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文档简介
尿液干化学分析仪应用学习目标了解尿液干化学分析仪发展史、结构及检测原理0102握尿液干化学检验中各项目的原理、方法03掌重点掌握尿液干化学检验中的注意事项及临床意义04掌握干化学检查过程中应注意的问题现代尿液分析仪类型干化学分析仪检验全自动尿沉渣分析仪流式细胞术分析仪影像式尿沉渣尿干化学试带测试原理、临床应用级及质量控制1全自动尿沉渣分析仪2CONTENTS
尿干化学试带测试原理、临床应用级及质量控制主要内容干化学尿液分析仪试剂带检测原理干化学尿液分析仪检验的干扰因素及质量控制干化学尿液分析仪检验的临床应用历史回顾16世纪:英国物理学家RobertBoyle发明石蕊试纸,用于测定溶液pH1937年:费格尔利用“蛋白质误差(proteinerror)原理,首次发明了测定尿蛋白的一种单颜色反应,此发明奠定了以后发展浸入即读(Dip-and-Read)干化学试带的基础1956年:联合尿糖、蛋白、pH等的多联试纸问世,从3-4个项目组合到九十年代的尿液10项干化学试带,已经达到比较理想的境地1970年起,用于判读尿试带颜色变化的半自动化仪器问世1980年:具有自动进样,点滴,试带传输和打印功能的全自动尿干化学分析仪问世历史回顾历史回顾---中国1966年:北京协和医院检验科生产出12种用于测定尿液中化学成分的试纸,包括尿蛋白、尿糖、酮体、胆红素、pH、潜血等项目1980年,北京协和医院与美国Ames公司签订双方协作计划,首次从美国引进一批自动化和半自动化检验设备中级医刊,1966年特刊
8项目半自动尿液干化学分析仪
近代尿液分析仪1985年,国内不少厂家如桂林医疗电子仪器厂等引进日本京都第一化学或日本荣研化学的技术,生产8项的干化学试带生产线然后还引进了MA-4210等型号的尿液分析仪进入上世纪90年代以后,尿液干化学分析仪器和试带已经扩展为10项至11项MA-4210尿液化学分析仪近代尿液分析仪Clinitek500型半自动尿液干化学分析仪
Roche2400全自动尿液干化学分析系统近代尿液分析仪ClinitekAtlas全自动尿液干化学分析仪迪瑞H800全自动尿液干化学分析仪爱科来AUTIONMAXAX-4280全自动尿干化学分析仪和iQ-200尿液有形成分分析仪连接运行
尿干化学试带结构及组成试带构成第一层尼龙膜起保护作用,防止大分子物质的污染第二层绒制层,包括碘酸盐层和试剂层,碘酸盐层可破坏Vitc等干扰物质,试剂层与尿液所测定物质发生化学反应第三层是固有试剂的吸水层,可使尿液均匀,快速地浸入,并能抑制尿液流到相邻反应区第四层选取尿液不浸润的塑料片为支持体干化学检测原理不同型号尿干化学分析仪使用配套的专用试带各试剂模块与尿中被测成分的反应呈现不同的颜色变化,颜色的深浅与尿中相应物质呈正比空白块,固定块作用检测参数8项:PH、PRO、GLU、KET、BIL、URO、ERY、NIT9项:增加WBC10项:SG11项:VitC肾病四联试带:PH、PRO、ERY、SG糖尿病五联试带:PH、PRO、GLU、KET、SG肝病二联试带:BIL、URO尿白细胞测定原理模块成分吲哚酚酯重氮盐粒细胞胞含有酯酶,先与试纸带吲哚酚酯反应作用生成吲哚酚,再与重氮盐氧化缩合生成紫色缩合物其颜色深浅与细胞多少呈比例关系注意事项本法主要检测粒细胞酯酶,不与淋巴细胞反应尿中含福尔马林、呋喃坦啶、大量胆红素可致假阳性高比重尿、高蛋白(5g/L)、VC、尿中含头孢霉素、庆大霉素、四环素以及硼酸、草酸可致假阴性注意事项尿液标本应新鲜,尿液在膀胱时间过长,或标本存储时间过长,引起白细胞破坏,导致干化学阳性,镜检阴性的假阳性出现综合酯酶、亚硝酸盐、镜检、结合临床分析结果白细胞和红细胞≤10/μl、亚硝酸盐和蛋白阴性,可以使用干化学过筛而不进行镜检镜检标准肾科及泌尿系病人以镜检作为诊断或疗效依据的,如结石、结晶、肿瘤尿液外观异常时依据医师指定要求做沉渣镜检的标本。
注意事项只要完全符合以下条件的可不进行显微镜检查。白细胞结果为阴性亚硝酸盐为阴性尿蛋白为阴性尿红细胞检查≤10/μl排除药物及其它因素的干扰尿中白细胞试带法与镜检结果比较
