2025年沪科版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年沪科版选择性必修3生物下册阶段测试试卷144考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共5题，共10分)1、从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作错误的是（）A.将土壤用无菌水稀释，制备104-106倍的土壤稀释液B.将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上C.用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌D.从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株2、金黄色葡萄球菌是引起细菌性食物中毒的主要病原菌之一。为单独分离出金黄色葡萄球菌用于后续试验；科学家研究了氯化钠是否能用作抑制剂来控制非金黄色葡萄球菌的生长，结果如图所示。下列叙述中不正确的是（）

A.当氯化钠的浓度为10g/L时，培养基对大肠杆菌等四种致病菌几乎无影响B.随氯化钠浓度的增加，对大肠杆菌、沙门氏菌和志贺氏菌抑制性越来越强C.高浓度的氯化钠对四种致病菌均有强烈的抑制作用D.氯化钠可用作抑制剂来控制非金黄色葡萄球菌生长3、下列有关生物工程的叙述；不正确的有（）

①基因工程的核心步骤是构建基因表达载体。

②利用植物茎尖培养脱毒苗时；需要对离体的茎尖；培养基等进行灭菌。

③克隆羊的培育涉及细胞核移植和胚胎移植等技术。

④PCR技术需要利用限制性内切核酸酶打开DNA双链。

⑤利用核移植技术可以培育试管婴儿。

⑥牛胚胎发育的历程是：受精卵→卵裂→桑葚胚→囊胚→原肠胚A.一项B.两项C.三项D.四项4、紫草富含一种红色的次生代谢产物——紫草宁，具有抗菌、消炎的功效。科研人员利用紫草新生的营养芽进行培养获得愈伤组织，再使用液体培养基进行细胞悬浮培养，以获得更多的紫草宁。下列叙述正确的是（）A.次生代谢产物一般认为不是植物基本生命活动所必需的，其在植物细胞中含量很少B.愈伤组织是由高度分化的一团薄壁细胞组成，无特定形态C.为获得愈伤组织，培养时需要加入PEGD.愈伤组织的诱导受植物激素配比的影响，不受营养物质和光照等因素的影响5、关于腐乳的制作实验，下列叙述正确的是（）A.将腐乳块堆积起来会导致堆内温度升高，缩短腐乳发酵时间B.毛霉是需氧型生物，所以装瓶后不能密封瓶口C.发酵过程中有机物的种类和含量都会减少，但营养价值增加D.腐乳制作过程中必须有能分解蛋白质和脂肪的微生物参与评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)6、农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入到被侵染植物的染色体DNA中。研究者将下图中被侵染植物的DNA片段连接成环；并以此环为模板，利用PCR技术扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，以此可确定T-DNA插入的具体位置。下列说法正确的是（）

A.进行PCR扩增的依据是DNA分子双链复制的原理B.进行PCR扩增需要的酶有解旋酶和热稳定DNA聚合酶C.利用图中的引物②、③组合可扩增出两侧的未知序列D.通过与受体细胞的基因组序列比对，可确定T-DNA的插入位置7、某学习小组从富含纤维素分解菌土壤中获取纤维素分解菌并进行了下列操作：称取土样20g，加入装有30mL培养基的摇瓶中并完成稀释，在30℃下将摇瓶置于摇床上振荡培养；吸取一定的培养液，转移至另一瓶新鲜的选择培养基中，以同样的方法培养到培养液变混浊时，吸取0.1ml培养液进行梯度稀释和涂布平板，以达到分离纯化培养的目的。下列叙述错误的是（）A.取样土壤须在无菌条件下，用蒸馏水稀释B.为确定所用的固体培养基是否灭菌严格，应选择未接种的牛肉膏蛋白胨培养基进行空白培养C.摇床上振荡培养的目的是保证纤维素分解菌所需要的有氧环境及提高营养物质的利用率D.在所用的固体培养基中添加刚果红，若存在纤维素分解菌，则其菌落周围会呈现红色的透明圈8、下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。下列说法正确的是（）

A.若能在细菌B中检测到人的生长激素基因，则说明该基因工程项目获得成功B.将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的就是导入了重组质粒的细菌C.将人的生长激素基因与质粒A结合的过程共形成了4个磷酸二酯键D.将重组质粒导入细菌B之前，可以用Ca2+处理细菌B9、下列有关动物细胞工程操作的叙述，错误的是（）A.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时，培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入琼脂B.动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体C.干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，有着自我更新能力及分化潜能D.动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植10、下图1表示限制酶SpeⅠ、XbaⅠ的识别序列和切割位点，图2表示基因P（960bp）、基因Q（840bp）的限制酶SpeⅠ或XbaⅠ的酶切图谱和融合基因，图3表示几种基因经限制酶SpeⅠ或XbaⅠ处理后进行电泳（电泳条带表示特定长度的DNA片段）得到的带谱图，下列相关分析正确的是（）

