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文档简介
PAGE7-微生物的基本培育技术(20分钟·70分)一、选择题(共8小题,每小题5分,共40分)1.下表为某培育基的配方,下列叙述正确的是 ()成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水含量101020.40.0651000mLA.从物理性质看该培育基属于固体培育基B.该培育基中属于碳源的物质主要是葡萄糖,属于氮源的物质是蛋白胨C.该培育基缺少供应生长因子的物质D.该培育基不能培育异养微生物【解析】选B。分析表中成分可知,该培育基中没有凝固剂,为液体培育基,A错误;该培育基中的蛋白胨既是唯一的氮源,也是碳源,而葡萄糖是绝大多数生物最常利用的碳源,B正确;该培育基中存在的蛋白胨中的某些物质可以看作是生长因子,C错误;该培育基中含有有机碳源,能用于培育异养微生物,D错误。【补偿训练】将相同的大肠杆菌样液分别接种于成分不同的三种培育基中,36小时后统计菌落数,结果如下表。下列叙述不正确的是 ()培育皿培育基成分菌落数Ⅰ琼脂、葡萄糖35Ⅱ琼脂、葡萄糖、生长因子250Ⅲ琼脂、生长因子0A.葡萄糖是培育基中的碳源也是能源B.配制培育基过程中应先灭菌后倒平板C.Ⅰ和Ⅱ比照,说明生长因子不利于大肠杆菌的生长D.Ⅱ和Ⅲ比照,说明大肠杆菌的生长须要葡萄糖【解析】选C。葡萄糖是培育基中的碳源也是能源,A正确;配制培育基过程中应先灭菌后倒平板,B正确;Ⅰ和Ⅱ比照,说明大肠杆菌的生长须要生长因子,C错误;Ⅱ和Ⅲ比照,说明大肠杆菌的生长须要葡萄糖,D正确。2.(2024·徐州高二检测)不同的微生物对养分物质的须要各不相同。一种自养微生物在以CO2为唯一碳源的培育基中培育,下列说法不正确的是 ()A.氮源物质为该微生物供应必要的氮素B.碳源物质也为该微生物供应能量C.无机盐是该微生物不行缺少的养分物质D.水是该微生物的养分要素之一【解析】选B。培育基中的氮源物质可以为该微生物供应必要的氮素,A正确;该微生物只能以二氧化碳作为唯一碳源,二氧化碳不能为该微生物供应能量,B错误;无机盐可以为微生物供应碳、氮以外的重要元素,是该微生物不行缺少的养分物质,C正确;水是生物体新陈代谢不行缺少的物质,是该微生物的养分要素之一,D正确。3.金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等,还可能引起食物中毒。下列试验结束后的做法错误的是 ()A.对接种环进行灼烧处理B.带菌培育基必需经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉C.做完试验后,在试验室内可以饮水D.接种后双手必需经肥皂洗净,再用70%的酒精棉球擦拭【解析】选C。试验结束后应将金黄色葡萄球菌杀死,以免使人致病,接种环应用灼烧灭菌,A正确;带菌的培育基要经高压蒸汽灭菌后才能倒掉,以免污染环境,B正确;在微生物培育的试验室中,不能吃东西、饮水等,C错误;接种后双手必需用肥皂洗净,再用70%的酒精棉球擦拭,D正确。4.关于酵母菌的纯培育试验操作,下列说法正确的是 ()A.配制培育基、倒平板、接种须要在酒精灯火焰旁进行B.倒平板时,倒入的培育基冷却后盖上培育皿的皿盖C.划线接种时,灼烧接种环后马上进行再次划线D.划线接种结束后,需将平板倒置后放入培育箱中培育【解析】选D。配制培育基不须要在酒精灯火焰旁进行,A错误。倒平板时,应马上盖上培育皿的皿盖,B错误。划线接种时,灼烧接种环冷却后进行再次划线,C错误。划线接种结束后,需将平板倒置后放入培育箱中培育,D正确。5.下列依次表示倒平板、接种的位置,以及平板划线法接种的路径示意图,其中错误的是 ()【解析】选D。倒平板时,用左手的拇指和食指将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培育基倒入培育皿,左手马上盖上培育皿的皿盖,防止空气中的杂菌污染,A正确;左手将培育皿打开一条缝隙,右手将蘸有菌种的接种环快速伸入平板内,B正确;不同区域内划线,而且每次转换划线角度后再进行划线,让菌种来源于上一次划线末端,C正确;下一次划线没有从上一次划线末端起先,D错误。6.产生标准菌落的最初数目和培育基分别是 ()A.同种少数细菌,液体培育基B.很多细菌,液体培育基C.同种少数细菌,固体培育基D.很多细菌,固体培育基【解析】选C。菌落是一个细菌或几个细菌的子细胞群体,形成于固体培育基上,有肯定的形态结构,所以肉眼可见。同种细菌形成的菌落,形态结构是相同的;假如有很多细菌形成的菌落,就不行能有比较标准的形态,所以C项正确。7.(2024·郑州高二检测)下列有关微生物培育及培育基的描述错误的是 ()A.培育基必需包含的成分有碳源、氮源、水、无机盐、生长因子及琼脂B.依据物理性质不同,培育基可分为固体培育基和液体培育基C.培育细菌时须要把培育基的pH调至中性或微碱性D.平板划线法接种时须要在酒精灯火焰旁进行操作【解析】选A。