂、固定化酶、固定化细胞已经广泛应用于各个领域,下列叙述正确的是()A.用于治疗消化不良症的肠溶多酶片含有多种消化酶,但嚼服后会失去疗效B.固定化酵母细胞的常用方法是吸附法,这种方法对酵母细胞活性影响最小C.固定化酶的应用中,要控制好pH、温度、溶解氧和营养条件D.固定化细胞用于生产胞外酶和分泌到胞外的产物7、下列关于凝胶色谱法原理的叙述,错误的是()A.凝胶是微小的多孔球体,大多数是由多糖类化合物构成的B.交联葡聚糖凝胶(G-75)中的75表示凝胶的得水值C.相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶颗粒外部移动D.相对分子质量较小的蛋白质只能在凝胶颗粒内部移动评卷人得分二、多选题(共5题,共10分)8、图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作;图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图。下列叙述正确的是。
A.刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液B.图1中X溶液为CaCl2溶液,其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠C.图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触D.图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中9、为探究不同糖源(蜂蜜、黄冰糖)对蓝莓酒发酵产物的影响,某研究小组研发出如下的蓝莓酒发酵工艺,其中“主发酵”时酵母菌会繁殖、大部分糖的分解和代谢物会生成,“后发酵”是在低温、密闭的环境下蓝莓酒会成熟。下列叙述错误的是()
A.菌种甲在产生CO2的同时会产生酒精B.切片后需对发酵液进行消毒然后再分组C.倒罐均需保留空间以促进菌种有氧呼吸D.主发酵要控制无氧,后发酵要控制有氧10、下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述,合理的是()A.在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长B.条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸C.果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小D.将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时,底层和近瓶口处需加大用盐量11、下列实验过程中,出现的正常现象有()A.制作果酒时,发酵瓶中溶液产生较多泡沫B.用果酒制作果醋过程中,液面出现一层褐色菌膜C.制作腐乳过程中,豆腐表面发黏且长有白色菌丝D.用固定化酵母进行酒精发酵,凝胶珠浮在液面12、下列关于血红蛋白提取和分离的过程及原理的叙述,错误的是()A.为了防止血液凝固,应在采血器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠B.SDS能使蛋白质完全变性,使电泳迁移率完全取决于电荷的性质和多少C.利用0.9%的NaCl对血红蛋白溶液透析12小时,可以去除小分子杂质D.在凝胶柱中加入蛋白样品后即可连接缓冲溶液洗脱瓶进行洗脱和收集样品评卷人得分三、填空题(共9题,共18分)13、凝胶色谱柱的装填。
装填凝胶时要尽量________,从而降低颗粒之间的空隙。不能有________存在,因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的________,降低分离效果。洗脱液不能______,露出凝胶颗粒,否则需重新装填。14、样品处理及粗分离。
血液由__________和__________组成,其中红细胞最多。红细胞的组成中,除水分以外,约90%是__________。血红蛋白由______条肽链组成,包括两条__________和两条__________。其中每条肽链环绕一个__________基团,此基团可携带一分子氧或一分子__________。血红蛋白因含有________而呈现____色。15、凝胶材料:______性,______类化合物,如葡聚糖或________。16、凝胶色谱法也称做__________,是根据____________的大小分离蛋白质的有效方法。17、蛋白质是生命活动不可缺少的物质。随着人类基因组计划的进展以及多种生物基因组测序工作的完成;人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中氧气和二氧化碳的运输。
(1)分离血红蛋白的方法是_____,其原理是根据_____来分离蛋白质。
(2)蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、_____和纯度鉴定。
(3)血红蛋白因含有_____而呈现红色,采集血液时需要预先加入柠檬酸钠,目的是_____。在血红蛋白样品处理和粗分离中需要用到很多试剂,如在红细跑的洗涤中需要用到生理盐水直至上清液不再呈现黄色;在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的_____,目的是使红细胞破裂释放血红蛋白;在透析过程中需要将透析袋放入20mmol/L的_____中。
(4)本实验用的是交联葡聚糖凝胶(SephadexG-75),其中“G”表示_____,“75”表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸收水分7.5g。在装填凝胶时色谱柱内不能出现气泡的原因是_____,给色谱柱添加样品的具体操作是_____。