A.基因P经限制酶SpeⅠ处理后进行电泳的结果与图3中的Ⅰ相同B.基因Q经限制酶XbaⅠ处理后进行电泳的结果与图3中的Ⅱ相同C.融合基因经限制酶SpeⅠ处理后进行电泳的结果与图3中的Ⅲ相同D.融合基因经限制酶XbaⅠ处理后进行电泳的结果与图3中的Ⅳ相同11、免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述正确的是（）

A.图示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次冲洗不充分则有可能出现假阳性现象C.电泳检测结果只能判断阳性与否，无法判断牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗体反应通过PCR技术间接扩增放大，从而达到可检测的水平评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)12、一般包括______、______等技术13、醋酸菌是一种____________细菌。醋酸生成反应式是_____________________。14、目的：使目的基因在受体细胞中_____，并且可以______，使目的基因能够______作用。15、结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：______和______。16、最后检测目的基因是否翻译成______，方法是从转基因生物中提取______，用相应的______进行______。评卷人得分四、实验题(共2题，共4分)17、研究表明生物制剂W对不同种类动物细胞的分裂均有促进作用。有同学设计相关实验来验证这个观点。请根据以下提供的实验材料；完善该实验步骤，并预测实验结果。

实验材料：培养液；正常肝组织、肝癌组织、W、胰蛋白酶。

（要求与说明：答题时不考虑加入W后的体积变化等误差。提供的细胞均具有分裂能力；只进行原代培养且培养条件适宜）

（1）实验步骤：

①用_________分别处理正常肝组织和肝癌组织获得分散的细胞。将两种分散的细胞加入培养液中制成两种细胞悬液。培养液需要中加入__________等营养物质和__________用以灭菌。

②在显微镜下用_____________直接计数两种细胞悬液中细胞的数量；并进行记录。

③取灭菌后的培养瓶若干个均分为A、B两组，A组加入正常肝细胞悬液；B组加入_________。从A、B组中各取出一半培养瓶作为C、D组，分别加入_________。放入动物细胞培养箱在适宜条件下培养。

④各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，每组取部分样品，加入_____________后摇匀；在显微镜下计数并记录细胞数量。

⑤重复④若干次。

⑥统计并分析所得数据。

（2）预测实验结果（用坐标系和曲线示意图表示）_____________18、丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化；部分患者可能发展为肝硬化甚至肝癌。为研制丙肝病毒的单克隆抗体，某研究者以小鼠为实验材料设计了以下实验流程。回答下列问题：

(1)为使单细胞悬液中的B淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与丙肝病毒结合的抗体，需要进行的操作是______。融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是____

(2)诱导细跑融合时利用的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶，能够与细胞膜上的______（填化学本质）发生作用，使得细胞互相凝聚，细胞膜上的______重新排布，细胞发生融合。筛选1利用______进行筛选，而筛选2通过多次的_______来完成。

(3)得到大量丙肝病毒单克隆抗体的方法之一是将杂交瘤细胞在体外培养液中进行培养，接入培养液中杂交瘤细胞的量是单克隆抗体产量的重要影响因素之一，为探究一定培养液中接种杂交瘤细胞的最佳数量，实验思路为_______。评卷人得分五、综合题(共1题，共7分)19、某地利用胚胎工程实现良种肉牛产业化生产；请结合胚胎工程相关知识回答下列问题：

（1）胚胎工程是指对动物_____所进行的多种显微操作和处理技术。体外受精对精子和卵细胞的具体要求是_____。

（2）早期胚胎培养时_____（填“需要”或“不需要”）用胰蛋白酶进行处理，原因是_____。

（3）胚胎工程技术的终端环节是_____，其最显著的意义在于_____；在胚胎移植过程中，外来胚胎能在受体内存活的生理学基础是_____。

（4）如果供体母牛具有很多优良性状，可利用体细胞克隆技术加速遗传改良进程。用于核移植的体细胞一般选用10代以内的细胞，原因是_____。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、C【分析】【分析】

土壤中分解尿素的细菌的筛选。

①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养；温度。pH等）；同时抑制或阻止其他微生物生长。培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基；能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。

