出血和血栓性疾病的检验（血液学检验技术课件）

血管壁和血小板检验目录/Contents0102004血管壁的止血作用与检验血小板的止血作用与检验检验技师考试大纲--骨髓项检查知识点要点要求血管壁的止血作用与检验血管壁的结构与调控掌握血管壁止血功能掌握血管壁检验掌握血小板的止血作用与检验血小板结构及特点掌握血小板生化组成、代谢掌握血小板止血功能掌握01血管壁的止血作用与检验血管壁的止血作用与检验血管壁的结构血管壁的结构内层单层内皮细胞表面含有肝素类物质基底膜中层平滑肌细胞动脉较厚，静脉较薄，毛细血管没有外层结缔组织血管壁的止血作用与检验血管壁的的止血功能激活血小板激活凝血过程抗血栓特性收缩反应血管壁的止血作用与检验血管壁的止血作用与检验血管壁（内皮）检验血管的止血作用主要是由血管内膜层主导，血管与血小板共同完成机体的一期止血（初期止血）。主要涉及血管壁、血管内皮细胞功能、血小板的数量与功能。主要的实验：毛细血管脆性试验：毛细血管结构和功能、血小板的质和量出血时间测定：皮肤毛细血管被刺破后，自然出血到自然止血所需时间。反应毛细血管的完整性与收缩功能、血小板的数量与功能、血管内皮细胞的功能、血管周围结缔组织成分。血管性血友病因子测定：介导血小板粘附，因子Ⅷ的载体；火箭电泳法和酶联免疫吸附法凝血酶调节蛋白测定：放射免疫法血浆6-酮-前列腺素F1α测定：是血管内皮细胞膜上PGG2和PGH2代谢的终末产物；ELISA02血小板的止血作用与检验血小板的止血作用与检验血小板由骨髓中成熟巨核细胞的胞质分割生成，是哺乳动物血液中体积最小的血细胞，寿命为7-10天。血小板在止血、伤口愈合、炎症反应、血栓形成及器官移植排斥反应等生理和病理过程中有重要作用。血小板的止血作用与检验血小板的结构血小板表面结构血小板膜，磷脂是脂膜的基本结构，其中磷脂酰丝氨酸(PS)是促进血液凝固的重要成分，当血小板发生活化时，PS转向外侧面，此时称为血小板第三因子（PF3）。细胞外衣，覆盖在血小板细胞膜外，由各种糖蛋白及与之相连的糖链部分构成。构成的各种血小板受体如胶原受体、凝血酶受体、vWF受体、纤维蛋白原受体和ADP受体等开放管道系统为血小板膜内陷入胞浆中形成的，管道的膜与血小板膜相连续溶胶质层结构由微管、微丝、致密管道系统等组成细胞器内含物结构主要致密颗粒和α-颗粒、溶酶体组成血小板的止血作用与检验血小板的花生四烯酸代谢血管内皮细胞内完成2～3min后前列环素合成酶血栓烷A2合成酶环氧化酶花生四烯酸膜磷脂磷脂酶A2前列腺素环内过氧化物PGG2过氧化物酶前列腺素环内过氧化物PGH2前列环素（PGI2）血栓烷A2（TXA2）30s后6-酮-PGF1α（稳定产物）血栓烷B2（TXB2）（稳定产物）血小板内完成血小板的花生四烯酸途径是血小板发挥止血功能的主要代谢基础。花生四烯酸是膜磷脂代谢产物。血小板的止血作用与检验血小板的止血功能血小板粘附促凝作用血小板聚集释放反应血块收缩血小板的止血作用与检验ADP血小板进一步激活、释放血块收缩内皮损伤（内皮下组织暴露）血小板粘附血小板初期释放ADP等血小板聚集纤维蛋白形成坚固的凝血块血小板促凝作用5-HT血小板的主要释放产物类别成分活性胺5-HT，组胺，肾上腺素，去甲肾上腺素腺嘌呤核苷酸ADP,ATP,cAMP阳离子Ca2+,K+血小板因子PF3,PF4等凝血因子凝血因子I，V，VIII，XIII血小板蛋白β-TG，血小板糖蛋白等血栓烷TXA2血小板的止血作用与检验促凝用实验室检查血小板粘附实验（PAdT）是判断血小板粘附能力的常用指标。试验利用血小板在体外可黏附于玻璃表面的原理设计，测定方法有多种，包括玻珠柱法、玻球法等。血小板粘附率减低见于先天性和继发性血小板功能异常（以后者多见），如血管性血友病、巨大血小板综合征、爱-唐综合征、低（无）纤维蛋白血症、异常纤维蛋白血症、急性白血病、骨髓增生异常综合征、骨髓增殖性疾病、肝硬化、尿毒症、服用抗血小板药物等；增高见于血栓前状态和血栓形成性疾病，如高血压病、糖尿病、妊娠高血压综合征、肾小球肾炎、肾病综合征、心脏瓣膜置换术后、心绞痛、心肌梗死、脑梗死、深静脉血栓形成、口服避孕药等。血小板的止血作用与检验促凝用实验室检查血小板聚集试验PPP1000r/min离心10minPRP剩余血液以3000r/min离心20min血小板的止血作用与检验促凝用实验室检查血小板聚集试验最大聚集率达到最大幅度时间达到1/2最大幅度时间2分钟的幅度延迟时间斜率参数血小板聚集曲线血小板的止血作用与检验促凝用实验室检查血小板聚集试验升高见于血小板无力症、血小板贮存池病、血管性血友病、巨大血小板综合征、低（无）纤维蛋白原血症、肝硬化、尿毒症、维生素B12缺乏症、细菌性心内膜炎、急性白血病、骨髓增生异常综合征、骨髓增殖性疾病、特发性血小板减少性紫癜、服用抗血小板药物等。减低见于血液高凝状态和（或）血栓形成性疾病血小板的止血作用与检验促凝用实验室检查血小板第3因子有效性测定（PF3aT）组别患者血浆（ml）正常血浆（ml）PRPPPPPRPPPP10.10.120.10.130.10.140.10.1采集待测和正常对照血样各一份制备PRP、PPP离心37ºC水浴预温2min记录时间20min白陶土悬液0.2ml加入0.025mol/L氯化钙0.2ml测定凝固时间血小板的止血作用与检验促凝用实验室检查血小板第3因子有效性测定（PF3aT）第1组较第2组延长如超过5s以上，即为PF3有效性减低。第3组、第4组分别为患者和正常人（作为对照管），患者PF3有缺陷或内源凝血因子有缺陷时（如血友病），第3组凝固时间比第4组长。升高见于先天性血小板PF3缺乏症、血小板无力症、巨大血小板综合征、肝硬化、尿毒症、弥散性血管内凝血、系统性红斑狼疮、特发性血小板减少性紫癜、骨髓增生异常综合征、急性白血病及服用抗血小板药物等。减低常见于高脂血症、动脉粥样硬化、心肌梗死、糖尿病伴血管病变等。血小板的止血作用与检验促凝用实验室检查血小板自身抗体测定血小板相关免疫球蛋白特异性膜糖蛋白自身抗体药物相关自身抗体抗同种血小板抗体判断血小板减少的原因ELISA法流式细胞术诊断特发性血小板减少性紫癜（ITP）的指标之一凝血因子检查目录/Contents010203凝血机制凝血象四项检查抗凝物质及检验检验技师考试大纲--血栓与止血的基本理论知识点要点要求凝血机制凝血因子种类、特性掌握凝血机制（内源凝血途径、外源凝血途径）掌握凝血象四项检查原理掌握临床意义掌握抗凝物质及检验种类掌握检验原理掌握临床意义掌握01凝血机制凝血机制凝血因子

