2025年新高考生物一轮复习第10单元生物技术与工程第40讲动物细胞工程(练习)(学生版+解析)

第40讲动物细包工程目录01模拟基础练【题型一】动物细包培养技术 【题型二】动物体细包核移植技术和克隆【题型三】动物细包融合与单克隆抗体的制备【题型四】干细包工程02重难创新练03真题实战练题型一动物细包培养技术1．下列关于动物细包培养和植物组织培养的叙述，正确的是（）A．植物通过光合作用自养，因此，在植物组织培养的培养基中不需要添加有机物B．植物组织培养利用了细包的全能性，动物细包培养也利用了该原理C．植物组织培养在再分化时需在有光条件下进行，动物细包培养对光照无要求D．植物组织培养和动物细包培养均可用于检测有毒物质2．Vero细包是非洲绿猴肾细包，易于培养，生物安全性高，对多种病毒的感染敏感，是很多病毒培养的理想基质。培养Vero细包能广泛地用于人和动物疫苗的生产，下列有关叙述错误的是（）A．贴壁生长的细包需用胰蛋白酶处理后再进行离心收集B．培养正常的Vero细包时，在培养瓶上可形成多层细包C．定期更换培养基能及时去除代谢废物并提供营养物质D．培养动物细包的气体环境中CO2的作用是维持培养液的pH3．由于肝脏器官的短缺，肝细包移植被作为肝移植的替代策略。用海藻酸盐微胶囊包裹可增殖人肝细包获得类器官（eLO），并用于移植是治疗肝衰竭的一种有前途的策略。下列叙述错误的是（）A．供体肝组织需先用胰蛋白酶将其分散，再进行原代培养B．开放式培养肝细包，有利于细包代谢产生CO2及时溢出C．异体移植细包会发生免疫排斥，用海藻酸盐包裹有利于形成免疫保护屏障D．若eLO与空微囊治疗组的效果相当，可证明微胶囊包裹不影响肝细包功能题型二动物体细包核移植技术和克隆4．W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟制备乳腺生物反应器来获得大量W，基本过程如图所示。下列相关叙述错误的是（）A．①过程构建的表达载体含有组织特异性启动子B．②过程通常在显微镜下进行去核、注入等操作C．该过程培养的山羊所有组织细包均能分泌WD．该过程利用了转生态、胚胎移植等工程技术5．猪繁殖与呼吸综合征（又称“猪蓝耳病”）是造成养猪业重大损失的主要疾病之一，CD163生态表达的蛋白质是猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的关键受体，某团队通过生态工程和细包核移植技术成功培育了CD163生态敲除大白猪。下列有关说法错误的是（

）A．生态敲除应选择猪胚胎成纤维细包的连续细包系作为重组DNA的受体细包B．对经筛选的阳性转化细包进行克隆化培养后作为供体细包进行细包核移植C．采用电融合方法可促进核供体和受体细包的融合及重组细包的分裂发育D．可从克隆猪仔耳组织提取DNA进行相关检测确定CD163生态是否成功敲除6．大熊猫是我国的国宝，尽管采取了许多保护措施，但由于其繁殖能力及幼仔成活率均较低，数量仍然非常少。有科学家尝试采用体细包核移植技术来克隆大熊猫。下列相关叙述错误的是（）A．在体细包核移植过程中，普遍使用的去核方法是显微操作法B．用体细包核移植技术克隆大熊猫，体现了动物细包具有全能性C．由于体细包分化程度高，因而体细包核移植难度明显高于胚胎细包核移植D．在保护濒危物种方面，体细包核移植技术有望增加濒危物种的存活数量题型三动物细包融合与单克隆抗体的制备7．卡其霉素是一种细包毒素，对肿瘤细包和正常细包均具有杀伤力。抗体—药物偶联物（ADC）通过细包毒素与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细包的选择性杀伤，其作用机制如图所示。下列叙述正确的是（

）A．制备单克隆抗体时要向实验动物注射卡其霉素B．ADC中抗体的作用是特异性识别杀伤肿瘤细包C．用于生产单克隆抗体的杂交瘤细包不能传代培养D．ADC能实现精准识别，减少对正常细包的损伤8．下图为制备抗新冠病毒单克隆抗体的流程图。通过过程③获得杂交瘤细包，通过过程④获得能够产生特定抗体的杂交瘤细包。下列相关叙述错误的是（

）A．图中过程①获得的淋巴细包，有的不能产生抗新冠病毒的抗体B．图中过程②利用了细包膜具有一定的流动性的结构特点C．图中过程③使用的HAT培养基，属于固体培养基和选择培养基D．图中过程④以新冠病毒的抗原物质为试剂，筛选抗体检测呈阳性的细包9．某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗S单克隆抗体，过程如图。下列说法正确的是（

）A．用胃蛋白酶处理，使贴壁生长的骨髓瘤细包分散开B．单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白C．细包融合后，第一次筛选需用96孔板培养以获得单一类型杂交瘤细包D．抗体由浆细包分泌，其化学本质大多数为蛋白质，少数为RNA题型四干细包工程10．诱导多能干细包（iPSC）可分化成类似间充质干细包（iMSC）。iMSC能合成和分泌Ⅴ蛋白，用于治疗骨关节炎等疾病。下列叙述错误的是（

）A．可用病毒作为载体将某些生态转入小鼠成纤维细包以诱导产生iPSCB．iPSC在适宜条件下培养，需添加特定的物质才能使其转化为iMSCC．利用96孔板筛选转化成功的iMSC，需稀释至每孔至多1个细包，并添加V蛋白D．iMSC培养液需定期更换，并维持适宜温度、PH、渗透压和气体环境等条件11．泪液分泌不足或蒸发太快，以及睑板腺分泌的油脂不足均会导致干眼症。科学家用诱导多能干细包（iPS细包）制成了与泪腺相似的组织，该研究成果有望带动对重症干眼症治疗方法和药物的研究。下列有关叙述正确的是（

）A．泪腺属于内分泌腺，除了分泌泪液，还能分泌有关激素B．泪液分泌不足导致内环境的成分减少，进而引发干眼症C．来源于病人的iPS细包形成的泪腺组织不会引起病人的免疫排斥D．iPS细包具有发育的全能性，可以从囊胚的内细包团中分离获得12．科学家利用黑鼠成纤维细包获得多能干细包（iPS），并利用该细包培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如图所示，图中①~⑨表示过程。下列相关叙述正确的是（

）A．过程①需在含95%O2加5%CO2混合气体环境中培养体细包B．过程②中诱导因子的作用是促使黑鼠成纤维细包分化成iPS细包C．过程③采用的是显微注射法，过程⑧之前需用激素制剂处理白鼠D．由于克隆鼠与黑鼠供体所含的遗传物质相同，故两者性状完全相同一、单选题1．植物组织培养是将植物组织或细包接种到培养基中，然后在人工控制的条件下进行培养，使其形成完整植株的过程。植物组织培养有多种，如原生质体培养、悬浮细包培养、花药培养、组织培养、器官培养等，其中最常见的是愈伤组织培养。下列叙述错误的是（）A．对植物细包和动物细包进行培养时，都用到了固体培养基B．在进行植物体细包杂交时，需要经历原生质体的培养阶段C．愈伤组织是未分化的薄壁组织，没有特定的结构和功能，全能性强D．动物细包培养和植物组织培养最终的目的不都是获得完整个体2．在保护粤东黑猪猪种遗传资源各项生物技术中，体细包核移植技术因具有继承亲本性状完整、实验周期短、保种效力强的优点而备受关注，下图为部分相关操作流程。据图分析正确的是（

）A．卵母细包需在卵巢中成熟后再移除核B．5%CO2的主要作用是维持培养液的pHC．重构胚的遗传物质完全来自粤东黑猪D．该技术证明了动物体细包具有全能性3．科学家将两株不同的杂交瘤细包A和B融合形成双杂交瘤细包AB．双杂交瘤细包AB能够悬浮在培养基中生长繁殖，产生的双特异性抗体AB结构如图所示。下列叙述正确的是（

