临床血液学检测SOP

临床血液学检测(SOP)=1\*ROMANI血细胞分析仪校准的标准操作程序(SOP)实验室名称项目编号制定日期******SysmexKX-21N血细胞分析仪校准*********年**月**日【目的】保证血细胞分析仪测定结果的准确性。【适用仪器范围】血细胞分析仪。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。【校准方法】(一)校准环境、仪器和试剂要求室温：20～25℃。湿度：<80％。试剂：所用稀释剂、溶血剂和清洁剂都为仪器配套产品。校准品：为仪器配套产品，并在使用效期内，同时无变质或污染仪器：(1)校准前仪器内部各通道及测试室均经清洁剂处理30分钟。(2)仪器的背景计数、重复性及携带污染率均符合要求，否则需请维修人员检修。(二)操作步骤1．从冰箱中取出校准物，放置室温15分钟，勿摇动。2．在测定校准物前，先测定两份正常人新鲜血液。3．将校准物瓶口朝上置双手掌心，双手来回搓动8次。4．颠倒小瓶，使瓶口朝下置于掌心，来回搓动8次。5．重复3和4步骤8次(计2分钟左右)。6．瓶底朝上，确认瓶底无沉积物，说明已充分混匀。7．用软纸拭净瓶口，轻轻打开瓶塞。8．将两瓶校准物混合在一起，充分混匀后再分装于两个瓶内。9．取一瓶校准物在仪器上连续测定11次。10．由仪器自动校准。(三)计算与核对标准1．计算出各项结果的均值和精密度，均值应比日常检测报告多保留一位小数点。2．检查精密度是否达到使用说明书上所示的精密度，如达到，继续下一步；否则，停止校准，与维修人员联系。3．计算出各项参数均值与定值之差的绝对值和相差的百分数，与校准标准(表1—1)进行比较。4．结果小于第一列数值，则不需校准；结果大于第二列数值，需请维修人员处理；结果在第一列与第二列数值之间，需校准仪器。5．如有自动校准功能，可按说明书进行。如没有此项功能，则用定值除以均值，再乘以原校正系数即为新校正系数，输入仪器即完成校正。表1—1校准标准表参数百分数差别一列二列WBC3%10%RBC%10%Hb%10%Hct%10%MCV%10%Plt%15%MPV%20%【校验校准结果】1.按上述方法混匀第2管校准物后再在仪器上重复测定11次，按同样的方法计算，将结果再次与校准标准核对，如合格，校准完毕，仪器方可使用。如不合格，应请厂方工程师维修、校准。2.仪器校准后补正值的计算公式：（仪器可自动计算）新的补正值=当前补正值（％）X平均补正率（％）/100当仪器出现下列情况显示所有校对错误，这时校对值的更换确认信息不能表示，需由维修工程师作故障检修。平均补正率>105％平均补正率<95％新的补正值>120％新的补正值<80％3.仪器故障检修后重复“操作步骤”和“计算和核对标准”重新校准和评价。4．书写和保存评价报告，交科室存档。操作人员部门主管质量负责人姓名******************日期**年**月**日

Ⅱ血细胞分析仪校准的标准操作程序(SOP)实验室名称项目编号制定日期******SysmexKX-21N血细胞分析仪校准*********年**月**日【目的】评价血细胞分析仪的各项性能指标，核实能否按厂商说明得到预期结果的评估，保证测定结果的准确性。【适用仪器范围】血细胞分析仪。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。【评价方法】(一)评价工作环境、仪器和试剂要求室温：20～25℃。湿度：<80％。试剂：所用稀释剂、溶血剂和清洁剂都为仪器配套产品。参评物：为仪器配套产品（标准品、质控品、干扰物等）并在使用效期内，同时无变质和污染，或病人标本。仪器：(1)评价前仪器内部各通道及测试室均经清洁剂处理30分钟。(2)仪器的背景计数、重复性及携带污染率均符合要求，否则需请维修人员检修。（二）评价内容精密度：分批内和批间精密度。用高、中、低三种或二种浓度质控物测定。批内精密度，一天内三种（二种）浓度分别各测20次，批间精密度三种浓度每天各测一次，共测20天。携带污染率：为了解前一高值标本对其后低值标本测定结果影响程度的指标。高、中、低三种浓度标本的排列须：中、中、高、低、中、中、低、低、高、高、中。包括总重复性测定随机误差与携带污染双重变异因素。线性范围：一种测定方法其线性范围应越广越好，至少应包括正常范围和常见的病理范围。线性评价至少作五个浓度点以上，每点平行测三份。可比性：用于判断该仪器与常规方法或参考方法所得结果的一致性。用标准物进行比对或用新鲜病人标本（40份以上）进行比对。分析干扰实验：干扰物也是标本中的一个组分，它不是被分析物，但它改变最后的结果。根据分析干扰因素制备标本，每份标本平行测三份。(二)操作步骤1．从冰箱中取出参评物，放置室温15分钟，勿摇动。2．在评价测定前，先测定两份正常人新鲜血液。3．将参评物瓶口朝上置双手掌心，双手来回搓动8次。4．颠倒小瓶，使瓶口朝下置于掌心，来回搓动8次。5．重复3和4步骤8次(计2分钟左右)。6．瓶底朝上，确认瓶底无沉积物，说明已充分混匀。7.用软纸拭净瓶口，轻轻打开瓶塞。8.根据评价目的进行测定。9.评价样本测定方法按血细胞分析仪测定程序。(三)计算与核对标准1．计算出各项结果的均值和精密度，均值应比日常检测报告多保留一位小数点。2．计算与核对[1]精密度测定计算、SD、CV，用CV于说明书上所示的要求比较。[2]携带污染率：≤1%。[3]总重复性测定随机误差与携带污染计算双重变异因素[4]线性范围核对可与说明书上所示的要求比较，也可用计算斜率观察线性范围。[5]可比性用标准物进行比对可与说明书上所示的要求比较，用新鲜病人标本（40份以上）进行比对，可用相关系数r，r≥或r2≥则认为数据满足要求。