14个：12个经典凝血因子激肽释放酶原高分子量激肽原依赖维生素K的凝血因子接触凝血因子对凝血酶敏感的凝血因子其他凝血因子分四类凝血机制依赖维生K的凝血因子因子Ⅱ因子Ⅶ因子Ⅸ因子ⅩⅩ凝血因子凝血机制凝血因子接触凝血因子因子Ⅻ因子Ⅺ激肽释放酶原高分子量激肽原凝血机制凝血因子对凝血酶敏感的凝血因子因子Ⅰ因子Ⅴ因子Ⅷ因子ⅩⅢ凝血机制凝血因子对凝血酶敏感的凝血因子因子Ⅰ因子Ⅴ因子Ⅷ因子ⅩⅢ凝血机制瀑布学说该学说认为凝血过程是一系列的酶促反应过程，每个凝血因子都被其前一因子所激活，最后生成纤维蛋白。该过程分为内源凝血途径和外源凝血途径两条途径的主要区别在于启动方式和参与的凝血因子不同，结果形成两条不同的因子X激活通路。现在认为两条凝血途径并不是各自独立，而是相互密切联系，在整个凝血过程中可能发挥不同的作用。凝血机制瀑布学说凝血机制1、钙的参与：在Ⅹ和ⅩⅢa的上下。2、内源凝血途径：是Ⅻ被激活到Ⅹa形成的过程。（1）Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ＝2、1、-1（2）血友病11、9、8＝丙、乙、甲（3）8＋9→103、外源凝血途径：Ⅲ的释放到Ⅹa形成的过程。3＋7＝104、共同凝血途径：（1）凝血活酶形成：Ⅹa－Ⅴa－Ca－PF3（活十五、钙血三）。（2）凝血酶形成：活化的Ⅱ因子（Ⅱa）（3）纤维蛋白的形成。5、内源凝血系统：从内源凝血途径启动到纤维蛋白形成称之；外源凝血系统：从外源凝血途径启动到纤维蛋白形成称之6、血液凝固是诸多凝血因子逐个被激活的一系列酶促反应，最后形成纤维蛋白而使血液凝固。凝血机制血液凝固机制Ca2+激肽释放酶激肽释放酶原ⅫⅫa接触ⅪⅪaⅨvWFⅧⅨaCa2+Ⅷa组织因子：TFTFCa2+ⅦaⅦⅩⅤⅡⅡaⅩⅢⅩⅢa纤维蛋白原纤维蛋白单体可溶性纤维蛋白Ca2+交联纤维蛋白转化作用ＸaCa2+Ⅴa02凝血象四项检查凝血象四项检查（一）内源性凝血途径凝血因子检测

