司法鉴定中心作业指导书

XXX版本第一版修订0编撰人吴俊标题 人体血液乙醇定性定审核人吴俊量检验作业指导书实施日期01/05/2023一、目的标准人体血液乙醇定性定量检验操作。二、适用范围1、顶空气相色谱氢火焰离子化检测器对人体血液乙醇含量的检验方法。2、道路交通执法活动中对人员血液中酒精的定性和定量分析。三、依据1、GA/T842-2023《中华人民共和国公共安全行业标准2、GA/T1556-20233、JJG700-20234、GA/T1147-202356、GB/T6682-2023《分析实四、技术主管职责1、治理试验室的技术工作，解决检验中消灭的技术问题。2、组织对重大案件、疑难案件的检验和复核检验。3、负责对检验员、技术员的培训及考核。4、审核检验报告。5、签发检验报告。五、试剂1、试验室用水二级水。2、乙醇〔色谱纯99.8%〕3、叔丁醇〔色谱纯99.5%〕4、乙醇标准工作溶液：用电子天平准确称量盛少量水的50毫升具塞容量瓶，归零，用该容量瓶准确称取5.01001000mg/100ml乙醇储藏5006储藏液按倍数用水稀释成试验中所用系列浓度的乙醇3个月。见表1。5、4mg/100mL叔丁醇内标工作溶液：用电子天平准确称量盛少量水的50毫升具塞容量瓶，归零，用该容量瓶准确称取0.4020克叔丁醇，用水配成400mg/100ml叔丁醇储藏液1003个月。周密吸取叔丁醇储藏液1.00毫升置于100毫升容量瓶4mg/100毫升的叔丁醇内标31乙醇标准工作溶液序号0123456781000mg/100ml醇储藏液(ml)0.100.501.002.005.008.0010.0020.0030.00〔ml〕100100100100100100100100100乙醇标准工作溶液浓度〔mg/100ml〕1510205080100200300六、顶空气相色谱检验方法应具备以下器材1、气相色谱器：配氢火焰离子化检测器；2、顶空自动进样器；3、1/0.14、1005005、1306、501005007、样品瓶〔顶空瓶；8、硅橡胶垫；9、铝帽；七、操作方法1、定性分析样品制备0.100.50升叔丁醇内标工作溶液参加样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，待测。1mg/100ml乙醇标准工0.100.50样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，与案件样品平行比照分析。0.10毫升及0.50毫升叔丁醇内标工作溶液参加样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，与案件样品平行比照分析。检测气相色谱检测参考条件见表牌仪器和不同样品等实际状况进展调整。顶空进样分析参考条件和顶空自动进样器参考条件加热箱温度65℃；定量环温度105℃；传输线温度110℃；样品瓶加热平衡时间10.00min;50.10min;定量环布满时间0.10min;定量环平衡时间0.05min;进样时间1.00min2气相色谱检测参考条件参考条件色谱柱柱温℃载气载气流速ml/min检测器检测器温进样口温1DB-ALC1(30M*0.32mm*1.8um)毛细管40高3氢火焰250200柱或等效色谱柱纯离子化2DB-ALC2(30M*0.32mm*1.8um)毛细管柱或等效色谱柱40氮气3检测器(FID)3PLOT-Q(30M*0.53mm*20.00um)毛细管1304柱或等效色谱柱45%carbowax20M/carbopack(80-1207020-40目〕2m*2mm进样：将已制备的样品置于顶空自动进样器样品架上，编制进样方法并运行。记录与计算：分别记录各样品中叔丁醇、乙醇标准品和案件样品可疑乙醇峰的保存时间，计算各样品中乙醇相对于内标叔丁醇的相对保存时间值。〔乙醇的保存时间-叔丁醇的保存时间〔丁醇的保存时间-死时间〕定量分析样品制备0.10毫升案件样品全血20.50瓶中，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，待测。校准曲线制备：取表1中系列浓度〔其中序号0除外〕的乙醇标准工作溶液0.10毫升及0.50毫升叔丁醇内标工作溶液，分别参加样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，备用。检测与记录：将已制备的样品置于顶空自动进样器样品架上，编制进样方法并运行。分别记录案件样品和系列浓度的乙醇标准工作溶液中叔丁醇、乙醇的峰面积值。计算样品中乙醇的峰面积与叔丁醇的峰面积之比为纵坐标，乙醇质量浓度为横坐标进展线性回归，建立线性回归方程。案件样品乙醇含量：由Y=aX+b进展计算7.2.3.3计算相对相差RD=|X1-X2|÷〔X1+X2〕÷2×100%8结果评价阳性定性结果评价：空白样品中消灭叔丁醇峰无乙醇峰，空白样品正常；检测限添加样品中同时消灭乙醇峰和叔丁醇峰，检测限添加样品正常；空白样品和检测限添加样品均正常，案件样品中色谱峰的相对保存时间〔或保存时间〕与检测限添加样品中乙醇峰的相对保存时间〔或保存时间〕比较，相对误差在±2%内，再选择不同的色谱条件检测，结果全都时，则认定案件样品中含有乙醇。相对误差〔乙醇保存时间〕=〔案件样品乙醇的保存时间-检测限添加样品乙醇保存时间〕÷检测限添加样品乙醇保存时间×100%。或者相对误差〔相对保存时间〕=〔案件样品乙醇相对叔丁醇的相对保存时间-检测限添加样品乙醇相对叔丁醇的相对保存时间〕÷检测限添加样品乙醇相对叔丁醇的相对保存时间×100%阴性定性结果评价：空白样品中消灭叔丁醇峰无乙醇峰，空白样品正常；检测限添加样品中同时消灭乙醇峰和叔丁醇峰，检测限添加样品正常；空白样品和检测限添加样品均正常，案件样品中无乙醇色谱峰消灭叔丁醇峰正常，则认定检验结果为阴性。检出限：1mg/100ml8.2定量结果评价：乙醇含量校准曲线的线性相关系数0.999,校