[6]分析干扰实验：目前一般以CLIA88为准。3.检查评价的项目是否达到使用说明书上所示的要求。仪器说明提供的性能指标[1]精度可靠水平95％，在下述范围之内：全血模式：WBC（×103）/μL以上％以下RBC（×106）/μL以上％以下HBG％以下HCT％以下MCV％以下MCH％以下MCHC％以下PLT（100×103）/μL以上％以下LYM＃[W-SCC]%以下MXD＃[W-MCC]×103)/μL以上％以下NEUT＃[W-LCC]％以下LYM％[W-SCR]％以下MXD％[W-MCR]（12％以上）％以下NEUT％[W-LCR]％以下RDW-SD或RDW-CV％以下PDW％以下MPV％以下P-LCR％以下稀释模式WBC（×103）/μL以上％以下RBC（×106）/μL以上％以下HGB％以下HCT％以下MCV％以下MCH％以下MCHC％以下PLT（100×103）/μL以上％以下[2]正确度全血模式WBC：±3％或±×103/μL以内RBC：±2％或±×106/μL以内PLT：±5％或±10×103/μL以内稀释模式WBC：±5％或±×103/μL以内RBC：±3％或±×106/μL以内PLT：±8％或±15×103/μL以内[3]线性WBC：（×103/μL）±（×103/μL）以内（×103/μL）±3％以内RBC：（×106/μL）±（×106/μL）以内（×106/μL）±3％以内HGB：（g/dL）±(g/dL)以内（g/dL）±2％以内HCT：（HCT％）±（HCT％）以内（HCT％）±3％以内PLT：10-199（×103/μL）±10（×103/μL）以内200-900（×103/μL）±5％以内（设RBC<×106/μL）【评价结果】1.仪器作全面评价或评价其中一个内容时，实验后需对结果进行核对评价，如不符合要求应检查原因，然后重复“操作步骤”和“计算和核对标准”重新评价。2.仪器故障检修后也要重复“操作步骤”和“计算和核对标准”重新评价。3．书写和保存评价报告，交科室存档。操作人员部门主管质量负责人姓名************日期**年**月**日

Ⅲ血细胞分析仪比对的标准操作程序(SOP)实验室名称项目编号制定日期XXXXXXXSysmexKX-21N血细胞分析仪校准XXXXXX年X月X日【目的】了解仪器之间测定结果的可比性和可靠性，保证实验室内结果的一致性。【适用仪器范围】血细胞分析仪。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。【比对方法】(一)比对测试环境、仪器、试剂和样品的要求室温：20～25℃。湿度：<80％。试剂：所用稀释剂、溶血剂和清洁剂都为仪器配套产品。质控品：为仪器配套产品，并在使用效期内，同时无变质或污染仪器：1.参于比对的仪器内部各通道及测试室均经清洁剂处理30分钟。2.仪器的背景计数、重复性及携带污染率均符合要求，否则需请维修人员检修。3.评价过程中各仪器必须有质量控制保证，避免人为误差和仪器误差，以免影响比对的真实性。样品：比对的样品应包括低于参考范围的低限到高于参考范围的高限，分析浓度尽可能在报告的浓度范围内均匀分布。比对的样品尽可能在6小时内完成，每个样品作双份测定。(二)操作步骤方法一、按NCCLS文件EP9-A1.首先选择一台本实验室内技术性能最好的仪器，该仪器应使用配套的校准物定期校正，每天有质量控制系统监控，并参加室间质评活动，各项目均在可接受性能范围之内。其他仪器分别与该仪器比较。2.每日随机选取8份样本（其中应包括高、中、低值），同时用各台仪器按常规样本测定的方法，测定其各项参数，每份样本测定2次，样本排列的顺序为1、2、3、4、5、6、7、8、8、7、6、5、4、3、2、1。连续测定五天，共40份样本。3.记录与统计[1]将每日结果记录、分别统计两台仪器40份样本双份测定的平均值、绝对值、两台仪器测定的平均值。[2]制图a.散点图：Y轴：确定仪器每样本双份测定的均值（Y）；X轴：对比仪器每样本双份测定的均值（X）。b.散点图：Y轴：确定仪器每次测定的值（Yij）;X轴：对比仪器每样本双份测定的均值（X）。c.偏差图：Y轴：每个样本两台仪器双份测定的均值差（Yi-Xi）；X轴：对比仪器每样本双份测定的均值（x），以直线X=0作为水平中线。d.Y轴：每个样本两台仪器每次测定的差（Yij-Xij）；X轴：对比仪器每样本双份测定的均值（x），以直线X=0作为水平中线。4.目测线性关系5.检查方法间的离群点绝对值允许误差范围相对值允许误差范围6.检查X测定范围是否足够宽7.线性回归：斜率b,y轴截距a的计算。8.计算预计偏差及其可信范围。残量和标准误的计算；计算给定的医学决定水平；(三)计算与核对标准1.通过作图直观地分析线性是否良好、偏差大小如何、有无离群点等初步印象。2.目测线性关系：观察两台仪器间的线性关系。3.检查方法间的离群点可接受限为：4*E即：4*两台仪器间平均绝对差。4.检查X测定范围是否足够宽的依据是以计算相关系数r，要求r≥或r2≥.5.线性回归是用统计学的方法评价回归图的相关性。6.可接受偏差大于预其偏差可信范围的上限，有％的可能性，预期偏差小于可接受偏差，说明比对的仪器测定的结果在可接受范围。反之为不可接受。方法二、简易比对方法1.首先选择一台本实验室内技术性能最好的仪器，该仪器使用配套的校准物定期校正，，每天有质量控制系统监控，并参加室间质评活动，各项目均在可接受性能范围之内。其他仪器分别与该仪器比较。2.选择高、中、低浓度三份样本同时用各台仪器按常规样本测定的方法，测定其各项参数，每份样本测定2次，求其均值。3.计算与核对标准[1]计算：按PT计算方法计算偏倚。