试带法白细胞(-)试带法白细胞(+)镜检白细胞(-)正常标本白细胞破坏、标本久置、低渗尿、高pH尿、漏检白细胞镜检白细胞(+)试带失效、高渗尿、抗生素、错误识别:滴虫、鳞状上皮裸核型,排斥等(+)临床意义白细胞增多主要见于泌尿系炎症肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎、前列腺炎,肾小球肾炎中性粒细胞见于急性炎症淋巴细胞、单核细胞见于肾移植、慢性炎症、新月形肾小球肾炎、抗癌药物引起的间质性肾炎嗜酸性细胞见于过敏性炎症、变态反应引起的泌尿系炎症急性肾小管坏死,可见单核细胞减少或消失女性生殖系统炎症分泌物污染VitC概
述人、灵长类和豚鼠不能合成VC的阈值14mg/L通过消化道需能吸收通过尿液排出,其重吸收机制和葡萄糖基本一致摄入45mg/L,血液中6mg/L左旋抗坏血酸左旋脱氢抗坏血酸测定方法同时测定:二硝基苯肼比色法和高效液相色谱法测定左旋抗坏血酸:干化学法和二氯靛酚蓝检测原理模块组成:2,6-二氯靛酚钠、中性红、亚甲基绿磷酸二氢钠、磷酸氢二钠VC含有1,2-烯二醇,在酸性条件使氧化态粉红色2,6-二氯靛酚还原为无色的2,6-二氯二对酚胺注意事项在碱性环境中不稳定,标本要新鲜,及时测定,防止被细菌破坏只对左旋抗坏血酸反应PH>4.0时,内源性酚和巯基化合物如半胱氨酸、硫代硫酸钠使结果偏高着重反映饮食VC含量,反映体内VC营养状况,VC低见于摄入不足或抗坏血酸病,长期增高与结石形成有关维生素C含量的高低对血红蛋白、葡萄糖、胆红素、尿胆原、亚硝酸盐及白细胞产生负干扰尤其注意酮体阳性,葡萄糖阴性或葡萄糖干化学和班氏结果不一致时半胱氨酸比色法测定VC使用活性碳将抗坏血酸氧化成氧化型,与2,4-二硝基苯肼结合成红色脎,脎溶解于硫酸,比色尿干化学检测的原理方法比较---尿干化学法优点:①标本用量少;②速度快;③项目多;④重复性好;⑤准确性高;⑥适用大批量标本筛查缺点:①显微镜检查,对白细胞、管型和结晶的检查属于间接检查;②很难判断红细胞形态特征;③测定蛋白以白蛋白为主,故不适于肾病患者;④易受药物、外源性物质或人为因素影响,出现假阳性或假阴性;⑤亚硝酸盐只能检查出有硝酸盐还原酶的细菌;⑥多联试带保存和使用要求高检出异常标本和排除健康标本,特别是避免假阴性。对假阳性可通过镜检进一步排除筛查的目的质量控制标本必须新鲜,最好2小时内完成,过久影响结果避免混入阴道分泌物混入尿标本,否则,引起白细胞假阳性了解病人饮食及用药情况试剂带要求一定要在失效期内避光、防潮、干燥保存使用时一次只取出所需要的试剂带,并立即盖紧,多余试剂带不可放回容器内打开盖子后不能再放冰箱不可合并各瓶中的试剂带。不可触摸试剂带上各反应检测块。质量控制操作严格、规范、正确2种浓度质控液临床应用尿液蛋白质检查种类流式细胞术尿沉渣分析仪流式细胞术尿沉渣分析仪流式细胞计数仪原理和电阻抗相结合影像式尿沉渣分析系统流式细胞分析技术和粒子成像分析技术影像式尿沉渣分析仪流式细胞术尿沉渣分析仪光学检测系统液压系统电阻抗检测系统电子系统参
数荧光强度(FI):反映细胞染色质强度前向荧光脉冲宽度(FLW):主要反映染色质长度前向散射光强度(Fsc):成比例反映细胞大小前向散射光脉冲宽度(Fscw):反映细胞长度定量参数WBC/μl、RBC/μl、EC/μl、CAST/μl、BACT/μl、conductivity标记参数PathCAST、SRC、YLC、X´TAL、SPERM等红细胞、白细胞isomorphicRBC、dysmorphicRBC、Non-LysedRBC#,%、RBC-MFI、RBC-MFsc、RBC-FI-DWSD、WBC-MFsc)FI-Fsc、Fscw-Flw散点图红细胞:FI极低,Fsc大小不均白细胞:FI大,Fsc较红细胞大细菌:FSC比白细胞和红细胞小,FI比红细胞大,比白细胞小上皮细胞:均有细胞核,主要分布在Fscw-Flw散点图左上角管型:透明管型有极高的Fscw和低的FLW;病理性管型含有其他内容物,有较高的Fscw和较高的FLWFSCWFSC酵母细胞和精子:较高的FI,Fsc在红细胞和白细胞之间;酵母的FSCW较精子的小,将其区分开来结晶出现在红细胞区域,草酸盐更靠近FSC,尿酸盐和红细胞分不清FSCWFSC80%的红细胞Fsc≦84ch,称为非均一性血尿80%的红细胞Fsc≥126ch,称为均一性血尿介于两者之间,混合性血尿结晶、真菌、结晶增多影响结果血尿伴菌尿,尿渗量≤700mOsm/L,PH≧7.0或放置时间过长,导致改变红细胞存活的白细胞,Fsc较强而FI弱死亡白细胞,Fsc较弱而FI强白细胞前向散射光(FSC)强,前向荧光(FI)弱,急性感染;否则FSC弱,FI强慢性感染。利用WBC-MFsc来判别白细胞状态,结合白细胞定量判断急性还是慢性感染:当其WBC-MFsc≥73.3时,可初步诊断为急性尿路感染;当其WBC-MFsc≤38.1时,可初步诊断为慢性尿路感染,并可指导临床用药影响:上皮细胞、真菌、滴虫、脂肪滴等,使白细胞增加
