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DB22DB22/T2909—2018H5N8亚型禽流感病毒HA和NA基因荧光RT-PCR检测方法Methodofthereal-timePCRforthedetectionofHAandNAgenesofAvianinfluenzasubtypeH5N8吉林省市场监督管理厅发布I1GB/T19438.1禽流感病毒通用荧光RTRT-PCR：反转录聚合酶链反应（ReverseTranscription-PCt值：每个反应管内的荧光信号达到的设定的阈值时所Taq酶：Taq脱氧核糖核酸聚合酶（Thermusaquatic基因和NA基因探针分别在5’端标记VIC和FAM荧光素作为报告荧光基团，3’端分别标记MGB和BHQ1作为淬荧光信号被淬灭基团所吸收，仪器检测不到荧光信号；而反应进行到延伸阶段时，Taq酶发挥5’→3’的2引物F1：5’–CTTGCGACTGGGCTCAGAAA引物R2：5’-CTGACCTGGAGGTTCG8.1.1.2每管加入600µL裂解液，分别加入被检），3），温冰箱（-80℃)（6.4）。在PCR溶液配制区，反应体系配制见表1与表2，每份检测样品的荧光RT-PCR体系为25µL。用旋涡DEPC水（5.2.7）DEPC水（5.2.7）4

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