PT计算公式：（确定仪器测定值-比对仪器测定值）/确定仪器测定值×100[2]标准：WBC8-10％RBC3-4％HBG3-4％HCT3-4％MCV4-5％MCH4-5％MCHC4-5％PLT10-15％PCV4-5％【评价结果】1.用新鲜样本比对按NCCLS文件EP9-A方法，以众多的数据客观全面分析比对方法的精密度、干扰、偏差、有效性、临床要求等。而简易比对方法仅是粗略的比对方法。前者方法每半年一次，后者方法每月至少一次。2.如不符合要求应检查原因，重复“操作步骤”和“计算和核对标准”重新比对。3.仪器故障检修后也要重复“操作步骤”和“计算和核对标准”重新比对。4.书写和保存评价报告，交科室存档。操作人员部门主管质量负责人姓名************日期**年**月**日Ⅳ血细胞分析仪检测的标准操作程序(SOP)实验室名称项目编号制定日期******SysmexKX-21N血细胞分析仪操作********年**月**日【目的】用于SysmexKX-21N血细胞分析仪的标准操作程序。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。【开机程序】1开机前的检查[1]试剂的检查：对每天要用的试剂进行检查，如量不够将试剂准备好备用，开封后的试剂使作限期为：溶血素（STROMATOLYSER-WH）90天，稀释液（CELLPACK）60天。[2]仪器的检查：检查管道、电线的连接。[3]废液的检查：主机左侧面的防止逆流容器和废液容器中若有废液积存须予以排除。[4]打开主机前的罩子检查打印纸。2.开机[1]打开主机右侧面的电源开关，打开与计算机相连的UPS电源，打开计算机主电源。[2]此时仪器自动进行检查、自动清洗、空白校验。仪器画面上出现〔请稍等〕。[3]自动清洗、空白校验正常结束后，蜂鸣器会发出“笛”的声音，屏幕显示〔准备测量〕，并显示空白校验的结果。仪器允许空白值的范围：WBC〔×103/uL〕以下；RBC〔×106/uL〕以下；HGB〔×g/dL〕以下；PLT10〔×103/uL〕以下.如果空白值超出允许范围，屏幕会出现〔空白出错〕的信息，并有警告音响，在这种情况下，先按〔C〕健，取消警告音，然后按下[HELP]将显示动作指示的画面，再进行自动清洗。【质控物监测】在测量样本之前，先测定质控物，质控物在质控模式中进行测定。1.将质控物从冰箱中取出，置室温后充分混匀进行测定。2.将测定结果进行分析，质控物测定结果在允许误差范围内才能作病人样本测定（详见血细胞分析仪室内质控标准操作程序SOP文件）【样本测定】1.标本采集：常采用肘部静脉，肘部静脉不明显时可采用手背静脉或内踝静脉，位于体表的浅静脉均可作为采血部位。婴幼儿可采用颈外静脉。采血姿势建议为坐位。扎上止血带，时间最好不超过半分钟，用75%乙醇棉球消毒采血部位待干。用血常规真空负压管抽血（内有EDTA-K2抗凝剂），抽完后立即混匀，防止标本凝固。2.样本编号、登记、置混匀器上充分混匀。3.选择全血模式测定：在“准备测量”状态下按下〔SAMPLENO〕健，在样本号码光标点闪处，以数字健输入样本号码，按下〔ENTER〕健。4.将试管塞取下，将吸液管插入样本中，按开始开关。此时屏幕显示“正在吸引”。5.蜂鸣器“笛笛”响两声之后，屏幕显示出“正在测量”，就可以将样本试管取下。此时进行自动测量，测定完毕后屏幕显示“正在清洗”，测定结果显示在屏幕上，并自动打印测定结果。此时屏幕显示“准备测量”，可进行下一个样本测定。【结果审核】1.审核打印结果的样本号与申请单上的编号是否一致。2.对特别异常的结果要向病人了解病情，并用显微镜法复检。3.对粒度分布检出异常时，要重新测定，必要时也用显微镜法复检。（1）粒度异常标记：WLWBC-LD（下限鉴别线）的相对度数超出规定值WUWBC-LD（上限鉴别线）的相对度数超出规定值F1中型白细胞下限鉴别线的相对度数超出规定值F2中型白细胞下限和上限鉴别线的相对度数超出规定值F3中型白细胞上限鉴别线的相对度数超出规定值R1RBC-LD（下限鉴别线）的相对度数超出规定值R2RBC-LD（上限鉴别线）的相对度数超出规定值DW分布幅不能算出MP有2个以上的峰值PLPLT-LD（下限鉴别线）的相对度数超出规定值PUPLT-LD（上限鉴别线）的相对度数超出规定值AG小于WBC-LD（下限鉴别线）的粒子数超出规定值（2）异常信息与处理方法WL：溶血不全，出现有核红细胞，大血小板增多，血小板聚集，纤维蛋白的析出。处理：清洗血细胞、确认血涂片标本。RL：出现破碎红细胞，大血小板增多，血小板聚集。处理：用手工法复检，确认血涂片标本。PL：受冷球蛋白、破碎红细胞，白血病细胞的细胞质碎片等干扰。处理：将标本加温后再检，用手工法再检，确认血涂片标本。WU：溶血不全，出现幼稚白细胞，白细胞凝集，血小板呈卫星状。处理：清洗血细胞、确认血涂片标本。RU：受冷凝集素的干扰，有白细胞混入。处理：将标本加温后再检，确认血涂片标本。PU：大血小板增多，有破碎红细胞混入，冷球蛋白沉淀。处理：用手工法复检，确认血涂片标本。DW（RBC）：红细胞大小不均很明显。处理：确认血涂片标本。DW（PLT）：有破碎红细胞混入，，血小板大小不均，受冷球蛋白等干扰。处理：清洗血细胞、确认血涂片标本。MP（RBC）：受贫血治疗、输血的影响，出现多种大小的细胞群。处理：确认血涂片标本。MP（PLT）血小板凝集或低值血样。处理：确认血涂片标本。T1：出现CML等异常细胞，溶血不全。处理：确认血涂片标本，清洗血细胞。T2：出现CML等异常细胞，溶血不全，长时间放置血样。处理：确认血涂片标本，清洗血细胞。F1、F2、F3：出现CML等异常细胞，单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞的高值血样、，溶血不全，长时间放置血样。