《慢性乙型肝炎感染中固有免疫细胞的调节作用综述论文》4300字

慢性乙型肝炎感染中固有免疫细胞的调节作用综述论文目录TOC\o"1-2"\h\u25579慢性乙型肝炎感染中固有免疫细胞的调节作用综述论文 1201871、自然杀伤细胞(Naturalkiller，NK) 1235702、树突状细胞(dendriticcell,DC) 23785小结 423101参考文献 4细胞免疫疗法作为一种重要的生物治疗技术，越来越受到人们的关注。指根据免疫学原理使用自身免疫细胞治疗HBV。在人体中，自然杀伤细胞（NK）、树突状细胞（DC）、细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）、嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）和其他细胞与细胞免疫有关。本文主要针对细胞免疫治疗HBV的研究近况展开论述。自然杀伤细胞(Naturalkiller，NK)20世纪70年代，发现了一种CD3-CD56+细胞，被命名为NK细胞。进一步的研究表明，NKs是身体的天然防线，是先天免疫的重要成员。与T淋巴细胞不同，NKs具有直接作用：它们不需要被肿瘤特异性抗原致敏，它们可以直接释放穿孔素和颗粒酶来杀死肿瘤细胞，它们是肿瘤免疫治疗的重要效应细胞，同时，NKs还可以产生TNF-、IFN-等，从而发挥免疫调节作用。由于上述特点，基于NKs的免疫疗法已成为HBV的新治疗方法。目前，基于NK细胞的抗肿瘤免疫治疗主要包括以下方案：1、通过基因工程等技术手段将特定基因片段导入NK细胞，增强NK细胞杀伤肿瘤细胞的功能；2.使用外源化合物直接刺激NK细胞以增强NK细胞功能。一些研究表明，在HBV患者的肝移植过程中，使用IL-2刺激患者肝脏中的NK细胞可以增强NK细胞的细胞毒性，同时分泌IFN-r，并表达肿瘤坏死因子[1]。周智锋等人研究了IL-12诱导的NK细胞活化的抗肿瘤作用。他们使用肝癌小鼠模型进行实验，向小鼠注射IL-12，发现NKs激活受体的表达上调，抑制小鼠肿瘤生长的效果明显[2].Jiang等人通过使用基因工程技术构建NKL-IFN-a细胞，成功将IFN-a基因转入NK细胞系[3]。为了观察NKL-IFN细胞对HBV的作用，发现NKL-IFN-细胞对人原发性肝癌细胞具有更强的杀伤能力（体外实验）；将NKL-IFN细胞引入肝癌小鼠模型中，发现HBV肿瘤的生长受到抑制，小鼠的存活时间延长（体内实验）。这可能与NKL-IFN细胞中一些与细胞毒性相关的基因的上调有关，如颗粒酶B、Fas配体等。同时，NKs分泌TNF-和IFN-r，从而增加Fas的表达，从而增强HBV细胞对NKs杀伤效应的敏感性。从这一观察可以看出，用IFN基因修饰的NK细胞可以增强癌细胞的敏感性，延长生存期，有望成为未来肝癌细胞免疫治疗的新方案。来自日本的一项研究表明，肝移植后的肝癌患者通过输注供体肝脏来源的活化NK细胞进行治疗。随访21个月后未发现肝癌复发[4]树突状细胞(dendriticcell,DC)1973年，Steinman他们发现了一种形状奇怪的细胞。当细胞成熟时，细胞膜会伸出多刺的突起[5]。根据其特殊形状，它被命名为树突状细胞（DC）。DC被称为体内最强大的抗原呈递细胞（APC），是激活和初始化T细胞最有效的APC[6]。DC表面的MHC-I和MHC-II分子高度表达，DC表面的CD80/CD86与T细胞表面的相关受体结合，从而激活初始T细胞。目前，已开发出负载特异性肿瘤抗原的DC细胞疫苗。这种DC疫苗可以特异性刺激T细胞，促进其迁移和聚集到肿瘤部位，并发挥其免疫功能[25]。以DC细胞为基础的细胞治疗具有很强的特异性，能够在体内长时间的存在，作为目前新兴的一种肿瘤疫苗治疗技术，已经成为医学工作者的研究重点，并且在HBV的治疗中已经表现出了很好的前景。据报道，DC疫苗是从1995年开始应用于临床试验的[7]，目前，DC疫苗在治疗某些恶性肿瘤(如:淋巴瘤、肺癌等)上取得了很好的效果。HBV患者在接种了DC疫苗后，能够使自身的NK细胞的活性得到增强，并且能够降低调节性T(Treg)细胞的比例[8]。