）A．用选择培养基即可筛选出双杂交瘤细包ABB．培养双杂交瘤细包时，需提供CO2维持培养液的渗透压C．双杂交瘤细包进行传代培养时，需使用胰蛋白酶分散处理D．抗体AB与抗体A、B相比，可增强对靶细包的杀伤效果4．在科学研究和制药等领域，经常要进行动物细包培养。体外培养动物细包时，需要为细包分裂和生长提供营养。下列相关叙述正确的是（）A．培养基中添加的葡萄糖主要用于细包合成糖原B．必须添加非必需氨基酸细包才能正常生长分裂C．培养基中不添加脂质，细包中也会合成新的脂质D．直接添加大量DNA有助于细包快速的分裂增殖5．体外动物细包培养制造出的细包培养肉是一种人造肉，具有营养可控、结构仿真、口感真实的特点。其主要生产流程如下图，图中的微载体是一种固体的细包生长基质，其表面能使细包贴附。下列叙述正确的是（）A．①过程可用机械的方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶等处理的方法获得细包悬液B．③过程中加入微载体为细包提供更大附着面积，使细包间不出现接触抑制，产量增加C．③④过程需使用经灭菌处理的培养液，培养细包时既要提供O2也要提供CO2D．肌肉干细包属于成体干细包，能够分化成特定的细包和组织，具有全能性6．郑州大学第一附属医院研究团队首次完成了去ECMO化的“人造子宫”动物实验。医生将胎龄4个月的胎羊从母体中取出，并将其脐动脉和脐静脉与母体颈部的动脉和静脉相连，建立起一个类似于ECMO的并体循环。下列叙述错误的是（

）A．“人造子宫”能为胎羊细包提供氧气和营养物质，运走代谢废物B．“人造子宫”作为液体屏障，能保护胎羊免受外界环境的直接干扰C．“人造子宫”能与胎羊细包进行物质和信息的双向交流D．该实验证明维持稳态仅需分子水平上的调节，不需进行器官、系统水平上的调节7．研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。据图分析，以下叙述错误的是（

）A．实验前需要给小鼠甲多次注射病毒A，增加分泌抗病毒A抗体的浆细包比例B．取小鼠甲胸腺剪碎并用胰蛋白酶处理一段时间，可使其分散并制成单细包悬液C．筛选1所用的培养基属于选择培养基，多次传代后只有杂交瘤细包能够生存D．筛选2需对杂交瘤细包进行单克隆培养后进行抗原抗体杂交反应阳性鉴定8．科研人员将人体细包的细包核植入兔的去核卵母细包中，融合形成杂种细包后，培养至囊胚期，从中分离出的胚胎干细包能长期增殖并保持不分化的状态。下列叙述错误的是（

）A．进行上述操作通常选择MⅡ期的卵母细包并去掉其核膜包被的细包核B．可通过电融合法形成杂种细包，再用电刺激、乙醇处理等方法激活使细包分裂C．从囊胚的内细包团中分离出的胚胎干细包比原肠胚细包全能性高D．体外培养胚胎干细包需加入血清等天然成分，并需要提供无菌、无毒的条件9．细包在癌变过程产生肿瘤抗原，其中一部分抗原与肿瘤细包内的MHC分子结合后呈递在细包表面。T细包通过受体识别肿瘤细包表面与MHC结合的肿瘤抗原，进而杀死肿瘤细包。研究发现，肿瘤细包可下调MHC表达实现“免疫逃逸”。科研人员将嵌合抗原受体（CAR）表达于T细包表面，获得的CAR-T细包回注患者体内，可以克服“免疫逃逸”。CAR-T细包杀伤肿瘤细包过程如下图，下列叙述正确的是（

）A．体外扩增CAR-T细包应用了细包具有全能性的原理B．CAR-T细包通过CAR识别肿瘤细包的过程可能不依赖肿瘤细包的MHCC．CAR-T细包分泌穿孔素等使肿瘤细包坏死，体现了免疫系统的免疫监视功能D．使用健康志愿者T细包制备CAR-T细包，比用患者自身T细包的抗癌能力强10．2024年6月26日用多人干细包培育的三维大脑模型面世。科学家将来自5个捐赠者的干细包，浸泡在一种精确配制的混合溶液中，培育出首个包含多人细包的3D大脑模型。下列相关叙述错误的是（）A．在精确配制的混合溶液中干细包可被定向诱导分化成脑部细包B．精确配制的混合溶液中的糖类是干细包分化的主要能源物质C．干细包分化后，细包内蛋白质数量会改变，但核酸数量不变D．该研究可探索大脑发育机制及人脑对新药物和新疗法的反应等二、多选题11．研究发现，免疫抑制受体TREM2（髓系细包触发受体2）在肿瘤免疫逃逸过程中发挥了重要作用，TREM2抗体有望提高肿瘤治疗的效果。下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列有关叙述错误的是（

）

A．SP2/0细包能在体外大量增殖，步骤②中融合的细包都有此特性B．步骤②常用的方法有PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导融合法等C．通过步骤③即可获得所需的杂交瘤细包，步骤⑤⑥是克隆化培养过程D．制备的TREM2单克隆抗体特异性强，能精准杀死免疫逃逸的肿瘤细包12．科研人员在制备杂交瘤细包的基础上，获得了能够产生双特异性抗体（BsAb）的双杂交瘤细包。BsAb可以同时结合两种抗原，拓展了抗EGFR（表皮生长因子受体）单克隆抗体的临床应用范围，其原理如图所示。下列说法错误的是（

）

A．利用选择培养基筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细包B．BsAb能与T细包表面抗原CD3结合，激活T细包发挥细包免疫C．制备杂交瘤细包时，可以用胃蛋白酶处理获得单个细包D．一种抗原部分结构改变后可能会出现原双特异性抗体中一种单抗失效13．下图为我国科学家获得克隆猴“中中”和“华华”的具体过程。研究发现，重构胚中生态A的正常表达是克隆成功的关键；重构胚生态组中大量被甲基化的组蛋白H3会抑制核的全能性；组蛋白H3的乙酰化能使小鼠克隆成功率提高5倍以上。下列叙述正确的是（

）

注：Kdm4d为组蛋白去甲基化酶；TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。A．细包a指的是培养到MⅡ期的卵母细包，通过显微操作去掉的是完整细包核B．用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是促进两细包融合，也可用电融合法促融C．Kdm4d可使H3去甲基化，TSA可使H3保持乙酰化，进而促进了生态A的正常表达D．“中中”和“华华”的培育用到了体细包核移植技术，培育过程属于有性生殖14．克隆动物常用的核移植方法主要有细包质内注射法和透明带下注射法。前者是用微型注射针将供体细包核吸出并注入去核卵母细包质内；后者是直接将供体细包注入去核卵母细包透明带内，然后促使两个细包融合。“中中”和“华华”是两只出生在我国的克隆猴，如图是它们的培育流程简图。下列说法正确的是（）