处理：确认血涂片标本，清洗血细胞。4.手工解析：当从测定结果的峰分析有干扰物引起假性增高或假性减低、或通过显微镜计数法确认仪器测定受干扰物的影响时，可用手工解析重新测定。（例如小红细胞干扰引起血小板假性增高）操作程序如下：[1]显示测量结果的屏幕时，按〔1〕健，选择〔1：手工解析〕，此时显示出手工解析画面的屏幕菜单〔1：WBC2：RBC3：PLT〕。[2]用〔▲〕健和〔▼〕将光标移至需手工解析的项目处。按下〔ENTER〕健。[3]用〔?〕健和〔?〕将光标移至需手工解析的鉴别线处。按下〔ENTER〕健。确定鉴别线选择位子，测量数据按新的鉴别线选择位子为基础进行再次计算。[4]再想改变鉴别线时可重复（2）-（4）的操作。[5]鉴别线更换结束后，按下〔SELECT〕健。[6]用〔▲〕健和〔▼〕将光标选择〔继续、确定、取消〕继续：返回手工解析画面，可以继续进行手工解析。确定：更新更换的内容，返回测量程序。取消：不更新更换的内容，返回测量程序。【试剂更换】1.测定中试剂不足，仪器会自动停机屏幕上会显示出更换试剂的信息，按下〔HELP〕2.准备好新的试剂确认其在使作期内，打开新试剂容器的盖子。3.稀释液更换时，将吸引软管垂直插入新的试剂。4.溶血剂更换时，打开空试剂容器的盖子，垂直将软管拔出，将软管垂直插入新的试剂中，拧紧盖子。5.试剂更换结束后按下〔1〕健，选择〔1：吸引试剂〕，试剂自动被吸引然后进行空白校验，此时要确认没有发生空白错误才能进行样本测定。6．将更换试剂的内容写入试剂更换记录本。【打印纸更换】1.屏幕上会显示内载没有打印纸的信息，按下〔HELP〕，选择〔3：停止输出〕2.打开主机前面的罩子，将锁杆往上推取出剩下的纸管，装上新的打印纸，关上罩子。3.按下〔1〕健，打印内存中残留的数字。【关机程序】1.在准备测量的状态下，按〔SHUTDOWE〕健，屏幕上出现“请吸引清洗液”信息2.将清洗液置于吸引管中，按下开始开关，保持5秒钟后，移开清洗液。3.仪器自动关机，屏幕上显示“关机已结束请切断电源”关闭主机右侧面的电源开关。4.关闭计算机电源。5.关闭UPS电源。注意：样本测量完后，关闭仪器电源之前必须执行关机，通过执行关机对检测器及稀释管路进行清洗，一天结束后或至少24小时进行一次关机动作。【仪器保养】1.日保养项目：检测器及稀释管路的清洗、防止逆流容器的水量确认和抽水。2.周保养项目：旋转阀（SBU）托盘的清洗。3.月保养项目：废液容器的清洗、检测部的清洗。4.每3个月保养项目：旋转阀（SBU）的清洗。5.必要时的保养项目：自动清洗、清洗糟的清洗、WBC/RBC检测器细孔的清洗、废液容器的更换。6.记录保养日期及项目。操作人员部门主管质量负责人姓名*****************日期**年**月**日V血细胞分析仪室内质控的标准操作程序实验室名称项目编号制定日期******SysmexKX-21N全血细胞计数室内质控******年**月**日【目的】保证检验结果的准确性和可比性。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。【室内质控的重要性】是临床实验室全面质量管理重要组成部分，也是实验室认可的重要依据。【室内质控的适用性】1.连续监测和评价本室工作质量，评价结果的可信性。2.排除质量环节中所有阶段导致不满意的原因。3.反映检验操作中所有步骤的工作情况，包括从收集标本到结果的发出全过程。提高常规测定工作的批间和批内标本检测结果的一致性。【室内质控的方法】L-J质控图和Westgard多规则质控方法。【室内质控的准备程序】开展室内质控前的准备工作1.培训实验室工作人员，每个人都应对质控的重要性、基础知识、实验方法有较充分的了解。并在实际工作中不断进行培训提高。2.建立一套完整的标准操作规程。（SOP文件）3.仪器须检定与校正其校正品应能溯源到参考方法或/参考物质，确立校正频度。4.质控品的选择、应用与保存。【质控图的限值设定与规则】1.质控图控制限的计算和设定[1]准备二个不同浓度的质控物。[2]先将第1天和第2天测定的数据计算均数和标准差，并将数据设置在质控图中。[3]再连续测定8天，将10天的数据计算均数和标准差，计算均数+2SD和-2SD的数值，计算均数+3SD和-3SD的数值，将数据重新设置在质控图中。[4]在重新进行质控设定时须清除质控文件内质控数据：在质控屏面上选择〔3：全部消除〕。使用〔?〕健和〔?〕选择〔是〕。再使用〔?〕健和〔?〕健选择〔执行〕。按下〔ENTER〕健。[5]TARGET（目标）值/LIMIT（限度）值的设定：在质控屏面上选择〔2〕健，选择〔2：设定〕用〔▲〕健和〔▼〕健来移动光标，选择.(批号)、（有效期限）、管理项目。管理项目用〔?〕健和〔?〕健移动光标选择TARGET（目标）值和LI（限度）值，按下〔ENTER〕健设定内容被确认，光标移至下一个项目，设定结束后按下〔SELECT〕健，再使用〔?〕健和〔?〕健选择〔确定〕，按下〔ENTER〕健。为L-J质控图。[6]在质控图屏面的所示数据：FILENO.：显示质控图的文件号码；Lot.NO.：质控文件中所设定的批号；N：当前正在绘制的质控数据的个数。质控项目：质控数据的管理图分成多个页面表示质控图屏面〔1/3〕:WBC、RBC、HGB质控图屏面〔2/3〕：HCT、MCV、MCH质控图屏面〔3/3〕：MCHC、PLTLIMIT（UL）：质控界限值的上限，测量值超出此界限为质控异常。LIMIT（LL）：质控界限值的下限，测量值超出此界限为质控异常。目标值：质控的目标值。DATD：下线光标所示的图的质控数据。MEAN：当前所在绘制中的质控数据的平均值。下线光标：使用〔?〕健和〔?