各种培育基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐,此外还要满意微生物生长对pH、特别养分物质以及氧气的要求,A错误;依据物理性质不同,培育基可分为固体培育基和液体培育基,B正确;培育细菌时须要把培育基的pH调至中性或微碱性,C正确;平板划线法接种时须要在酒精灯火焰旁进行操作,防止杂菌污染,D正确。8.接种是微生物培育和分别等过程的必要步骤之一。下列关于接种的叙述不正确的是 ()A.接种通常指无菌条件下将微生物接入培育基的操作B.接种前须要对接种环灼烧灭菌,接种后则无须灭菌C.接种通常在酒精灯火焰旁边进行D.接种环不能将培育基的表面划破【解析】选B。无菌条件下将微生物接入培育基的操作过程称为接种,A正确;接种前须要对接种环灼烧灭菌,接种后也需灭菌,防止污染环境和感染操作者,B错误;为避开杂菌污染,接种通常在酒精灯火焰旁边进行,C正确;接种时接种环不能将培育基的表面划破,D正确。二、非选择题(共2小题,共30分)9.(12分)将马铃薯去皮切块,加水煮沸至马铃薯软烂,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入肯定量葡萄糖和琼脂,用蒸馏水定容后灭菌,得到马铃薯琼脂培育基。回答下列问题:(1)马铃薯琼脂培育基中的马铃薯浸出液为微生物生长供应了多种养分物质,养分物质类型除氮源外还有______________________(答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参加合成的生物大分子有________________________(答出两点即可)。
(2)分别培育酵母菌通常运用马铃薯琼脂培育基,该培育基在进行接种前要进行______________。将酵母菌菌种划线接种在平板上,培育一段时间后可视察到菌落,菌落的含义是__
______________________________________。
(3)该培育基按物理性质划分属于________培育基,若要对酵母菌进行扩大培育,此培育基中不应加入的物质是________。
【解析】(1)马铃薯浸出液中含有淀粉、蛋白质、脂质、无机盐、水等多种物质,因此,除氮源外其中还有微生物生长所须要的碳源、无机盐等养分要素。进入细胞的氮源可参加合成蛋白质、核酸(DNA、RNA)等含氮的生物大分子。(2)培育基在运用前常用高压蒸汽灭菌法灭菌;菌落概念见答案。(3)该培育基中有凝固剂,属于固体培育基,对微生物进行扩大培育,一般用液体培育基。答案:(1)碳源、无机盐蛋白质、核酸(2)(高压蒸汽)灭菌分散的微生物在相宜的固体培育基表面或内部可以繁殖形成的肉眼可见的、有肯定形态结构的子细胞群体(3)固体琼脂10.(18分)自然界中有多种微生物,将其进行合理筛选、培育和应用,能给医药和化工等生产领域带来巨大经济效益。回答下列问题。(1)对培育基进行灭菌时,多实行____________法,即将培育基置于____________条件下维持15~30分钟,目的是杀死培育基中的____________。对接种环灭菌时则用____________法。
(2)若要将微生物采纳平板划线法进行分别操作,在固体培育基表面连续进行了4次划线,则须要对接种环灼烧____________次。平板划线在做其次次及其后的划线操作时,要从上次划线的____________起先划线,最终一次划的线不能与第一次划的线____________。
(3)将接种后的固体培育基和一个未接种的固体培育基放入恒温箱中____________培育,以削减培育基中的水分挥发。其中,培育未接种的固体培育基是为了__________________________________________________。
【解析】(1)对培育基进行灭菌时,多实行高压蒸汽灭菌法,即将培育基置于压力100kPa、温度121℃条件下维持15~30分钟,目的是杀死培育基中的全部微生物(微生物和芽孢、孢子)。对接种环灭菌用灼烧灭菌法。(2)接种环在每次接种前都要灼烧灭菌,最终一次接种完也要灭菌,所以在固体培育基表面连续进行了4次划线,则须要对接种环灼烧5次。平板划线在做其次次及其后的划线操作时,要从上次划线的末端起先划线,使菌体的数目随着划线次数的增加而渐渐削减,最终获得由单个菌体形成的单个菌落。最终一次划的线不能与第一次划的线相连。(3)将接种后的固体培育基和一个未接种的固体培育基放入恒温箱中倒置培育,以削减培育基中的水分挥发。培育未接种的固体培育基是为了作为比照组答案:(1)高压蒸汽灭菌压力100kPa、温度121℃全部微生物(微生物和芽孢、孢子)灼烧灭菌(2)5末端相连(或相接、相交等意思正确即可)(3)倒置作为比照组,解除培育基被杂菌污染【互动探究】在平板划线法操作过程中,为什么在其次次及以后划线时,总是从上一次划线的末端起先?提示:目的是将聚集的菌种逐步稀释,以便得到单菌落。(10分钟·30分)1.