2025年仁爱科普版选择性必修3生物下册月考试卷

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A.①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能B.②代表早期胚胎培养，可移植的胚胎应发育到原肠胚或囊胚阶段C.③代表胚胎分割，需均等分割桑椹胚的内细胞团D.⑤代表胚胎移植，移植之前需要对供体和受体进行同期发情处理2、胰岛素可用于治疗糖尿病；但胰岛素注射后易在皮下堆积，需较长时间才能进入血液，进入血液后又易被分解，因此治疗效果受到影响。下图是新的速效胰岛素的生产过程，有关叙述正确的是（）

A.新的胰岛素的预期功能是构建新胰岛素结构模型的主要依据B.若用大肠杆菌生产新的胰岛素，需用显微注射法导入大肠杆菌C.新胰岛素基因和人体胰岛素基因相同，新的胰岛素生产过程中不涉及中心法则D.新的胰岛素功能直接由新的胰岛素基因结构发挥3、下列关于动物细胞培养过程的叙述，错误的是（）A.制作细胞悬液时，可以使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B.悬液中分散的细胞很快贴附在瓶壁上，细胞贴壁体现了细胞的适应性C.10代以内的细胞能保持细胞正常的二倍体核型D.细胞培养在含混合气体的培养箱中，其中的CO2可刺激细胞的呼吸4、下列有关几种发酵食品的发酵温度、发酵时间和发酵菌种等的叙述，错误的是（）A.葡萄酒发酵时应将温度控制在18～30℃B.生产醋酸所用的醋酸菌的最适生长温度为30～35℃C.腐乳发酵时，毛霉中蛋白酶的合成只需要核糖体参与D.刚装坛密封好的泡菜，夏季的发酵时间比冬季的短5、传统发酵技术是人们在日常生活过程中对微生物的应用。下列相关叙述正确的是（）A.果酒应该密封保存，否则醋酸菌可利用酒精直接转化为醋酸而影响口感B.制作泡菜时加入的“老汤”中含有纯度较高的酵母菌可加速发酵进程C.欲将果酒制备成果醋，制备时的温度无需改变但需通入充足的氧气D.酸奶发酵时，溶液pH值逐渐降低，是乳酸菌无氧呼吸产生的乳酸造成的6、刚果红是一种染料，纤维素能够与刚果红结合形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。为探究土壤中甲、乙两种微生物能否产生纤维素酶及分解纤维素能力的大小，某小组分别将两种微生物接种于含刚果红的培养基上并在相同条件下培养，结果如下图。下列说法错误的是（）

A.所用的培养基为固体培养基，且以纤维素为唯一碳源B.甲、乙菌均能产生纤维素酶，但乙菌的分解能力较强C.刚果红不能与纤维素降解产生的葡萄糖形成红色复合物D.要筛选出高效降解菌株，应从透明圈较大的菌落中挑取微生物接种7、人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药，改造后的t-PA蛋白能显著降低出血副作用。下图表示构建含t-PA改良基因重组质粒的过程示意图。相关说法错误的是（）

A.构建重组质粒时，选用的限制酶是XmaⅠ和BglⅡB.需要DNA聚合酶将t-PA改良基因与质粒连接C.新霉素抗性基因的作用是便于将导入质粒的大肠杆菌筛选出来D.在加入新霉素的培养基中选择呈白色的菌落选育工程菌株8、GUS基因作为一种报告基因，编码β-葡萄糖苷酸酶，该酶可催化特定底物水解，产生蓝色化合物，借此用来观察转基因植物中外源基因的表达情况，鉴定转基因植株。下列说法错误的是（）A.GUS基因是有遗传效应的DNA片段，由多个核糖核苷酸构成B.GUS基因编码β-葡萄糖苷酸酶合成的过程包括转录和翻译C.应将GUS基因和外源基因融合后导入受体细胞以观察表达情况D.蓝色的深浅可表示外源基因表达量的多少9、水稻胚乳含直链淀粉和支链淀粉；直链淀粉所占比例越小糯性越强。科研人员将能表达出基因编辑系统的DNA序列转入水稻，实现了对直链淀粉合成酶基因（Wx基因）启动子序列的定点编辑，从而获得了三个突变品系。各品系WxmRNA量的检测结果如下图所示。下列分析不合理的是（）