1、凝血时间测定（CT）

2、活化部分凝血活酶时间测定（APTT）

（二）外源性凝血途径凝血因子检测

血浆凝血酶原时间测定（PT）

（三）共同凝血途径凝血因子检测

1、血浆凝血酶时间（TT）

2、血浆纤维蛋白原测定（Fg）

3、血浆纤维蛋白（原）降解产物测定（FDP）

4、血浆D-二聚体测定凝血象四项检查活化部分凝血活酶时间测定（APTT）是在受检血浆中加入接触因子激活剂（白陶土）和部分凝血活酶（脑磷脂，代替血小板），在Ca2+的参与下，观察血浆凝固的时间。本试验是反映内源性凝血系统凝血状况的筛选试验。凝血象四项检查参考值

男性：37±3.3s（31.5～43.5s）；

女性：37.5±2.8s（32～43s），

受检者的测定值较正常对照值延长10s以上才有病理意义。临床意义

轻型血友病vWD肝病DIC等纤溶亢进血中抗凝物质水平增高肝素治疗的监测指标APTT延长凝血象四项检查血浆凝血酶原时间测定（PT）是在受检血浆中加入过量的组织凝血活酶和Ca2+，观测血浆的凝固时间。PT的长短反映了血浆中凝血酶原、纤维蛋白原和因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的水平.

本试验是外源性凝血系统常用的筛选试验。凝血象四项检查组织凝血活酶的国际敏感指数（ISI）：表示标准品组织凝血活酶与每批组织凝血活酶PT校正曲线的斜率。国际标准化比值（INR）：WHO规定对口服抗凝剂患者必须使用国际标准化比值（INR）作为PT报告形式，并用以作为抗凝治疗监护的指标。

INR=（PT病人/PT正常人）ISI凝血酶原时间比值（PTR）

PTR=受检者PT值（s）/正常对照PT值（s）凝血象四项检查参考值凝血酶原时间（PT）：（12±1）s，

男性11～13.7s，女性11～14.3s，

超过正常对照值3s为异常。凝血酶原时间比值（PTR）

PTR=受检者PT值（s）/正常对照PT值（s）,参考值为0.82～1.15。国际标准化比值（INR）参考值为1.0±0.1。凝血象四项检查注意事项：1.采血应顺利，避免溶血、凝固，血液与抗凝剂比例要准确。及时离心，3000r/min，离心10min，除去血小板。2.采血后应在1h内测定完毕，4℃冰箱保存不应超过4h。3.测定温度应控制在37±1℃。4.质控要求①双份测定的PT值相差应小于5%，否则应重做。②正常参比血浆PT值在X±2S限内，CV≤6%。凝血象四项检查临床意义

1.PT延长

①先天性凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏，如先天性某因子缺乏症和低（无）纤维蛋白原血症。

②获得性凝血因子缺乏，如严重肝病、维生素K缺乏、纤溶亢进、DIC晚期、口服抗凝剂及异常凝血酶原增加等。

③血循环中抗凝物质增加，如肝素或FDP等。2.PT缩短

见于血液高凝状态如DIC早期，心肌梗死、脑血栓形成，多发性骨髓瘤等。3.INR

是用于监测口服抗凝药的首选指标，以INR为2.0～3.0为宜。凝血象四项检查血浆凝血酶时间测定（TT）是在待检血浆中加入“标准化”的凝血酶溶液后，到血浆凝固所需时间，当待测血浆中抗凝物质增多时，凝血酶时间延长。凝血酶纤维蛋白原纤维蛋白凝血象四项检查临床意义1.TT延长：主要用于循环抗凝物质的检查，见于血浆中肝素或肝素类抗凝物质存在，如肝素治疗时、放疗后、过敏性休克、DIC晚期、系统性红斑狼疮、肝病及肾病等。2.TT缩短：常见于血样本中有微小凝块或Ca2+存在时。3.在使用链激酶，尿激酶作溶栓治疗时，可用TT作为监护指标，以控制在正常值2～5倍为宜。凝血象四项检查血浆纤维蛋白原测定(Fg)在一定条件下（如加Ca2+、凝血酶及加热等），使血浆纤维蛋白原（Fg）转变成纤维蛋白或凝集，然后利用比色或比浊的原理检测并计算出Fg的含量。参考值：2～4g/L凝血象四项检查临床意义

1.Fg增高

见于糖尿病、急性心肌梗死、多发性骨髓瘤及血栓前状态。肾病综合征，风湿热，恶性肿瘤及风湿性关节炎。肺炎、轻型肝炎、胆囊炎、肺结核及长期的局部炎症。另外，如外科手术、放射治疗、月经期及妊娠期可见轻度增高。2.Fg减低

见于原发性纤维蛋白原减少性疾病、DIC晚期、原发性纤溶症、重症肝炎及肝硬化等。03抗凝物质及检验抗凝物质及检验由于血液中的抗凝与纤溶系统的作用，正常生理情况下，即使有少量的凝血因子被激活或促凝物质进入血液循环，血液也不会凝固，保证了血液在血循环中正常运行。正常抗凝细胞抗凝单核-巨噬细胞吞噬血循环中的TF、凝血酶、FDP；肝脏摄取和灭活被激活的凝血因子，和血管内皮细胞释放凝血抑制物发挥抗凝作用体液抗凝血浆中存在的多种蛋白酶抑制物，主要包括抗凝血酶、蛋白C系统、组织因子途径抑制物等抗凝物质及检验抗凝血酶（AT）由肝、血管内皮细胞和巨核细胞合成的一种单链糖蛋白，属于α2球蛋白。AT是肝素依赖的丝氨酸蛋白酶抑制物，抑酶谱很广，能抑制FIIa、FVIIa、FIXa、Fxa、FXIIa以及纤溶酶、胰蛋白酶和激肽释放酶等。AT具备2个结合位点，其一与肝素结合，另一位点与上述酶结合。肝素与AT结合后，导致AT构型发生改变，后者可与这些酶活性中心的丝氨酸残基结合，“封闭”了这些酶的活性中心而使之失活。此时肝素可从复合物中重新释出，再与其他游离的AT结合，继续发挥肝素增强AT抗凝功能的作用，肝素的这种增强抗凝作用可被鱼精蛋白的和甲苯胺蓝所中和。

