生物浙科版自我小测：实验DNA片段的PCR扩增

学必求其心得，业必贵于专精学必求其心得，业必贵于专精学必求其心得，业必贵于专精自我小测1DNA分子经PCR反应循环一次后，新合成的那条子链的脱氧核苷酸的序列应与（)A．模板母链相同B．非模板母链相同C．两条模板母链相同D．两条模板母链都不相同2假设PCR反应中，只有一个DNA的片段作为模板，请计算在30次循环后,反应物中大约有多少这样的DNA片段(）A．215B．230C．260D．2313DNA的合成方向总是________延伸（)A．从DNA分子的左端向右端B．从DNA分子的右端向左端C．从子链的5′端向3′端D．从子链的3′端向5′端4要使PCR反应在体外的条件下顺利地进行,需要严格地控制(）A．氧气的浓度B．酸碱度C．温度D．大气的湿度5PCR技术的实质是（）A．DNA分子的复制B．RNA分子的复制C．DNA分子的转录D．DNA分子受损、缺漏部位的修补6有关PCR技术，下列叙述不正确的是（)A．是聚合酶链式反应，是利用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术B．在用PCR技术扩增DNA时,DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似C．PCR反应只需在一定的缓冲溶液中提供:DNA模板以及四种脱氧核苷酸D．PCR一般经历三十多次循环从第二次循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应7关于PCR技术的应用,错误的一项是（)A．古生物学、刑侦破案、DNA序列测定B．诊断遗传疾病、基因克隆、古生物学C．DNA序列测定、基因克隆、刑侦破案D．诊断遗传疾病、合成核苷酸、DNA序列测定8用于PCR的引物长度通常为20～30个核苷酸，是一小段()A．DNAB．RNAC．DNA或RNAD．双链DNA9关于DNA双链的叙述,错误的是（）A．通常将DNA的羟基末端称为5′端，而磷酸基团的末端称为3′端B．通常将DNA的羟基末端称为3′端，而磷酸基团的末端称为5′端C．通常DNA只能从3′端延伸DNA链D．通常DNA不能从5′端延伸DNA链10PCR的含义是（）A．亲子代反应技术B．多聚酶链式反应C．DNA片段的复制D．DNA序列测定11标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是(）A．92℃、50℃、72℃B．72℃、50℃、92℃C．50℃、92℃、72℃D．80℃、50℃、72℃12在PCR实验操作中，下列说法不正确的是…()A．在微量离心管中添加各种试剂时，只需一个枪头B．离心管的盖子一定要盖严,防止液体外溢C．用手轻弹离心管壁的目的是使反应液充分混合D．离心的目的是使反应液集中在离心管部，提高反应效果13关于DNA的复制，下列叙述正确的是（）A．DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从5′端延伸DNA链B．DNA复制不需要引物C．引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合D．DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸14某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中，发现了一种冰冻的已灭绝的巨型动物的肌肉。他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下检测工作，其中正确的操作步骤及顺序是()①降低温度，检测处理后的杂合DNA双链②通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA③把巨型动物的DNA导入大象的细胞中④在一定温度条件下，将巨型动物和大象的DNA水浴共热A．②④③B．②④③①C．③④①D．②④①15PCR技术是把某一DNA片段在实验条件下，合成许许多多相同片段的一种方法，利用这种技术能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或者DNA分子片段,“人类基因组计划"的研究中常用到这种技术.请结合有关知识,回答有关此技术的一些问题：(1)PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,依据的原理是:________________________________________________________________________.(2)在实验条件下，DNA分子进行扩增,除了所要扩增的DNA片段处，还需要________和________、________等条件。(3)某DNA片段有160个碱基,其中有腺嘌呤35个，若让该DNA分子扩增三次(即复制三次）至少需要腺嘌呤脱氧核苷酸和鸟嘌呤脱氧核苷酸的数目分别是________和________个。16近10年来，PCR技术（多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制（如下图所示）.