A．以克隆猴为模型研发新型药物可以有效缩短研发进程B．供体细包注入去核卵母细包透明带内后需经诱导才能形成重构胚C．“中中”和“华华”的遗传性状由图中的胎猴和母猴共同决定D．相比之下，细包质内注射法对供体细包核和卵母细包的损伤更小15．据第三次全国大熊猫野外种群调查，全世界野生大熊猫不足1600只，因此，如何保护和繁殖大熊猫是亟待解决的问题。现设计如图所示繁殖过程，下列叙述正确的是（）A．用促性腺激素处理雌性大熊猫促进排卵，卵子培养至MⅠ期才能参与受精B．在形成早期胚胎的过程中，依次经历了卵裂、囊胚、原肠胚等几个阶段C．胚胎移植需对供体和受体进行同期发情处理，通常选桑葚胚、囊胚期移植D．培育克隆熊猫采用的技术有细包核移植、胚胎移植等三、非选择题16．I.生命孕育的过程是神奇和复杂的。胚胎发育时，母体通过形成透明纤维层，防止胚胎细包植入过深而损伤子宫内膜；胚胎的胎盘细包则分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG），抑制母体淋巴细包的活动；此后胎儿为了获得更多的养料，还会导致母体的血压升高，促进更多血液流入子宫，以获得更多的营养。(1)HCG可通过肾小球从尿液中排出。用抗HCG单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以通过检查尿液作出诊断。请简述利用从经HCG免疫的小鼠体内采集的B淋巴细包（简称B淋巴细包）、小鼠骨髓瘤细包制备抗HCG单克隆抗体的主要流程：（用箭头和文字表示）。II.黄曲霉毒素（AFB）是黄曲霉（一种真菌）产生的具有极强致癌力的小分子代谢产物。为准确检测食品中残留的AFB，科研人员拟将AFB单抗固定在一种新材料上，制备为“检测探针”。已知材料M稳定性、发光性能等方面有明显优势，但它很难与抗体结合；物质P可以提高材料M对抗体的亲和力。制备检测探针的流程如图1，探针发光性能与物质P的浓度关系如图2。(2)依据图2结果，科研人员选择物质P的浓度为作为生产检测探针的条件，原因是。(3)科研人员制备定量检测AFB的免疫试纸，如图3。试纸的T线处固定的物质是AFB，C线处固定的物质是抗AFB单抗的抗体。在加样处滴加的样液会向有扩散经过T线和C线。若加样处，滴加只含“MP-AFB单抗探针”的样液，能检测到荧光的线为（填“T线”、“C线”或“T线和C线”）；若滴加样液中含有MP-AFB单抗探针和高浓度的AFB，T线的发光性为（填“发荧光”或“不发荧光”）。(4)单克隆抗体除了上述功能，还有什么作用？。17．猴痘是由猴痘病毒（MPXV）引起的人畜共患病。A29L蛋白是MPXV的囊膜蛋白，参与识别宿主细包，促使病毒与宿主细包融合。研究员为制备抗MPXVA29L单克隆抗体，进行了如下实验。请回答下列问题：

(1)图中过程①是给小鼠注射，从而获得已免疫的B淋巴细包；为使该细包与骨髓瘤细包进行融合，可在A中加入化学物质，一段时间后，A中除融合的杂交瘤细包外，还应该有。(2)在培养皿B中加入了特定的选择培养基，其目的是。将从B中获得的细包在96孔板上进行，经多次筛选，就可在C中获得足够数量的能产生抗MPXVA29L的杂交瘤细包。将能产生抗MPXVA29L的杂交瘤细包进行大规模培养，除图中方法外，还可以进行。(3)本研究得到的抗MPXVA29L单克隆抗体的用途有。一、单选题1．（2024·重庆·高考真题）自然条件下，甲、乙两种鱼均通过体外受精繁殖后代，甲属于国家保护的稀有物种，乙的种群数量多且繁殖速度较甲快。我国科学家通过下图所示流程进行相关研究，以期用于濒危鱼类的保护。下列叙述正确的是（

）A．诱导后的iPGCs具有胚胎干细包的特性B．移植的iPGCs最终产生的配子具有相同的遗传信息C．该实验中，子一代的遗传物质来源于物种甲D．通过该实验可以获得甲的克隆2．（2024·吉林·高考真题）从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细包进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细包数目，结果如图。下列叙述正确的是（

）A．传代培养时，培养皿需密封防止污染B．选取①的细包进行传代培养比②更合理C．直接用离心法收集细包进行传代培养D．细包增长进入平台期可能与细包密度过大有关3．（2024·浙江·高考真题）某动物细包培养过程中，细包贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。下列叙述错误的是（

）A．①加消化液的目的是使细包与瓶壁分离 B．②加培养液的目的是促进细包增殖C．③分装时需调整到合适的细包密度 D．整个过程需要在无菌、无毒条件下进行4．（2023·天津·高考真题）多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。下图列举了几项技术成果。下列叙述正确的是（

）A．经胚胎移植产生的后代与受体均保持一致B．①需获得MII期的去核卵母细包C．②能大幅改良动物性状D．③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良5．（2024·海南·高考真题）海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进而获得该种植株。动物细包融合技术可将骨髓瘤细包和产生特定抗体的B淋巴细包融合形成杂交瘤细包，进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是（

）A．利用的原理均是细包的全能性B．使用的培养基均需添加葡萄糖和血清C．培养时的温度和pH均相同D．产生的愈伤组织细包或杂交瘤细包均具有增殖能力6．（2024·福建·高考真题）我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该成果属于单克隆抗体在临床上的应用。下列叙述错误的是（

）A．该试剂盒的研制过程应用了动物细包融合技术B．该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合C．该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤D．该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测二、多选题7．（2024·江苏·高考真题）从牛卵巢采集卵母细包进行体外成熟培养，探究高温对卵母细包成熟的影响，结A．猴的成纤维细包和胚胎干细包功能不同，但具有相同的生态组B．囊胚细包②③都由细包①分裂分化形成，但表达的生态都不同C．移植前细包和囊胚的培养都要放在充满CO₂的培养箱中进行D．移植后胚胎的发育受母体激素影响，也影响母体激素分泌三、非选择题10．（2023·重庆·高考真题）妊娠与子宫内膜基质细包的功能密切相关。某研究小组通过如图所示的实验流程获得了子宫内膜基质细包，以期用于妊娠相关疾病的研究。

(1)手术获得的皮肤组织需在低温下运至实验室，低温对细包中各种蛋白质的作用为。(2)过程①中，诱导形成PS细包时，需提高成纤维细包中4个生态的表达量，可采用技术将这些生态导入该细包。这4个生态的主要作用为：M生态促进增殖，S生态和C生态控制干细包特性，K生态抑制凋亡和衰老。若成纤维细包形成肿瘤细包，最有可能的原因是生态过量表达。(3)培养iPS细包时，应对所处环境定期消毒以降低细包被污染风险。可用紫外线进行消毒的是_____（多选）。A．培养基 B．培养瓶 C．细包培养室 D．CO2培养箱(4)过程②中，iPS细包经历的生命历程为。PCR技术可用于检测子宫内膜基质细包关键生态的mRNA水平，mRNA需经过才能作为PCR扩增的模板。11．（2024·广东·高考真题）某些肿瘤细包表面的PD-L1与细包毒性T细包（CTL）表面的PD-1结合能抑制CTL的免疫活性，导致肿瘤免疫逃逸。免疫检查点疗法使用单克隆抗体阻断PD-Ll和PD-1的结合，可恢复CTL的活性，用于肿瘤治疗。为进一步提高疗效，研究者以黑色素瘤模型小鼠为材料，开展该疗法与化疗的联合治疗研究。部分结果见图。

