生物专题测评：专题微生物的培养与应用

学必求其心得，业必贵于专精学必求其心得，业必贵于专精学必求其心得，业必贵于专精专题测评（时间：100分钟，满分:100分)一、选择题(每小题2分,共50分）1．要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（）A．加入青霉素的培养基 B．加入高浓度食盐的培养基C．固体培养基 D．液体培养基2．下列关于选择培养叙述正确的是(）A．可以增加纤维素分解菌的浓度 B．可以减少纤维素分解菌的浓度C．所用培养基是固体培养基 D．选择培养不可以省略,但可以重复操作3．下列关于灭菌和消毒的理解不正确的是（）A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B．消毒和灭菌实质上是完全相同的C．接种环用灼烧法灭菌D．常用的灭菌方法有灼烧法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法4．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中,不正确的是（）A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素B．碳源物质也是该微生物的能源物质C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D．水是该微生物的营养要素之一5．金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，下列实验结束后的做法错误的是(）A．对接种环进行灼烧处理B．带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉C．带菌培养基必须经加热后才能倒掉D．接种后双手必须经肥皂洗净，再用体积分数为70％的酒精棉球擦拭6．下列有关细菌培养的叙述,正确的是（）A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D．在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动7．制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基,关于倒平板的具体描述正确的是(）①待培养基冷却至40℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板②将灭过菌的培养皿放在桌面上,左手拔出棉塞③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰④用左手的拇指和食指完全打开皿盖⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖⑥等待平板冷却5～10s,将平板倒过来放置，使皿盖在下A．①③④⑤B．④⑤⑥ C．③⑤ D．①②④⑥8．下列叙述错误的是（）A．培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素B．培养霉菌时需将培养基的pH调至碱性C．培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性D．培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件9．在培养基的配制过程中,有如下步骤，其正确顺序为()①溶化②调pH③加棉塞④包扎⑤培养基的分装⑥称量A．①②⑥⑤③④ B．⑥①②⑤③④ C．⑥①②⑤④③ D．①②⑤④⑥③10．下列属于菌落特征的是（）①菌落的形状②菌落的大小③菌落的多少④隆起程度⑤颜色⑥有无荚膜A．①②③④ B．①②④⑤ C．②③④⑥ D．①②③④⑤⑥11．将硝化细菌接种到下列培养基中，其中可以长出硝化细菌菌落的是（）A．无氮培养基，试管密闭B．无氮培养基，试管口用棉塞塞住C．含氮培养基，试管密闭D．含氮培养基,试管口用棉塞塞住12．下列关于微生物的培养和分离的叙述，不正确的是（）A．细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增B．噬菌体或大肠杆菌可在蛋白胨培养基中增殖C．灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的杂菌D．稀释涂布法分散细菌得到单菌落的效果更好13．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时(）①可以用相同的培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A．①② B．③④ C．①③ D．②④14．“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段,下列有关技术中不能筛选成功的是（）A．在全营养的LB培养基（普通培养基）中，筛选大肠杆菌B．在尿素固体培养基中，筛选能够分解尿素的微生物C．用纤维素为唯一碳源的培养基，筛选能分解纤维素的微生物D．在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体植物15．下列有关培养基的配制原则，表述正确的是(）A．任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、特殊营养物质B．碳源和氮源必须具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、氧、渗透压的影响D．营养物质的浓度越高越好16．下列分离纤维素分解菌的实验过程中,操作有误的是()A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B．富集培养这一步可省略，但培养的纤维素分解菌少C．经稀释培养后，用刚果红染色D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上17．为探究落叶是否在土壤微生物的作用下腐烂，下列各项构成了一个实验设计，其中不符合实验目的的步骤是(）A．可选择带有落叶的土壤为实验材料，筛选出落叶和土壤B．将落叶平均分成两份，把土壤也平均分成两份C．将灭菌的落叶设为实验组，不做处理的落叶设为对照组D．将落叶分别埋入两组土壤中，观察腐烂情况18．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（）A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0。1mL，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置,37℃恒温培养24D．确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数19．若某一稀释度下,平板上生长的平均菌落数为90，涂布平板时所用的稀释液体积为0.1mL，稀释液的稀释倍数为105，则每克样品中的菌株数约为（)A．9×108 B．9×107 C．9×105 D．20．下列关于微生物的分离和培养的有关叙述,错误的是(）A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度C．测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法D．分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源21．