(5)判断纯化的蛋白质是否达到要求,选用的检测方法是_____。18、默写:制作果酒和果醋实验流程示意图_________19、测定亚硝酸盐含量的原理:在___________________酸化的条件下,亚硝酸盐与______________________发生重氮化反应后,与____________________结合形成_______________色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出亚硝酸盐的含量。20、蛋白质是生命活动不可缺少的物质。随着人类基因组计划的进展以及多种生物基因组测序工作的完成;人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中氧气和二氧化碳的运输。
(1)分离血红蛋白的方法是_____,其原理是根据_____来分离蛋白质。
(2)蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、_____和纯度鉴定。
(3)血红蛋白因含有_____而呈现红色,采集血液时需要预先加入柠檬酸钠,目的是_____。在血红蛋白样品处理和粗分离中需要用到很多试剂,如在红细跑的洗涤中需要用到生理盐水直至上清液不再呈现黄色;在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的_____,目的是使红细胞破裂释放血红蛋白;在透析过程中需要将透析袋放入20mmol/L的_____中。
(4)本实验用的是交联葡聚糖凝胶(SephadexG-75),其中“G”表示_____,“75”表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸收水分7.5g。在装填凝胶时色谱柱内不能出现气泡的原因是_____,给色谱柱添加样品的具体操作是_____。
(5)判断纯化的蛋白质是否达到要求,选用的检测方法是_____。21、蛋白质的提取和分离一般分为四步:________、粗分离、______和________。评卷人得分四、实验题(共2题,共16分)22、根据提取橘皮精油的实验流程示意图回答下列问题:
①石灰水浸泡→②漂洗→③压榨→④过滤→⑤静置→⑥再次过滤→橘皮油。
(1)第①步之前对橘皮的处理是__________________。
(2)新鲜的橘皮中含有大量的_________;_________和_________;如果直接压榨,出油率较低。
(3)压榨是个机械加压的过程;其要求是____________________________________。
(4)为了使橘皮油易与水分离;还要分别加入__________________,并调节pH至_________。
(5)第④步用_________过滤;目的是除去_________。
(6)第③步用_________过滤。23、高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌;其筛选过程如下图所示。请回答下列问题:
(1)实验过程应采用无菌技术,防止培养物被微生物污染及____被微生物感染,操作者的双手需要进行清洁和____处理。
(2)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是____。
(3)Ⅰ号培养基中的碳源为____。若Ⅰ号培养基中的菌落连成一片,最可能的原因是____。
(4)部分嗜热菌的菌落周围形成透明圈,应挑出透明圈____(填“大”或“小”)的菌落接种到Ⅱ号培养基,该过程的目的是____目的菌;下次划线时接种环上的菌种来源于____。评卷人得分五、非选择题(共2题,共10分)24、【生物——选修1:生物技术实践】请回答下面与微生物的培养与应用有关的问题:
(1)在微生物培养过程中;获得纯净培养物的关键是__________________;对玻璃器皿的灭菌方法为__________________。
(2)微生物常用的接种方法有2种;但只有_____________方法可用于微生物的计数,运用该方法计数的结果往往比实际结果__________________。
(3)农作物秸秆中含有大量的纤维素,利用微生物可以将纤维素转化为酒精以供人类所需。将纤维素转化为酒精需要先将纤维素转化为葡萄糖,将纤维素转化为葡萄糖的酶是一种复合酶,它包括C1酶;___________;将葡萄糖转化为酒精的微生物是______________。
(4)下表是分离某种微生物的培养基配方:
。成分。
MgS04
葡萄糖。
X物质。
水。
琼脂。
用量。
5g
10g
7g
lOOOmL
20g
表中X物质最可能为______________(碳源、氮源、无机盐);培养基中添加琼脂的作用是______________。25、哺乳动物成熟的红细胞,在生命科学研究中有着广泛的应用。请回答下列有关问题:
(1)哺乳动物成熟的红细胞是由骨髓中的造血干细胞经__________(填“有丝分裂”或“无丝分裂”)和分化形成的。
(2)从哺乳动物成熟的红细胞中提取血红蛋白时,首先要用相当于红细胞液体体积五倍的__________洗涤红细胞__________次,然后用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂,释放出血红蛋白。
(3)得到血红蛋白混合液之后,可先用离心法进行__________,再通过__________法或凝胶电泳法进一步纯化。使用前一种方法纯化时,先从色谱柱洗脱出来的是__________(填“大分子”或“小分子”)蛋白质。
(4)用凝胶电泳法测定蛋白质分子量时,需要在凝胶中加入SDS,目的是__________;使电泳迁移率完全取决于分子的大小。
(5)因哺乳动物成熟的红细胞__________,常被用作制备细胞膜的材料。与提取血红蛋白不同的是:在制备细胞膜时,红细胞的破裂只能使用__________而不能使用__________。评卷人得分六、综合题(共4题,共24分)26、橘皮精油无色透明;具有诱人的橘香味,在食品;医药化妆品等领域具有广泛的应用回答下列问题:
(1)橘皮精油的主要成分是______;常用新鲜的橘皮提取橘皮精油;理由是______
(2)新鲜橘皮中含有大量的_________;若直接压榨桶皮,出油率较低。为提高出油率可采取的措施是_____.