白细胞临床应用方法学评价不需离心尿样,自动进样所需标本量少工作效率高,50~100/h,并报告多个参数,且可定量采集信息量大,标本9μl,相当于50个高倍镜视野,粒子总数0~4000,明显高于手工镜检有形成分不能确认,需离心显微镜区分应用时间短,经验不足,未建立公认的参考值不能替代传统尿沉渣操作程序统一,易于标准化和质量控制影像式尿沉渣分析仪结合了流式细胞分析技术和粒子成像分析技术捕获所有颗粒的影像并数字化分析系统分类12种有形成分可以和全自动尿液分析仪或其他设备组合使用组成显微镜高速摄像数字相机图像采集电脑软件参数红细胞、白细胞、白细胞簇、透明管型、非分类的管型、鳞状上皮细胞、非鳞状上皮细胞、细菌、酵母样菌、结晶体、粘液丝、精子尿干化学分析仪应用反映肾脏调节机体内环境体液、酸碱平衡能力的重要指标之一,通常简称为尿液酸度。尿液pH值决定因素主要由肾脏肾小管泌H+、泌NH3、铵盐的形成、HCO3-的重吸收有关尿液酸碱度检查检测方法方法学评价质量控制临床意义目
录CONTENTS检测方法01采用双指示剂法,模块中含有溴麝香草酚蓝(PH6.0~7.6)和甲基红(PH4.6~6.2),变色范围5.0(黄色)—7.0(绿色)—9.0(蓝色)0203溴麝香草酚蓝干化学法pH试纸法指示剂法04可滴定酸度
05滴定法电极法方法学评价注意试带保存条件.质量控制(1)分析前标本必须新鲜分析中试纸、试带法试带应能满足的生理和病理尿pH变化范围定期弱酸、弱碱检查试带灵敏度未被酸、碱污染,未吸潮变质在有效期内使用浸泡时间过长,PH有降低趋势不能浸入过多尿液,防止试带间溢出现象,影响PH测定质量控制(2)---PH计法经常校准PH计对温度有严格要求,故首先调整所需试验温度,新型PH计可自动对温度进行补偿质量控制(3)分析后生理条件下,少见PH小于4.5或大于8.0。尿液PH大于8.0见于标本防腐或保存不当,细菌大量繁殖并分解尿素并产生氨患者服用大量碱性制剂建立完善的报告审核制度参考值在正常饮食条件下,晨尿多偏弱酸性,多数尿标本pH5.5-6.5,平均pH6.0随机尿pH4.5-8.0。临床意义续表有形成分临川意义混合管型活动性肾小球肾炎颗粒管型肾实质病变后期、药物中毒性肾小管损伤脂肪管型慢性肾炎肾病型、类脂性肾病、肾病综合征、中毒性肾病宽大管型急性肾功能不全早期、慢性肾功能不全,为预后不良的征象蜡样管型慢性肾炎晚期肾小管病变,为预后不良的征象尿酸结晶一般无意义;大量出现半红细胞提示泌尿系结石或机体尿酸代谢障碍草酸钙结晶一般无意义;大量出现伴刺激症提示泌尿系结石胱氨酸结晶大量出现提示泌尿系结石可能;胱氨酸病胆固醇结晶偶见于乳糜尿、脓尿、肾炎尿等磷酸钙结晶泌尿道慢性炎症尿酸铵无临床意义或见于膀胱炎、腐败尿胆红素结晶阻塞性黄疸、急性肝坏死、肝硬化、肝癌、急性磷中毒非晶形磷酸盐无临川意义监测尿酸碱度在干化学尿液分析中的价值?思考题尿液一般性状检查尿量测定方法、参考范围和临床意义1尿颜色和透明度检查方法和临床意义2CONTENTS尿比密测定的方法、方法学评价和临床意义3尿渗量测定方法、参考区间和临床意义4
尿量测定方法、参考范围和临床意义一、尿量概念:指24h内排出体外的尿液总量。尿量的多少主要取决于肾脏生成尿液的能力和肾脏的浓缩与稀释功能。尿量的变化也受机体的内分泌功能、精神因素、活动量、饮水量、年龄、环境温度、药物等多种因素的影响。量筒标准化(一)检测方法和参考范围检测方法直接法(用量筒直接测量24h尿)累积法(测定每次尿量后累计24h总尿量)参考值成人1~2L/24h儿童3~4倍/体重(二)临床意义——多尿多尿>2.5L/24h(一)临床意义——多尿多尿伴有烦渴多饮,排低比重尿见于尿崩症。多尿伴有多饮多食和消瘦见于糖尿病。多尿伴有高血压,低血钾和周期性麻痹见于原发性醛固酮增多症。多尿伴有酸中毒,骨痛和肌麻痹见于肾小管性酸中毒。少尿数天后出现多尿可见于急性肾小管坏死恢复期多尿伴神经症症状可能为精神性多饮。