(5分)下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培育微生物的三种培育基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖;甲能在Ⅰ中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是 ()粉状硫10K2HPO44FeSO40.5蔗糖10(NH4)2SO40.4H2O100mLMgSO49.25CaCl20.5Ⅰ+++++++Ⅱ+++++++Ⅲ++++++++A.甲、乙、丙都是异养微生物B.甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物C.甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物D.甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物【解析】选C。甲能在Ⅰ中正常生长繁殖,而乙和丙都不能,而Ⅰ培育基缺氮,说明甲能够自身固氮,属于固氮微生物。乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,而甲和丙都不能,Ⅱ培育基中没有有机碳源,说明乙能够合成有机物,属于自养微生物。丙不能在Ⅰ培育基生长繁殖,说明不能固氮,又不能在Ⅱ培育基中生长繁殖,说明不能合成有机物,只能在Ⅲ培育基中生长繁殖,说明属于异养微生物。2.(5分)(不定项)(2024·江苏高考改编)下列关于微生物试验操作的叙述,正确的是 ()A.培育微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌B.接种前后,接种环都要在酒精灯火焰的充分燃烧层进行灼烧C.接种后的培育皿要倒置,以防培育基污染D.可以运用固体培育基将菌种分别并获得纯培育物【解析】选B、C、D。接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理,接种环等常用灼烧灭菌法处理,吸管、培育皿等常用干热灭菌法处理,培育基等用高压蒸汽灭菌法处理,A错误;为了防止杂菌污染,每次接种前后,接种环都要进行灼烧灭菌,B正确;接种后,培育皿须要倒置,以防皿盖上水珠落入培育基造成污染,C正确;分别菌种可以用平板划线法和稀释涂布平板法,所用培育基为固体培育基,分别得到的单菌落即纯培育物,D正确。3.(5分)(不定项)某探讨小组用平板划线法从有机废水中分别微生物用于废水处理。下列叙述正确的是 ()A.培育基转移到培育皿后进行灭菌B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C.接种时不能划破培育基,否则难以达到分别单菌落的目的D.划线操作时完全打开皿盖,划完马上盖上【解析】选B、C。在配制培育基的过程中要先高压蒸汽灭菌后分装到培育皿,A错误;转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌,冷却后再进行划线,B正确;接种环不应划破培育基表面,否则不能分别得到单菌落,C正确;划线时皿盖打开一条缝,右手于火焰旁边处将接种环快速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖,而不是完全打开皿盖,D错误。4.(15分)(2024·全国卷Ⅲ)回答下列与细菌培育相关的问题。(1)在细菌培育时,培育基中能同时供应碳源、氮源的成分是______________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制备培育基时要依据所培育细菌的不同来调整培育基的pH,其缘由是______________________________________。硝化细菌在没有碳源的培育基上________________(填“能够”或“不能”)生长,缘由是__
_________________________________________________。(2)用平板培育细菌时一般须要将平板____________(填“倒置”或“正置”)。
(3)单个细菌在平板上会形成菌落,探讨人员通常可依据菌落的形态、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,缘由是________________________。
(4)有些运用后的培育基在丢弃前须要经过______________处理,这种处理可以杀死丢弃物中全部的微生物。
【解析】(1)蛋白胨含有C、H、O、N等元素,葡萄糖只含有C、H、O,NaNO3不含有C,所以培育基中蛋白胨能同时供应碳源和氮源。不同细菌生长繁殖所须要的pH不同,因此培育不同的细菌,须要调整培育基的不同pH。硝化细菌属于化能自
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