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DB21IdentificationofGooseDownFiberinFeatherandDownProducts-PCRmethodandreal-timefluorescenc辽宁省市场监督管理局发布I请注意本文件的某些内容可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。1羽绒制品中鹅绒的鉴别PCR法和实时荧光PCR法GB/T6682分析实验室用水规格和3.1聚合酶链式反应polymerasechainrea3.2实时荧光PCRreal-timefluorescencepolymerasechainr4缩略语bp:碱基对(basepair)DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonuleicacid)dNTP:脱氧核苷酸三磷酸(deoxyribonucleosidetriphospha26.2组织和毛发提取试剂盒TaKaRaMiniBESTUniversalGenomicDNAExtractionKitVer.5.0(T3),10.8将核酸纯化柱安置于收集管上),进行PCR、实时荧光PCR鉴别时设置阳性对照、阴性对照和空白对照。阳性对照:扩增鹅5’-GCTACTAGCCATACACTAC-3’5’-GTTGGATTGTCTACTGAGA-3’4并加DNAmarker点样以判断PCR产物的片段大小。电压大小根据电泳鹅5’-GCTACTAGCCATACACTAC-3’5’-GTTGGATTGTCTACTGAGA-3’5’-(FAM)CGCAGACACTTCACTCGCCT(Eclipse)-3’反应结束后,应设置无效基线范围,基线范围选择在3~15个循环5对照和空白对照结果正常者,则可判定该样品检出鹅源性6PremixExTaq(ProbeqPCR2×C7扩增产物序列Attcctagccatgcactactcaccagacgcctcaaccgccttttcatcaatcgcccacatcactcgagacgtaaattatggctgaatcatccgctaccttcacgccaatggcgcctcaatattctttatctgcctcttcctacacatcgggcgaggcctatattactctctactcagaaacctgaaacatcggcattatcctcctgcttgcaactatagcaacagccttcataggctatgtccaaatatcattctgaggggccacagtaattacaaacttactatccgccatcc
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