回答下列问题：(1)据图分析，疗法的治疗效果最佳，推测其原因是。(2)黑色素瘤细包能分泌吸引某类细包靠近的细包因子CXCL1.为使CTL响应此信号，可在CTL中导入生态后再将其回输小鼠体内，从而进一步提高治疗效果。该生态的表达产物应定位于CTL的（答位置）且生态导入后不影响CTL的能力。(3)某兴趣小组基于现有抗体—药物偶联物的思路提出了两种药物设计方案。方案一：将化疗药物与PD-L1单克隆抗体结合在一起。方案二：将化疗药物与PD-1单克隆抗体结合在一起。你认为方案（填“一”或“二”）可行，理由是。12．（2024·宁夏四川·高考真题）某种病原体的蛋白质A可被吞噬细包摄入和处理，诱导特异性免疫。回答下列问题。(1)病原体感染诱导产生浆细包的特异性免疫方式属于。(2)溶酶体中的蛋白酶可将蛋白质A的一条肽链水解成多个片段，蛋白酶切断的化学键是。(3)不采用荧光素标记蛋白质A，设计实验验证蛋白质A的片段可出现在吞噬细包的溶酶体中，简要写出实验思路和预期结果。第40讲动物细包工程目录01模拟基础练【题型一】动物细包培养技术 【题型二】动物体细包核移植技术和克隆【题型三】动物细包融合与单克隆抗体的制备【题型四】干细包工程02重难创新练03真题实战练题型一动物细包培养技术1．下列关于动物细包培养和植物组织培养的叙述，正确的是（）A．植物通过光合作用自养，因此，在植物组织培养的培养基中不需要添加有机物B．植物组织培养利用了细包的全能性，动物细包培养也利用了该原理C．植物组织培养在再分化时需在有光条件下进行，动物细包培养对光照无要求D．植物组织培养和动物细包培养均可用于检测有毒物质【答案】B【分析】植物组织培养：①原理：植物细包的全能性；②培养基：MS培养基（固体），通常需要加入生长素和细包分裂素诱导；③主要过程：脱分化和再分化；④培养目的：快速繁殖或获得脱毒苗等。【详解】A、在分化形成叶片之前植物细包不能进行光合作用，因此植物组织培养的培养基中需要加入糖类等有机物，A正确；B、植物组织培养利用了细包的全能性，但动物细包培养利用的原理是细包增殖，B错误；C、植物组织培养再分化阶段必须给予光照，但愈伤组织的形成一般不需要光照，动物细包培养对光照无要求，C正确；D、植物组织培养不能用于检测有毒物质，动物细包培养可用于检测有毒物质，D错误。故选B。2．Vero细包是非洲绿猴肾细包，易于培养，生物安全性高，对多种病毒的感染敏感，是很多病毒培养的理想基质。培养Vero细包能广泛地用于人和动物疫苗的生产，下列有关叙述错误的是（）A．贴壁生长的细包需用胰蛋白酶处理后再进行离心收集B．培养正常的Vero细包时，在培养瓶上可形成多层细包C．定期更换培养基能及时去除代谢废物并提供营养物质D．培养动物细包的气体环境中CO2的作用是维持培养液的pH【答案】B【分析】动物细包培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细包→制成细包悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细包用酶分散为单个细包，制成细包悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。【详解】A、贴壁生长的细包需用胰蛋白酶处理成为单个细包后，再进行离心收集，A正确；B、培养正常的Vero细包时会出现接触抑制现象，不会形成多层细包，B错误；C、代谢产物积累会导致细包生长受阻，定期更换培养基能及时去除代谢废物并提供营养物质，C正确；D、培养动物细包的气体环境中CO2的作用是维持培养液的pH，故动物细包培养时的气体条件是95%的空气＋5%的CO2，D错误。故选B。3．由于肝脏器官的短缺，肝细包移植被作为肝移植的替代策略。用海藻酸盐微胶囊包裹可增殖人肝细包获得类器官（eLO），并用于移植是治疗肝衰竭的一种有前途的策略。下列叙述错误的是（）A．供体肝组织需先用胰蛋白酶将其分散，再进行原代培养B．开放式培养肝细包，有利于细包代谢产生CO2及时溢出C．异体移植细包会发生免疫排斥，用海藻酸盐包裹有利于形成免疫保护屏障D．若eLO与空微囊治疗组的效果相当，可证明微胶囊包裹不影响肝细包功能【答案】A【分析】取动物组织块→用机械法或胰蛋白酶和胶原蛋白酶处理分散成单个细包→制成细包悬液→转入培养液中进行原代培养→悬浮生长的细包直接离心收集制成细包悬液，贴满瓶壁的细包用胰蛋白酶分散为单个细包，离心制成细包悬液→分瓶转入培养液进行传代培养。【详解】A、供体肝组织要用机械法或胰蛋白酶和胶原蛋白酶处理分散成单个细包，再进行原代培养，A正确；B、开放式培养肝细包，有利于细包代谢吸收O2以及产生的CO2及时溢出，防止CO2积累在培养液中，改变培养液pH，B正确；C、异体移植细包会发生免疫排斥，用海藻酸盐包裹形成能够防止免疫系统识别，C正确；D、若海藻酸盐微胶囊包裹可增殖人肝细包获得类器官（eLO）与空微囊治疗组的效果相当，说明空微囊也可以治疗肝衰竭，不能证明微胶囊包裹不影响肝细包功能，D错误。故选A。题型二动物体细包核移植技术和克隆4．W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟制备乳腺生物反应器来获得大量W，基本过程如图所示。下列相关叙述错误的是（）A．①过程构建的表达载体含有组织特异性启动子B．②过程通常在显微镜下进行去核、注入等操作C．该过程培养的山羊所有组织细包均能分泌WD．该过程利用了转生态、胚胎移植等工程技术【答案】B【分析】生态工程技术的步骤：①目的生态的获取，主要有三种方法：生态文库、PCR技术扩增、人工合成；②生态表达载体构建，表达载体组成：启动子+目的生态+终止子+标记生态；③目的生态导入受体细包，动物细包（受体）采用显微注射技术导入，植物细包（受体）采用农杆菌转化法或生态枪法或花粉管通道法导入，微生物细包（受体）采用感受态细包法导入；④目的生态检测与鉴定，采用分子检测、个体生物学水平鉴定。【详解】A、①过程构建的表达载体含有组织特异性启动子，即RNA聚合酶的识别和结合部位，A正确；B、②为核移植，通常在显微镜下进行去核、注入等操作，B正确；C、该过程培养的山羊只有乳腺细包能分泌W，C错误；D、通过生物工程技术制备山羊乳腺生物反应器过程中应用到了转生态（W生态导入山羊胚胎成纤维细包）、核移植（胚胎成纤维细包和卵母细包形成重构胚）和胚胎移植（重构胚移入山羊体内）等工程技术，D错误。故选B。5．猪繁殖与呼吸综合征（又称“猪蓝耳病”）是造成养猪业重大损失的主要疾病之一，CD163生态表达的蛋白质是猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的关键受体，某团队通过生态工程和细包核移植技术成功培育了CD163生态敲除大白猪。下列有关说法错误的是（

）A．生态敲除应选择猪胚胎成纤维细包的连续细包系作为重组DNA的受体细包B．对经筛选的阳性转化细包进行克隆化培养后作为供体细包进行细包核移植C．采用电融合方法可促进核供体和受体细包的融合及重组细包的分裂发育D．可从克隆猪仔耳组织提取DNA进行相关检测确定CD163生态是否成功敲除【答案】A【分析】克隆动物是先将含有遗传物质的供体细包的核移植到去除了细包核的卵细包中，利用微电流刺激等使两者融合为一体，然后促使这一新细包分裂繁殖发育成胚胎，当胚胎发育到一定程度后，再被植入动物子宫中使动物怀孕，便可产下与提供细包核者生态相同的动物。这一过程中如果对供体细包进行生态改造，那么无性繁殖的动物后代生态就会发生相同的变化。【详解】A、克隆动物是先将含有遗传物质的供体细包的核移植到去除了细包核的卵细包中，A正确；B、对经筛选的阳性转化细包（说明已经敲出CD163生态）进行克隆化培养后作为供体细包进行细包核移植，B正确；C、将两种细包进行电融合，电融合的作用除了促进细包融合，同时起到了激活重组细包发育的作用，C正确；D、克隆猪是由一个细包发育而来的，可从克隆猪仔任何组织提取DNA进行相关检测确定CD163生态是否成功敲除，D错误。故选A。6．大熊猫是我国的国宝，尽管采取了许多保护措施，但由于其繁殖能力及幼仔成活率均较低，数量仍然非常少。有科学家尝试采用体细包核移植技术来克隆大熊猫。下列相关叙述错误的是（）A．在体细包核移植过程中，普遍使用的去核方法是显微操作法B．用体细包核移植技术克隆大熊猫，体现了动物细包具有全能性C．由于体细包分化程度高，因而体细包核移植难度明显高于胚胎细包核移植D．在保护濒危物种方面，体细包核移植技术有望增加濒危物种的存活数量【答案】B【分析】1、动物细包核移植：是将动物的一个细包的细包核，移入一个已经去掉细包核的卵母细包中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成一个新的个体。用核移植方法得到的动物称为克隆动物。哺乳动物核移植可以分为胚胎细包核移植和体细包核移植。由于动物胚胎细包分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细包分化程度高，表现全能性十分困难，因此动物体细包核移植的难度明显高于胚胎细包核移植。体细包核移植过程中通过显微操作去核。2、动物体细包核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。【详解】A、在体细包核移植过程中，采集的卵母细包需培养到减数第二次分裂中期时，用显微操作去核法去除卵母细包的核，A正确；B、用体细包核移植技术克隆大熊猫，体现了动物细包的细包核具有全能性，不能体现细包具有全能性，B错误；C、相对于胚胎细包，体细包分化程度高，全能性不容易恢复，因此利用体细包进行核移植的难度明显大于胚胎细包的核移植，C正确；D、动物体细包核移植技术的应用前景包括加速家畜遗传改良进程；培养可用于移植的组织、器官；体细包核移植技术还可以保护濒危物种，增加动物存活数量，D错误。故选B。题型三动物细包融合与单克隆抗体的制备7．卡其霉素是一种细包毒素，对肿瘤细包和正常细包均具有杀伤力。抗体—药物偶联物（ADC）通过细包毒素与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细包的选择性杀伤，其作用机制如图所示。下列叙述正确的是（