A.构建基因编辑系统的DNA重组载体所需的酶是限制酶和DNA连接酶B.Wx基因启动子序列的改变可能影响RNA聚合酶与启动子的识别和结合C.根据各品系WxmRNA量的检测结果，可推测品系3的糯性最强D.与野生型相比，3个突变品系中直链淀粉合成酶的氨基酸序列发生改变评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)10、老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β－淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降，某些基因的突变会导致β－淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术能用于老年痴呆症治疗的是（）A.胚胎移植技术B.胚胎干细胞技术C.单克隆抗体技术D.核移植技术11、下图是胚胎干细胞潜能示意图,相关叙述正确的是()

A.由细胞形态判断,4种细胞中细胞②最可能连续分裂B.胚胎干细胞能分化为各种细胞的实质是基因的选择性表达C.分化得到的各种细胞,功能不同的主要差异是特定蛋白不同D.定向诱导胚胎干细胞分化形成的组织或器官,进行自体移植可避免免疫排斥反应12、重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥；互为模板；经过多次PCR扩增。从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方而具有广泛的应用前景，下图表示利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。下列叙述正确的是（）

A.引物中G＋C的含量越高，引物与模板DNA结合的稳定性越高B.在第一阶段由于引物2和引物3发生碱基互补配对，因此两者置于不同反应系统中C.引物1、2组成的反应系统和引物3、4组成的反应系统中均进行一次复制，共产生4种双链DNA分子D.在引物1、2组成的反应系统中，经第一阶段要形成图示双链DNA，至少要经过3次复制13、下列有关利用不同材料进行“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是（）A.鸡血细胞液中，加入0．14mol/L的NaCl溶液有利于瓦解细胞膜B.洋葱鳞片叶碎片中，加入沐浴液和食盐后研磨有利于去除细胞壁C.鱼白（精巢）提取的DNA滤液中，加入嫩肉粉有利于去除蛋白质D.菜花提取的DNA滤液中，加入冷酒精有利于析出DNA14、MIC是指药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。某研究小组将含有相同浓度抗生素I~IV的四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的琼脂平板上，进行药敏试验以了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，用于指导临床合理选用抗生素。图1为实验器材，图2为实验结果。下列叙述正确的是（）

A.为获得长满测试菌的琼脂平板，需要使用图1中工具①②③B.据图2可知抗生素I的MIC大于抗生素皿的MICC.图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素IV的突变株D.图2抑菌圈中离纸片越近的菌落对抗生素IV的抗性越强15、为探究不同糖源（蜂蜜、黄冰糖）对蓝莓酒发酵产物的影响，某研究小组研发出如下的蓝莓酒发酵工艺，其中“主发酵”时酵母菌会繁殖、大部分糖的分解和代谢物会生成，“后发酵”是在低温、密闭的环境下蓝莓酒会成熟。下列叙述错误的是（）

A.菌种甲在产生CO2的同时会产生酒精B.切片后需对发酵液进行消毒然后再分组C.倒罐均需保留空间以促进菌种有氧呼吸D.主发酵要控制无氧，后发酵要控制有氧16、进行土壤中尿素分解菌的选择培养时，利用的培养基组分及含量如表所示。下列分析错误的是（）。组分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4•7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0gH2O定容至1000mL

A.KH2PO4和Na2HPO4既可为菌体提供无机盐，又可调节培养基的pHB.尿素既可为尿素分解菌提供氮源，又可对培养基中的微生物起选择作用C.琼脂既可为尿素分解菌提供碳源，又起到凝固剂的作用D.蒸馏水既可进行定容，又可对培养液进行稀释以便于计数17、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)18、平板划线法是通过____________在_______________培养基表面______________的操作，将__________的菌种______________分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由____________繁殖而来的肉眼可见的_______________，这就是_______________________。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的______________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到_____________培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成____________，从而能在培养基表面形成___________________。19、基因进入受体细胞的______——“分子运输车”20、第一步：______21、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以将_____________水解成_________________和________________。22、DNA粗提取与鉴定实验中，二苯胺要___________。23、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。评卷人得分四、实验题(共1题，共3分)24、单克隆抗体技术在生物工程中有着广泛的应用；下图1是单克隆抗体制备流程图，下图2是我国科研人员为了准确筛选没有明显表型特征的某种微生物所采用的流程图，图3是某双特异性抗体作用示意图，双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合。

