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文档简介
第二章蛋白质的结构与功能第三节蛋白质的理化性质一、蛋白质的两性解离和等电点
(一)两性解离
蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外,氨基酸残基侧链中某些基团,在一定的溶液pH条件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团,故称两性解离。(二)蛋白质的等电点当蛋白质溶液处于某一pH时,蛋白质解离成正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子,净电荷为零,此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。二、蛋白质的胶体性质
(一)蛋白质属于生物大分子之一,分子量可自1万至100万之巨,其分子的直径可达1~100nm,为胶粒范围之内。(二)蛋白质胶体稳定的因素颗粒表面电荷水化膜+++++++带正电荷的蛋白质--------带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质水化膜++++++++带正电荷的蛋白质--------带负电荷的蛋白质不稳定的蛋白质颗粒酸碱酸碱酸碱脱水作用脱水作用脱水作用溶液中蛋白质的聚沉三、蛋白质的变性、沉淀和凝固
(一)
蛋白质的变性(denaturation)在某些物理和化学因素作用下,其特定的空间构象被破坏,也即有序的空间结构变成无序的空间结构,从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。1.变性的本质
即破坏非共价键和二硫键,不改变蛋白质肽链的一级结构。2.导致变性的因素如高温、高压、强酸、强碱、有机溶剂、重金属离子、生物碱试剂及辐射等因素。
3.应用举例①临床医学上,变性因素常被应用来消毒及灭菌。②防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂(如疫苗等)的必要条件。
天然状态,有催化活性26110958472584065HSSHSHHSHSSHHSHS26110958472655840
去除尿素、β-巯基乙醇
尿素、β-巯基乙醇4.复性(renaturation)
若蛋白质变性程度较轻,去除变性因素后,蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能,称为复性。非折叠状态,无活性第三节蛋白质的理化性质(二)蛋白质沉淀在一定条件下,蛋白疏水侧链暴露在外,肽链融会相互缠绕继而聚集,因而从溶液中析出。变性的蛋白质易于沉淀,有时蛋白质发生沉淀,但并不一定变性。(三)蛋白质的凝固作用蛋白质变性后的絮状物加热可变成比较坚固的凝块,此凝块不易再溶于强酸或强碱中。
四、蛋白质的紫外吸收由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,因此在280nm波长处有特征性吸收峰。蛋白质的OD280与其浓度呈正比关系,因此可作蛋白质定量测定。五、蛋白质的呈色反应(一)茚三酮反应(ninhydrinreaction)蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚三酮反应。(二)双缩脲反应(biuretreaction)蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与硫酸铜共热,呈现紫色或红色,此反应称为双缩脲反应,双缩脲反应可用来检测蛋白质水解程度。(三)Fol
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