抗凝物质及检验蛋白C系统

由蛋白C（PC）、凝血酶调节蛋白（TM）、蛋白S（PS）、活化蛋白C抑制物（APCI）和内皮细胞蛋白C受体（EPCR）。肝脏内皮细胞PC、PS凝血酶+凝血酶调节蛋白复合物APCTM、EPCR蛋白S协同裂解Ⅴa、Ⅷa，抑制Ｘa与血小板膜磷脂结合。抗凝物质及检验组织因子途径抑制物:是一种单链糖蛋白.TFPI血小板单核细胞脂蛋白结合TFPI＋脂蛋白复合物游离TFPIⅦaⅩaTF-ⅦaⅦ内皮细胞抗凝物质及检验抗凝物质病理性肝素及类肝素物质狼疮抗凝物质生理性肝素辅因子a1-抗胰蛋白酶a2-巨球蛋白抗凝物质及检验检验抗凝血酶活性及抗原测定蛋白C活性及抗原测定蛋白S抗原测定组织因子途径抑制物活性及抗原测定凝血酶时间及其纠正试验普通肝素和低分子量肝素测定复钙交叉试验凝血因子Ⅷ抑制物测定纤维蛋白溶解系统及检验知识目标:

能说出纤溶系统的组成、纤溶的基本过程能力目标:

会分析纤溶系统检验项目素质目标:

养成良好的职业素质和细心严谨的工作作风纤维蛋白溶解系统及检验纤溶系统纤溶酶原激活物组织纤溶酶原激活物尿激酶样纤溶酶原激活物纤溶酶原纤溶抑制物纤溶酶原激活物抑制剂纤溶酶抑制物一、纤溶系统的组成纤维蛋白溶解系统及检验二、纤维蛋白溶解机制纤溶酶原纤溶酶原激活物

纤溶酶原激活抑制物纤溶酶纤溶酶抑制物纤维蛋白(原)纤维蛋白降解产物纤维蛋白溶解系统及检验二、纤维蛋白溶解机制纤维蛋白溶解系统及检验二、纤维蛋白溶解机制纤维蛋白溶解系统及检验三、纤维蛋白系统的检验

（一）优球蛋白溶解时间测定

（二）血浆D-二聚体测定纤维蛋白溶解系统及检验优球蛋白溶解时间测定蒸馏水7.5ml和1%醋酸溶液0.12ml置冰浴快速分离血浆置冰浴10min3000r/min离心5min硼酸盐缓冲0.5ml37℃水浴0.025mol/L氯化钙溶液0.5ml凝固时计时置37℃水浴ELT纤维蛋白溶解系统及检验优球蛋白溶解时间测定表明纤溶活性减低，见于血栓形成前期和血栓形成性疾病。ELT延长表明纤溶活性增强，见于原发性和继发性（DIC）纤溶亢进。但在DIC早期尚未发生继发性纤溶亢进是，或当纤溶极度亢进，纤溶酶绝大部分已被消化时，可为阴性。ELT缩短参考区间

加钙法:129min48s±4min6s纤维蛋白溶解系统及检验血浆D-二聚体测定ELISA法胶乳凝集法D-二聚体单抗体包被聚苯乙烯反应板加入待测血浆，样本中的D-二聚体结合于固相的抗体上加入酶标记D-二聚体抗体加底物显色纤维蛋白溶解系统及检验血浆D-二聚体测定参考区间

胶乳凝集法：阴性ELSIA法：0-200ug/L临床应用在继发性纤溶、深静脉血栓、肺栓塞、DIC等疾病中升高。原发性纤溶时不升高，是鉴别继发性与原发性纤溶最重要指标，也可作为溶栓治疗疗效观察指标。纤维蛋白溶解系统及检验检验技师考试大纲--血栓与止血的基本理论知识点要点要求纤维蛋白溶解系统纤溶系统组成及特性掌握纤维蛋白溶解机制掌握01概述纤维蛋白溶解系统及检验纤溶系统作用：是将沉积在血管内外的纤维蛋白溶解，起到修复、祛除和防止血管内由于纤维蛋白沉着(如血栓形成)引起的阻塞作用。功能亢进可引起出血，功能减低则可导致血栓形成，因而纤溶系统具有重要的生理和病理意义。纤维蛋白溶解系统及检验血栓形成出血不止减弱