(3)在橘皮压榨时;为了使橘皮精油易与水分离,采取的措是__________压榨法得到的糊状液体可通过______法初步除去其中的固体物和残渣。
(4)提取的橘皮精油需要在黑暗条件下保存,理由是____27、乳酸菌在细胞代谢过程中会分泌细菌素;有机酸等物质;细菌素对多种食品中常见的致病菌具有广谱的抑菌活性。实验小组为了检测细菌素的抗菌活性,将富集培养后的乳酸菌菌株分离纯化,并接种到MRS液体培养基中。回答下列问题:
(1)纯化乳酸菌可以用平板划线法,该方法所用的接种工具是__________,对该工具进行灭菌的方法是___________。
(2)利用平板划线法纯化乳酸菌时,第二次及其后的划线都要从上一次划线的________开始,目的是_________。平板划线法不能用于微生物的计数,其原因是______。
(3)用打孔法测定乳酸菌分泌的细菌素对指示菌的抑菌效果时,应该先吸取稀释的_______菌液涂布到平板中,再使用5mm直径的打孔器打孔,每孔分别注入离心后的50μLMRS液体培养基的_____(填“上清液”或“沉淀物”)。培养24h后测定抑菌圈的直径,当抑菌圈的直径至少大于________才能判断为具有抑菌活性。
(4)实验小组用经乳酸调节pH至3.5(与发酵48h后发酵液的pH相同)的MRS液体培养基作为空白对照组,观察其抑菌情况。设置该组实验的目的是__________。28、蜜柚有“天然水果罐头”之称;目前,蜜柚果汁饮料的生产是蜜柚开发利用的主要途径之一。某科研单位开展了利用果胶酶对蜜柚汁澄清效果的研究,如图为酶解温度的实验结果,蜜柚汁的透光率代表澄清效果,透光率越高澄清效果越好。请回答下列相关问题:
(1)在蜜柚果汁饮料生产中;加入果胶酶不仅使榨取果汁变得更容易,也可使果汁变得澄清。果胶酶使果汁变得澄清的主要原因是________________________。从图示判断,在蜜柚果汁饮料生产中,所用果胶酶活性的最适温度约为__________℃,判断依据是____________________。
(2)在进行图示对应的实验过程中;要保证每组实验在设定的温度下进行,应进行的操作是:取若干支试管均分为两组,将____________________,再将相同温度下的两组混合后置于设定的温度下进行实验,实验中还应确保每组实验的____________________(写两个影响因素)等均相同且适宜。
(3)果胶酶是一类酶的总结,包括_______________________________29、苹果是常见水果;口感好、营养价值高;广受人们喜爱,但其收获的季节性强,易造成积压滞销,腐烂变质。某市为缓解产销矛盾,提高产品的附加值,利用苹果生产果汁、果酒和果醋,大致工艺流程如下图。请分析回答:
(1)用苹果加工成果汁的过程中;需要加入果胶酶,果胶酶可以将果胶分解成____________。
(2)果酒发酵之后进行果醋发酵;需要改变的条件包括:①_________________;②________________。
(3)为使酵母菌能反复利用,常用_____法固定。酵母细胞实验研究表明使用固定化酵母进行发酵的酒精产量平均值明显高于使用游离酵母进行发酵的对照组,可能的原因是____________________。参考答案一、选择题(共7题,共14分)1、B【分析】【分析】
带电颗粒在电场作用下;向着与其电性相反的电极移动,称为电泳。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。
【详解】
蛋白质的泳动速度与蛋白质电荷数、分子量大小、分子体积、形状等有关,而与蛋白质分子的密度无关。故选B。2、D【分析】【详解】
A;微生物的分离和培养的关键技术是无菌技术;因此在微生物的分离和培养的过程中称取和稀释土壤时应在火焰旁等活动要在火焰旁进行,A正确;
B;筛选出能分解石油的细菌;培养基的配方应以石油为唯一碳源,B正确;
C;对微生物进行分离和计数;应该用稀释涂布平板法,C正确。
D;对活菌进行计数常用稀释涂布平板法而不能用平板划线法;D错误。
故选D。3、B【分析】【详解】
纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种,A项正确;初步筛选只是分离纯化的第一步,为确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行发酵产生纤维素酶的实验,B项错误;纤维素酶的测定方法,一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定,C项正确;纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶;Cx酶和葡萄糖苷酶;D项正确。
【点睛】
分离纤维素分解菌的几个关键步骤。
(1)分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基;再用鉴别培养基。选择培养基为液体培养基,以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长,而其他绝大多数微生物不能正常生长;因培养基中无凝固剂,为液体培养基,利用液体培养基能使营养成分充分消耗,以增加纤维素分解菌的浓度。
(2)鉴别培养基含琼脂,为固体培养基,因为要在培养基上形成我们肉眼可见的菌落。刚果红染色法应用的就是此培养基。4、A【分析】【分析】