【详解】

A、测定土壤中细菌的数量，一般选用104、105、106的稀释液进行平板培养；A正确；

B；将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上；从中选取菌落数适宜的平板对细胞进行分离或计数，B正确；

C；用加入酚红指示剂的培养基鉴别分解尿素的细菌；C错误；

D；分解尿素的菌在分解尿素时产生氨气；氨气能使酚红指示剂显红色，从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株，D正确。

故选C。2、C【分析】【分析】

该实验的目的为探究氯化钠是否能用作抑制剂来控制非金黄色葡萄球菌的生长；自变量为氯化钠的浓度以及菌种，因变量为细菌相对数量。当存在多个自变量时，一定要控制无关变量；保证单一变量的情况下研究实验的结果，得出实验的结论。

【详解】

A；当氯化钠的浓度为10g/L时；大肠杆菌等四种致病菌相对数量在1.2左右，与对照组相差不大，说明培养基对大肠杆菌等四种致病菌几乎无影响，A正确；

B；随氯化钠浓度的增加；金黄色葡萄球菌的数量相差不大，但大肠杆菌、沙门氏菌和志贺氏菌的数量随着氯化钠的浓度的增加出现下降，尤其是当氯化钠的浓度大于10g/L，数量急剧下降，说明随氯化钠浓度的增加，对大肠杆菌、沙门氏菌和志贺氏菌抑制性越来越强，B正确；

CD；高浓度的氯化钠对大肠杆菌、沙门氏菌和志贺氏菌这三种致病菌均有强烈的抑制作用；但对金黄色葡萄球菌的抑制作用不明显，故氯化钠可用作抑制剂来控制非金黄色葡萄球菌生长，C错误；D正确。

故选C。

【点睛】3、C【分析】【分析】

1；将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体．用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

2；植物组织培养的过程：离体的植物组织；器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）。

3；植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。

4；基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。

【详解】

①基因工程的核心步骤是第二步；即构建基因表达载体，①正确；

②利用植物茎尖培养脱毒苗时；需要对离体的茎尖；培养基等进行消毒，不能进行灭菌，否则会导致外植体失活，②错误；

③克隆羊的培育涉及细胞核移植；早期胚胎培养和胚胎移植等技术；③正确；

④PCR技术需要利用高温打开DNA双链；④错误；

⑤利用体外受精；胚胎移植技术可以培育试管婴儿；⑤错误；

⑥牛胚胎发育的历程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体；⑥正确；

综上正确的选项有①③⑥；共三项，C正确，ABD错误。

故选C。

【点睛】4、A【分析】【分析】

次生代谢物：

（1）概念：植物代谢产生的一些一般认为不是植物基本生命活动所必需的产物。

（2）本质：一类小分子有机化合物（如酚类；赭类和含氮化合物等）。

（3）作用：在植物抗病；抗虫等方面发挥作用；也是很多药物、香料和色素等的重要来源。

（4）缺点：①植物细胞的次生代谢物含量很低；从植物组织提取会大量破坏植物资源。②有些产物又不能或难以通过化学合成途径得到。

【详解】

A；植物的次生代谢产物一般不是植物基本生命活动所必需的；其在植物细胞中含量很少，A正确；

B；愈伤组织是由高度分化的细胞转化而来的一团薄壁细胞组成；其分化程度很低，B错误；

C；诱导外植体脱分化获得愈伤组织不需要PEG（聚乙二醇）；需要植物激素，C错误；

D；愈伤组织的诱导受植物激素配比的影响；也受营养物质和光照等因素的影响，D错误。

故选A。5、D【分析】【分析】

1；毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

2；豆腐乳的前期制作温度控制在15～18℃的环境条件下；因为毛霉属于需氧型微生物，因而放置在空气中即可；豆腐乳的后期制作温度控制在30℃条件下，且要放入坛中密封坛口。

3；酒在豆腐乳的后期制作过程中；能防止杂菌生长，利于后期成熟的因素：腌制中的盐，卤汤中的酒、香辛料以及对坛子消毒、装坛密封时用酒精灯火焰处理坛口等，都有抑制微生物生长的作用。