下表表示某培养基的配方，下列叙述正确的是()成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊红美蓝加蒸馏水定容至1000mL含量101020.40.065A。从物理性质看该培养基属于液体培养基,从用途看该培养基属于选择培养基B．培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨C．该培养基缺少提供生长因子的物质D．对培养基调节至合适的pH后就可以接种菌种使用22．下列有关培养基和菌种鉴定的叙述,不正确的是（）A．植物组织培养常用的是固体培养基B．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌D．在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌23．三个培养皿中分别加入10mL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液.培养36h后，计算菌落数，结果如下表.下列选项正确的是（）培养皿培养基成分菌落数Ⅰ琼脂、葡萄糖35Ⅱ琼脂、葡萄糖、特殊营养物质250Ⅲ琼脂、特殊营养物质0A．该实验采用的是液体培养基B．该实验采用平板划线法接种C．Ⅰ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长不需要特殊营养物质D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖24．某实验小组欲从土壤中筛选出能分解淀粉的芽孢杆菌.下列叙述不正确的是（）A．采样与培养：称量1g土样置于刚配制的液体培养基中，B．接种：为避免培养液中菌体浓度过高,需经过系列稀释后接种C．选择：所用的固体培养基，作为唯一碳源的是淀粉D．筛选：将适量的碘液滴加到平板中的菌落周围,出现透明圈说明此种菌能分解淀粉25．下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述，不正确的是（)A．纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵B．对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后,无需再进行其他实验C．纤维素酶的测定方法,一般是对所产生的葡萄糖进行定量的测定D．纤维素酶是一种复合酶二、非选择题（共50分）26．（10分）让金黄色葡萄球菌得名的那种金黄色，实际上是类胡萝卜素。金黄色葡萄球菌广泛分布在大气、土壤中，对热敏感，能耐高盐生长。通常每克食品中菌株数大于105时可产生致病性肠毒素,因常规烹饪等处理方式不能破坏肠毒素而引起食物中毒。卫生部公布的《速冻面米制品食品安全国家标准（征求意见稿）》，规定每批产品抽检5个样品中，至多只能有1个样品每克生制品中检出的金黄色葡萄球菌含量在1000～10000个之间。(1）食用无菌的熟制品，是否一定不会引起因为细菌而导致的食物中毒？________。(2）利用高盐的培养基,可从生制品的微生物中筛选出金黄色葡萄球菌，依据的原理是__________________________________________。（3）每批产品抽检5个样品,属于__________调查法.若只是检测生制品是否合格，可将样品以克为单位进行稀释处理，其稀释倍数最好为__________（0、10、102、103、104、105）倍。采用__________法将稀释液接种到平板培养基上培养,以保证能从中选择出菌落数在30～300之间的平板进行计数。培养得到的菌落数常常会____________（填“大于”“等于”或“小于”)实际含菌数量。(4)从色素角度分析,金黄色葡萄球菌不能进行光合作用是由于其缺少________.27．(10分）微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理,通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作.请回答下列问题.（1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自________的土壤。（2)为筛选和纯化该类微生物,从功能上分，应选用____培养基。常用的接种方法是__________和____________.（3）接种后，应密封培养的原因是__________，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取__________就可获得高效菌株。（4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品,用固体培养基对其培养，最后统计三个平板,菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为__________个/mL。该统计结果________（填“低于"或“高于”)实际值.28．（10分)临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性.回答下列问题。（1）为了从样本中获取致病菌单菌落，可用________法或________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得.（2）取该单菌落适当稀释,用________法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，(3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A________；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B________;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明______________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的________。(4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素________。29．（10分）高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。(1）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于__________培养基；从物理状态上来说，Ⅱ号培养基属于固体培养基，配制时一般加入__________作为凝固剂。Ⅰ号培养基中除了加入淀粉外，还需加入另一种重要的营养成分________.A．琼脂B．葡萄糖C．硝酸铵D．碳酸氢钠(2）进行①过程的目的是________；②过程所使用的接种方法是__________法.(3）Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是____________________；一般对配制的培养基采用________________法灭菌。（4）部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放____________分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈；应挑出透明圈________（填“大”或“小”）的菌落,接种到Ⅱ号培养基.