〕，可以左右移动下线光标所示的图的质控数据和测量日期将被表示在屏面上。2.质控规则12S：为警告规则，提示有一水平质控值超出×±2S，发出警告；13S：失控规则，提示有一水平质控值超出×±3S，提示随机误差增大造成的失控；22S：失控规则，是系统误差，有二种表现①同一个水平的质控品连续2次控制值同方向超出×+2S或×-2S限值；②在1批检测中，2个水平的质控值同方向超出×+2S或×-2S限值；R4S：失控规则，在1批检测中，1个水平控制品的控制值超出×+2S限值，另1个水平控制品超出×-2S限值，提示随机误差增大造成的失控；41S：失控规则，有连续4次的控制值超出×+1S或×-1S限值，是系统误差，有二种表现①1个水平控制品连续4次控制值超出×+1S或×-1S限值；②2个水平控制品连续2次控制值同方向×+1S或×-1S限值；10X：失控规则，有连续10次控制值在均数的一侧，是系统误差，有二种表现①1个水平的控制品连续10次的控制值在均值的一侧；②2个水平的控制品连续5次的控制值在均值的一侧；3.室内质控的精密度要求HBG、RBC：3-4％PCV、MCV、MCH、MCHC：4-5％WBC：8-10％PLT：10-15％【室内质控的操作程序】1.质控样本的准备[2]测试环境、仪器、试剂的要求室温：20～25湿度：<80％。仪器空白值在允许范围内；试剂：所用稀释剂、溶血剂和清洁剂都为仪器配套产品[2]质控样品的准备：1]从冰箱中取出质控物，放置至室温（约30分钟），勿摇动。2]将质控物瓶口朝上置双手掌心，双手来回搓动8次。3]颠倒小瓶，使瓶口朝下置于掌心，来回搓动8次。4]重复②和③步骤8次(计2分钟左右)或置混匀器上混匀。5]瓶底朝上，确认瓶底无沉积物，说明已充分混匀。2.质控样本的测定[1]在准备测量的状态下，按下〔SELECT〕健，使用〔▲〕健和〔▼〕选择〔2：质控〕。[2]按下〔1〕健，选择〔1：质控测量〕，确认当前状态为质控测量的准备状态。[3]将质控样本充分混匀后，取下质控样本试管塞，将吸液管放进质控样本的容器中，按开始开关，进行测定，此时屏幕上显示〔正在吸引〕。[4]当屏幕上显示〔正在测量〕时，将质控样本的容器移开，并将盖子塞上。[5]在〔Data〕栏中显示测量结果，〔判定〕栏中显示与质控数据的比较结果。[6]测量结果由三个画面组成，可用〔?〕健和〔?〕选择页面。项目：WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT。分析画面：WBC、LYM％、MXD％、NEUT％、LYM＃、MXD＃、NEUT＃、W-SMV、W-LMY。PLT分析画面：RBC、MCV、RDW-SD、RDW-CV、PLT、PDW、MPV、P-LCR。[7]质控异常信息：在〔判定〕栏中表示〔+〕或〔-〕。[8]分析质控结果后按数字健：〔1：OK〕：质控数据被确定，图形将进入质控图，此质控数据被存储。〔2：NG〕：消除质控结果，再次回到等待测量状态。〔3：打印〕：测量结果的打印须在数据确定之前有效，按下〔1：OK〕和〔2：NG〕健数据确认后，就不能打印测量结果。[9]质控品测定“在控”后，才能测定病人样本。3.失控的原因与处理[1]检查质控图或失控的规则，确定误差的类型。系统误差（或偏倚）的失控：每天的质控值有定向的漂移或倾向性，并且随时间在增大，逐渐形成失控。随机误差的失控：表现较突然，失控的质控值相对于均值的离散度比往常大。[2]误差类型和失控原因的关系?造成系统误差的原因：使用不同批号的试剂、不同批号的校准品、校正品过期或保存不妥造成校准值变化、校正值设定错误、试剂的质量或由于使用不当引起试剂变质、吸样器或稀释器校准或调试错误、仪器的故障、检验人员的变动等。?造成随机误差的原因：试剂瓶或试剂管道中有气泡、电源电压不稳、检验人员操作不熟练、重现性差等。?在检测中偶尔出现的不恒定因素。[3]自动分析仪多项目检测系统常见的原因如果失控仅1个项目，在确定误差性质后，按照不同误差可能具有的问题去寻找原因。如果多个项目同时出现失控问题，应从出现问题的共性上考虑。[4]与近期变化有关的原因[5]确认解决问题，作好记录找出原因，经纠正后须重测定质控品，以“在控”来确认问题解决与否，在失控时测定的病人样本也须重测，应将出现的质控事件和纠正过程形成文件。4.作质控日记。5.定期随机抽查病历，综合分析病人的诊断、疗效与检验桔果的相关性。6.经常征求临床意见，了解检验结果与诊疗事件的相关性，使检验结果得到临床的认可。7.参加部、省临检中心的室间质评活动，保证检验结果的准确性和可比性。操作人员部门主管质量负责人姓名×××××××××日期XX年X月XEVI血细胞分析仪室间质评的标准操作程序实验室名称项目编号制定日期******全血细胞计数室间质评********年**月**日【目的】了解本实验室测定结果的准确性和实验室所处的水平。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。【室间质评的组织机构】卫生部临床检验中心或省临床检验中心。【室间质评的重要性】是临床实验室全面质量管理重要组成部分，也是实验室认可的重要依据。【室间质评的适用性】确定某个实验室进行检测或测量的能力，以及监控实验室的持续能力；识别实验室中的问题并制定相应的补救措施；确定新的检测和测量方法的有效性和可比性、并对这些方法进行相应的监控；增加实验室用户的信心；识别实验室间的差别；【室间质评的测定原则】室间质评样本测定时须与病人样本同样操作，不得特殊对待，并且不能与其他医院核对测定结果，要如实的反映实验室的真实工作状况和水平。【室间质评活动程序】1.在建立实施室内质控体系的基础上，参加室间质评活动。2.收到质控物后认真检查核对，如有破损、缺失、标本编号错误等及时向科室及映，以便及时与部临检或省临检中心取系，及时补寄。