在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。(1)加热使DNA双链打开，这一步是打开________键，称为________，在细胞中是在________酶的作用下进行的。（2）当温度降低时，引物与模板末端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸，最终合成两条DNA分子,此过程中原料是________，遵循的原则是________。(3)PCR技术的必需条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还有三个条件，即：液体环境、适宜的________和________。(4)通过PCR技术使DNA分子大量复制,若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中，以含有14N的脱氧核苷酸为原料,连续复制4次之后,则15N标记的DNA分子占全部DNA总数的比例为________。（5）PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法:若要检测一个人是否感染了艾滋病，你认为可用PCR技术扩增血液中的（）A．白细胞DNAB．病毒的蛋白质C．血浆中的抗体D．病毒的核酸参考答案1答案：B解析:DNA分子经PCR反应循环1次,也就是DNA分子复制1次，那么新合成的那条子链序列应与其模板母链互补，而与非模板母链相同。2答案：B解析：由于DNA分子的复制为半保留复制，并以指数级递增，因此30个循环后，DNA片段应为230个。3答案：C解析：DNA分子的合成方向，也就是DNA聚合酶的移动延伸方向，应该为C项所述。4答案：C解析:PCR技术水浴的温度、时间是决定其复制的关键因素。5答案:A解析：PCR技术的实质就是体外快速的DNA分子复制。6答案：C解析：PCR反应是聚合酶链式反应,是体外扩增DNA片段的技术，需要在一定的缓冲溶液中提供：DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶，同时控制温度使DNA复制在体外反复进行，复制过程与细胞内DNA的复制类似;PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性、延伸。7答案：D解析：PCR技术的应用十分广泛，但D选项中的合成核苷酸却不是.8答案：C解析：PCR既可以用DNA作引物进行DNA分子的复制扩增，少数情况下也可以用RNA分子做引物。9答案:A解析：为了明确DNA分子的方向，通常将DNA的羟基末端称为3′端，而磷酸基团的末端称为5′端。10答案：B解析：PCR的全称是Polymerasechainreaction，即聚合酶链反应。11答案:A解析：当温度上升到90℃(90～96℃）以上时，双链DNA解聚为单链，称之为变性；当温度下降到50℃(40～60℃)左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；当温度上升到72℃（70～75℃)时，溶液中的四种脱氧核苷酸（A、T、C、G)在TaqDNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，称为延伸。12答案：A解析：在微量离心管中添加各种试剂时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头必须更换，确保实验的准确性；离心管的盖子一定要盖严，防止实验中脱落或液体外溢；离心10s的目的是使反应液集中在离心管部，提高反应效果.13答案：C解析:DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从引物的3′端向5′端延伸DNA子链；由于DNA分子的两条链是反向平行的，故在DNA聚合酶作用下DNA的合成方向是从子链的5′端向3′端延伸。14答案:D解析:比较巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性时，首先要通过PCR技术扩增出一定数量的这两种动物的DNA，然后再将二者的DNA解旋,通过DNA分子的杂交法，比较它们DNA的相似性,不需要把巨型动物的DNA导入大象的细胞中。15解析:(1)PCR技术的实质是DNA分子的复制,所以DNA分子复制所依据的原理就是PCR扩增的原理。（2)DNA分子复制所需的条件，除了模板外，还有四种脱氧核苷酸、能量、酶。(3)从DNA分子的半保留复制来解答。DNA扩增3次,共得23＝8个DNA分子,需要相当于重新合成7个DNA分子的脱氧核苷酸，即：A＝35×7＝245，G＝(80－35）×7＝315。答案：（1)DNA分子具有双螺旋结构和DNA分子中碱基的互补配对(2)四种脱氧核苷酸能量酶(3）24531516解析：DNA两条链之间的碱基通过氢键形成碱基对，从而将两条链连接起来,因而，要想打开DNA双链，必须打开氢键，这一过程在细胞内是在解旋酶作用下完成的，在细胞外（PCR)则是通过高温实现的。合成DNA时，所用的原料是4种游离的脱氧核苷酸，复制过程遵循碱基互补配对原则。PCR技术的条件除了模板