亢进亢进减弱凝血纤溶纤溶抑制动态平衡抗凝血纤维蛋白溶解系统及检验纤溶系统的组成纤溶系统的组成纤溶酶原激活物组织纤溶酶原激活物(t-PA)尿激酶样纤溶酶原激活物(u-PA)纤溶酶原(PLG)和纤溶酶(PL)纤溶抑制物纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)纤溶酶抑制物凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)纤维蛋白溶解系统及检验纤维蛋白的溶解机制纤维蛋白的溶解机制纤溶酶原被激活为纤溶酶内激活途径外激活途径外源激活途径纤溶酶水解纤维蛋白(原)及其他蛋白质纤维蛋白原的降解可溶性纤维蛋白的降解交联纤维蛋白的降解碎片X’、Y’、D’、E’和D-D二聚体等复合物纤维蛋白溶解系统及检验纤维蛋白（原）降解产物的作用纤溶酶对纤维蛋白和(或)纤维蛋白原裂解产物统称为纤维蛋白(原)降解产物(FDP)。FDP中的X(或X’)、Y(或Y’)和E(或E’)片段都保留了类似纤维蛋白原与凝血酶作用的部位，因此这些片段可与纤维蛋白原竞争凝血酶，①阻止纤维蛋白单体(FM)形成，并可与FM结合形成可溶性复合物，②抑制FM聚合和交联成不溶性纤维蛋白，因而发挥抗凝作用。由于交联纤维蛋白的裂解产物D二聚体等发生在继发性纤溶之后，因此它们的检测，区别原发性与继发性纤溶有较高的价值。纤维蛋白溶解系统及检验纤维蛋白（原）降解产物的作用纤维蛋白(原)降解产物02实验室检查纤维蛋白溶解系统及检验（一）优球蛋白溶解时间测定【原理】血浆优球蛋白组分中含纤维蛋白原、纤溶酶原和纤溶酶原激活物等，但不含纤溶酶抑制物。用低离子强度和pHh4.5的溶液沉淀和分离优球蛋白，再溶于缓冲液中，加钙或凝血酶使其凝固，Fg转变成纤维蛋白凝块，测定凝块完全溶解的时间，即优球蛋白溶解时间（ELT）。【参考区间】加钙法：129min48s±4min6s；加凝血酶法：123±24min。【临床意义】1.ELT缩短（<70min）表明纤溶活性增强，见于原发性和继发性（DIC）纤溶亢进。但在DIC早期尚未发生继发性纤溶亢进时，或当纤溶极度亢进，纤溶酶绝大部分已被消化时，可为阴性。2.ELT延长表明纤溶活性减低，见于血栓形成前期和血栓形成性疾病。优球蛋白：血浆中的一类球蛋白，溶于等渗盐溶液，不溶于低离子强度的溶液或纯水，加入硫酸铵至浓度33%时沉淀。纤维蛋白溶解系统及检验（二）血浆组织纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制剂的测定（ELISA法）【原理】根据双抗体夹心法原理，将纯化的组织纤溶酶原激活物（t-PA）或纤溶酶原激活物抑制剂（PAI）单克隆抗体包被在反应板上，加入待测样本和标准品，加过氧化物酶标记的t-PA或PAI抗体，再加邻苯二胺（OPD）显色后读取A值，计算出各自的血浆浓度。【参考区间】t-PA：1-12μg/L；PAI：2-10μg/L。【临床意义】1.t-PA增高见于应激反应、剧烈运动、先天性增高以及纤溶亢进时。减低往往见于高凝状态和血栓性疾病、口服避孕药、肥胖症等。2.PAI增高见于血栓性疾病和高凝状态，减低见于原发性或继发性纤溶症。3.t-PA和PAI的检测不仅是为了了解纤溶系统激活状态，目前在动静脉血栓形成性疾病的诊断、预后和治疗评价中也被广泛应用。纤维蛋白溶解系统及检验（三）血浆纤溶酶原活性(PLG：A)测定【原理】免疫扩散法受检血浆（含抗原）加到含抗纤溶酶原（PLG）血清的琼脂糖扩散板中，自然扩散一定时间后，通过测定抗原抗体反应沉淀弧的直径来计算受检者血浆纤溶酶原（PLG抗原）含量。其直径与PLG含量呈正相关。发色底物法受检血浆中加链激酶(SK)和发色底物(S-2251)，受检血浆中的PLG在SK的作用下，转变成PL，后者作用于发色底物，释出对硝基苯胺(PNA)而显色。显色的深浅与纤溶酶的水平呈正相关，通过计算求得血浆中PLG的活性。【参考区间】免疫扩散法：230～340mg/L；发色底物法：75-150%。【临床意义】1.减低：见于先天性纤溶酶原缺乏症，但更常见于纤溶酶原激活物活性增强的情况，如原发性和继发性纤溶亢进、溶栓治疗后、重症肝炎、肝硬化、肝叶切除术、大手术后、肿瘤播散、严重感染等。2.增高：见于纤溶活性的降低，如高凝状态和血栓性疾病。纤维蛋白溶解系统及检验（四）α2-抗纤溶酶（α2-AP）活性及抗原测定【原理】发色底物法：受检血浆中加人过量的纤溶酶，使α2-AP与纤溶酶形成复合物，剩余的纤溶酶作用于发色底物（HD-Nva-CHA-Lys-PNA）释出PNA而显色，显色的深浅与血浆中剩余的纤溶酶正相关，而纤溶酶又与血浆中α2-AP呈负相关。【参考区间】95.6%±12.8%。【临床意义】1.增高：见于静脉、动脉血栓形成，恶性肿瘤、分娩后等。2.减低：见于肝病、DIC、手术后、先天性α2-AP缺乏症。