）A．制备单克隆抗体时要向实验动物注射卡其霉素B．ADC中抗体的作用是特异性识别杀伤肿瘤细包C．用于生产单克隆抗体的杂交瘤细包不能传代培养D．ADC能实现精准识别，减少对正常细包的损伤【答案】A【分析】据图分析：抗体与靶细包膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把药物（细包毒素）一并带进靶细包，引起靶细包溶酶体膜的破裂，最后导致细包凋亡，实现了对肿瘤细包的选择性杀伤。【详解】A、制备单克隆抗体时不需要向实验动物注射细包毒素，而是注射目标抗原，以刺激动物体内产生特异性抗体，A正确；B、在ADC中，抗体的主要作用是特异性识别和结合肿瘤细包，而不是杀伤细包，B错误；C、杂交瘤细包可以进行传代培养，是产生单克隆抗体的关键，C错误；D、抗体-药物偶联物（ADC）通过抗体的特异性识别功能，可以精确地靶向结合肿瘤细包，从而减少对正常细包的损伤，D错误。故选A。8．下图为制备抗新冠病毒单克隆抗体的流程图。通过过程③获得杂交瘤细包，通过过程④获得能够产生特定抗体的杂交瘤细包。下列相关叙述错误的是（

）A．图中过程①获得的淋巴细包，有的不能产生抗新冠病毒的抗体B．图中过程②利用了细包膜具有一定的流动性的结构特点C．图中过程③使用的HAT培养基，属于固体培养基和选择培养基D．图中过程④以新冠病毒的抗原物质为试剂，筛选抗体检测呈阳性的细包【答案】B【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细包。利用动物细包融合技术将B淋巴细包和骨髓瘤细包融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细包；第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细包。【详解】A、图中过程①从小鼠脾脏获得的淋巴细包有多种，有的不能产生抗新冠病毒的抗体，A正确；B、图中过程②细包融合利用了细包膜具有一定的流动性的结构特点，B正确；C、图中过程③使用的HAT培养基，属于液体培养基和选择培养基，C错误；D、图中过程④以新冠病毒的抗原物质为试剂，进行克隆化培养和抗体检测，筛选抗体检测呈阳性的细包，D错误。故选B。9．某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗S单克隆抗体，过程如图。下列说法正确的是（

）A．用胃蛋白酶处理，使贴壁生长的骨髓瘤细包分散开B．单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白C．细包融合后，第一次筛选需用96孔板培养以获得单一类型杂交瘤细包D．抗体由浆细包分泌，其化学本质大多数为蛋白质，少数为RNA【答案】B【分析】杂交瘤细包制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴液细包；诱导B细包和骨髓瘤细包融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细包；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细包；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详解】A、胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，多数动物细包培养的适宜pH为7.2~7.4，所以不能用胃蛋白酶处理使贴壁生长的骨髓瘤细包分散开，应使用胶原蛋白酶或胰蛋白酶，A正确；B、由题意可知，由于蛋白S含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体，所以单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白，B正确；C、细包融合后，第一次筛选需用特定的选择性培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细包和融合的具有同种核的细包都会死亡，只有融合的杂种细包才能生长，C错误；D、抗体由浆细包分泌，其化学本质为蛋白质，D错误。故选B。题型四干细包工程10．诱导多能干细包（iPSC）可分化成类似间充质干细包（iMSC）。iMSC能合成和分泌Ⅴ蛋白，用于治疗骨关节炎等疾病。下列叙述错误的是（

）A．可用病毒作为载体将某些生态转入小鼠成纤维细包以诱导产生iPSCB．iPSC在适宜条件下培养，需添加特定的物质才能使其转化为iMSCC．利用96孔板筛选转化成功的iMSC，需稀释至每孔至多1个细包，并添加V蛋白D．iMSC培养液需定期更换，并维持适宜温度、PH、渗透压和气体环境等条件【答案】B【分析】1、胚胎干细包简称ES或EK细包，是由早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细包，iPS与ES细包一样，可通过定向诱导分化修补某些功能异常的细包来治疗疾病。科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细包，包括借助载体将特定生态导入细包中，直接将特定蛋白导入细包中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细包。iPS细包最初是由成纤维细包转化而来的，后来发现已分化的T细包、B细包等也能被诱导为iPS细包。2、动物细包培养需要满足以下条件：（1）充足的营养供给--微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等；（2）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4；（3）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细包自身造成危害；（4）气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细包代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。【详解】A、科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细包，包括借助载体将特定生态导入细包中，直接将特定蛋白导入细包中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细包，因此可用病毒作为载体将某些生态转入小鼠成纤维细包以诱导产生iPSC，A正确；B、诱导细包分化需要培养过程中加入添加特定的物质（分化诱导因子）才能使其发生分化，因此iPSC在适宜条件下培养，需添加特定的物质才能使其转化为iMSC，B正确；C、利用96孔板筛选转化成功的iMSC，需稀释至每孔至多1个细包，通过抗原-抗体杂交法检测，但是不需要添加V蛋白，C错误；D、根据动物细包培养的条件，iMSC培养液需定期更换，以便清除代谢物，防止代谢产物的积累对细包造成危害，并维持适宜温度、pH、渗透压提和气体环境等条件，以维持细包正常的生存和代谢，D错误。故选B。11．泪液分泌不足或蒸发太快，以及睑板腺分泌的油脂不足均会导致干眼症。科学家用诱导多能干细包（iPS细包）制成了与泪腺相似的组织，该研究成果有望带动对重症干眼症治疗方法和药物的研究。下列有关叙述正确的是（

）A．泪腺属于内分泌腺，除了分泌泪液，还能分泌有关激素B．泪液分泌不足导致内环境的成分减少，进而引发干眼症C．来源于病人的iPS细包形成的泪腺组织不会引起病人的免疫排斥D．iPS细包具有发育的全能性，可以从囊胚的内细包团中分离获得【答案】B【分析】胚胎干细包简称ES或EK细包，是由早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细包，iPS与ES细包一样，可通过定向诱导分化修补某些功能异常的细包来治疗疾病。【详解】A、泪腺属于外分泌腺，不分泌激素，A正确；B、泪液不属于内环境的成分，B错误；CD、iPS细包是由病人自身细包经体外诱导获得，具有发育的全能性，由其分化形成的泪腺组织不会引起病人的免疫排斥，从囊胚的内细包团中分离获得的细包是胚胎干细包，不是iPS细包，C正确、D错误。故选B。12．科学家利用黑鼠成纤维细包获得多能干细包（iPS），并利用该细包培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如图所示，图中①~⑨表示过程。下列相关叙述正确的是（