【详解】

A；毛霉的适宜生长温度为15～18℃；所以将腐乳坯堆积起来会导致堆内温度升高，不利于毛霉的生长，延长腐乳发酵时间，A错误；

B；毛霉是需氧型生物；装瓶密封瓶口可防止杂菌的污染，B错误；

C；发酵过程中有机物的种类会增加；大分子有机物会被分解为小分子有机物，有机物含量减小，但营养价值增加，C错误；

D；腐乳制作过程是利用能分泌蛋白酶和脂肪酶的微生物将豆腐中的蛋白质的脂肪分解为小分子的物质；故必须有能分解蛋白质和脂肪的微生物参与，D正确。

故选D。二、多选题(共6题，共12分)6、A:D【分析】【分析】

PCR技术：

1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2；原理：DNA复制。

3；前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；PCR扩增依据的是DNA分子双链复制的原理；A正确；

B；进行PCR扩增需要热稳定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B错误；

C；DNA的两条链反向平行；子链从引物的3′端开始延伸，则利用图中的引物①、④组合可扩增出两侧的未知序列，C错误；

D；通过与受体细胞的基因组序列比对；即可确定T-DNA的插入位置，D正确。

故选AD。

【点睛】7、A:B:D【分析】【分析】

刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理：刚果红是一种染料；它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；取样土壤须在无菌条件下；用无菌水稀释，这样可以避免杂菌污染，A错误；

B；为检测所用的固体培养基是否灭菌严格；应选择未接种的上述培养基进行空白培养，若无菌落出现，则说明配制的固体培养基合格，B错误；

C；摇床上振荡培养不仅能保证纤维素分解菌所需要的有氧环境；而且还可以使菌体和营养液充分接触，进而提高营养物质的利用率，C正确；

D；在所用的固体培养基中添加刚果红；随着纤维素被分解利用，若存在纤维素分解菌，则其菌落出现透明圈，D错误。

故选ABD。8、C:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；检测到细菌B合成人的生长激素才能说明获得成功；A错误；

B；根据题意；细菌B不含有质粒A及其上的基因，即没有抗氨苄青霉素基因；质粒含抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，基因发生重组时抗四环素基因被破坏，抗氨苄青霉素基因被保留，故在含氨苄青霉素的培养基上能生长的是导入了普通质粒或者重组质粒的细菌，B错误；

C；将人的生长激素基因与质粒A结合的过程连接两个切口；该过程共形成4个磷酸二酯键，C正确；

D、将目的基因导入细菌时，需要用Ca2+处理细菌；使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的生理状态，D正确。

故选CD。

【点睛】9、A:B【分析】【分析】

动物细胞工程技术包括动物细胞培养；动物细胞融合、核移植技术等技术；其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。在进行细胞培养时，培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入血清等天然成分。干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞等，存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，有着自我更新能力及分化潜能。

【详解】

A；在进行动物细胞培养时；培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入血清等天然成分，A错误；

B；动物细胞融合不能形成杂种个体；形成的是杂种细胞，而植物体细胞杂交能形成杂种个体，两者都能形成杂种细胞，B错误；

C；干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞等；存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，有着自我更新能力及分化潜能，C正确；

D；动物体细胞分化程度较高；全能性较低，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，D正确。

故选AB。10、A:B:D【分析】【分析】

限制酶能识别双链DNA中特定的核苷酸序列并进行切割；具有特异性；DNA连接酶将不同的DNA片段连接成DNA链。

【详解】

A、根据图2所示，基因P上有限制酶SPeⅠ的一个酶切位点，基因P的总长度960bp；所以经酶切后可以得到两个小于960的片段，符合图3中的Ⅰ，A正确；

B、根据图2所示，基因Q上有限制酶XbaⅠ的一个酶切位点，基因P的总长度为840bP；所以经酶切后可以得到两个小于840的片段，符合图3中的Ⅱ，B正确；

CD、融合基因中没有限制酶SPeⅠ和限制酶XbaⅠ的酶切位点；所以用这两种端处理都不会断开，因此处理之后只有一个片段，符合图3中的Ⅳ，C错误，D正确。

故选ABD。11、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一种抗原检测系统；将一段已知序列的DNA片段标记到抗体2上，通过抗原抗体的特异性识别并结合，抗体2会和固定抗体1；抗生素形成复合物“固定抗体1—抗生素—抗体2”，再用PCR方法将这段DNA进行扩增，通过检测PCR产物的量，即可推知固定抗体1上吸附的抗生素的量。

【详解】

A；免疫PCR中所用的DNA不选用受检样品（牛乳）中可能存在的DNA。待检测的牛乳中可能含有牛乳腺细胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段）；若图示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，经过PCR扩增后的产物中，不仅有抗体2上的DNA扩增产物，还可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的扩增产物，使检测结果偏大，A正确；