纤维蛋白溶解系统及检验（五）血浆鱼精蛋白副凝固试验【原理】纤维蛋白原在凝血酶作用下释放出A肽和B肽后转变成纤维蛋白单体(FM)。FM具有自行聚合呈肉眼可见的纤维、絮状或胶冻状的特性。如发生继发性纤溶，存在纤维蛋白降解产物，尤其X’片段可和FM形成可溶性复合物，而硫酸鱼精蛋白具有分离这种复合物的能力，可使FM游离出来，形成肉眼可见的纤维素样物质，这种不需凝血酶的“凝结”现象叫副凝现象，称为血浆鱼精蛋白副凝固(3P)试验。【参考区间】阴性【临床意义】1.阳性见于DIC早期、中期，严重创伤，大手术，咯血、呕血以及久置冰箱的样品。2.DIC晚期和原发性纤溶(因血中无FM)时也表现为阴性。故在区别原发性和继发性纤溶时有一定意义。纤维蛋白溶解系统及检验（六）血浆纤维蛋白(原)降解产物的检测【原理】胶乳凝集试验(Fi试验)用特异性抗纤维蛋白(原)D.E片段抗体标记的胶乳颗粒与受检血清混合，如血清中含有纤维蛋白(原)降解产物(FDP)，特别是D.E片段，可发生抗原抗体反应，导致胶乳颗粒凝集。乳胶增强散射比浊法将FDP抗体包被在乳胶颗粒上，然后与FDP结合，形成FDP抗原抗体复合物的乳胶凝集颗粒，体积增大，根据散射光的变化计算出其含量。ELISA法将抗FDP抗体(多克隆或单克隆抗体)包被于固相载体上(酶标反应板)，加入待测血清或尿液。如存在FDP即发生抗原抗体反应，形成的复合物再与酶联抗体(过氧化物酶标记的相同抗体)反应，以OPD显色，读取的A值与FDP含量呈正比，参照用标准品制成的标准曲线可算出待测样本的FDP量。【参考区间】胶乳凝集法：阴性；乳胶增强散射比浊法：（0-5）µg/ml；ELISA法：血清（28±17）mg/L。【临床意义】血浆FDP增高常见于DIC、急性静脉血栓、原发性纤溶症、链激酶等溶栓治疗、急性心肌梗死、严重的肺炎、大手术后、恶性肿瘤和休克等。纤维蛋白溶解系统及检验（七）血浆D-二聚体(D-dimer，DD)测定【原理】乳胶凝集法受检血浆中加入标有D-二聚体（DD）单克隆抗体的乳胶颗粒悬液，若血浆中的D-二聚体含量高于0.5mg/L，则与乳胶颗粒上标记的单抗发生凝集反应。乳胶增强散射比浊法将D-二聚体抗体包被在乳胶颗粒上，然后与D-二聚体结合，形成D-二聚体抗原抗体复合物的乳胶凝集颗粒，体积增大，根据散射光的变化计算出其含量。ELISA法双抗体夹心法。【参考区间】胶乳凝集法：阴性；乳胶增强散射比浊法：（0-256）µg/L；ELISA法：（0-200）µg/L。【临床意义】在继发性纤溶、深静脉血栓、肺栓塞、弥散性血管内凝血、重症肝炎、肺栓塞等疾病中升高。而在原发性纤溶时不增高，是鉴别原发性纤溶和继发性纤溶的重要指标，也可作为溶栓治疗是否有效的观察指标。陈旧性血栓患者D-二聚体并不升高。凡有血块形成的出血，本试验均可呈阳性，故其特异性较低。血栓与止血检验的临床应用目录/Contents0102030血栓形成血液流变学及检验血栓与止血筛选试验检验技师考试大纲--血栓与止血的基本理论知识点要点要求血栓形成概念掌握分类掌握形成机制掌握血液流变学及检验血液流动性和粘滞性特性了解影响血液黏度的因素了解血栓与止血筛选试验方法掌握结果判读掌握01血栓形成血栓形成出血：血管损伤后，血液自血管内溢出或流出称为出血止血：自发的阻止出血和维持体内血液呈溶胶状态的一系列过程称止血。凝血：血液由溶胶状态转变为凝胶状态称为凝血血栓形成：在某些因素作用下，活体血管内或心腔中形成纤维蛋白块或出现血凝块的过程称为血栓形成血栓：血栓形成所产生的纤维蛋白或血凝块称为血栓。血液脱离了血管束缚就是出血；对活体而言，血液在血管内流动的中止就是血栓对活体而言，血液在血管内流动的中止就是血栓，因而止血是发生血栓的基础血栓形成血栓分类：血栓分类白色血栓透明血栓混合血栓红色血栓血小板和少量纤维蛋白构成附壁血栓流速较快的动脉内分头、体、尾三部分头部白色血栓，体部红色与白色血栓，尾部红色血栓附壁血栓主要由红、白细胞构成血流淤滞的静脉内易脱落形成栓塞微循环的血管内（微血栓多见于DIC、休克血栓形成血栓的形成机制：血栓形成机制血管内皮细胞损伤血流状态改变血液凝固性增加血小板量活性增高血栓形成的最重要和最常见的原因凝血因子活性增强和生理性抗凝物质缺陷，或纤溶活性减低血小板黏附、释放、聚集，促进血液凝固主要指血流减慢和血流产生漩涡等改变血栓形成内皮细胞损伤血小板激活血小板聚集释放凝血酶激活纤维蛋白网罗白细胞和红细胞形成血栓血栓形成血栓对机体的影响：心瓣膜变形栓塞心瓣膜血栓机化，引起瓣膜粘连、变硬和变形血栓脱落形成栓子，随血流运行栓塞相应血管，引起局部组织坏死或水肿血栓对机体影响阻塞血管广泛性出血动脉阻塞：局部器官缺血萎缩或坏死静脉阻塞：局部淤血、水肿、出血或坏死微循环内广泛的微血栓形成，引起组织广泛坏死或全身广泛出血和休克02血液流变学及检验血液流变学及检验血液流变学：是研究血液的流动性和粘滞性、血液中的红细胞和血小板的聚集性、血浆的流动性、血液和血浆的粘滞性等方面的一门分支科学，在血管疾病中有重要意义。