病理性多尿原因(二)临床意义——少尿参考值成人:<0.4L/24h,或<17ml/h儿童<0.3L/24h婴幼儿<0.2L/24h1.生理性少尿:出汗过多或缺水少尿原因(三)临床意义——无尿成人:<0.1L/24h或12h无尿儿童<20~50mL/24h不能排出尿液称尿闭与少尿原因相同肾毒性物质如汞、四氯化碳、二乙烯乙二醇等导致的急性肾小管坏死,常突然少尿或无尿颜色和透明度二、颜色和透明度尿液颜色淡黄色(参考)黄色褐黄色红色乳白色透明度清晰透明轻度浑浊(雾状)浑浊(云雾状)明显混浊(一)颜色生理变化饮水运动出汗食物(大量胡萝卜素、木瓜呈黄色;芦荟呈红色)月经药物(二)尿液透明度尿液透明度分级判定依据清晰、透明没有肉眼可见的颗粒物质微混只出现少数可见的颗粒物质,但透过尿液可看清书上字迹浑浊出现可见的颗粒物质,透过尿液所见书上的字迹模糊不清明显浑浊透过尿液看不见书上字迹临床意义——血尿尿液内含有一定量的红细胞时,称为血尿。肉眼血尿>lml(血)/L(尿)尿液呈淡红色云雾状、洗肉水样、鲜红色混浊外观镜下血尿:RBC>3个/HP血尿来源(排除女性月经污染)泌尿生殖系统疾病(98%)肾结核、肾肿瘤、结石、急性肾小球肾炎、肾盂肾炎、膀胱炎、多囊肾、血管畸形生殖系统:前列腺炎和肿瘤、输卵管炎、宫颈癌三杯实验血尿来源全身性疾病血液病:白血病、再障、血小板减少性紫癜、血友病等感染性疾病:心内膜炎、败血症、肾病综合征、出血热、高热、重感冒结缔组织病:系统性红斑狼疮、血管炎心血管疾病:高血压性肾病、肾动脉硬化、心力衰竭、心血管神经症内分泌代谢性疾病:痛风、糖尿病血尿来源药物毒副作用:磺胺类、水杨酸类、抗凝类、抗生素类、汞剂环磷酰胺等,导致不同程度的血尿。其他过敏性紫癜肾炎、器官移植、排斥反应,一过性血尿泌尿系统邻近器官疾病急性阑尾炎、急性或慢性盆腔炎、宫外孕、结肠或直肠憩室、恶性肿瘤,以及其他临近器官疾病侵犯或刺激尿道时,但程度轻临床意义——血红蛋白尿概念:尿液游离的血红蛋白过量时,引起尿隐血试验阳性者颜色:酸性尿中的血红蛋白,可被氧化成正铁血红蛋白,其含量不同,尿可呈棕色、深棕色浓茶样或棕黑色酱油样外观尿蛋白与隐血试验均呈阳性1(二)临床意义——肌红蛋白尿概念:当机体心肌或骨骼肌组织发生严重损伤时,血浆Mb增高,经肾脏排泄,使尿液Mb检查呈阳性,称为肌红蛋白尿病因:①创伤②肌肉疾病③心肌梗死④代谢性疾病⑤缺血性肌损伤(行军性肌红蛋白尿)⑥中毒肌红蛋白与血红蛋白尿区别颜色:肌红蛋白尿呈粉红色、暗褐色溶解性,Mb能溶于80%饱和度的硫酸铵溶液中,而Hb则不溶免疫学方法(二)临床意义——胆红素尿概念:尿液含有大量的结合胆红素外观:深黄色,振荡泡沫亦呈黄色,与空气接触,被氧化为胆绿素使尿液变为棕绿色、黄褐色或啤酒色。
病因阻塞性黄疸或肝细胞性黄疽(二)临床意义——浑浊尿乳糜尿概念:乳糜液或淋巴液进入尿液中,尿液呈乳白色混浊称为乳糜尿主要成分:脂肪微粒、卵磷脂、胆固醇、甘油三酯,少量纤维蛋白原和清蛋白等。
产生机制:泌尿系淋巴管破裂,深部淋巴管阻塞。乳糜尿见于多为丝虫病所致少数病例为腹膜结核、肿瘤、胸腹部创伤或手术、先天性淋巴管畸形等以及肾病综合征、肾小管变性、脂肪组织创伤等鉴别:乳糜试验:在尿中加入等量乙醚或氯仿,提取乳糜,用苏丹Ⅲ染色(+)与脓尿与菌尿鉴别:乳糜尿以脂肪颗粒为主,少见血细胞、脓细胞、细菌脓尿与菌尿外观脓尿:含大量白细胞、脓细胞等炎症性渗出物,黄白色、乳酪状;常含有脓丝状悬浮物,放置后有云絮状沉淀。菌尿:含大量细菌,云雾状,静置不下沉病因:泌尿生殖系统感染鉴别试验(镜检):脓尿可见大量白细胞及成堆的脓细胞;菌尿以细菌为主。结晶尿概念:含有较高浓度盐类结晶的尿液称为盐类结晶尿。外观:灰白色或粉红色混浊常见类型:磷酸盐和碳酸盐:在食入多量植物性食物后,
尿液呈碱性,体外遇冷时结晶析出,使尿呈淡灰色、白色混浊尿酸盐:浓缩的酸性尿液冷却后析出淡粉红色结晶混浊或沉淀,多存在尿酸盐结晶草酸盐:加入15%盐酸后,浑浊消失浑浊尿鉴别气味尿比密测定的方法、方法学评价和临床意义三、尿比密测定尿液在4℃时与同体积纯水重量之比,称为尿比密,又称比重(SG)可相对指示肾脏的浓缩和稀释功能生理情况下与尿液中水分、盐类及有机物含量有关病理情况下受尿蛋白、尿糖及细胞成分、管型等病理成分的影响折射仪法试带法浮标法超声波法称量法液滴落下法