3.仔细阅读.室间质评的通知和要求，由室负责人将质评样本保存在2℃-8℃冰箱，妥善保管好报表和项目编码。4.质评样本测定程序：[1]测试环境、仪器、试剂的要求室温：20～25℃。湿度：<80％。试剂：所用稀释剂、溶血剂和清洁剂都为仪器配套产品质控品：为仪器配套产品，并在使用效期内，同时无变质或污染仪器：仪器必须有质量控制保证。[2]质评样品的准备：1]按测定日期从冰箱中取出参评物，放置至室温（约30分钟），勿摇动。2]将参评物瓶口朝上置双手掌心，双手来回搓动8次。3]颠倒小瓶，使瓶口朝下置于掌心，来回搓动8次。4]重复②和③步骤8次(计2分钟左右)。5]瓶底朝上，确认瓶底无沉积物，说明已充分混匀。6]将5份样本编号。或者：1]按测定日期从冰箱中取出参评物，放置至室温（约15分钟），勿摇动。2]然后将质评样本置混匀器上混匀2-3分钟。3]将5份样本编号。[3]质评样品的测定：1]选择全血模式测定：在“准备测量”状态下按下〔SAMPLENO〕健，在样本号码光标点闪处，以数字健输入样本号码，按下〔ENTER〕健。2]将试管塞取下，将吸液管插入样本中，按开始开关。此时屏幕显示“正在吸引”。3]蜂鸣器“笛笛”响两声之后，屏幕显示出“正在测量”，就可以将样本试管取下。此时进行自动测量，测定完毕后屏幕显示“正在清洗”，测定结果显示在屏幕上，并自动打印测定结果。此时屏幕显示“准备测量”，可进行下一个样本测定。4]每份样本平行测2次，取均值。[4]填写报表1]填写报表时应按要求逐项填写，字迹清晰整洁。实验室编码：116×××；仪器编码：100710稀释液编码：100101溶血液编码：100201清洗液编码：1003012]填写完后再次核对，以防笔误、样本号顺序错误等。3]然后由测定者、室负责人、科主任签字。[5]结果存档填写完后复印，一份寄出，一份存档，以备核查。【评价方法】1.评价按仪器分组统计，共分七组：组号组名仪器种类第1组Sysmex(1)SF-30000,K-series,KX-21第2组Sysmex(2)除第1组外的Sysmex仪器第3组CoulterCoulter系列各型号仪器第4组AbbottAbbott系列各型号仪器第5组SwalabACSwalabAC系列各型号仪器第6组CelltacCelltac系列各型号仪器第7组BayerBayer系列各型号仪器第8组Others其它仪器和手工方法2.统计方法[1]首先计算出各组的均值和SD。[2]剔除均值±3SD范围以外的回报数据后分别重新计算各组的均值和SD。[3]重复（2）中的过程，直至所有的回报结果数据都在±3SD的范围内，即剔除均值±3SD范围以外数据后得到的均值和SD分别称为加权均值和加权SD。[4]分别用各组的加权均值为靶值，计算各批号质评物测定结果与靶值的偏差。计算公式：偏差％（PT值）=（我室结果-本组靶值）/本组靶值×100％3.评价标准：（可接受性能范围）项目允许范围WBC靶值±15％RBC靶值±6％Hgb靶值±7％Hct靶值±6％Plt靶值±25％MCV靶值±7％MCH靶值±7％MCHC靶值±7％4.单项PT值评分标准每一项目每一批号结果在允许范围内时，测定结果合格，得分为100％，若在允许范围外时，测定结果不合格，得分为0％。单个项目的得分计算公式为：该项目的及格结果数×100％该项目的总的测定样本数合格：该项目的测定成绩≥80％;不合格：该项目的测定成绩≤80％。5.总项目的PT值评分标准总项目的计算公式为：总项目的及格结果数×100％总项目的总的测定样本数合格：总项目的测定总分≥80％;不合格：总项目的测定总分≤80％。6.部临检中心给参加实验室发证书的规定合格证书：每年每个专业参加2次或3次以上，不得缺席，每次有五个调查样本。每次总项目的测定总分≥80％;颁发合格证书。参加证书：发合格证书的标准，有一点不符合要求的均颁发参加证书。【质评返馈分析】1.收到返馈报告后要及时分析，检查各项目的准确程度、有无系统性误差、有无不合格项目，对不合格项目需要分析失误的原因。例如：WBC（109）/L质评结果返馈例1：样本编号你室结果靶值偏倚（％）允许范围你室得分（％）200311100200312100200313100200314100200315100成绩100％WBC可接受性能范围为：15％。此次测定结果均在允许范围内，并基本上在靶值两侧分布，因此准确度为满意。

例2：样本编号你室结果靶值偏倚（％）允许范围你室得分（％）200311100200312100200313100200314100200315100成绩100％WBC可接受性能范围为：15％。此次测定结果虽然均在允许范围内，但偏倚均>10％以上，在靶值的下限，出现系统性误差，应结合室内质控，结合上次室间质评情况综合分析，如果室内质控结果也在靶值的下限或上次室间质评情况也是系统性偏低，应该分析误差原因，必要时进行校正。例3：样本编号你室结果靶值偏倚（％）允许范围你室得分（％）200311020031210020031302003141002003150成绩40％WBC可接受性能范围为：15％。此次总成绩为40％分，测定结果不准确，有三个样本超出允许范围的高限，有二个样本在靶值的上限。应该分析误差原因，进行校正。例4：样本编号你室结果靶值偏倚（％）允许范围你室得分（％）2003110200312100200313100200314100200315100成绩80％WBC可接受性能范围为：15％。此次测定结果总成绩为80％分，有一个样本超出允许范围的高限（此分样本也需分析原因），其它四个样本并基本上在靶值两侧分布，因此准确度也为满意。2.不可接受结果的原因可分为以下几个类形：[1]书写误差：此类误差大致是：不正确的报告单位或小数点位数错误。