B；如果第三次冲洗不充分；可能使残留的、呈游离状态的抗体2上的DNA也作为PCR的模板参与扩增，会出现假阳性现象，B正确；

CD；微量抗原抗体反应；是通过PCR技术扩增抗体2上连接的DNA，最后通过检测扩增产物—DNA的量来确定抗生素的量的方法。因此，PCR扩增产物的量与牛乳中抗生素的量呈正相关，抗原、抗体的数量可通过PCR技术间接扩增放大，C错误，D正确。

故选ABD。三、填空题(共5题，共10分)12、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】好氧C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】稳定存在遗传至下一代表达和发挥15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】黏性末端平末端。16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交四、实验题(共2题，共4分)17、略

【分析】【分析】

1；动物细胞培养的条件：

（1）无菌；无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液；以清除代谢废物；

（2）营养物质：糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；还需加入血清、血浆等天然物质；

（3）适宜的温度和pH；

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

2；实验操作步骤的安排一般如下：第一步：取材随机均分为几组；编号；第二步：不同组自变量的处理；第三步：把上述各组放在无关变量相同且适宜等条件下处理一段时间；第四步：观察并记录比较相应的因变量。根据题意可知，本实验的目的是验证生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用，则该实验的自变量是细胞的种类及是否加入生物制剂W，因变量是细胞悬液中细胞的数目，对细胞直接计数可以采用血球板计数法。

【详解】

（1）①动物细胞培养前需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分别处理正常肝组织和肝癌组织获得分散的细胞。将两种分散的细胞加入培养液中制成两种细胞悬液。动物细胞的培养液中需要加入葡萄糖；氨基酸、无机盐、维生素、动物血清；为了保证无菌的条件，一般在培养液中加入一定量的抗生素。

②在显微镜下可以采用血球计数板直接计数两种细胞悬液中细胞的数量；并进行记录。

③本实验的目的是验证生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用；根据题干所给实验材料可知，不同细胞是指正常肝细胞和癌细胞，因此该实验应该设置四组，变量为细胞的种类及是否加入生物制剂W，具体如下：

A组：培养液中加入正常肝细胞悬液；B组：培养液中加入与之等量癌细胞悬液；从A；B组中各取出一半培养瓶作为C、D组；C、D两组：培养液中加入等量的生物制剂W。放入动物细胞培养箱在适宜条件下培养。

④该实验的因变量是计数细胞悬液中细胞的数量；因此各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，每组取部分样品，加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶摇匀，将细胞分散成单个，然后在显微镜下计数。

（2）预测实验结果；若较长时间培养，因为正常细胞的增殖次数有限，故A组中细胞数量最少，由于W促进细胞增殖的作用，因此C组细胞数量多于A组；而癌细胞可以无限增殖，且由于其细胞膜上的糖蛋白减少，易于扩散和转移，同时失去接触抑制，可大量培养增殖，故B；D两组中细胞数量明显更多，且由于W的促进作用，D组多于B组；由于此实验是验证实验，所以实验结果是加入生物制剂W的实验组比对照组细胞数多，同时癌细胞分裂能力比正常细胞高，故绘制坐标曲线具体如下:

【点睛】

本题考查验证实验，要求学生明确实验的目的，正确区分实验的变量，能够根据题意判断自变量和因变量，然后根据设计实验的单一变量和等量原则，同时结合题干所给的实验材料完善实验设计，并能预测实验结果和绘制相关曲线图表示实验的结果。【解析】胰蛋白酶（胶原蛋白酶）葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清抗生素血球计数板等量肝癌细胞悬液等量生物制剂W胰蛋白酶（胶原蛋白酶）18、略

【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

【详解】

（1）用丙肝病毒对小鼠进行免疫后；小鼠的B淋巴细胞能产生抗丙肝病毒的抗体，从该小鼠的脾细胞中能获得产生该抗体的B淋巴细胞。B淋巴细胞在体外培养条件下不能无限增殖，而骨髓瘤细胞能无限增殖，故融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是骨髓瘤细胞。

（2）诱导细胞融合的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶；能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使得细胞互相凝聚，细胞膜具有一定的流动性，在灭活病毒的诱导下，其上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜会发生融合。细胞融合后产生的融合细胞有B细胞间的融合；骨髓瘤细胞间的融合及B细胞和骨髓瘤细胞的融合，会产生三类细胞。筛选1是指利用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞产生的抗体除了抗丙肝病毒的抗体外，还可能有其他类型，故筛选2是指进行