(一)检测方法浮标法应避免起泡沫避免碰壁比密计保存在盛水容器中用纯水检验比密计,观察是否在1.000刻度处.温度校正:每高于(或低于)定标
温度3℃,结果应加上(或减去)0.001尿中含10g/L蛋白质者减去0.003,含10g/L葡萄糖减去0.004造影剂,右旋糖酐、甘露醇尿比密可升高盐类沉淀的处理将尿标本温育后测定尿折射仪法间接测定尿液中总固体量,来反映尿比重原理:当折射角为90º的光线,进入另一种介质(较密)时,被折射的角度称为临界角。依折射临界角的大小,可见明暗视场的改变,从而求出相对折射率折射率与溶质的浓度和性质有关,并与入射光波长和温度有关参考方法尿比重(SG)--化学试带法原理试带模块中含有甲氧乙烯顺丁烯二酸和溴麝香草酚蓝从高分子电解质共聚体释放出H+释放出的H+和酸碱指示剂反应蓝色黄色3,3׳,5,5′-四溴苯酚磺酰酞
黄色蓝色试带法注意事项(1)标本要新鲜,不含强酸、强碱等物质(喹宁、嘧啶),变化范围为pH6.2-7.0。当尿液pH≥7.0时,应在结果的基础上增加0.005尿比重>1.030,需加蒸馏水稀释一倍再行测定干化学法所测比重结果间隔太大,只能用于一般性的筛选试带法注意事项(2)干化学法是测定尿液离子浓度,而比重计法、折射仪法是测定尿中固体物质浓度,三者结果存在一定差距干化学法简便易行,受非离子成分(糖、造影剂)干扰甚少,适于观察肾脏浓缩功能本法不宜用于新生儿比重测定(新生儿仅在1.002~1.004)试带法注意事项(3)尿中蛋白浓度升高时,使结果偏高每增加10g/L,折射仪法减去0.005,比重计法减去0.003,干化学法影响最大试带法优缺点缺点该方法灵敏度略低,只能按0.005的梯度色阶表达结果精密度差测试范围窄并且受强碱性尿和高蛋白质尿的影响不适宜用于小儿及肾脏浓缩稀释功能严重减低的患者使用优点快速过筛,适合于一般尿液分析仪自动检测适合于健康人群过筛试验方法学评价临床意义参考值晨尿:1.015~1.025随机尿:成人1.003~1.035;新生儿1.002~1.004增高肾性:见于急性肾炎、急性肾衰少尿期-肾前性:蛋白尿、糖尿病、尿毒症、高热、大量
出汗、脱水、心功能不全,流行性出血热少尿期等减低<1.015见于慢性肾炎、尿崩症、精神性多饮多尿症、原发性醛固酮增多症、流行性出血热多尿期及恢复期尿渗量测定方法、参考区间和临床意义4尿渗量测定概念:又称尿渗透量,指尿液中具有渗透活性的全部溶质颗粒的总数量。是反映溶解在尿液中具有渗透作用的溶质颗粒数量的一种指标表示肾脏排泄到尿液中所有溶质颗粒的总数量受大分子物质影响小,较尿比密测定更能确切反映肾脏浓缩稀释功能。故是用于评价肾脏浓缩和稀释功能的最佳指标测定方法冰点下降法(主)沸点升高法蒸汽压下降法渗透压半透膜法蒸汽压渗透压计法(一)蒸汽压降法溶液中含非挥发性溶质的浓度愈高,其蒸气压愈低亦即溶液蒸气压的下降量和溶质的莫耳分率成正比美国Wescor露点渗透压仪(二)沸点升高法液体的蒸气压随温度升高而增高,当蒸气压和液面大气压力相等时,液体便开始沸腾溶液的沸点(T4)比纯溶剂(T3)高△Tb溶液沸点的上升和溶质的粒子数目有关△Tb=Kbm
(三)渗透压半透膜法1半透膜能让颗粒较小的溶剂粒子通过,却不让体积较大的溶质粒子穿透,具有这种性质的薄膜称为半透膜细胞膜、膀胱壁及人工合成的薄膜(三)渗透压半透膜法2为了保持两边液体的液面高度相等,施加于溶液的压力就是溶液的渗透压,其值便可以由压力计读出在稀薄溶液中,渗透压(π)的大小与溶质的莫耳数(n)和绝对
温度(T)成正比,与溶液的体积(V)成反比,而与溶质和溶剂的种类无关
π=MRT