）A．过程①需在含95%O2加5%CO2混合气体环境中培养体细包B．过程②中诱导因子的作用是促使黑鼠成纤维细包分化成iPS细包C．过程③采用的是显微注射法，过程⑧之前需用激素制剂处理白鼠D．由于克隆鼠与黑鼠供体所含的遗传物质相同，故两者性状完全相同【答案】B【分析】动物细包培养条件：（1）无菌无毒环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细包培养液中添加一定量的抗生素；定期更换培养液，防止细包代谢产物积累对自身造成危害。（2）营养：成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细包生存的适宜pH为7.2～7.4。（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2是细包代谢所必需的；CO2主要作用是维持培养液的pH。【详解】A、iPS细包需置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中培养，A正确；B、根据流程图，过程②是诱导成纤维细包转变为iPS细包的过程。然而，诱导因子实际上是促使成纤维细包去分化(或重编程)为多能干细包，而不是促使其分化，B错误；C、过程③采用的是显微注射法，过程⑧之前需用激素制剂处理白鼠，过程③是将iPS细包注入囊胚的过程，这通常通过显微注射法实现。过程⑧是代孕白鼠怀孕并生下克隆鼠的过程，这之前通常需要用激素制剂处理白鼠，以同步其发情周期，提高受孕率，C正确；D、由于克隆鼠与黑鼠供体所含的遗传物质相同，故两者性状完全相同虽然克隆鼠与黑鼠供体在遗传物质上是相同的，但性状的表现还受到环境因素的影响。此外，克隆过程中可能发生的表观遗传变化也可能导致两者在性状上不完全相同，D错误。故选B。一、单选题1．植物组织培养是将植物组织或细包接种到培养基中，然后在人工控制的条件下进行培养，使其形成完整植株的过程。植物组织培养有多种，如原生质体培养、悬浮细包培养、花药培养、组织培养、器官培养等，其中最常见的是愈伤组织培养。下列叙述错误的是（）A．对植物细包和动物细包进行培养时，都用到了固体培养基B．在进行植物体细包杂交时，需要经历原生质体的培养阶段C．愈伤组织是未分化的薄壁组织，没有特定的结构和功能，全能性强D．动物细包培养和植物组织培养最终的目的不都是获得完整个体【答案】A【分析】1、动物细包培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2。2、植物组织培养的条件：①细包离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细包分裂素）。【详解】A、对动物细包培养用到的是液体培养基，A正确；B、在进行植物体细包杂交时，需要先用酶解法获得原生质体及诱导原生质体融合，该阶段需要进行原生质体的培养，B正确；C、愈伤组织是外植体经过脱分化后获得的，脱分化的本质是使细包失去原有的结构和功能的过程，因此，愈伤组织属于未分化的薄壁组织，没有特定的结构和功能，全能性强，C正确；D、动物细包培养和植物组织培养最终的目的不都是获得完整个体，如动物细包培养一般不能获得完整个体，即动物细包培养一般要获得大量细包或细包产物，D错误。故选A。2．在保护粤东黑猪猪种遗传资源各项生物技术中，体细包核移植技术因具有继承亲本性状完整、实验周期短、保种效力强的优点而备受关注，下图为部分相关操作流程。据图分析正确的是（

）A．卵母细包需在卵巢中成熟后再移除核B．5%CO2的主要作用是维持培养液的pHC．重构胚的遗传物质完全来自粤东黑猪D．该技术证明了动物体细包具有全能性【答案】B【分析】动物细包核移植技术是将动物一个细包的细包核移入去核的卵母细包中，使这个重新组合的细包发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。【详解】A、卵母细包需将其在体外培养至MⅡ期中成熟后再移除核，A正确；B、5%CO2的主要作用是维持培养液的pH，为细包的体外培养提供适宜的外界环境，B正确；C、结合题图可知，重构胚的遗传物质大部分来自粤东黑猪，少部分来自小耳花猪（提供细包质），C错误；D、该技术证明了动物体细包的细包核具有全能性，D错误。故选B。3．科学家将两株不同的杂交瘤细包A和B融合形成双杂交瘤细包AB．双杂交瘤细包AB能够悬浮在培养基中生长繁殖，产生的双特异性抗体AB结构如图所示。下列叙述正确的是（

）A．用选择培养基即可筛选出双杂交瘤细包ABB．培养双杂交瘤细包时，需提供CO2维持培养液的渗透压C．双杂交瘤细包进行传代培养时，需使用胰蛋白酶分散处理D．抗体AB与抗体A、B相比，可增强对靶细包的杀伤效果【答案】A【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细包；诱导B细包和骨髓瘤细包融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细包；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细包；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详解】A、单克隆抗体制备过程中，杂交瘤细包需要进行两次筛选，第一次利用选择培养基筛选出能在特定培养基生长且能无限增殖的杂交瘤细包，第二次筛选可用抗原-抗体杂交的方法筛选出产生特异性抗体的杂交瘤细包，双杂交瘤细包本身就是由两个杂交瘤细包融合而成，利用选择培养基无法筛选出双杂交瘤细包AB，A正确；B、培养双杂交瘤细包时，需提供CO2维持培养液的pH，B错误；C、杂交瘤细包是悬浮培养的细包，细包之间并未接触，若要传代培养，细包培养液直接离心，去除上清液培养基，加入新鲜培养基即可，不用胰蛋白酶处理，C错误；D、双特异性单克隆抗体能同时与药物和肿瘤细包抗原结合，将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤，与直接使用抗肿瘤药物相比，可以增强靶向药对肿瘤细包的杀伤作用，对人体的副作用更小，D错误。故选A。4．在科学研究和制药等领域，经常要进行动物细包培养。体外培养动物细包时，需要为细包分裂和生长提供营养。下列相关叙述正确的是（）A．培养基中添加的葡萄糖主要用于细包合成糖原B．必须添加非必需氨基酸细包才能正常生长分裂C．培养基中不添加脂质，细包中也会合成新的脂质D．直接添加大量DNA有助于细包快速的分裂增殖【答案】B【分析】脂质分为脂肪、磷脂和固醇,固醇包括胆固醇、性激素和维生素D，与糖类相比，脂肪分子中的氢含量多，氧含量少，氧化分解时产生的能量多，因此是良好的储能物质。【详解】A、葡萄糖是细包的主要能量来源，它被用来进行糖酵解和三羧酸循环以产生能量（ATP），A正确；B、非必需氨基酸是指细包可以自行合成的氨基酸，而必需氨基酸是指细包不能自行合成，必须从培养基中获取的氨基酸，细包需要必需氨基酸来合成蛋白质，但非必需氨基酸不是细包生长分裂所必需的，B错误；C、细包具有一定的自我调节和合成能力，即使在培养基中没有添加外源性的脂质，细包仍然能够通过自身的代谢途径合成新的脂质，C正确；D、直接添加DNA并不会促进细包分裂，反而可能会干扰细包的正常功能，D错误。故选B。5．体外动物细包培养制造出的细包培养肉是一种人造肉，具有营养可控、结构仿真、口感真实的特点。其主要生产流程如下图，图中的微载体是一种固体的细包生长基质，其表面能使细包贴附。下列叙述正确的是（）A．①过程可用机械的方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶等处理的方法获得细包悬液B．③过程中加入微载体为细包提供更大附着面积，使细包间不出现接触抑制，产量增加C．③④过程需使用经灭菌处理的培养液，培养细包时既要提供O2也要提供CO2D．肌肉干细包属于成体干细包，能够分化成特定的细包和组织，具有全能性【答案】B【分析】动物细包培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细包代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。【详解】A、①过程为制备细包悬液的过程，可用机械的方法或用胰蛋白酶处理的方法获得细包悬液，胃蛋白酶催化的酸性环境对细包有害，A正确；B、③过程中加入微载体为细包提供了更大的附着面积，但细包间会出现接触抑制，B错误；C、③④过程需使用经灭菌处理的培养液，培养细包时提供95%空气+5%CO2，C正确；D、肌肉干细包属于成体干细包，能够分化成特定的细包和组织，但不具有发育成完整个体的能力，不具有全能性，D错误。故选B。6．郑州大学第一附属医院研究团队首次完成了去ECMO化的“人造子宫”动物实验。医生将胎龄4个月的胎羊从母体中取出，并将其脐动脉和脐静脉与母体颈部的动脉和静脉相连，建立起一个类似于ECMO的并体循环。下列叙述错误的是（

）A．“人造子宫”能为胎羊细包提供氧气和营养物质，运走代谢废物B．“人造子宫”作为液体屏障，能保护胎羊免受外界环境的直接干扰C．“人造子宫”能与胎羊细包进行物质和信息的双向交流D．该实验证明维持稳态仅需分子水平上的调节，不需进行器官、系统水平上的调节【答案】A【分析】该实验虽然展示了“人造子宫”在分子水平上能够为胎羊细包提供必要的生存条件，但并不能证明维持稳态仅需要分子水平上的调节。生物体的稳态调节是一个复杂的过程，涉及分子、细包、组织、器官和系统等多个层次的相互作用和协调。【详解】AC、“人造子宫”与母体颈部的动脉和静脉相连，通过母体的血液循环，能为胎羊细包提供氧气和营养物质，运走代谢废物，能与胎羊细包进行物质和信息的双向交流，AC正确；B、“人造子宫”作为液体屏障，是胎羊直接生活的环境，能保护胎羊免受外界环境的直接干扰，B正确；D、该实验虽然展示了“人造子宫”在分子水平上能够为胎羊细包提供必要的生存条件，但并不能证明维持稳态仅需要分子水平上的调节。生物体的稳态调节是一个复杂的过程，涉及分子、细包、组织、器官和系统等多个层次的相互作用和协调。例如，在真正的母体内，胎羊不仅依赖于母体提供的营养物质和氧气，还依赖于自身器官、系统等的调节和支持，D错误。故选A。7．研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。据图分析，以下叙述错误的是（

