DB2305-T 038-2024水稻种质对纹枯病抗性评价技术规程

ICS65.020.20CCSB16

DB2305双 鸭 山 市 地 方 标 准DB2305/T038—2024水稻种质对纹枯病抗性评价技术规程2024-08-302024-08-302024-09-30双鸭山市市场监督管理局发布DB2305/T038—2024前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由双鸭山市农业农村局提出并归口。本文件起草单位：黑龙江省农业科学院佳木斯分院、宝清县小城子镇乡村振兴发展服务中心、芜湖职业技术学院、黑龙江农业职业技术学院。IIDB2305/T038DB2305/T038—2024DB2305/T038DB2305/T038—2024水稻种质对纹枯病抗性评价技术规程范围本文件规定了水稻种质对纹枯病抗性的苗期接种鉴定技术要求。本文件适用于水稻种质纹枯病抗性的苗期离体叶片接种鉴定和评价。规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4404.1粮食作物种子第1部分：禾谷类术语和定义下列术语和定义适用于本文件。下列术语和定义适用于本文件。3.1水稻纹枯病A。3.2抗病性植物与病原在长期进化和相互作用的复杂过程中，逐渐形成和表现出各种抵御有害病原物的特征和能力。3.3接种物人工制备能够侵染寄主并引起病害的微生物病原体，本文特指培养好的表面长满水稻纹枯病菌菌丝的菌饼。13.4接种体制备制备人工接种使用的水稻纹枯病菌菌饼。3.5离体叶片水稻叶片从植株体上分离出来放置于特定培养液中用于接种试验。3.6抗性评价根据采用的技术标准判定寄主植物对特定病害反应程度和抵抗水平的定性描述。病原菌来源选择经过纯化和鉴定的水稻纹枯病菌。5水稻种质的种植5水稻种质的种植供试水稻种质分别装入纱网袋，每份种质播种50粒,经过常规浸种催芽后播于育苗大棚或育苗室内，并进行常规肥水管理。种子质量符合GB4404.1标准。6接种6.1培养基的配制6.1.1马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）将去皮马铃薯200g1000mL25min，用四层纱布过滤，过滤后加入琼脂20g，煮沸后加入葡萄糖20g，加水定容至1000mL，121℃下湿热灭菌25min。6.1.26-苄氨基嘌呤（6-BA）溶液的配制40mg/L640mg1000pHpHpHpH值为7，备用。6.1.3接种体制备25mmPDA平板中央，28℃培养箱48h5mm6.1.4离体叶片接种水稻4叶期，选取健康叶片，将叶片剪成6cm长小段，放置于覆有3层滤纸的直径9cm培养皿中（培养基及滤纸经高温灭菌），45mm的菌饼，培养pH740mg/L6-苄氨基嘌呤（6-BA）溶液10mL，6-BA溶液的主要作28℃h光照，10h黑暗培养。培养期间，接种培养皿的盖子盖着。多个培养皿可以进行叠加放置。每个种质共取12个叶片，分别放置在3个培养皿中，即为三次重复。病情调查调查时间接种后24h调查发病级别。调查与记载复的平均值。调查表见B.1。种质的最终发病级别计算公式如下：种质最终发病级别复的平均值。调查表见B.1。种质的最终发病级别计算公式如下：种质最终发病级别=1/3（1+2+3发病级别）………（1）8抗病性评价1要求。1：水稻种质对纹枯病抗性评价标准等级表3病级标准病斑面积表现情况0级（免疫）无病斑1级（抗病）病斑面积占叶片面积的1/8以下2级（中抗）病斑面积占叶片面积的1/8～1/4（不包括1/4）3级（中感）1/4~1/2（1/2）4级（感病）1/2~3/4（3/4）5级（高感）病斑面积占叶片面积的3/4以上注：原始数据和抗性评价记载参见附录B.1。附录A(资料性附录)水稻纹枯病田间症状附图A.1水稻纹枯病田间症状（叶鞘）A.2（菌核）4附图A.1水稻纹枯病田间症状（叶鞘）A.2（菌核）4DB2305/TXXX—2024附录B(资料性附录）水稻苗期抗纹枯病离体叶片鉴定原始数据和抗性评价记载表B.1水稻苗期抗纹枯病离体叶片鉴定原始数据和抗性评价记载表见表B.1:编号品种