1渗量的溶质可使1kg水的冰点下降1.858℃,因此溶质渗透压等于冰点下降数除以1.858。渗透压(Osm/kgH2O)=测得溶液冰点下降度(0C)/1.858(四)冰点下降法注意事项1、尿液标本应收集在清洁干燥、无防腐剂的带盖容器内,并立即送检。2、离心除去不溶性颗粒,但注意不能丢失盐类颗粒3、不能立即测定保存在冰箱内,测定时孵育至室温4、血清渗量在室温稳定3h,4℃稳定10h,最长3d;尿液在4℃稳定24h,冰冻长期稳定参考范围1.尿渗量随机尿:600~1000mOsm/kg.H2O晨尿:14岁为578~836mOsm/kg.H2O15~59岁为542~994mOsm/kg.H2O60~75岁为331~783mOsm/kg.H2O2.血浆渗量275~315mOsm/kg.H2O尿渗量/血浆渗量比:3.0~4.7/1﹤临床意义1.评价肾脏浓缩稀释功(1)正常两者比值应大于3,尿渗量大于800mOsm/kg.H2O。否则,肾脏浓缩功能不全(2)降低见于:慢性肾小球肾炎、慢性肾盂肾炎、多囊肾、阻塞性肾病等慢性间质性病变2.鉴别肾性和肾前性少尿肾小管坏死导致少尿时,尿渗量<350mOsm/kg·H2O肾前性少尿>450mOsm/kg·H2O尿液显微镜检查细胞1管型2CONTENTS结晶3病例成分——癌细胞4
其他成分5质量控制5细胞
尿液分析的全部内容应包括尿液理学检查、化学检查和显微镜形态学检查三大部分。在完整的尿液分析过程中,不可对任何一项检验内容有所忽略,因为三大部分在临床疾病的诊断和治疗中都有重要作用。尿液有形成分检查尿液显微镜形态学检查也称作尿沉渣检查或尿液有形成分检查。显微镜检查包括定性检查、定量检查、红细胞形态分析等内容。常规显微镜检查主要观察的内容是细胞、管型、结晶三大类成分。同时注意发现异常细胞和寄生虫。尿液有形成分检查临床意义是肾脏疾病和泌尿系统疾病检查和诊断的重要指标是全身其他系统疾病筛查、疗效观察的重要指标是某些现代化检验方法不能取代的内容红细胞检查的临床意义泌尿系统自身疾病:泌尿系统各个部位的炎症、肿瘤、结核、结石、创伤、肾脏移植排斥反应、先天性疾患等都会引起血尿。肾盂肾炎、泌尿道感染、肾结石、肾结核、肾外伤、肾活检后、多囊肾、肾积水、肾脏和泌尿道良性或恶性肿瘤等都是造成血尿的病因。生殖系统疾病:前列腺增生、前列腺癌、前列腺炎或脓肿、精囊炎等也可出现血尿。全身性疾病:各种原因导致的出血性疾病,如血小板减少性紫癜、再生障碍性贫血、DIC、白血病伴血小板减少、血友病、坏血病等;某些免疫系统疾病如系统性红斑狼疮、风湿性肾炎等;感染性疾病如钩端螺旋体病、流行性出血热、猩红热、血丝虫病等;心血管系统疾病如动脉粥样硬化合并肾小管动脉硬化、心力衰竭等;遗传性疾病如遗传性毛细血管扩张症等,都可引起尿中红细胞增加,形成镜下血尿。尿路临近器官疾病:阑尾炎、输尿管周围炎症、盆腔炎、输卵管和附件炎、结肠癌、直肠癌、子宫颈癌、卵巢恶性肿瘤等,均可侵犯道尿道,而造成尿中红细胞数量增加。药物的毒副作用也可引发血尿。相差镜下的红细胞正常形态的红细胞肾结石病例急性肾小球肾炎病例尿中白细胞检查的意义尿中检查到的白细胞多为中性粒细胞。尿液中白细胞增加主要见于泌尿系统炎症,如肾盂肾炎、尿道炎、前列腺炎、结核、结石症,以及膀胱癌、尿道癌等恶性肿瘤疾病。中性粒细胞增加:①泌尿系统炎症,特别是细菌性感染时以中性粒细胞明显增多,如急慢性肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎等。②生殖系统疾病:前列腺炎、阴道炎、宫颈炎、附件炎时,可因前列腺液或阴道分泌物混入尿中,导致尿中中性粒细胞增加,若伴有白带混入,还可见大量扁平上皮细胞出现。尿中的白细胞淋巴细胞和单核细胞增加:多见于泌尿道慢性炎症和肾移植术后发生排异反应,淋巴细胞白血病患者等。应用抗生素、抗癌药物引起的间质性肾炎和新月体性肾小球肾炎,也是以淋巴细胞、单核细胞数量增加为主。嗜酸性粒细胞增多:如果尿中出现过多的嗜酸性粒细胞,可称为嗜酸性粒细胞尿。常见于某些急性间质性肾炎患者、药物所致变态反应、过敏性炎症等。变态反应性疾患引起的泌尿系及其他部位的非特异性炎症,也可见嗜酸性粒细胞增多。脓细胞增加:新鲜尿中出现过多陈旧性脓细胞,则可能与泌尿系统原发性感染,如肾盂肾炎、肾脓肿、尿道炎、淋病有关;也与泌尿系统继发感染,如泌尿系统结石感染和尿道梗阻性疾病感染有关;还与泌尿生殖道周围器官和组织的疾病,如肾周围炎、尿道旁脓肿、阑尾周围炎症有关。泌尿道感染病例肾小管上皮细胞正常人尿中无此类细胞。当明显增多时表示肾小管病变,以急性肾小球肾炎最为多见。当大量或成堆出现时,表示肾小管有坏死性病变。肾移植后一周内,尿内可发现较多的肾小管上皮细胞,随后可逐渐减少至恢复正常。当发生排异反应时,尿中可再度出现成片脱落的肾小管上皮细胞。急性肾小球肾炎病例上皮细胞尿中脱落的上皮细胞来自肾脏到尿道口所有部位。