《药物分析与检验技术》课件-β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查

β-内酰胺类抗生素中

特殊杂质的检查β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析青霉素钠取本品少许，依法检査（通则0981），应符合规定。结晶性取本品，加水制成每1ml中含30mg的溶液，依法测定（通则0631），pH值应为5.0〜7.5。酸碱度β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析青霉素钠溶液的澄清度与颜色β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析青霉素钠溶液的澄清度与颜色取本品5份，各0.3g，分别加水5ml使溶解，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液（通则0902第一法）比较，均不得更浓；如显色，与黄色或黄绿色1号标准比色液（通则0901第一法）比较，均不得更深。β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析青霉素钠吸光度取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含1.80mg的溶液，照紫外-可见分光光度法(通则0401)，在280nm与325nm波长处测定，吸光度均不得大于0.10；在264nm波长处有最大吸收，吸光度应为0.80〜0.88。β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析青霉素钠有关物质HPLC法——梯度洗脱时间（分钟）流动相A(%)流动相B(%)07030200100350100507030β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析青霉素钠青霉素聚合物蛋白、多肽、多糖或抗生素与蛋白、多肽、多糖的结合物。主要来自于发酵工艺，致敏，如青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽。

外源性杂质过敏物质β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析青霉素钠青霉素聚合物药物的自身聚合物，来自于生产、贮存过程。可引发过敏。内源性杂质过敏物质β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析青霉素钠根据待测组分的分子大小进行分离的一种液相色谱技术。青霉素聚合物青霉素聚合物测定方法分子排阻色谱法（HPSEC）β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析青霉素钠青霉素聚合物青霉素聚合物测定方法利用凝胶的分子筛作用，让药物分子自由的进入到凝胶颗粒内部，而高分子杂质被排阻的原理进行的。故此大分子则先流出色谱柱，小分子后出峰而得以分离。原理β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析青霉素钠分子量（如蛋白质、多肽）；分子量与分子量分布（多糖、多聚物、胶原蛋白）；高分子杂质。青霉素聚合物青霉素聚合物测定方法适用于测定β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析青霉素钠青霉素聚合物青霉素聚合物测定方法固定相：葡聚糖凝胶G-10（40~120µm）

流动相A：pH7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液

流动相B：水

流速:1.5ml/minβ-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析青霉素钠青霉素聚合物青霉素聚合物测定方法检测波长：254nm对照品溶液：青霉素对照品0.1mg/ml测定方法：进样供试液，用流动相A；进样对照液，用流动相B。以外标法计算，含青霉素聚合物以青霉素计不得过0.08%。β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析头孢氨苄及其制剂头孢氨苄除检查“水分”、“炽灼残渣”外，还应检查“酸度”“有关物质”和“2-萘酚”。β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析头孢氨苄及其制剂取本品50mg，加水10ml溶解后，依法测定，pH应为3.5～5.5。酸度β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析头孢氨苄及其制剂β-内酰胺类抗生素结构中的β-内酰胺环对酸、碱均不稳定，可发生开环反应，导致药物的抗菌活性降低或丧失。解析β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析头孢氨苄及其制剂固定相：十八烷基硅烷键合硅胶流动相A：0.2mol/L磷酸二氢钠溶液（用氢氧化钠试液调节pH至5.0）流动相B：甲醇，进行线性梯度洗脱检测波长：220nm进样量：20μl有关物质HPLC法——线性梯度洗脱色谱条件β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析头孢氨苄及其制剂有关物质HPLC法——线性梯度洗脱头孢氨苄中有关物质检查梯度洗脱程序时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）098219822070302398230982β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析头孢氨苄及其制剂供试品溶液：取本品适量，加流动相A制成约1.0mg/ml的溶液。有关物质HPLC法——线性梯度洗脱测定法β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析头孢氨苄及其制剂对照溶液：精取1ml供试品溶液，用流动相A稀释至刻100ml。有关物质HPLC法——线性梯度洗脱测定法β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析头孢氨苄及其制剂杂质对照品溶液：取7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸对照品和α-苯甘氨酸对照品适量，用流动相A制成各含约0.01mg/ml的混合溶液。有关物质HPLC法——线性梯度洗脱测定法β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析头孢氨苄及其制剂有关物质HPLC法——线性梯度洗脱供试品溶液色谱图中如有杂质峰，含7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸峰与α-苯甘氨酸峰按外标法以峰面积计算，均不得超过1.0%；其他单个杂质的峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1.5倍（1.5%），其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍（2.5%），供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰可忽略不计。结果规定β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析头孢氨苄及其制剂2-萘酚HPLC法——外标法（等度洗脱）色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（55︰45）为流动相，流速为每分钟1ml，检测波长为225nm。β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查实例分析头孢氨苄及其制剂2-萘酚HPLC法——外标法（等度洗脱）测定法取本品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含10mg的溶液，充分振摇，取混悬液适量，以每分钟15000转速率离心5分钟，取上清液作为供试品溶液；另取2-萘酚对照品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释