（1）据图2分析，科研人员利用目标微生物编码膜蛋白的基因序列，构建____________________，并导入用__________处理的大肠杆菌细胞中；获取大量膜蛋白。

（2）已知细胞合成DNA有“D途径”和“S途径”两条途径，其中“D途径”能被氨基嘌呤阻断。兔子的已免疫的淋巴细胞有上述两种途径，但一般不分裂增殖；兔子的骨髓瘤细胞中只有“D途径”，但能不断分裂增殖。据此，图1所示的__________（填“HAT培养基”或“多孔板”）中添加氨基嘌呤可以达到筛选目的，其原理是______________________________。

（3）将上述带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合，目的是______________________________。

（4）与直接使用抗肿瘤药物相比，将抗肿瘤药物与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是________________________________________，体现的是双特异性单克隆抗体在__________方面的用途。评卷人得分五、综合题(共4题，共40分)25、新型冠状病凝肺炎（COVID-19）的病原体严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）是一种RNA病毒。回答下列问题。

（1）SARS-CoV-2的基因组测序工作由我国科学家率先完成。为提高准确率，检测样本中是否含有SARS-CoV-2，应选择其基因组中特有的_______（多选）的基因。

A.单个B.多个C.碱基序列稳定D.碱基序列易变。

（2）检测采集的样本中是否含有SARS-CoV-2的步骤如下：

①利用样本中获取的RNA得到cDNA.该过程需要使用________酶。

②利用PCR技术对上述cDNA进行扩增。PCR过程的原理是______，该过程需要在一定的缓冲溶液中才能进行，需提供DNA聚合酶、引物、______，同时通过控制温度使该过程在体外反复进行。扩增的过程包括______。

③对扩增后的cDNA进行荧光检测；过程如下图所示。DNA探针只能与特有的SARS-CoV-2基因中部分序列结合，DNA探针中R基团发出的荧光会被距离很近的Q基团吸收，不能发出荧光。在对结合有探针的cDNA扩增过程中，DNA聚合酶会将遇到的探针水解，使DNA探针上R基团与Q基团分离，R基团发出荧光。释放到溶液中的R基团达到一定量时，才能检测到发出的荧光。

样本中不含病毒时，检测不到荧光的原因是____________。当样本中病毒含量较少时，能检测到荧光值所需的扩增次数比病毒含量较多时___________（填“多”或“少”）。26、如果已知一小段DNA的序列；可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，具体流程如图（以EcoRⅠ酶切为例）：

请据图回答问题：

（1）步骤Ⅰ用的EcoRⅠ主要存在于_____生物中，限制酶存在于该类生物中的主要作用是_____。

（2）步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3′-羟基与5′-磷酸间形成_________；PCR每次循环一般可分为_____（按顺序书写）三步，其中第二步的目的是_____。

（3）若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是_____________（从引物①②③④中选择；填编号）。

。

DNA序列（虚线处省略了部分核苷酸序列）

已知序列。

PCR引物。

①5′-AACTATGCGCTCATGA-3′②5′-AGAGGCTACGCATTGC-3′

③5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′④5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′

（4）对PCR产物测序，经分析得到了片段F的完整序列。下列DNA单链序列中（虚线处省略了部分核苷酸序列），结果正确的是_____________。A．5′-AACTATGCGAGCCCTT-3′B．5′-TTGATACGCCGAGTAC-3′C．5′-GCAATGCGTTCGGGAA-3′D．5′-AATTCCATGCTGAATT-3′27、水稻的雄性不育植株是野生型水稻的隐性突变体（正常基因M突变为m）。雄性不育植株不能产生可育花粉；但能产生正常雌配子。