其中肾小管上皮细胞来自肾脏,各种移形上皮细胞来自肾盂、输尿管、膀胱、尿道的大部分器官表层。常见的鳞状上皮细胞来自尿道前端,女性可来自阴道分泌物污染。增多并伴有白细胞或脓细胞,主要见于尿道炎。移行上皮细胞表层移行上皮细胞(大圆上皮细胞):膀胱炎时可成片脱落。中层移行上皮细胞:此类细胞多来自肾盂,也称为肾盂上皮细胞,有时亦可来自输尿管及膀胱颈部。在上述部位有炎症时,可成片出现。底层移形上皮细胞:输尿管、膀胱和尿道炎症或肿瘤,病变部位较深。表层移行上皮细胞中层移行上皮细胞底层移行上皮细胞非典型细胞出现非典型细胞需要通过特殊染色方法鉴别,如可能出现肿瘤细胞等。需通过病理或细胞学鉴定。含铁血黄素颗粒和复粒细胞在慢性肾炎、肾脏慢性充血、充血性肾梗阻或血红蛋白沉着时,肾小管上皮细胞内会出现含铁血黄素颗粒,此类细胞有时易与正常尿中的单核白细胞混淆,形态似痰内心力衰竭细胞的颗粒。鉴别方法:在盐酸中与亚铁氰化钾作用,经普鲁蓝染色后呈蓝色,可以确认。当在某些慢性疾病时,肾小管上皮细胞可发生脂肪变性,细胞浆内会出现许多脂肪颗粒,称为脂肪颗粒细胞,如果脂肪颗粒覆盖和充满整个细胞浆和核上,将其称为复粒细胞。慢性肾小球肾炎病例吞噬细胞尿液蛋白质检查管型尿中常见的管型主要有:透明管型、颗粒管型、白细胞管型、红细胞管型、蜡样管型、肾上皮细胞管型。还可见到脂肪管型、结晶管型、细菌管型、宽大管型等。管型形成条件:T-H糖蛋白、肾小管的浓缩和酸化能力、有可交替使用的肾单位正常人晨尿中可偶见透明管型,儿童尿中透明管型较成人略多,老人尿中透明管型较常见。剧烈运动、发热、心功能不全时透明管型略微增多。尿中透明管型明显增加多见于急慢性肾小球肾炎、急性肾盂肾炎、肾病综合征、肾淤血、高血压、肾脏动脉硬化和肾淀粉样变性。急性肾小球肾炎时,透明管型常与其他病理性管型同时出现;慢性间质性肾炎患者尿中可长期大量出现透明管型。肾炎晚期可出现异常粗大的透明管型,称为肾衰竭管型,是宽幅管型的一种类型。透明管型颗粒管型正常人尿中无,但在剧烈运动后、高热、脱水等情况下可偶见细颗粒管形。尿中颗粒管形同透明管形同时存在和出现。尿中细颗粒管型的出现和增加,提示肾脏有实质性改变。常见于急慢性肾小球肾炎、肾病综合征、肾小管硬化症、药物中毒等。一般情况下细颗粒管形出现表示症状较轻,而粗颗粒管形出现提示病情加重,如肾功能衰竭时会出现宽福的粗颗粒管型。蜡样管型正常人尿中无蜡样管型。尿中检出蜡样管型是预后不良的征象,提示病情严重,肾小管有严重坏死或肾单位慢性损害。长期少尿和无尿则可导致管型长期滞留于肾小管内,形成蜡样管型。常见于慢性肾小球肾炎晚期、慢性肾功能衰竭、肾淀粉样变、肾功能不全、肾移植慢性排异反应等。白细胞管型正常人尿中不会出现白细胞管型。白细胞管型内主要是中性粒细胞和脓细胞。因此多与感染性疾病有关。+若尿中检出白细胞管型则提示肾脏有化脓性或细菌性感染,常见于急性肾盂肾炎、间质性肾炎等肾实质感染性疾病,是上尿路感染的标志物。也见与肾脏非感染性炎症,如急性肾小球肾炎、狼疮性肾炎、肾病综合征患者,但多与肾上皮细胞管型和红细胞管型同时出现。肾小管上皮细胞管型正常人尿中无肾小管上皮细胞管型。尿中检出肾小管上皮细胞管型表示肾小管腔内的上皮细胞有病变和脱落。是肾脏疾病加重的指标。在各种原因导致的肾小管损伤时出现。如急性肾小管坏死、肾淀粉样变性、肾移植术后排异反应、肾小球肾炎晚期等。妊娠中毒症、药物、重金属或化学品中毒症也可见肾小管上皮细胞。肾移植排斥反应脂肪管型(光镜和偏振光显微镜图)宽大管型结晶结晶(crystaluria)尿中出现结晶称晶体尿结晶是机体进食各种食物及其代谢过程中产生的各种酸性产物与钙、镁、铵等离子结合生成各种无机盐及有机盐,再通过肾小球滤过、肾小管重吸收及分泌、排入尿中的物质结晶尿的形成与尿液的PH值、温度、形成该结晶的物质及其胶体物质的浓度和溶解度有关分类生理性结晶:来自食物或机体代谢性盐类结晶草酸钙结晶尿酸结晶非晶性尿酸盐马尿酸结晶磷酸盐结晶碳酸钙结晶碳酸铵结晶病理性结晶:由于各种疾病因素在尿液中出现或由于某种药物代谢异常出现的结晶胆红素结晶胱氨酸结晶亮氨酸、酪氨酸结晶胆固醇结晶含铁血黄素颗粒药物结晶