1、植物组织培养过程是:离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织,然后再分化生成根、芽,最终形成植物体。
2;人工种子通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料;通过人工薄膜包装得到的种子。
【详解】
A;植物组织培养根据再生途径分为:愈伤组织途径、芽增殖途径、原球茎途径、体胚发生途径;所以从茎尖、腋芽开始的植物组培可以不经过愈伤组织,A正确;
B;离体组织为起点的胚胎发生途径;一般要经过脱分化和再分化过程,B错误;
C;生长素和细胞分裂素的用量比例将影响细胞的分化方向;针对茎尖开始的发芽培养基包含相对较多的BA和相对较少的NAA,C错误;
D;在植物组培的继代培养中;有些细胞会发生遗传物质的变化,D错误。
故选A。5、C【分析】【分析】
胡萝卜素化学性质稳定;不溶于水,易溶于石油醚等有机溶剂,可以用萃取法提取。萃取时的有机溶剂应该具有较高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶。提取的胡萝卜素粗品可通过纸层析进行鉴定。
【详解】
胡萝卜素的化学分子式中包含多个碳碳双键;根据双键的数目可将胡萝卜素分为α;β、Υ三类,β-胡萝卜素是其中最主要的组成成分,胡萝卜素的化学性质稳定,微溶于乙醇,易溶于石油醚,胡萝卜素的提取效率与颗粒含水量成反比,ABD错误,C正确。
故选C。6、A【分析】试题分析:
A.消化酶的本质是蛋白质;能被消化道中的水解酶水解,正确;
B.固定化酶和固定化细胞利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术;包括包埋法;化学结合法和物理吸附法,B错误;
C.固定化酶的应用中;不需要营养条件,要控制好pH;温度,但和溶解氧无关,C错误;
D.固定化细胞在多步酶促反应中发挥连续催化作用;无分泌到胞外的产物,D错误。故选A。
考点:此题考查固定化酶和固定化细胞,考查学生对基础知识的掌握和应用能力,解题的关键是理解固定化技术的相关知识。7、D【分析】【分析】
凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法,所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体;在小球体内部有许多贯穿的通道,当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快,相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。
【详解】
A;凝胶实际上是一些微小的多孔球体;在小球体内部有许多贯穿的通道,大多数是由多糖类化合物构成的,A正确;
B;交联葡聚糖凝胶(G-75)中的75表示凝胶的得水值;即每克凝胶膨胀时吸水7.5g,B正确;
C;相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道;只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快,C正确;
D;相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时;相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,也能在凝胶外部移动,D错误。
故选D。二、多选题(共5题,共10分)8、B:C:D【分析】【分析】
制作固定化酵母细胞的实验步骤:1、酵母细胞的活化;2、配制0.05mol/L的CaCl2溶液;3;配制海藻酸钠溶液(该实验成败的关键步骤);4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合;5、固定化酵母细胞。
【详解】
A;溶化的海藻酸钠应冷却至室温后与活化的酵母菌混合;A错误;
B、海藻酸钠与酵母菌混合液应滴入CaCl2溶液中;以制备凝胶珠,B正确;
C;搅拌可使酵母菌与培养液充分接触;有利于发酵的顺利进行,C正确;
D;凝胶珠用蒸馏水冲洗2~3次后;再转移到发酵装置中,D正确。
故选BCD。9、A:C:D【分析】【分析】
酵母菌是一类单细胞真菌;能以多种糖类作为营养物质和能量的来源,因此在一些含糖量较高的水果;蔬菜表面经常可以发现酵母菌的存在。酵母菌是兼性厌氧微生物,在无氧条件下能进行酒精发酵,可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素,酿酒酵母的最适生长温度约为28℃。
【详解】
A、发酵产生果酒的菌种是酵母菌,酵母菌在有氧呼吸产生CO2;但不产生酒精,A错误;
B;切片后对发酵液进行消毒;防止杂菌污染,再进行分组,B正确;
C;压榨倒罐用于主发酵需保留空间以促进酵母菌的有氧呼吸;二次倒罐时菌种是进行无氧呼吸,C错误;
D;主发酵先有氧促进酵母菌大量繁殖;后无氧进行酒精发酵,后发酵要控制无氧,D错误。
故选ACD。10、A:B:C【分析】【分析】
果酒、果醋制作原理与发酵条件。
果酒制作
果醋制作
菌种
酵母菌
醋酸菌
菌种
来源
附着在葡萄皮上的酵母菌
变酸酒表面的菌膜
发酵
过程
