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发酵法生产白细胞介素-2

白细胞介素-2白介素－2是一个分子量为14500的糖蛋白，它刺激已被特异性抗原或致丝裂因数启动的T细胞增殖【所属】免疫增强剂/其他抗肿瘤药及辅助治疗药【别名】白间素,欣吉尔,T细胞生长因子,白细胞介素-2等【适应症】主要用于肾癌、黑色素瘤和非何杰金淋巴瘤有效（Rossenberg）。LAK细胞代表1个有单核巨噬细胞，B和T淋巴细胞特征的异原的细胞体。这些LAK细胞似乎对癌细胞有特异作用。此外，LAK细胞（不象T细胞）介导杀伤不受MHC的约束。应用【药理作用】本品可促进T淋巴细胞增殖与分化，诱导具有细胞毒样活力的杀伤细胞，诱导及增强杀伤性T细胞、单核细胞、巨噬细胞的活力等。【临床应用】适用于慢性活动性乙型肝炎病毒感染等；用于肾细胞癌、黑色素瘤的治疗，用于癌性胸腹水的控制及其他晚期肿瘤；用于先天或后天免疫缺陷症的治疗，如艾滋病，可提高病人细胞免疫功能和抗感染能力；各种自身免疫病的治疗，如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、干燥综合征等；对某些疾病性、杆菌性疾病、胞内寄生菌感染性疾病，如乙型肝炎、麻风病、肺结核、白色念珠菌感染等具有一定的治疗作用。2生产过程及工艺过程(1)发酵工程菌为大肠杆菌，温度敏感型。种子用LB培养基；发酵用M9CA培养基，30度10小时，后提高温度至42度，诱导3h。

传统工艺鸡瘟病毒，PHA,培养液[启动诱生]37℃人白细胞粉诱生白细胞培养液[灭活病毒，分离],HCl,NaOHpH=2~2.5,pH=7.2~7.4,离心上清液35%硫酸铵4℃，24h，离心上清液85%硫酸铵4℃，24h，离心沉淀10mmol/LPBS透析pH=6.5，24h透析内液[亲和层析]上Sepharose柱pH=6.5亲和载体I[洗涤]0.4mol/LNaCl，PBSpH=6.5亲和载体Ⅱ[吸收]1.0mol/LNaCl,PBS透析pH=6.5IL-2组分[凝胶层析]上Utrogel柱pH=6.5凝胶载体0.2mol/Ltris-HCl含0.1%PEG2%正丁醇，0.2mol/L甘氨酸pH=7.6IL-2酶法生产1工艺流程图IL-2工程菌斜面摇瓶发酵制备包涵体洗涤与裂解凝胶过滤与复性检定与包装(2)分离纯化包涵体制备离心收集，菌体悬于EDTA溶液中，用超声波破碎细胞，后8000r/min离心，收集沉淀(包涵体和细胞碎片)。包涵体洗涤及裂解：

用Tris-HCl洗涤3次，离心收集沉淀，用盐酸胍变性，离心收集上清液。凝胶过滤及复性：

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