（1）水稻的花为两性花，自花授粉并结种子。在杂交育种时，雄性不育植株的优点是无需进行_____________；大大减轻了杂交操作的工作量。

（2）我国科研人员将紧密连锁不发生交换的三个基因M、P和R（P是与花粉代谢有关的基因，R为红色荧光蛋白基因）与Ti质粒连接，构建_____________，通过_____________法转入雄性不育水稻植株细胞中；获得转基因植株，如下图所示。

（3）向雄性不育植株转入M基因的目的是让转基因植株_____________。转基因植株自交后代中，雄性不育植株为_____________荧光植株，由无荧光植株和红色荧光植株的性状分离比为_____________，分析P基因的功能是_____________。

（4）雄性不育植株不能通过自交将雄性不育的特性传递给它的子代，而育种工作者构建出的转基因植株的特点是_______________________________________。

（5）不用担心转基因植株自交时，转基因植株中的M、P和R基因会随着花粉扩散，这是由于转基因植株_____________。28、枸杞果酒果香浓郁；保留了原果实中特有的营养成分；其生产流程大致如下。回答下列问题：

(1)果酒酿制过程中应适时排气，其原因是___________。果汁发酵后可用酸性重铬酸钾溶液来检验酒精是否产生，若观察到__________的颜色变化；则可说明有酒精产生。

(2)可采取___________法进行接种；以进行酵母菌的分离纯化。

(3)果酒酿造过程中如果果汁灭菌不合格，含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸?___________请说明理由：__________。

(4)枸杞汁调配过程中要控制初始糖浓度。实验发现，若初始糖浓度过高，所得果酒酒精浓度反而偏低。从酵母菌生长，繁殖的角度分析，其原因是__________。

(5)发酵后进行离心收集的目的是___________。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、D【分析】【分析】

胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；分析题图，①是体外受精过程，②是早期胚胎培养，③是胚胎分割，④是分割后胚胎的恢复，⑤是胚胎移植。

【详解】

A；①代表体外受精；体外受精前和体内受精前精子均需要获能，A错误；

B；②代表早期胚胎培养；可移植的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚，B错误；

C；③代表胚胎分割；在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，而桑椹胚阶段的胚胎还未形成内细胞团，C错误；

D；⑤代表胚胎移植；胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关，要对供体、受体进行同期发情处理，使供体和受体的生理状态相同，D正确。

故选D。2、A【分析】【分析】

分析题图：图示是利用蛋白质工程设计速效胰岛素的生产过程。蛋白质工程的过程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）。蛋白质工程得到的蛋白质一般不是天然存在的蛋白质。

【详解】

A；根据蛋白质工程的过程；构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键，而构建新的胰岛素模型的主要依据就是新的胰岛素的预期功能，A正确；

B；若要利用大肠杆菌生产新的胰岛素；常用感受态法导入目的基因，B错误；

C；新胰岛素基因和人体胰岛素基因不同；新的胰岛素生产过程中涉及中心法则，C错误；

D；新的胰岛素功能的发挥必须依赖于胰岛素蛋白质正确的高级结构；D错误。

故选A。3、D【分析】【分析】

1；动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

2；用胰蛋白酶而不用胃蛋白酶的原因：胃蛋白酶作用的适宜pH约为2；当pH大于6时，就失去活性，胰蛋白酶作用的pH为7.2-8.4，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2-7.4。

【详解】

A；在利用动物组织块制备细胞悬液时；可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，以消化组织细胞间的蛋白质，得到单个细胞，A正确；

B；细胞贴壁是指悬浮液中分散的细胞很快就贴在瓶壁上的现象；体现了细胞的适应性，B正确；

C；原代培养一般传代1～10代；细胞的遗传物质不会发生改变，能够保持二倍体核型，C正确;

D、细胞培养在含混合气体的培养箱中，其中的CO2可调节培养液的pH值；D错误。

故选D。

【点睛】4、C【分析】【分析】

参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理:当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；由于酵母菌适宜生长的温度是18~30℃；因此制葡萄酒时，要将温度控制在18~30℃，A正确;