有氧条件下,酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖:C6H12O6+6O26CO2+6H2O;无氧条件下,酵母菌通过无氧呼吸产生酒精:C6H12O62C2H5OH+2CO2
氧气、糖源充足时:
C6H12O6+2O22CH3COOH+2CO2+2H2O;
缺少糖源、氧气充足时:
C2H5OH+O2CH3COOH+H2O
温度
一般酒精发酵18~25℃,
繁殖最适为20℃左右
最适为30~35℃
气体
前期:需氧,后期:无氧
需要充足的氧气
【详解】
果酒发酵后期;酵母菌活动逐渐减弱,产生的二氧化碳逐渐降低,放气时间间隔可延长,A正确。当氧气;糖源都充足时,醋酸菌可将葡萄汁中的果糖分解成醋酸,B正确。果酒发酵过程中因为营养物质的消耗,有氧呼吸过程中也有水的产生,故发酵液的密度减小,C正确。制作腐乳时是逐层加盐,瓶口处需加大用盐量,以减小被杂菌污染的可能性,D错误。故选:ABC。
【点睛】
解答本题关键在于对果酒、果醋的制作原理的理解应用。11、A:C:D【分析】【分析】
1;参与果酒制作的微生物是酵母菌;其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理:(1)在有氧条件下,进行有氧呼吸大量繁殖;(2)在无氧条件下,产生酒精和二氧化碳。
2;参与果醋制作的微生物是醋酸菌;其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理:当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。
3;参与腐乳制作的微生物主要是毛霉;其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理:毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】
A;果酒制作时;除了产生酒精,还会产生大量二氧化碳,因此发酵瓶中容易产生较多泡沫,A正确;
B;用果酒制作果醋过程中;液面出现一层白色菌膜,而不是褐色菌膜,B错误;
C;制作腐乳过程中;豆腐表面发黏且长有白色菌丝,C正确;
D;用固定化酵母进行酒精发酵;酒精浓度越来越高,因此凝胶珠逐渐浮上液面,D正确。
故选ACD。
【点睛】12、B:C:D【分析】【分析】
血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有:样品处理:①红细胞的洗涤;②血红蛋白的释放,③分离血红蛋白溶液。粗分离:①分离血红蛋白溶液,②透析。纯化:调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。
【详解】
A;为了防止血液凝固;应在采血器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠,A正确;
B;在一定pH下;使蛋白质基团带上正电或负电;加入带负电荷多的SDS,形成“蛋白质-SDS复合物”,使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小,B错误;
C;利用磷酸缓冲液对血红蛋白溶液的透析12小时;可以去除小分子杂质,C错误;
D;在凝胶柱中加入蛋白样品后;等样品完全进入凝胶层后才能连接缓冲溶液洗脱瓶进行洗脱和收集样品,D错误。
故选BCD。三、填空题(共9题,共18分)13、略
【分析】【详解】
人教版教材指出,凝胶色谱柱的装填装柱前要将色谱柱垂直固定在支架上。因为干的凝胶和用级冲液平衡好的凝胶的体积差别很大,因此装柱前需要根据色谱柱的内体积计算所需要的凝胶量。凝胶用蒸馏水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液,在与色谱柱下端连接的尼龙管打开的情况下,一次性缓慢倒人色谱柱内,装填时可轻轻蔽动色谱柱,使凝胶装填均匀。在色谱柱中装填凝胶的时候要尽量紧密,以降低凝胶颗粒之间的空隙。在装填凝胶柱时,不得有气泡存在。气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。在凝胶色谱操作过程中,不能发生洗脱液流干,露出凝胶颗粒的现象。一旦发生这种情况,凝胶色谱柱需要重新装填。【解析】紧密气泡洗脱次序流干14、略
【分析】【详解】
样品处理及粗分离:
血液由血浆和血细胞组成,其中红细胞最多。红细胞的组成中,除水分以外,约90%是血红蛋白。血红蛋白由4条肽链组成,包括两条α-肽链和两条β-肽链。其中每条肽链环绕一个亚铁血红基团,此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳。血红蛋白因含有血红素而呈现红色。【解析】血浆血细胞血红蛋白4α-肽链β-肽链亚铁血红基团二氧化碳血红素红15、略
【分析】【详解】
凝胶材料:多孔性,多糖类化合物,如葡聚糖或琼脂糖。葡聚糖凝胶指的是由一定平均相对分子质量的葡聚糖和甘油基以醚桥形式相互交联而成,具有立体网状结构,应用面广的一类凝胶;琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶,多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。【解析】多孔多糖琼脂糖16、略
【分析】【详解】