红细胞血小板血浆流动性、粘滞性血液流变学及检验影响血液粘度的因素

132为“非牛顿流体”，其粘度与流体本身的性质和压力有关血管的管径越大，管壁的“光洁度”越高，血液粘度就越低红细胞的变形性血液流变学及检验血液流变学

血液流变学检验全血粘度测定血浆粘度测定红细胞聚集性测定红细胞变形性测定红细胞电泳时间测定03血栓与止血筛选试验血栓与止血筛选试验正常生理条件下，人体内止血和凝血系统、抗凝和纤溶系统之间处于动态平衡，以保证机体不致出血，无血栓形成，使血液成流动状态循环于全身。当平衡失调时，便引起出血或血栓形成，即止血凝血障碍。

血栓与止血筛选试验出血性疾病：是由于遗传性或获得性的原因，导致机体止血、血液凝固活性减弱或纤溶活性的增强，引起自发性或轻微外伤后出血难止的一类疾病。本类疾病的诊断，除病史、家族史和临床表现外，血栓与止血检验具有确诊的重要价值。

粘膜出血皮肤出血血肿血栓与止血筛选试验一期止血缺陷筛选试验（血小板和血管壁的筛选试验）

一期止血缺陷是指血管损伤和血小板激活所引起的止血异常出血时间（BT）血小板计数（PLT）血栓与止血筛选试验一期止血缺陷筛查结果分析BT、PLT均正常除健康人之外，多数是由于单纯血管壁通透性和（或）脆性增加所致BT延长和PLT减少多数是由于血小板数量减少所引起的血小板减少性紫癜BT延长和PLT正常多数是由于血小板功能异常或某些凝血因子缺乏所引起的出血性疾病BT延长和PLT增多常见于原发性和继发性（反应性）血小板增多症血栓与止血筛选试验二期止血缺陷筛选试验（凝血和抗凝血的筛选试验）

血浆凝血酶原时间（PT）活化部分凝血活酶时间（APTT）二期止血缺陷是指凝血因子缺乏和抗凝血物质存在所引起的止血异常血栓与止血筛选试验APTT（N）PT（A）APTT（N）PT（N）APTT（A）PT（N）APTT（A）PT（A）外源途径缺陷因子Ⅶ缺陷症（遗传性、获得性）共同途径缺陷因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ、Fg缺乏血液中存在凝血物质内源凝血途径缺陷因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ缺陷症（遗传性、获得性）无出血症状因子Ⅻ、PK、HMWK和Ⅺ缺乏（遗传性、获得性）因子XIII缺乏

因子XIII缺陷症（遗传性、获得性）有出血症状N-正常；A-异常PK-激肽释放酶原HMWK-高分子量激肽原Fg-纤维蛋白原二期止血缺陷筛查结果分析血栓与止血筛选试验纤溶活性增强的筛选试验

纤溶活性增强筛查结果分析纤溶活性正常继发性纤溶（DIC）原发性纤溶血栓自发性溶解FDP(-)D-D（-）

FDP(-)D-D（+）FDP(+)D-D（-）FDP(+)D-D（+）血浆纤维蛋白（原）降解产物测定（FDPs）血浆D-二聚体测定出、凝血性疾病目录/Contents0102030405过敏性紫癜的诊断血友病的诊断特发性血小板减少性紫癜的诊断弥散性血管内凝血（DIC）诊断血管性血友病原发性纤溶亢进06检验技师考试大纲知识点要点要求过敏性紫癜的诊断概述掌握实验室检查掌握血友病的诊断概述掌握实验室检查掌握特发性血小板减少性紫癜的诊断概述掌握实验室检查掌握弥散性血管内凝血（DIC）诊断概述(临床特征等)了解病因及发病机制了解检验及诊断标准掌握01过敏性紫癜的诊断过敏性紫癜的诊断过敏性紫癜：是一种常见的血管变态反应性出血性疾病。主要是由于机体对某些致敏物质（如细菌、病毒、寄生虫、食物、药物、花粉等）发生变态反应而引起全身性毛细血管壁的通透性和（或）脆性增加，导致以皮肤和粘膜出血为主要表现的临床综合征。主要临床症状是紫癜。腹痛、恶心、呕吐、出血性腹泻关节肿痛紫癜样皮疹主要集中在臀部、腿部和足。部分患者躯干部及双臂、双手可累及过敏性紫癜的诊断过敏性紫癜类型肾脏损坏腹痛关节肿痛关节型紫癜皮肤损坏单纯性紫癜肾型紫癜血尿腹型紫癜过敏性紫癜的诊断实验室检查：一般检查白细胞正常或轻度升高红细胞和血红蛋白一般正常出凝血机制检查50%病例束臂试验阳性血小板计数正常血栓与止血检查正常过敏性紫癜的诊断实验室检查：尿常规粪常规累及肾脏时血尿、蛋白尿、管型尿累及胃肠道时粪便隐血阳性肾功能尿素升高肌酐升高过敏性紫癜的诊断诊断与鉴别诊断：过敏性紫癜的诊断依据：1．四肢出现对称分布，分批出现的紫癜，特别以下肢为主。2．在紫癜出现前后，可伴有腹部绞痛、便血、关节酸痛、血尿及水肿等前驱症状或过敏史。3．束臂试验可能阳性，血小板计数和功能、凝血象检查及骨髓检查等均正常。4．排除其他原因所致的血管炎和紫癜。本病应与下列疾病鉴别：血小板减少性紫癜；风湿性关节炎；肾小球肾炎、系统性红斑狼疮；外科急腹症。由于本病特殊的临床表现及绝大多数实验室检查均正常，鉴别一般不难。02血友病的诊断血友病的诊断血友病：是常见的遗传性出血性疾病之一。该病是由于患者体内的血管性血友病因子（vWF）基因缺陷而造成血浆中vWF数量减少或质量异常所导致。血友病伴性遗传女传男，男发病;男传女，女携带。几乎所有的血友病患者都为男性，女性罕见发病，多为携带者。如果家族里有人患有血友病，应在产检时检查基因。血友病的诊断关节出血出血为主要症状肌肉出血临床表现血友病的诊断血友病A(甲)