B；醋酸菌的最适生长温度为30～35℃；故果醋发酵时温度宜控制在30-35℃，B正确；

C；腐乳发酵时；毛霉中蛋白酶的合成除了需要核糖体参与，还需要线粒体提供能量，C错误；

D；泡菜腌制过程中；温度高更容易发酵，故夏季的发酵时间比冬季的短，D正确。

故选C。5、D【分析】【分析】

果醋制作原理：利用醋酸菌有氧呼吸将葡萄糖或者乙醇转化为醋酸。泡菜（酸菜）的制作原理：在无氧条件下；乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。腐乳制作的原理：多种微生物参与了豆腐的发酵，如毛霉；曲霉、根霉、酵母菌等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。在多种微生物的协同作用下，普通的豆腐转变成风味独特的腐乳。

【详解】

A；当糖源不足（果酒制作时已经将糖源分解）时；醋酸菌可将酒精变成乙醛，再将乙醛最终转变成醋酸，A错误；

B；泡菜利用的是乳酸菌；B错误；

C；制作果酒利用的是酵母菌；其最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃，而制作果醋利用的是醋酸菌，其最适生长温度为30～35℃，故欲将果酒制备成果醋，制备时需要将温度升高，同时还需通入充足的氧气，C错误；

D；酸奶发酵所需的菌种是醋酸菌；无氧呼吸可产生乳酸，酸奶发酵时，溶液pH值逐渐降低，是乳酸菌无氧呼吸产生的乳酸造成的，D正确。

故选D。6、B【分析】【分析】

据题干分析可知；当微生物产生纤维素酶以后，就无法产生红色复合物，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，透明圈直径越大，其分解纤维素酶的能力越强。从甲乙两个培养基中微生物周围的透明圈可知，甲；乙两种微生物均能产生纤维素酶，但甲菌种周围的透明圈直径大于乙菌种，因此甲菌种分解纤维素的能力更强。

【详解】

A；甲乙培养基中出现菌落；菌落只能在固体培养基中形成，且实验探究甲、乙两种微生物能否产生纤维素酶，所以以纤维素为唯一碳源，A正确；

B；甲、乙菌种周围都出现透明圈；即两种微生物都能产生纤维素酶，但甲菌种周围透明圈直径大于乙菌种，甲菌的分解能力较强，B错误；

C；刚果红不能与纤维素分解后产生的葡萄糖形成红色复合物；所以能分解纤维素的微生物周围出现透明圈，C正确；

D；透明圈较大说明降解纤维素的能力越强；因此要筛选出高效降解菌株，应从透明圈较大的菌落中挑取微生物接种，D正确。

故选B。7、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因等。载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存，②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入，③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（3）将目的基因导入受体细胞：将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；根据图中目的基因两端的黏性未端以及各种限制酶的的切制位点可知；在构建重组质粒时，选用限制酶Xmal和BglⅡ切割质粒，才能与目的基因t-PA改良基因高效连接，A正确；

B；将t-PA改良基因与质粒连接的酶是DNA连接酶；不是DNA聚合酶，B错误；

C；在构建重组质粒时；其中的新霉素抗性基因没有被破坏，因此可以根据对新霉素的抗性将成功导入质粒的大肠杆菌筛选出来，即该基因的作用是便于将成功导入质粒的大肠杆菌筛选出来，C正确；

D；重组质粒已经破坏了mlacZ基因；其不会表达产物，即细胞呈白色。所以，在加入新霉素的培养基中选择呈白色的菌落选育工程菌株，D正确。

故选B。8、A【分析】【分析】

基因表达包括转录和翻译两个过程；其中转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，该过程主要在细胞核中进行，需要解旋酶和RNA聚合酶参与；翻译是以mRNA为模板合成蛋白质的过程，该过程发生在核糖体上，需要以氨基酸为原料，还需要酶；能量和tRNA等。

【详解】

A；GUS基因是有遗传效应的DNA片段；DNA的基本单位是脱氧核苷酸，A错误；

B；β-葡萄糖苷酸酶的本质是蛋白质；GUS基因编码β-葡萄糖苷酸酶合成的过程包括转录（以基因的一条链为模板合成RNA）和翻译（以mRNA为模板合成蛋白质），B正确；