Lee等针对HBV晚期患者的治疗，采用的是一种被破裂的HBV细胞产物负载的DC细胞疫苗治疗的方法，结果，患者的自身免疫得到强化，生存期相对增长[9]。与Lee的技术手法相同，董春帆等将患者自身的肝癌细胞裂解物负载DC细胞进行治疗HBV，临床观察可见，该患者的无瘤生存率提高了大约20%左右，这种DC细胞疫苗能够延缓HBV肿瘤的复发、防止瘤细胞的转移[10]。目前，国际上已经利用DC细胞负载多种肿瘤抗原肤靶点，使CTL细胞得到活化，治疗肝癌。尤其是在我国，该项技术已经率先开始入组病例，这项新技术可以用于肝癌临床治疗，成为肝癌综合治疗中有力的补充。3、细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-inducedkiller,CIK)CIK细胞是一种表型为CD3+CD56+的异质细胞，人体PBMC在体外培养过程中经过多重刺激能够得到。CIK细胞即具有T细胞的标志(CD3+)，又具NK细胞的标志(CD56+)[30]，同时，CIKS还同时具有两种细胞的功能。根据以上理论，CIKS具有较强的杀伤机体内肿瘤细胞的功能。因此，给机体回输CIK细胞，能够增强机体的免疫调剂功能，杀伤自身的肿瘤细胞，同时，也不会对自身的免疫系统造成损伤[11]。研究显示，在每各疗程回输约(3-5)X109有以上内容可以知道，CIK细胞与DC细胞相同，都是肿瘤的免疫治疗的重要组成部分，DCs识别病原体，激活免疫系统;CIKs可以间接杀伤瘤细胞，或者直接杀伤瘤细胞[13].DC细胞与CIK细胞联合回输不仅可以提高机体的自身免疫功能，延长生存期，同时还可以增加患者对于化疗的敏感性，从而可以使用多种方法共同治疗HBV。现阶段，已经有研究证实，DCs与CIKs联合培养获得DC-CIKs,DC-CIKs回输入患者体内，与仅仅回输单纯的CIKs相比，抗瘤活性增强[14]。到目前，应用DC-CIK免疫治疗肝癌在我国已经进入临床研究阶段，并且，一部分取得较好的效果。陈宝安等分别使用CIKs和DC-CIK杀伤SMC-772肝癌细胞珠，发现，DC-CIK不光增殖活性比CIKS强，杀伤能力也明显高于CIKS[15].钟国成、张小玉等在研究DC-CIK过程中，直接利用DCS负载患者癌细胞裂解物，获得的DCS与CIKs共培养[16]。结果发现，CIKs与这种DCS(Ag-DC)共同培养后，其杀伤肿瘤细胞的能力也明显增强(体外实验);而使用Ag-DC-CIK回输到患者体内，发现HBV患者的免疫功能获得显著改善，临床疗效显著提高。王娟等体外联合培养DC-CIKs回输到患者体内，1例患有肝癌且伴随骨转移的患者治疗宣告无效，其余12例恶性肿瘤患者病情均有所好转[17].目前，回输自体DC-CIKs治疗HBV，同时联合其他技术手段，如肝动脉化疗栓塞术、射频消融等，也取得了较好的成绩。程小珍、彭大为等采用两种技术治疗中晚期HBV患者，将患者分为两组，一组联合治疗，即接受TALE治疗又回输DC-CIKs，该组共32人，一组只接受TALE治疗，该组共28人[18]。治疗后发现，联合治疗不仅能够降低患者AFP,还能够控制患者肿瘤的大小。尤振宇、苏晓辉等将研究对象确定为肝癌患者，且在治疗过程中均没有手术适应症的出现[19]。将研究对象分为两组，分别为试验组(介入治疗+D治疗)和对照组(只包含介入治疗)。比较两组患者治疗后的效果，发现，实验组的患者有效率比对照组高，同样，疾病控制率也比对照组高。试验组AFP明显下降，体重显著增加。最后得出结果，DC-CIK治疗虽然无法提高肝癌患者接受介入治疗的短期内的疗效，但是能够提高患者的生存质量。4、嵌合抗原受体(chimericantigenreceptor,CAR)的T细胞(CAR-T)最近Science杂志将肿瘤免疫治疗列在2013年十大科技突破的首位，嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)的免疫细胞治疗是其中的一个最为热门的领域[20].CAR-T细胞是一种特殊的T淋巴细胞，它是利用基因工程技术手段在T淋巴细胞内导入了一段单链抗体，而这个单链抗体能够与T细胞的活化基序结合，具有特异性识别肿瘤细胞的作用。