分离蛋白质分子的一种常用方法是凝胶色谱法,也称做分配色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快;分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部,路程长,流动慢。【解析】分离色谱法相对分子质量17、略
【分析】【分析】
血红蛋白存在于红细胞内;由四条肽链构成,两条α肽和两条β肽链,每条肽链围绕一个亚铁血红素基团,一个血红素基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳。
【详解】
(1)分离血红蛋白的方法是凝胶色谱法(又叫分配色谱法);是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质,相对分子质量大的蛋白质分子直接穿过凝胶颗粒间的空隙,路径短,移动速度快,优先可收集到;相对分子质量小的蛋白质分子进入凝胶珠的内部,路径长,移动速度慢,可在后收集。
(2)蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理;粗分离、纯化和纯度鉴定。
(3)血红蛋白因含有亚铁血红素基团而呈现红色;采集血液时需要预先加入柠檬酸钠防止血液凝固。在血红蛋白样品处理和粗分离中需要用到很多试剂,如在红细跑的洗涤中需要用到生理盐水直至上清液不再呈现黄色;在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的甲苯,破坏细胞膜,释放血红蛋白;在透析过程中需要将透析袋放入20mmol/L磷酸缓冲液,除去无机盐和小分子蛋白质。
(4)纯度鉴定中;用的是交联葡聚糖凝胶,其中“G”表示凝胶的交联程度;膨胀程度和分离范围。在装填凝胶时色谱柱内不能出现气泡,气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。给色谱柱添加样品的具体操作是吸管吸1mL样品加到色谱柱的顶端,滴加样品时,吸管管壁贴着管壁环绕移动加样,同时注意不要破坏凝胶面。
(5)经过凝胶色谱法获得的蛋白质;为了确定其是否达要求,可用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行检测。
【点睛】
本题考查血红蛋白的提取和分离方法、凝胶色普的操作、异常原因分析,要求考生熟记课本相关知识,并理解运用。【解析】凝胶色谱法(又叫分配色谱法)相对分子质量的大小纯化亚铁血红素基团防止血液凝固甲苯磷酸缓冲液凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序,降低分离效果吸管吸1mL样品加到色谱柱的顶端,滴加样品时,吸管管壁贴着管壁环绕移动加样,同时注意不要破坏凝胶面。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳18、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】19、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】盐酸对氨基苯磺酸N-1-萘基乙二胺盐酸盐玖瑰红20、略
【分析】【分析】
血红蛋白存在于红细胞内;由四条肽链构成,两条α肽和两条β肽链,每条肽链围绕一个亚铁血红素基团,一个血红素基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳。
【详解】
(1)分离血红蛋白的方法是凝胶色谱法(又叫分配色谱法);是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质,相对分子质量大的蛋白质分子直接穿过凝胶颗粒间的空隙,路径短,移动速度快,优先可收集到;相对分子质量小的蛋白质分子进入凝胶珠的内部,路径长,移动速度慢,可在后收集。
(2)蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理;粗分离、纯化和纯度鉴定。
(3)血红蛋白因含有亚铁血红素基团而呈现红色;采集血液时需要预先加入柠檬酸钠防止血液凝固。在血红蛋白样品处理和粗分离中需要用到很多试剂,如在红细跑的洗涤中需要用到生理盐水直至上清液不再呈现黄色;在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的甲苯,破坏细胞膜,释放血红蛋白;在透析过程中需要将透析袋放入20mmol/L磷酸缓冲液,除去无机盐和小分子蛋白质。
(4)纯度鉴定中;用的是交联葡聚糖凝胶,其中“G”表示凝胶的交联程度;膨胀程度和分离范围。在装填凝胶时色谱柱内不能出现气泡,气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。给色谱柱添加样品的具体操作是吸管吸1mL样品加到色谱柱的顶端,滴加样品时,吸管管壁贴着管壁环绕移动加样,同时注意不要破坏凝胶面。
(5)经过凝胶色谱法获得的蛋白质;为了确定其是否达要求,可用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行检测。
【点睛】