C；GUS基因作为一种报告基因；能够在适宜条件下产生蓝色物质，故GUS基因和外源基因融合后导入受体细胞，可通过蓝色的产生情况观察表达情况，C正确；

D；GUS基因可编码β-葡萄糖苷酸酶；β-葡萄糖苷酸酶可催化特定底物水解，产生蓝色化合物，将GUS基因和外源基因融合后导入受体细胞，理论上蓝色的深浅可表示外源基因表达量的多少，D正确。

故选A。9、D【分析】【分析】

根据题干信息“将能表达出基因编辑系统的DNA序列转入水稻；实现了对直链淀粉合成酶基因（Wx基因）启动子序列的定点编辑，从而获得了三个突变品系”，说明突变品系的获得是由于启动子发生改变，启动子位于编码区是RNA聚合酶结合的位点。

根据图中信息；品系3的WxmRNA含量最低，说明其直链淀粉合成酶基因表达量最少。

【详解】

A；将目的基因与Ti质粒构建基因表达载体时；需要限制酶的切割，将目的基因插入载体时需要DNA连接酶的连接，A正确；

B；启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点；如果启动子序列改变将会影响RNA聚合酶与之结合和识别，进而影响基因的转录水平，B正确；

C；图中品系3的Wx基因的mRNA的含量最少；那么合成的直链淀粉酶最少，直链淀粉合成量最少，因此该水稻胚乳中含的直链淀粉比例最小，糯性最强，C正确；

D；在真核生物中；编码蛋白质的序列是基因中编码区，编码区中不包括启动子序列，因此直链淀粉合成酶的基因碱基序列中不含有启动子，因此3个突变品系中Wx基因中控制合成直链淀粉酶的氨基酸序列不发生改变，D错误。

故选D。

【点睛】二、多选题(共8题，共16分)10、B:C【分析】【分析】

根据题意；治疗老年痴呆症的思路有，通过生产抗体对抗患者体内的β－淀粉样蛋白体积累，通过增殖补充损伤死亡的神经元改善患者的情况。

【详解】

A；胚胎移植技术只可用于培养新的个体；对该疾病无应用意义，A错误；

B；胚胎干细胞技术可以培养诱导增殖新的神经元；有可能用于治疗该疾病，B正确；

C；单克隆抗体技术可以用于生产抗体对抗患者体内的β－淀粉样蛋白体；有助于治疗该疾病，C正确；

D；核移植技术主要运用于克隆动物等；对该病没有实际应用意义，D错误。

故选BC。11、A:B:C:D【分析】【分析】

干细胞：在个体发育过程中；通常把那些具有自我复制能力，并能在一定条件下分化形成一种以上类型的细胞的多潜能细胞称为干细胞。

（1）全能干细胞：如胚胎干细胞；

（2）多能干细胞：如造血干细胞；

（3）专能干细胞：如骨髓瘤细胞；皮肤生发层干细胞。

【详解】

A；由细胞形态判断；①为精细胞，③为肌肉细胞，④为神经细胞，这3种细胞都是高度分化的细胞，所以推测图示4种细胞中细胞②分化程度最低，最可能连续分裂，A正确；

B；胚胎干细胞分化为各种细胞的实质是基因的选择性表达；B正确；

C；分化得到的各种细胞；功能不同的主要差异是特定蛋白不同，C正确；

D；定向诱导胚胎干细胞分化形成的组织或器官；进行自体移植可避免免疫排斥反应，D正确。

故选ABCD。

【点睛】12、A:B【分析】【分析】

PCR扩增运用DNA分子复制的原理；经过变性；复性、延伸，最终获得大量DNA的过程。

【详解】

A；引物中G＋C的含量越高；C和G之间是三个氢键连接，因此引物与模板DNA结合的稳定性越高，A正确；

B；图中可知；引物2和引物3分别作用同一段DNA的两条链，会发生碱基互补配对，因此两者置于不同反应系统中，B正确；

C；引物1、2组成的反应系统和引物3、4组成的反应系统中均进行一次复制；共产生2种双链DNA分子，C错误；

D；在引物1、2组成的反应系统中；经第一阶段要形成图示双链DNA，至少要经过2次复制，D错误。

故选AB。13、C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：1；DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化钠中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。

2；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。

3；DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；鸡血细胞液加入蒸馏水；使得鸡血细胞的细胞膜吸水涨破，A错误；