在报告单上填写仪器、方法、试剂等编码错误。测定结果没有正确地从仪器、磁带、读数窗口抄写到报告单上（如标本的结果以相反的顺序抄写或考贝）[2]方法学问题：仪器功能检查（如温度、空白读数、压力）未按要求执行，性能指标不在可接受范围内。未能适当地执行仪器的定期维护。不正确的仪器校准。标准和试剂不恰当的复溶和保存或超出有效期而疏忽地在使用。仪器未调好。仪器数据处理功能问题。厂家试剂/标准，或生产厂家规定的仪器设置问题。（实验室需要与厂家联系来评价此类问题。）标本的携带污染率问题。自动吸样器没有校准到可接受的精密度和准确度。方法的灵敏度低限或高限结果的不精密度、仪器问题质量控制未能反映出来---在有效期内未检测质控物或不恰当的保存、在有关的分析浓度没有质控物监测。结果不在仪器/试剂线性范围。仪器管道堵塞。[3]技术问题：室间质评物的不恰当的复溶或复溶后检测延迟。测定时样本放置顺序不对。当天的质控结果失控但仍发出报告。质控数据虽在可接受限之内，但检测显示出呈趋势性。不适当的质控限/规则。（如果可接受的质控范围太宽，结果落在可接受的范围内的概率增加，同样会超过可接受的室间质评限）没有按实验室的规范程序操作。[4]室间质控品的问题基质效应：有些仪器/方法的性能会受到EQA样本基质的影响。导致不可接受的结果。非均匀性试验物（如不恰当的混匀，或质评物不一致的前处理等）细菌污染或溶血。[5]室间质量评价的问题分组不适当不适当的靶值不适当的评价区间EQA组织者不正确的数据输入。[6]经调查后无法解决的问题当以排除了所有的可识别的误差时，单个不可接受结果可能是由于随机误差，特别是当重复分析结果是可接受时，在这种情况下不应采取纠正措施。如果两个或多个结果是不可接受的，且两个结果偏向一侧，则更可能的是系统误差。重复不可接受的结果分散在平均数的两侧提示实验方法不够精密。操作人员部门主管质量负责人姓名******************日期****年**月**日

Ⅶ白细胞计数的标准操作程序实验室名称项目编号制定日期********SysmexKX-21N白细胞计数********年**月**日【目的】用于白细胞计数的标准操作程序。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。【方法原理及特点】方法原理：电阻抗法。方法特点：进行白细胞计数及对白细胞进行三分群，但不能对单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞进行分类。【仪器型号】SysmexKX-21N【参考值】成人(4-10)×109/L新生儿(15-20)×109/L6个月-2岁(11-12)×109/L【开机程序】1开机前的检查[1]试剂的检查：对每天要用的试剂进行检查，如量不够将试剂准备好备用，开封后的试剂使作限期为：溶血素（STROMATOLYSER-WH）90天，稀释液（CELLPACK）60天。[2]仪器的检查：检查管道、电线的连接。[3]废液的检查：主机左侧面的防止逆流容器和废液容器中若有废液积存须予以排除。[4]打开主机前的罩子检查打印纸。2.开机[1]打开主机右侧面的电源开关，打开与计算机相连的UPS电源，打开计算机主电源。[2]此时仪器自动进行检查、自动清洗、空白校验。仪器画面上出现〔请稍等〕。[3]自动清洗、空白校验正常结束后，蜂鸣器会发出“笛”的声音，屏幕显示〔准备测量〕，并显示空白校验的结果。仪器空白值须在允许范围内。【质控物监测】在测量样本之前，先测定质控物，质控物在质控模式中进行测定。1.将质控物从冰箱中取出，置室温后充分混匀进行测定。2.将测定结果进行分析，质控物测定结果应在允许误差范围内，才能作病人样本测定（详见血细胞分析仪室内质控标准操作程序SOP文件）【样本要求】标本采集：常采用肘部静脉，肘部静脉不明显时可采用手背静脉或内踝静脉，位于体表的浅静脉均可作为采血部位。婴幼儿可采用颈外静脉。采血姿势建议为坐位。扎上止血带，时间最好不超过半分钟，用75%乙醇棉球消毒采血部位待干。用血常规真空负压管抽血（内有EDTA-K2抗凝剂），抽完后立即混匀，防止标本凝固。【样本测定】1.样本编号、登记、置混匀器上充分混匀。2.选择全血模式测定：在“准备测量”状态下按下〔SAMPLENO〕健，在样本号码光标点闪处，以数字健输入样本号码，按下〔ENTER〕健。3.将试管塞取下，将吸液管插入样本中，按开始开关。此时屏幕显示“正在吸引”。4.蜂鸣器“笛笛”响两声之后，屏幕显示出“正在测量”，就可以将样本试管取下。此时进行自动测量，测定完毕后屏幕显示“正在清洗”，测定结果显示在屏幕上，并自动打印测定结果。此时屏幕显示“准备测量”，可进行下一个样本测定。5.手工解析：当从测定结果的峰分析有干扰物引起假性增高或假性减低、或通过显微镜计数法确认仪器测定受干扰物的影响时，可用手工解析重新测定。[1]显示测量结果的屏幕时，按〔1〕健，选择〔1：手工解析〕，此时显示出手工解析画面的屏幕菜单〔1：WBC2：RBC3：PLT〕。[2]用〔▲〕健和〔▼〕将光标移至需手工解析WBC处。按下〔ENTER〕健。[3]用〔▲〕健和〔▼〕将光标移至需手工解析的鉴别线处。按下〔ENTER〕健。确定鉴别线选择位子，测量数据按新的鉴别线选择位子为基础进行再次计算。[4]想改变鉴别线时可重复（2）-（3）的操作。[5]鉴别线更换结束后，按下〔SELECT〕健。【白细胞直方图】在35-450fL范围内将血细胞分为三群。正常白细胞直方图的左侧峰又高又陡，跨越35-93fL，定为淋巴细胞峰（小细胞群），以成熟小淋巴细胞为主。