本题考查血红蛋白的提取和分离方法、凝胶色普的操作、异常原因分析,要求考生熟记课本相关知识,并理解运用。【解析】凝胶色谱法(又叫分配色谱法)相对分子质量的大小纯化亚铁血红素基团防止血液凝固甲苯磷酸缓冲液凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序,降低分离效果吸管吸1mL样品加到色谱柱的顶端,滴加样品时,吸管管壁贴着管壁环绕移动加样,同时注意不要破坏凝胶面。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳21、略
【分析】【详解】
血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步,包括:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品的处理;再经过透析去除分子量较小的杂质,即样品的粗分离;然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化;最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。【解析】样品处理纯化纯度鉴定四、实验题(共2题,共16分)22、略
【分析】【分析】
石灰水碱性;可以防止压榨时材料滑脱;分解果胶;为了使橘皮油易与水分离,还要分别加入盐,利于分离;特别注意前后两次过滤有所区别,第一次过滤是用布袋,目的是除去粗杂质;第二次过滤用滤纸,目的是除去较细致的杂质。
【详解】
(1)第①步石灰水浸泡之前对橘皮干燥去水;提高出油率。
(2)新鲜的橘皮中含有大量的果蜡;果胶和水分;如果直接压榨,出油率较低。
(3)压榨是个机械加压的过程;其要求是既要将原料压紧,防止原料滑脱,又要将油分挤压出来。
(4)为了使橘皮油易与水分离;还要分别加入相当于橘皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸钠,并调节pH至7~8。
(5)压榨液中含有橘皮油和大量的水分;还有一些糊状残渣等物质,可先经过第④过滤步用普通布袋过滤,除去固体物和残渣。
(6)第③再次过滤;用过滤纸过滤,滤液与吸出的上层橘油合并,成为最终的橘皮精油。
【点睛】
考查橘皮精油提取实验流程中所用的试剂及作用、操作的要求与目的。熟悉课本的实验是解决问题的关键。【解析】干燥去水果蜡果胶水分既要将原料压紧,防止原料滑脱,又要将油分挤压出来相当于橘皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸钠7~8普通布袋固体物和残渣滤纸23、略
【分析】(1)整个实验过程应采用无菌技术;防止培养物被微生物污染及操作者自身被微生物感染,实验前后操作者的双手需要进行清洁和消毒处理。(2)培养基制作完成后要调整pH,再灭菌。(3)Ⅰ号培养基属于选择培养基,该筛选要使用以淀粉为唯一的碳源的选择培养基。用稀释涂布平板法接种前需要对菌液进行梯度稀释,如果培养基中的菌落连成一片,最可能的原因是菌液浓度过高(或稀释不够)。(4)嗜热菌的菌落周围形成透明圈越大,说明嗜热菌产生高温淀粉酶的效率越高,应该就是筛选的目的微生物,将其菌落接种到Ⅱ号培养基,该过程的目的是纯化目的菌,接种时下次划线时接种环上的菌种来源于上次划线的末端。
【考点定位】微生物的分离和培养【解析】(1)操作者自身消毒(2)先调节pH,后灭菌(3)淀粉菌液浓度过高(或稀释不够)(4)大纯化上次划线末端五、非选择题(共2题,共10分)24、略
【分析】试题分析:培养基为微生物提供生长;繁殖和积累代谢产物的营养物质;营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水;根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等根据用途分选择培养基、鉴别培养基;根据性质分为液体、半固体和固体培养基;筛选目的微生物需要使用选择培养基;微生物的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法;其中稀释涂布平板法可以用来进行微生物的计数。
(1)微生物培养过程中;获得纯净培养物的关键是无菌技术,即防止外来杂菌的污染,其中常用的对培养皿进行灭菌的方法是干热灭菌法。
(2)常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法两种;但只有稀释涂布平板法可用于微生物的计数;由于一个菌落可能是由两个或多个细菌长成,因此运用该方法计数的结果往往比实际数目低。
(3)纤维素分解菌能产生分解纤维素的纤维素酶,该酶是一种复合酶,一般认为它至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三种组分;酵母菌可进行有氧呼吸和无氧呼吸;无氧呼吸时能产生酒精。
(4)据表中数据可知;表中营养物质缺乏氮源,故X物质最可能为氮源;培养基中添加琼脂可作为凝固剂,使液体培养基变成固体培养基。
【点睛】掌握微生物的两种接种方法以及这两种方法的比较是解答本题的难点。【解析】防止外来杂菌的入侵干热灭菌法稀释涂布平板法偏小Cx酶和葡萄糖苷酶酵母菌氮源作为凝固剂,使液体培养基变成固体培养基25、略
【分析】【分析】
1;哺乳动物成熟的红细胞是由骨髓中的造血干细胞分裂分化形成;细胞内没有细胞核和众多的细胞器,所以常常选做为提取细胞膜的材料;
2;红细胞内血红蛋白的提取和分离一般分为:洗涤→释放→分离→透析→纯化→纯度鉴定。
【详解】