B；洋葱鳞片叶碎片中；加入沐浴液有利于去除细胞膜，食盐能溶解DNA，B错误；

C；向DNA粗提取物中加入嫩肉粉；嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能破坏其中的蛋白质，有利于去除蛋白质，获得较纯净DNA，C正确；

D；由于DNA不溶于酒精；蛋白质溶于酒精，因此需向DNA滤液中加入冷酒精有利于析出DNA，一步纯化DNA，D正确。

故选CD。

【点睛】14、A:B:C【分析】【分析】

1；平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

2；稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后形成单个菌落。

【详解】

A；为获得长满测试菌的琼脂平板；需要用到的接种方法是稀释涂布平板法。稀释涂布平板法需要用到酒精灯、涂布器和培养基，A正确；

B；MIC是指药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。含有相同浓度抗生素Ⅰ～Ⅳ的四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的琼脂平板上；抗生素Ⅰ的抑菌圈比抗生素Ⅲ的抑菌圈小。说明抗生素Ⅰ的MIC大于抗生素Ⅲ的MIC。即想要达到和抗生素Ⅲ相同的抑菌效果抗生素Ⅰ要增加浓度才行，B正确；

C；图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素Ⅳ的突变株；这些突变株在抗生素的环境下能够存活并繁殖形成菌落。细菌是原核生物，发生变异最可能是基因突变，C正确；

D；在抑菌圈中出现的菌落都是对该种抗生素具有抗性的菌株；它们之间抗性的强弱无法根据题干信息进行判断。如果要判断它们之间抗性的强弱还需进一步实验才能确定，D错误。

故选ABC。

【点睛】

本题考查的知识点包括：微生物接种，微生物培养及微生物的应用。15、A:C:D【分析】【分析】

酵母菌是一类单细胞真菌；能以多种糖类作为营养物质和能量的来源，因此在一些含糖量较高的水果；蔬菜表面经常可以发现酵母菌的存在。酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28℃。

【详解】

A、发酵产生果酒的菌种是酵母菌，酵母菌在有氧呼吸产生CO2；但不产生酒精，A错误；

B；切片后对发酵液进行消毒；防止杂菌污染，再进行分组，B正确；

C；压榨倒罐用于主发酵需保留空间以促进酵母菌的有氧呼吸；二次倒罐时菌种是进行无氧呼吸，C错误；

D；主发酵先有氧促进酵母菌大量繁殖；后无氧进行酒精发酵，后发酵要控制无氧，D错误。

故选ACD。16、C:D【分析】【分析】

实验室的培养基按照功能划分；可以分为选择培养基和鉴别培养基。选择培养基是在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。

【详解】

A、KH2PO4和Na2HPO4可为尿素分解菌提供无机盐，H2PO4-和HPO42-又是一种调节pH的缓冲对；A正确；

B；培养基中除了尿素无其他含氮物质；只有尿素分解菌能通过分解尿素进行生长繁殖，故尿素既能为尿素分解菌提供氮源，又可对培养基中的微生物起选择作用，B正确；

C；琼脂不能被微生物利用；只能充当凝固剂，C错误；

D、表中的H2O为蒸馏水；起定容作用，蒸馏水不能对培养液进行稀释，稀释所用的溶剂应该是无菌水，D错误。

故选CD。17、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。三、填空题(共6题，共12分)18、略

【解析】①.接种环②.琼脂固体③.连续划线④.聚集⑤.逐步稀释⑥.一个细胞⑦.子细胞群体⑧.菌落⑨.梯度稀释⑩.琼脂固体⑪.单个细胞⑫.单个的菌落19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】载体20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因的获取21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】现配现用23、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。四、实验题(共1题，共3分)24、略

【分析】【分析】

单克隆抗体制备过程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

（1）

据图分析，科研人员利用基因工程将目标微生物编码膜蛋白的基因序列，构建基因表达载体，并导入用CaCl2处理的大肠杆菌细胞中；使目的基因增殖并表达可获取大量膜蛋白。

（2）

杂交瘤细胞由淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成；其合成DNA有“D途径”和“S途径”两条途径。“HAT培养基”有筛选作用，在添加了氨基喋吟的HAT培养基中，杂交瘤细胞“D途径”虽然被氨基嘌呤阻断，但可通过“S途径”合成DNA，不断分裂增殖；而淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力，而不能在HAT培养基中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在HAT培养基中因DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制，也不生长。