这种细胞不仅具有T淋巴细胞杀伤肿瘤细胞的能力，还能够特异性的识别肿瘤抗原[21].CAR-T细胞不会受到免疫逃逸的影响就可以发挥其抗肿瘤效应，它能够与肿瘤细胞特异性的结合，进而发挥抗肿瘤效应[22]。CAR-T细胞能够产生颗粒酶、穿孔素直接介导肿瘤细胞溶解，也可以分泌细胞因子，诱导巨噬细胞分泌IL-6等，间接影响肿瘤细胞的生长[23]。CAR-T细胞还能够上调表达NIFIC-II,INF-γ和CD86，改变肿瘤微环境，进而影响肿瘤的生长[24]。近几年来，关于CAR-T细胞的研究有了很多令人振奋的突破，得到了很多好的结果。在ASH第55届年会上3个课题组分别报道了抗CD19的CAR-T细胞在治疗慢性、急性淋巴细胞性白血病和B细胞淋巴瘤的早期临床治疗效果，CAR-T细胞治疗反应的有效率达到60%~80%.研究者构建不同结构的CAR-T细胞，如，FAP特异性CAR-T细胞[25]、抗PSMA-CAR-T细胞[26],FR-CAR-T细胞[47],EGFRvIII-ICOS-CAR-T细胞[27],GD2-CAR-T细胞[28]，并证实CAR-T细胞对于肺癌、卵巢癌等其他肿瘤中发挥强烈的抗肿瘤效应，延长患者的生存期。小结在我国，原发性肝癌的细胞免疫治疗发展了十多年，己进入临床试验阶段，并在不断的改革、完善。细胞免疫治疗并不是完美无缺的，现阶段要更加认真的研究集体的免疫应答，弥补细胞免疫治疗存在的不足，设计出新的免疫治疗或者联合治疗的方案，从而为HBV的治疗提供新的方法。参考文献[1]NishidaS,LeviDM,TzakisAG.Livernaturalkillercellinoculumforlivertransplantationwithhepatocellularcarcinoma[J].CurrOpinOrganTransplant,2017,18(6):690-694.[2]周智锋，江金华，李洁羽，等.IL-12诱导肝癌微环境中NK细胞活化发挥抗肿瘤作用.中国肿瘤生物治疗杂志，2013,20(1):93-98.[3]NishidaS,LeviDW,TzakisAG.Livernaturalcellinoculumforlivertransplanttationwithhepatocellularcarcinoma[J].CurrOpinOrganTrandplant,2017,18(6):690-694.[4]崔莹莹,徐光福.加味参苓白术散对慢性乙型肝炎患者疗效及免疫细胞功能的影响[J].2021.[5]SteinmanRM,CohnZA.Idetificationofanovelcelltypeinperipherallymphoidorgansofmice.Morphology,quantitation,tissuedistribution[J].JExpMED,1973,137(5):1142-1162.[6]王炳然,张立平,郭子宁,等.扶正祛毒方对慢性乙型肝炎病毒携带小鼠细胞免疫水平的调节作用[J].2020.[7]高慧,刘守胜,赵真真,等.肠道菌群介导的免疫反应在慢性HBV感染中的作用[J].临床肝胆病杂志,2019,35(11):4.[8]魏金刚,石统东,邹丽云.Th9细胞在慢性乙型肝炎病毒感染不同阶段中的作用[J].免疫学杂志,2019(10):6.[9]LeeWC,WangHC,HungCF,eta1.Vaccinationofadvancedhepatocellularcarcinomapatientswithtumorlysate-pulseddendriticcells:atrial.[J]Immunother,2005,28(5):496-504.[10]陈成聪.乙肝核心抗体在慢性HBV感染过程中的免疫调节和作用机制研究[D].南方医科大学,2019.[11]肖军.乙型肝炎患者外周血中免疫细胞检测的临床意义[J].2021.[12]刘娇,戢敏,陈星,等.PD-1/PD-L1信号通路在慢性乙型肝炎患者免疫调节中作用的研究进展[J].山东医药,2020,060(001):90-94.[13]张沛欣,张颖.慢性乙型肝炎患者影响CD8+T细胞衰老的初讨[C]//第十届全国疑难及重症肝病大会论文汇编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