DB37T 2842-2016 鸭坦布苏病毒抗体间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法_第1页
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DB37DB37/T2842—2016鸭坦布苏病毒抗体间接酶联免疫吸附试验2016-09-18发布2016-10-18实施山东省质量技术监督局发布IDB37/T2842—2016本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由山东省畜牧兽医局提出。本标准由山东省畜牧业专业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东农业大学。本标准主要起草人：刁有祥、唐熠、陈浩、冯强、提金凤、高绪慧。1DB37/T2842—20161范围本标准规定了鸭坦布苏病毒抗体间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法所需试剂及仪器、检测步骤、结果判定等。中坦布苏病毒特异性抗体。2.1试剂2.1.5磷酸盐缓冲液(PBS),见A.1。2.1.7洗涤液，见A.3。2.1.8样品稀释液(封闭液),见A.4。2.1.10终止液，见A.5。4.1试验试剂预温到20℃~25℃。2DB37/T2842—20164.2将抗原按照浓度为2.6ng/μL用碳酸盐缓冲液稀释，每孔100μL加入到96孔聚苯乙烯板中，4℃孵育过夜后，用洗涤液100μL洗板3次，每次置于水平振荡器300r/min震荡34.3每孔加入200μL封闭液，37℃温箱孵育1h,用4.2方法洗板。值)/2;阳性对照OD均值等于(A3孔OD值+A4孔OD值)/2。试验条件成立，否则重做。5.3.1阳性样品OD450≥0.40,待检血清为阳性；即已感染坦布苏病毒。5.3.2阴性样品OD450≤0.20,待检血清为阴性；即未感染坦布苏病毒。5.3.3可疑样品0.20<0D450<0.40,判为可疑，重新测定。3DB37/T2842—2016试剂配制A.1磷酸盐缓冲液(PBS,0.01mol/LpH7.4)KC10.2gKH₂PO₄0.2gNa₂HPO₄·12H₂O0.2gA.2包被液(0.05mol/LpH9.6)Na₂CO₃0.2756gNaHCO₃0.6216gA.3洗涤液Tween-20

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