（3）

带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合；可起到标记目标微生物的作用。

（4）

双特异性单克隆抗体借助单克隆抗体的导向作用；能将药物定向带到癌细胞所在的位置，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。体现的是双特异性单克隆抗体在治疗疾病方面起到运载药物的用途。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程和动物细胞的培养，意在考查学生对所学知识的理解与掌握程度，培养了学生分析图示、获取信息、解决问题的综合应用的能力。【解析】（1）基因的表达载体Ca2+或CaCl2

（2）HAT培养基淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力；故不能在HAT培养基中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在HAT培养基中因DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制，而不生长。

（3）标记目标微生物。

（4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到肿瘤细胞所在位置，在原位杀死癌细胞治疗疾病（运载药物）五、综合题(共4题，共40分)25、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

PCR反应过程是：变性→复性→延伸。

【详解】

（1）为提高基因组测序的准确率；应该选择基因组中特有的多个基因，且需要碱基序列稳定不变。

（2）①RNA到cDNA是逆转录过程；因此需要逆转录酶；

②PCR的基本原理是DNA半保留复制，以需要扩增的DNA为模板，以一对分别与模板的5'和3'末端相互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，重复这一过程，即可使目的DNA片段得到扩增。PCR的基本步骤包括：a变性：将反应系统加热至95°C，使模板DNA全部变性变成单链DNA。b退火：将温度下降至适当温度；使引物与模板DNA退火结合。c延伸：将温度升至72°C，DNA聚合酶以脱氧核糖核苷酸为底物催化DNA的合成反应。上述三个步骤称为一个循环，这样的循环重复25~30次，就可以得到大量的目标DNA，因此需要提供DNA聚合酶；引物、模板以及四种脱氧核糖核苷酸。

③当样本中不含病毒时；检测不到荧光是因为探针无法和SARS-CoV-2基因中的序列结合，不会被水解，不会发出荧光；当样本中病毒含量少时，需要多扩增，使R基因达到一定量，才能被检测，病毒含量高时，特有的SARS-CoV-2基因多，只需要扩增一点，因此病毒含量少时需要扩增次数多。

【点睛】

本题考查了PCR技术的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。【解析】BC逆转录DNA复制模板和4种脱氧核苷酸（或“模板和dNTP”）变性、退火、延伸探针无法和SARS-CoV-2基因中的序列结合，不会被水解，不会发出荧光多26、略

【分析】【分析】

1.限制酶主要从原核生物中分离纯化出来。限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。限制酶处理双链DNA后形成黏性末端或平末端。

2.PCR扩增过程中；在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。

（1）

步骤Ⅰ用的EcoRⅠ是一种限制酶；主要存在于原核生物中，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，进而在特定部位将双链DNA切开，显然限制酶在原核生物中能切割外源DNA，保证自身安全。

（2）

步骤Ⅱ用的是DNA连接酶；DNA连接酶催化形成的是磷酸二酯键，即催化相邻核苷酸之间的3′-羟基与5′-磷酸间形成磷酸二酯键；PCR循环包括变性；复性和延伸三步，该过程中升温到95℃是为了使DNA变性解旋，进而获得DNA单链，其中第二步复性是指引物与两条模板DNA单链结合，进而为后续的延伸做准备。

（3）

由于DNA聚合酶只能从5′→3′方向催化子链延伸；根据碱基互补配对原则可知，引物①是以目的基因下边一条链的左端为模板向右侧延伸，引物②是以目的基因上边一条链为模板的右端向左侧延伸，引物③是以目的基因下边那条链的右端为模板向右侧延伸，引物④是以目的基因上边那条链的左端为模板向左侧延伸，本题的目的是要扩增已知序列两侧的未知序列，因此，应该选择引物③和④。

（4）

以下选项中；A；B、C都是已知序列，只有D是未知序列，而要测定的是未知序列，故选D。

【点睛】

熟知熟知P