DB37T 4639.1-2023 猪疫病诊断技术 第1部分：圆环病毒

37DiagnosistechnologyofswineepidemicdiI本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定b)更改了提出与组织实施单位（见前言，2011年版的前言）；c)删除了主要起草人和起草单位（见2e)增加了“规范性引用文件”和“术语和定义”（）；f)更改了“试剂或材料”和“仪器设备”相关内容（见第4章和第5章，2011年g)增加了“临床诊断”和“病理诊断”（见h)更改了“实验室诊断”（见6.3，2011年版的第3章是由猪圆环病毒（PCV）引起的一种多系统性疾病，包括断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎和肾病综合征（PDNS）、增生性坏死性肺炎（PNP）和繁殖障碍性疾病等，主要表现为呼吸、泌尿、肠合感染是国际公认的严重危害养猪业发展的疾病之一，对生猪生产造成巨大的经济损失。全，最大限度减少猪圆环病毒病造成的经济损失，本文件结合先进经验和行业的实际，严格按照GB/T1.1《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》的要求编写，以“科学性、先进性、系统性、1猪疫病诊断技术第1部分：圆环病毒；）GB/T6682分析实验室用水规格NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范4试剂或材料4.2磷酸盐缓冲溶液（PBS）：取磷酸二氢钾（KH2PO4）0.27g、磷酸氢二钠（Na2HPO4）1.42g、氯化4.3核酸提取试剂：市售病毒DNA/RNA提取试剂盒5.2震荡研磨仪。5.5生物安全柜。5.7涡旋振荡器。2猪是PCV的天然宿主，各种年龄、不同性别的猪都可以感染，但以哺乳期和育成期的猪最易感。病6.1.2.1断奶仔猪多系统衰竭综合征(P耳等部位扩展。剖检，在大部分死亡猪中，可见双肾肿大、苍白、皮质有出血出生后3周龄仔猪，因痉挛而出现步态异常姿势，从双耳，被毛和与保育猪和育肥猪发生的呼吸道病有关。PNP的确诊主要依据组织病理学变化，表现为增生性和坏大，可见均匀的白色，所有病例几乎都能看到和肝细胞的单细胞坏死为特征的肝炎。慢性死3按照NY/T541规定采集病死猪的淋巴结、脾脏、肾脏和肺脏等样品2℃~8℃贮藏。样品保存在2℃~8℃条件下不超过24h，-20℃以不超过3个月，-70℃以下不超过5年。必须低温保存运输样品，且在规定温度下的保存6.3.3.1淋巴结、脾脏、肾脏和肺脏等组10%的组织匀浆液，5000r/min离心5min，上将细胞培养样品反复冻融3次，3000r/min离心5min，弃去细胞碎片，上清备用。12×SYBR®GreenProTaqHSP2344567712345—6—在阳性和阴性成立前提下，样品检测结果判定a)熔解曲线峰值温度为84℃,则样品中含有PCV1；b)熔解曲线峰值温度为85℃,则样品中含有PCV2；c)熔解曲线峰值温度为82℃,则样品中含有PCV3；g)熔解曲线峰值温度为84℃、85℃、82℃,则样品中含有PCV1、PCV2和PCV3。55’-TKGATGATYTTTTATGGSTGG-3’5’-GTCAGCAGTTGAGGACTACCATT-3’5’-AGTAATCCGCCGATAAAGAGC-3’5’-CTCCTAAACAAGGCCTCCAACT-3’注：简并碱基K：G/T；Y