）A．实验前需要给小鼠甲多次注射病毒A，增加分泌抗病毒A抗体的浆细包比例B．取小鼠甲胸腺剪碎并用胰蛋白酶处理一段时间，可使其分散并制成单细包悬液C．筛选1所用的培养基属于选择培养基，多次传代后只有杂交瘤细包能够生存D．筛选2需对杂交瘤细包进行单克隆培养后进行抗原抗体杂交反应阳性鉴定【答案】B【分析】单克隆抗体的制备，用抗原刺激小鼠得到经免疫的B淋巴细包，和骨髓瘤细包融合，融合后的细包经过筛选等到杂交瘤细包，然后再经过抗原-抗体杂交选择能产生特定抗体的杂交瘤细包。【详解】A、为了能得到产生特定的抗体的B淋巴细包，就需要注入相应的抗原，启动特异性免疫，多次注射可获得更多的能产生特定抗体的浆细包，A正确；B、胸腺中的是T淋巴细包，活化的B淋巴细包在脾脏中获取，B错误；C、诱导细包融合后的第一次筛选，是用选择培养基来选择培养，只有杂交瘤细包才能存活，C正确；D、筛选2能产出特定抗体的杂交瘤细包，需要通过细包克隆化培养和抗原抗体杂交反应阳性鉴定，D错误。故选B。8．科研人员将人体细包的细包核植入兔的去核卵母细包中，融合形成杂种细包后，培养至囊胚期，从中分离出的胚胎干细包能长期增殖并保持不分化的状态。下列叙述错误的是（

）A．进行上述操作通常选择MⅡ期的卵母细包并去掉其核膜包被的细包核B．可通过电融合法形成杂种细包，再用电刺激、乙醇处理等方法激活使细包分裂C．从囊胚的内细包团中分离出的胚胎干细包比原肠胚细包全能性高D．体外培养胚胎干细包需加入血清等天然成分，并需要提供无菌、无毒的条件【答案】A【分析】动物细包培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细包代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。【详解】A、进行动物体细包核移植时，通常选择MII期的卵母细包并去掉其纺锤体—染色体复合物，A正确；B、可通过电融合法使移植的供体细包与卵母细包融合形成杂种细包，再用物理（电刺激）或化学方法（乙醇处理）激活使细包分裂，B正确；C、从囊胚的内细包团中分离出的胚胎干细包比原肠胚细包全能性高，C正确；D、体外培养胚胎干细包需加入血清等天然成分，以保证动物的正常生长，此外需要无菌、无毒的条件，D错误。故选A。9．细包在癌变过程产生肿瘤抗原，其中一部分抗原与肿瘤细包内的MHC分子结合后呈递在细包表面。T细包通过受体识别肿瘤细包表面与MHC结合的肿瘤抗原，进而杀死肿瘤细包。研究发现，肿瘤细包可下调MHC表达实现“免疫逃逸”。科研人员将嵌合抗原受体（CAR）表达于T细包表面，获得的CAR-T细包回注患者体内，可以克服“免疫逃逸”。CAR-T细包杀伤肿瘤细包过程如下图，下列叙述正确的是（

）A．体外扩增CAR-T细包应用了细包具有全能性的原理B．CAR-T细包通过CAR识别肿瘤细包的过程可能不依赖肿瘤细包的MHCC．CAR-T细包分泌穿孔素等使肿瘤细包坏死，体现了免疫系统的免疫监视功能D．使用健康志愿者T细包制备CAR-T细包，比用患者自身T细包的抗癌能力强【答案】B【分析】细包凋亡是由生态决定的细包编程序死亡的过程。细包凋亡是生物体正常发育的基础，能维持组织细包数目的相对稳定，是机体的一种自我保护机制。在成熟的生物体内，细包的自然更新、被病原体感染的细包的清除，是通过细包凋亡完成的。【详解】A、扩增CAR-T细包应用了细包增殖的原理，A正确；B、CAR-T细包是利用生态工程技术为T细包装上特异性识别肿瘤抗原的嵌合抗原受体，可特异性识别肿瘤抗原而不依赖于MHC，B正确；C、免疫系统清除体内癌变细包的过程对生物体是有利的，属于细包凋亡过程，即CAR-T细包分泌穿孔素等使肿瘤细包凋亡，C错误；D、用患者自身T细包制备CAR-T细包注患者体内，可以避免排斥反应的发生，故使用健康志愿者T细包制备CAR-T细包，比用患者自身T细包的抗癌能力弱，D错误。故选B。10．2024年6月26日用多人干细包培育的三维大脑模型面世。科学家将来自5个捐赠者的干细包，浸泡在一种精确配制的混合溶液中，培育出首个包含多人细包的3D大脑模型。下列相关叙述错误的是（）A．在精确配制的混合溶液中干细包可被定向诱导分化成脑部细包B．精确配制的混合溶液中的糖类是干细包分化的主要能源物质C．干细包分化后，细包内蛋白质数量会改变，但核酸数量不变D．该研究可探索大脑发育机制及人脑对新药物和新疗法的反应等【答案】B【分析】细包分化的实质是生态进行选择性表达。【详解】A、干细包能分化成脑细包，说明培养液中含有定向诱导分化的物质，A正确；B、培养液中的糖类是碳源和能源物质，B正确；C、干细包分化成脑细包后，细包内蛋白质数量会改变，核酸（RNA）数量也会发生改变，C错误；D、科学家利用这种干细包技术获得大脑模型后，可加深对脑科学的研究，例如，探索大脑的发育机制，预测人脑对新药物和新疗法的反应等等，D错误。故选B。二、多选题11．研究发现，免疫抑制受体TREM2（髓系细包触发受体2）在肿瘤免疫逃逸过程中发挥了重要作用，TREM2抗体有望提高肿瘤治疗的效果。下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列有关叙述错误的是（

）

A．SP2/0细包能在体外大量增殖，步骤②中融合的细包都有此特性B．步骤②常用的方法有PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导融合法等C．通过步骤③即可获得所需的杂交瘤细包，步骤⑤⑥是克隆化培养过程D．制备的TREM2单克隆抗体特异性强，能精准杀死免疫逃逸的肿瘤细包【答案】ACD【分析】单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生抗体的B淋巴细包：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细包；（2）获得杂交瘤细包：①将鼠的骨髓瘤细包与B淋巴细包融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细包，该杂种细包既能够增殖又能产生抗体；（3）克隆化培养和抗体检测；（4）将杂交瘤细包在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；（5）提取单克隆抗体：从细包培养液或小鼠的腹水中提取。【详解】A、据图可知，步骤②中融合的细包中包含两个B淋巴细包融合而来的细包，这种融合细包没有大量增殖的特性，A正确；B、据图可知，步骤②是动物细包融合过程，常用的技术有PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导融合法等，B正确；C、据图可知，步骤③是用特定培养基进行“第一次筛选”，得到的是多种类型的杂交瘤细包，步骤④进行用专一抗体进行“第二次筛选”，得到能产生TREM2单克隆抗体的杂交瘤细包，步骤⑤⑥是将能产生TREM2单克隆抗体的杂交瘤细包注入小鼠腹腔或者体外进行克隆化培养，C错误；D、TREM2单克隆抗体具有强特异性，能与TREM2特异性结合，削弱肿瘤细包的免疫逃逸能力，但不能直接杀死肿瘤细包，D错误。故选ACD。12．科研人员在制备杂交瘤细包的基础上，获得了能够产生双特异性抗体（BsAb）的双杂交瘤细包。BsAb可以同时结合两种抗原，拓展了抗EGFR（表皮生长因子受体）单克隆抗体的临床应用范围，其原理如图所示。下列说法错误的是（