（5）一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压"是为了________。30．（10分）饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。（1）培养基中除了添加植酸钙以外，还应含有________、________、水、无机盐等基本营养物质.（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行________，而且须将接种后的培养皿呈________状态放置。（3)接种以前进行的一系列操作，目的是在培养皿表面形成________。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的________就能大致推测出样品中的活菌数。(4)由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无,可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A~E五种菌株中，________是产植酸酶的理想菌株.(5）获得目的菌以后，若要用于植酸酶的生产,还需要进行________。参考答案1．解析：固体培养基主要用于微生物分离、鉴定等。液体培养基用于工业生产。加入青霉素的选择培养基能抑制细菌和放线菌的生长，从而分离酵母菌和霉菌。加入高浓度食盐的培养基可抑制多种细菌生长，可分离出金黄色葡萄球菌。本题没有说明分离哪种细菌，故应用固体培养基。答案：C2．解析:选择培养是增加纤维素分解菌的浓度，所用培养基是液体培养基，以便于下一步的稀释操作。答案:A3．解析：消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子），灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。答案：B4．解析：该微生物以CO2为唯一碳源,但CO2不能为微生物提供能量,不属于能源物质。答案:B5．解析：带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉，不能通过简单的加热后就倒掉，这样达不到灭菌效果。答案：C6．解析：菌落是由单个细菌细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见有一定形态结构等特征的子细胞群体，故只含一种细菌；青霉素是抗生素，抑制细菌细胞壁的合成,对真菌不起作用;破伤风杆菌为严格厌氧型细菌，通入氧气，破伤风杆菌死亡。答案：D7．解析：琼脂是一种多糖，在98℃以上可溶解于水，在45℃以下凝固，倒平板时高于答案：C8．解析：霉菌适宜的pH为5.0～6.0；细菌适宜的pH为6.5~7.5；放线菌适宜的pH为7.5～8。5。答案：B9．解析:应先称量，溶化后调pH，分装后加棉塞，最后包扎。答案:B10．解析：不同种类的细菌所形成的菌落大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定特征，所以，每种细菌在一定条件下所形成的菌落可以作为鉴定的重要依据.单个的细菌用肉眼是看不见的，故细菌的个体特征(如⑥）不能作为菌种鉴定的依据。答案：B11．解析：硝化细菌需要氮源，因此培养硝化细菌需要含氮的培养基;硝化细菌是需氧型微生物，因此试管口用棉塞塞住便于通气.答案：D12．解析：细菌的繁殖方式是二分裂方式；噬菌体是没有细胞结构的细菌病毒，需要在活细菌中才能生活，在蛋白胨培养基中不能增殖；灭菌的目的是防止杂菌和培养菌发生竞争。答案:B13．解析：平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作,而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作,需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基,故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。答案：C14．解析：全营养的LB培养基（普通培养基）上多种细菌可生长，筛选不到纯的大肠杆菌。答案：A15．解析：不同的微生物需要的营养不同，如自生固氮菌能利用空气中的N2为氮源，因而培养基中无需添加氮源；碳源和氮源具有一定的比例，但碳元素不一定最多；营养物质浓度太高，会导致微生物失水。答案：C16．解析：经选择培养后，再经稀释,才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上;富集培养可省略；经稀释培养后，用刚果红染色;设置对照应遵循单一变量原则。答案：A17．解析：该实验是为了探究落叶的分解是否与土壤微生物有关,所以该实验的自变量是土壤微生物的有无，其他无关变量实验组和对照组均应保持一致。答案：C18．解析：在细菌计数时，为保证实验结果的准确性,一般选择菌落数在30～300的平板进行计数;然后求出平均数,再根据对应的稀释度计算出样品中的菌株数。答案：D19．解析：每克样品中菌株数＝(90÷0。1)×105＝9×107.答案：B20．解析：微生物培养前，需对培养基进行灭菌处理，将所有的微生物杀死。答案：A21．解析:从配方可知，该培养基为鉴别培养基，用于鉴别大肠杆菌；碳源主要是葡萄糖，蛋白胨主要是氮源，但同时又可以为大肠杆菌提供生长因子;该培养基在使用前不仅要调节pH,而且要进行严格的灭菌.答案：B22．解析：在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。答案：D23．解析：该培养基加入了琼脂，故为固体培养基；对微生物进行计数，宜采用稀释涂布平板法（而不是平板划线法）接种；Ⅰ与Ⅲ对照,说明大肠杆菌生长需要葡萄糖，但不能证明是否需要特殊营养物质；Ⅱ和Ⅲ对照,自变量是有无葡萄糖,说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖.答案：D24．解析：为了确保分离出的目的菌是从土壤中分离的,所用培养液和仪器等都要严格灭菌，所以刚配制的培养基必须经高压蒸汽灭菌处理才能使用。答案:A25．解析：初步筛选只是分离纯化的第一步，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产生纤维素酶的实验。答案：B26．解析:（1)无菌的熟制品在未熟之前可能存在细菌产生的毒素，做成熟制品该毒素不一定分解消失,因此，食用无菌的熟制品，也有可能导致食物中毒。(2）利用高盐的培养基，可从生制品的微生物中筛选出金黄色葡萄球菌，依据的原理是金黄色葡萄球菌对高浓度食盐抗性较强。（3）因为每克食品中菌株数大于105时，可产生致病性肠毒素，所以将样品以克为单位进行稀释处理，其稀释倍数最好为102。采用(稀释）涂布平板法将稀释液接种到平板培养基上培养,以保证能从中选择出菌落数在30~300之间的平板进行计数。培养得到的菌落数常常会小于实际含菌数量，因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察的只是一个菌落。（4）从色素角度分析，金黄色葡萄球菌不能进行光合作用是由于其缺少叶绿素.答案：(1）否（2）金黄色葡萄球菌对高浓度食盐抗性较强(3）抽(取）样102（稀释）涂布平板小于（4）叶绿素27．解析：土壤取样，应从含石油多的土壤中采集；从功能上分,应选用选择培养基进行筛选和纯化该类微生物，常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。该类微生物是厌氧微生物，接种后应密封培养，一段时间后选择降油圈大的菌落进