(1)哺乳动物成熟的红细胞是由骨髓中的造血干细胞经有丝分裂和分化形成的。
(2)从哺乳动物成熟的红细胞中提取血红蛋白时;首先要用相当于红细胞液体体积五倍的生理盐水洗涤红细胞3次,然后用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂,释放出血红蛋白。
(3)得到血红蛋白混合液之后;可先用离心法进行样品处理及粗分离,再通过凝胶色谱法或凝胶电泳法进一步纯化。使用凝胶色谱法纯化时,先从色谱柱洗脱出来的是大分子蛋白质。
(4)用凝胶电泳法测定蛋白质分子量时;消为了除净电荷对迁移率的影响,需要在凝胶中加入SDS,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。
(5)因哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和众多的细胞器,常被用作制备细胞膜的材料。在制备细胞膜时;红细胞的破裂只能使用蒸馏水而不能使用甲苯,因为蒸馏水的作用是让红细胞吸水胀破,而甲苯的作用是溶解细胞膜。
【点睛】
解答本题关键需要熟悉血红蛋白的提取与分离的步骤与相关操作方法以及操作原理。【解析】有丝分裂生理盐水3样品处理及粗分离凝胶色谱法大分子消除净电荷对迁移率的影响(或掩盖不同种蛋白间的电荷差别)没有细胞核和众多的细胞器蒸馏水甲苯六、综合题(共4题,共24分)26、略
【分析】【分析】
根据植物原料的特点;植物芳香油的提取方法有蒸馏;压榨和萃取等。
提取橘皮精油;常采用压榨法.植物芳香油不溶于水,但是极易溶于有机溶剂,如石油醚;酒精、乙醚和戊烷等.芳香油溶解于有机溶剂后,只需蒸发出有机溶剂,就可以获得较纯净的植物芳香油了,因此可以用有机溶剂作为提取剂来提取芳香油。
为了提高出油率,首先将橘皮干燥去水,并用石灰水浸泡,压榨过程常加入一定的NaHC03和Na2S04;并调节pH值至7-8。
【详解】
(1)橘皮精油的主要成分是柠檬烯;常用新鲜的橘皮提取橘皮精油;因为橘皮精油主要存在于橘皮中且新鲜的橘皮中橘皮精油含量高。
(2)由于新鲜橘皮中含有大量的果蜡;果胶、水分;直接压榨桶皮,会出现滑脱现象,导致出油率较低。为提高出油率可采取的措施是干燥去水,并用石灰水浸泡。
(3)橘皮压榨时,为了使橘皮精油易与水分离,常采取加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4;压榨得到的糊状液体可通过过滤初步除去其中的固体物和残渣。
(4)由于橘皮精油在光下易分解;所以应将提取的橘皮精油放在黑暗条件下保存。
【点睛】
熟悉压榨法提取橘皮精油的操作方法和原理是分析解答本题的关键。【解析】柠檬烯橘皮精油主要存在于橘皮中,新鲜的橘皮中橘皮精油含量高果蜡、果胶、水分干燥去水,并用石灰水浸泡加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4过滤橘皮精油在光下易分解27、略
【分析】【分析】
1;无菌技术的主要内容:①对实验操作的空间、操作者的衣着和手;进行清洁和消毒;②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌;③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行;④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2;微生物常见的接种的方法:①平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板;接种,划线,在恒温箱里培养。在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面,经培养后可形成单个菌落。
【详解】
(1)平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板;接种,划线,在恒温箱里培养。在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成单个菌落,该方法所用的接种工具是接种环;灭菌方法有:湿热灭菌;干热灭菌、灼烧灭菌,对接种环进行灭菌的常用方法为灼烧灭菌。
(2)利用平板划线法纯化乳酸菌时;第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始,从而使细菌数目随着划线次数的增加而逐步减少,便于获得单菌落,起到分离菌落的作用;但是平板划线法不能用于微生物的计数,因为平板划线法只在划线末端出现单菌落,而不能统计出单菌落数。
(3)要研究的是乳酸菌分泌的细菌素对指示菌的抑菌效果;应该先吸取稀释的指示菌菌液涂布到平板中进行培养;在提取抑菌有效成分时,只需要获取细菌素这一物质即可,乳酸菌菌体主要分布在离心后的液体培养基的沉淀物中,其分泌物细菌素位于上清液,故需要吸取离心后液体培养基的上清液菌液涂布到平板中;
抑菌圈是指固体培养基表面与试样接触的边界处无菌繁殖的环带区域;利用待测次生代谢产物在琼脂平板扩散使其周围的细菌生长受到抑制形成的抑菌圈大小,而本实验用的是5mm直径的打孔器打孔,故注入相应物质后,培养24h后测定抑菌圈的直径,当抑菌圈的直径至少大于5mm才能判断为具有抑菌
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