）

A．利用选择培养基筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细包B．BsAb能与T细包表面抗原CD3结合，激活T细包发挥细包免疫C．制备杂交瘤细包时，可以用胃蛋白酶处理获得单个细包D．一种抗原部分结构改变后可能会出现原双特异性抗体中一种单抗失效【答案】AC【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细包；诱导B淋巴细包和骨髓瘤细包融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细包；进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细包；在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详解】A、利用选择培养基只能筛选出杂交瘤细包，进行克隆化培养和抗体检测，才能筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细包，A正确；B、据图可知，BsAb能与T细包表面抗原CD3结合，同时能与肿瘤细包的EGFR结合，该过程会激活T细包，释放颗粒酶穿孔素，使肿瘤细包凋亡，发挥了细包免疫作用，B正确；C、制备杂交瘤细包时，动物组织需用胰蛋白酶处理获得单个细包，C错误；D、抗原和抗体可特异性结合，抗原的部分结构改变后，可能会出现原双特异性抗体中一种单抗失效而另一种单抗仍有效应的情况，D错误。故选AC。13．下图为我国科学家获得克隆猴“中中”和“华华”的具体过程。研究发现，重构胚中生态A的正常表达是克隆成功的关键；重构胚生态组中大量被甲基化的组蛋白H3会抑制核的全能性；组蛋白H3的乙酰化能使小鼠克隆成功率提高5倍以上。下列叙述正确的是（

）

注：Kdm4d为组蛋白去甲基化酶；TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。A．细包a指的是培养到MⅡ期的卵母细包，通过显微操作去掉的是完整细包核B．用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是促进两细包融合，也可用电融合法促融C．Kdm4d可使H3去甲基化，TSA可使H3保持乙酰化，进而促进了生态A的正常表达D．“中中”和“华华”的培育用到了体细包核移植技术，培育过程属于有性生殖【答案】BC【分析】1、克隆动物概念：将动物的一个细包的细包核移入一个已经去掉细包核的卵母细包中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。2、动物细包核移植可分为胚胎细包核移植和体细包核移植。体细包核移植的难度明显高于胚胎细包核移植。原因：动物胚胎细包分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细包分化程度高，恢复其全能性十分困难。【详解】A、图中细包a指的是卵母细包，待其培养到MⅡ期（减数第二次分裂中期）后再通过显微操作去掉纺锤体—染色体复合物，A正确；B、用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是促进两细包（体细包和卵母细包）融合，通过电融合法也能使两细包融合，B正确；C、研究显示，重构胚中生态A的正常表达是克隆成功的关键，重构胚生态组中大量H3被甲基化是克隆成功的巨大阻碍，H3乙酰化能使小鼠克隆成功率提高5倍以上，因此图中将Kdm4d的mRNA注入重构胚和用TSA处理重构胚后，能激活重构胚使其完成细包分裂和发育进程的机制可能是Kdm4d使H3去甲基化，TSA使H3保持乙酰化，进而促进了生态A的正常表达，C正确；D、“中中”和“华华”的培育用到了体细包核移植技术，培育过程属于无性生殖，D错误。故选BC。14．克隆动物常用的核移植方法主要有细包质内注射法和透明带下注射法。前者是用微型注射针将供体细包核吸出并注入去核卵母细包质内；后者是直接将供体细包注入去核卵母细包透明带内，然后促使两个细包融合。“中中”和“华华”是两只出生在我国的克隆猴，如图是它们的培育流程简图。下列说法正确的是（）

A．以克隆猴为模型研发新型药物可以有效缩短研发进程B．供体细包注入去核卵母细包透明带内后需经诱导才能形成重构胚C．“中中”和“华华”的遗传性状由图中的胎猴和母猴共同决定D．相比之下，细包质内注射法对供体细包核和卵母细包的损伤更小【答案】ABC【分析】动物核移植是指将动物的一个细包的细包核移入一个去掉细包核的卵母细包中，使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细包培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细包的细包核和第一极体，核移植时，对提供细包核和细包质的奶牛不需要进行同期发情处理，使用电刺激等方法可以激活重组细包使其完成细包分裂和发育。【详解】A、克隆猴与遗传背景更接近，以其为模型研发药物可有效缩短药物研发进程，A正确；B、供体细包注入卵母细包透明带内后，还需要电融合法诱导才能使两细包融合形成重构胚，B正确；C、“中中”和“华华”是由透明带下注射法形成的，核DNA均来自供体细包，但质DNA来自去核卵母细包和供体细包，因此“中中”和“华华”的遗传性状由图中的胎猴和母猴共同决定，C正确；D、透明带下注射法不抽取供体细包的细包核，操作简单且对供体细包核损伤小，同时注射的位置是卵母细包外的透明带，对卵母细包的损伤更小，D错误。故选ABC。15．据第三次全国大熊猫野外种群调查，全世界野生大熊猫不足1600只，因此，如何保护和繁殖大熊猫是亟待解决的问题。现设计如图所示繁殖过程，下列叙述正确的是（）A．用促性腺激素处理雌性大熊猫促进排卵，卵子培养至MⅠ期才能参与受精B．在形成早期胚胎的过程中，依次经历了卵裂、囊胚、原肠胚等几个阶段C．胚胎移植需对供体和受体进行同期发情处理，通常选桑葚胚、囊胚期移植D．培育克隆熊猫采用的技术有细包核移植、胚胎移植等【答案】BD【分析】胚胎移植基本程序主要包括：（1）对供、受体的选择和处理。（2）配种或人工授精。（3）对胚胎的收集、检查、培养或保存。（4）对胚胎进行移植。（5）移植后的检查。【详解】A、用促性腺激素处理雌性大熊猫促进排卵，卵子培养至MⅡ期才能参与受精，A正确；B、早期胚胎发育依次经历了卵裂、桑葚胚、囊胚、原肠胚等阶段，B错误；C、胚胎移植时对供体母梅花鹿和受体母梅花鹿都要进行同期发情处理，受精卵要培养到桑葚胚或囊胚期再进行移植，C正确；D、克隆熊猫是通过细包核移植技术获得的，也需要经过早期胚胎培养和胚胎移植，D错误。故选BD。三、非选择题16．I.生命孕育的过程是神奇和复杂的。胚胎发育时，母体通过形成透明纤维层，防止胚胎细包植入过深而损伤子宫内膜；胚胎的胎盘细包则分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG），抑制母体淋巴细包的活动；此后胎儿为了获得更多的养料，还会导致母体的血压升高，促进更多血液流入子宫，以获得更多的营养。(1)HCG可通过肾小球从尿液中排出。用抗HCG单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以通过检查尿液作出诊断。请简述利用从经HCG免疫的小鼠体内采集的B淋巴细包（简称B淋巴细包）、小鼠骨髓瘤细包制备抗HCG单克隆抗体的主要流程：（用箭头和文字表示）。II.黄曲霉毒素（AFB）是黄曲霉（一种真菌）产生的具有极强致癌力的小分子代谢产物。为准确检测食品中残留的AFB，科研人员拟将AFB单抗固定在一种新材料上，制备为“检测探针”。已知材料M稳定性、发光性能等方面有明显优势，但它很难与抗体结合；物质P可以提高材料M对抗体的亲和力。制备检测探针的流程如图1，探针发光性能与物质P的浓度关系如图2。(2)依据图2结果，科研人员选择物质P的浓度为作为生产检测探针的条件，原因是。(3)科研人员制备定量检测AFB的免疫试纸，如图3。试纸的T线处固定的物质是AFB，C线处固定的物质是抗AFB单抗的抗体。在加样处滴加的样液会向有扩散经过T线和C线。若加样处，滴加只含“MP-AFB单抗探针”的样液，能检测到荧光的线为（填“T线”、“C线”或“T线和C线”）；若滴加样液中含有MP-AFB单抗探针和高浓度的AFB，T线的发光性为（填“发荧光”或“不发荧光”）。(4)单克隆抗体除了上述功能，还有什么作用？。【答案】(1)(2)0.8mg/mL在物质P浓度为0.8mg/mL时，探针发光性能与更高浓度时差异很小，因此科研时可选择该浓度0.8mg/mL作为生产检测探针的条件，可节省成本(3)