血友病的分类FⅧ缺乏血友病B(乙)

FⅨ缺乏血友病的分型正常Ⅷ因子或Ⅸ因子活性50-150%轻型Ⅷ因子或Ⅸ因子活性5-40%中型Ⅷ因子或Ⅸ因子活性1-5%重型Ⅷ因子或Ⅸ因子活性通常低于1%血友病的诊断实验室检查血常规出凝血功能血小板计数正常血时间延长.活化部分凝血活酶时间(APTT)延长凝血活酶生成试验(TGT)延长出血时间、凝血酶原时间（PT）正常血管性血友病因子抗原（vWF：Ag）正常血友病的诊断诊断FⅧ：C、FⅨ：C显著降低vWF无明显减少明显的家族史03特发性血小板减少性紫癜的诊断特发性血小板减少性紫癜的诊断特发性血小板减少性紫癜（ITP）：又叫原发性血小板减少性紫癜。是一种自身免疫性疾病。特点为患者体内产生抗血小板抗体，致使血小板寿命缩短，破坏过多。而骨髓中巨核细胞增多，但巨核细胞的成熟及产血小板的功能受抑制。血小板减少、血小板生存缩短为特征免疫介导特发性血小板减少性紫癜的诊断各种原因血小板数量低血小板生成减少血小板破坏过多血不板生存时间缩短特发性血小板减少性紫癜的诊断发病原因及临床表现急性型多发生于儿童，起病急，病程短，多自发性缓解。慢性型多发生于青壮年，女性多于男性，起病缓慢，病程长，少见自发缓解，常反复发作。特发性血小板减少性紫癜的诊断实验室检查血象血小板明显减少束臂试验阳性血块收缩不良出血时间延长大血小板血小板数量减少大血小板特发性血小板减少性紫癜的诊断实验室检查骨髓象骨髓增生明显活跃红系增生活跃巨核系增加，伴成熟障碍粒系增生活跃巨核细胞成熟障碍各种表现巨核细胞增多，表现为成熟障碍，以幼稚型巨核细胞和颗粒型巨核细胞明显增多；产生血小板的巨核细胞明显减少或缺乏，胞质中出现空泡、变性。特发性血小板减少性紫癜的诊断实验室检查血小板寿命测定血小板聚焦和释放试验血小板相关抗体检测（PAIg）无论用核素14C、51Cr标记，还是TXB2法均表现为血小板破坏过多，寿命缩短。一小部分病人可影响血小板的功能，表现为血小板聚集能力下降和血小板第4因子释放下降。PAIgG、PAIgM、PAIgA、PAC3的测定曾为ITP的一项重要检查方法，其中80%以上病人有PAIgG增高。04弥散性血管内凝血（DIC）诊断弥散性血管内凝血（DIC）诊断弥漫性血管内凝血（DIC）：是指微循环内广泛性纤维蛋白沉积和血小板聚集，并伴有继发性纤维蛋白溶解亢进的一种获得性全身性血栓-出血综合征，它本身并不是一个独立的疾病，而是许多疾病发展中的一种中间病理过程。败血症重症肝炎产科疾病DIC弥散性血管内凝血（DIC）诊断发病机制

促凝物质进入血流或其他因素↓血液高凝状态↓血小板黏附→广泛血管内凝血————→继发性纤溶聚集释放↓/↓∣消耗凝血因子＼/纤维蛋白（原）降解∣↓↘↙↓∣凝血机制障碍←低纤维蛋纤维蛋白（原）∣↓↖白血症降解产物（FDP）∣血液低凝状态＼/∣∣＼/↓↓抗凝作用↙血小板减少—→出血倾向与消耗

弥散性血管内凝血（DIC）诊断临床表现除原发病的临床表现外，主要出现：出血倾向84-95%，自发性、多发性出血，表浅出血多见，