结晶碱性结晶三价磷酸盐尿酸铵结晶非晶型磷酸盐磷酸钙酸性结晶磺胺结晶亮氨酸尿酸结晶草酸钙结晶非晶型尿酸盐酪氨酸结晶胆固醇、胆红素01生理性结晶生理性结晶---草酸钙草酸钙结晶为无色方形闪烁发光的八面体或信封样,有两条对角线相交叉,有时呈菱形等多种形态偶见形态为哑铃型或饼形,易于红细胞混淆溶于盐酸而不溶于乙酸(加乙酸后红细胞溶解)和氢氧化钠草酸钙结晶新鲜尿液有大量草酸钙结晶,并伴有红细胞,又有肾或膀胱刺激症状时,多为肾或膀胱结石尿路结石90%为草酸钙结晶,或与磷酸钙的混合结石。草酸钙结晶生理性结晶---尿酸结晶尿酸结晶在目视下类似红砂细粒,常沉积在容器底层镜下呈黄色或暗棕红色的棱形、三棱形、长方形、斜方形、蔷薇花瓣形的结晶体可溶于氢氧化钠溶液而不溶于乙酸或盐酸尿酸结晶尿酸是核蛋白中嘌呤类物质代谢产物见于痛风症、儿童急性发热、慢性间质性肾炎。伴有红细胞出现提示膀胱或肾结石可能加氨水后形成尿酸铵尿酸结晶尿酸铵结晶常呈刺球形或不规则形,是尿酸与游离胺结合的产物,又称重尿酸铵结晶第二幅图中的尿酸铵结晶形态似螨虫形似螨虫尿酸盐尿酸钠结晶非晶形尿酸盐主要是尿酸钠、尿酸钾、尿酸钙等混合物外观呈黄色的非晶性颗粒状沉淀物在淡色尿中无色,在低温、浓缩或酸性较强尿中容易析出加热或加碱均可使之溶解,一般无临床意义马尿酸结晶呈有色泽的针状、板状、斜方柱状或三棱状由苯甲酸与甘氨酸结合而成人类与草食动物共有生理性结晶---磷酸盐类结晶磷酸盐类结晶磷酸盐类结晶非晶性磷酸盐磷酸铵镁磷酸钙常见于碱性或近中性尿非晶性磷酸盐为白色或灰黑色颗粒状加酸可溶解无临床意义磷酸铵镁三联磷酸盐无色,呈方柱形,信封状,或羽毛状,有强折光性瓦楞屋顶形三价磷酸盐结晶无色透明,折光性强,呈屋顶或楞柱型,有时呈羊齿草叶形为碱性尿液内常见结晶感染引起结石时可多见磷酸钙有非晶形、粒状、三棱形,排列成星状或束状常见于弱碱性尿应排除甲状腺功能亢进、肾小管性酸中毒或长期卧床引起的骨质脱钙02病理性结晶胆红素结晶黄红色成束的小针状或小片状、橘红色结晶,可被白细胞吞噬氧化后呈非晶体色素颗粒,加硝酸后,因被氧化成胆绿素呈绿色,可溶于氢氧化钠或氯仿中见于各种黄疸患者病理性结晶---氨基酸结晶胱氨酸结晶无色、六边形,边缘清晰,折光性强的薄片状结晶由蛋白分解而来尿中少见不溶于乙酸而溶于盐酸、能迅速溶于氨水中,再加乙酸后结晶可重出现胱氨酸试验(硝普盐)阳性在胱氨酸病时可大量出现,有形成结石的可能性
亮氨酸为蛋白质分解产物亮氨酸结晶呈黄色或褐色小球形或油滴状,并有密集辐射状和同心纹,折光性强不溶于盐酸而溶于乙酸亮氨酸试验呈蓝色反应,且加热不还原亮氨酸此结晶系蛋白质分解产物,不存在于正常尿液内当体内组织急剧破坏时,肝脱氨基作用不全,尿液内可见此结晶,常与酪氨酸结晶同时存在酪氨酸此结晶系蛋白质分解产物略带黑色的细针状结晶,呈束状或羽毛状可溶于氢氧化铵而不溶于乙酸酪氨酸试验(亚硝基萘酚)阳性酪氨酸结晶病理性结晶---胆固醇结晶胆固醇结晶为无色缺角方形薄片状结晶,大小不一,单个或重叠,浮于表面能溶于氯仿、乙醚等有机溶剂见于肾淀粉变性,脂肪变性,偶见肾盂肾炎,膀胱炎,脓尿和乳糜尿含铁血黄素颗粒为黄色的小颗粒,存在于细胞内,可用亚铁氰化钾染色进行鉴别血管内溶血时,沉积于肾脏,可见于尿中病理性结晶---药物结晶药物结晶放射造影剂磺胺类药物结晶 解热镇痛药药物结晶磺胺结晶磺胺结晶磺胺甲基异噁唑
似玻璃块药物结晶吡哌酸
泛影酸
造影剂结晶(碘番酸)
造影剂结晶(泛影葡胺
病理成分---癌细胞4其他成分5其他阴道毛滴虫寄生虫蓝氏贾第鞭毛虫血吸虫虫卵质量控制6尿沉渣检查质量控制检验前质量保证1.标本要求2.器材标准化3.制定规范标准化的操作程序4.参与室内、室间质评检验中质量保证1.标准化操作2.离心机要求3.离心要求4.制作涂片或充入尿定量计数板1.镜检方法2.分析仪结果分析3.鉴别有形成分形态检验后质量保证1.综合分析检查结果2.核对申请单(报告单)3.检查结果及时反馈4.做好检查结果的备份、记录,进行回顾性阶段资料分析
检验前标本要求1.第1次晨尿标本、第2次晨尿、随机中段尿2.标本不加防腐剂,及时分析,非冷藏条件下放置时间不能超过2h;若不能及时检查应加防腐剂,并冷藏保存。有形成分检查一般在lL尿中加400g/L甲醛5ml进行防腐3.女性尿标本应避免混入月经血、阴道分泌物;男性应避免混入前列腺液,必要时导尿送检
检验前器材标准化使用清洁、干燥的不与尿
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