最右侧峰又低又宽，跨越160-450fl,定为中性粒细胞峰（大细胞群）以中性粒细胞为主，包括杆状核细胞和晚幼粒细胞，左右两峰之间较平坦区，定为单个核细胞区（中间细胞群）主要以单核细胞为主，也含有嗜酸、嗜碱性粒细胞及白血病细胞等。【结果审核】1.审核打印结果的样本号与申请单上的编号及是否一致。2.审核申请单的检验项目与测定的项目是否一致。3.对特别异常的结果要向病人了解病情，并用显微镜法复检后才能发报告。4.审核有否报警信号，如有复检后才能发报告。5.检验报告单须有测定者和审核者签章后才能发出。【临床意义】1.生理性增加新生儿、运动、疼痛、月经期、受寒、妊娠、分娩、阵发性心动过速、阳光或紫外线照射、抽搐、恶心、呕吐、麻醉等。2.病理性增加类白血病、白血病急性化脓性细菌感染、急性溶血、急性失血、单核细胞增多症、淋巴细胞增多症、真性红细胞增多症、腮腺炎、病毒性肝炎、淋巴瘤、组织坏死、手术后、肿瘤转移、药物中毒、代射性酸中毒、过敏等。3.减少伤寒、副伤寒、斑疹伤寒、兔热病、布氏杆菌热、流感、麻疹、风疹、登革热、传染性肝炎（亦可增多）、疟疾、过敏性休克、系统性红斑狼疮、粟粒性结核、败血症、重症细菌感染、恶液质、放射治疗、肿瘤化疗。4.造血系统障碍所致减少恶性贫血、非白血性白血病、再生障碍性贫血、脾功能亢进、戈谢（Gaucher）病、Felty综合症、Chediak-Higashi综合症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。【质量保证】1.白细胞计数的可接受性能为±15%。2.对特别异常的结果须用手工计数复检，手工计数应用高精度的微量吸管，加液器，计算盘等。3.样本须在6小时内测定完毕。4.报警信号的处理[1]WL；溶血不全，出现有核红细胞，大血小板增多，血小板聚集，纤维蛋白的析出。处理：清洗血细胞、确认血涂片标本。[2]WU：溶血不全，出现幼稚白细胞，白细胞凝集，血小板呈卫星状。处理：清洗血细胞、确认血涂片标本。[3]T1：出现CML等异常细胞，溶血不全。处理：确认血涂片标本，清洗血细胞。[4]T2：出现CML等异常细胞，溶血不全，长时间放置血样。处理：确认血涂片标本，清洗血细胞。[5]F1、F2、F3：出现CML等异常细胞，单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞的高值血样、，溶血不全，长时间放置血样。处理：确认血涂片标本，清洗血细胞。5.直方图上白细胞计数值的异常信息[1]当出现红细胞溶血不全时（WL报警），在白细胞直方图上，WBC低鉴别线与直方图曲线的交点位置异常高，可通过血样稀释、或用CELLPACK对血样中的血浆进行置换（清洗细胞）、或用较强烈溶血剂的仪器进行测定。[2]当出现白细胞凝集时，直方图上可见三峰分布混乱，在超出250fL的区域也有颗粒存在可以引起白细胞计数假性减低。可将血样加温，用生理盐水等清洗，消除白细胞凝集。[3]当出现有核红细胞的影响时，红细胞与小白细胞之间的低谷位置上升，并有WL报警，有核红细胞几乎全被当作白细胞计数。可以引起白细胞计数假性增高，因此必须按下式进行校正：校正白细胞计数值=KX-21白细胞计数值×100/（100+有核红细胞数）有核红细胞数：100个白细胞中的有核红细胞数[4]当出现血小板聚集时，WBC直方图上，Ghost区和SCR之间的鉴别线与直方图的交点位置很高，同时有WL报警信号，可使白细胞假性增高，需重新采血测定。[5]当CML时WBC直方图上，在MCR到LCR之间找不到正常状态下的波谷，说明出现多种大小不一的白细胞。须作涂片检查。6.冷凝集现象、检出纤维蛋白均可使白细胞计数值产生正误差；小淋巴细胞可使白细胞计数值产生负误差；不恰当的溶血剂作用可使白细胞计数值产生正的或负的误差。7.仪器安装、使用须规范，开展室内质控和参加室间质评。操作人员部门主管质量负责人姓名******************日期****年**月**日

Ⅷ红细胞计数的标准操作程序实验室名称项目编号制定日期********SysmexKX-21N白细胞计数********年**月**日【目的】用于红细胞计数的标准操作程序。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。【方法原理及特点】方法原理：电阻抗法。方法特点：进行红细胞计数及观察红细胞的分布情况。【仪器型号】SysmexKX-21N【参考值】男性：（～）×1012/L；女性：（～）×1012/L；新生儿：（～）×1012/L；儿童（～）×1012/L。【开机程序】1.开机前的检查[1]试剂的检查：对每天要用的试剂进行检查，如量不够将试剂准备好备用，开封后的试剂使作限期为：溶血素（STROMATOLYSER-WH）90天，稀释液（CELLPACK）60天。[2]仪器的检查：检查管道、电线的连接。[3]废液的检查：主机左侧面的防止逆流容器和废液容器中若有废液积存须予以排除。[4]打开主机前的罩子检查打印纸。2.开机[1]打开主机右侧面的电源开关，打开与计算机相连的UPS电源，打开计算机主电源。[2]此时仪器自动进行检查、自动清洗、空白校验。仪器画面上出现〔请稍等〕。[3]自动清洗、空白校验正常结束后，蜂鸣器会发出“笛”的声音，屏幕显示〔准备测量〕，并显示空白校验的结果。仪器空白值须在允许范围内。【质控物监测】在测量样本之前，先测定质控物，质控物在质控模式中进行测定。1.将质控物从冰箱中取出，置室温后充分混匀进行测定。2.将测定结果进行分析，质控物测定结果应在允许误差范围内，才能作病人样本测定（详见血细胞分析仪室内质控标准操作程序SOP文件）【样本要求】标本采集：常采用肘部静脉，肘部静脉不明显时可采用手背静脉或内踝静脉，位于体表的浅静脉均可作为采血部位。婴幼儿可采用颈外静脉。采血姿势建议为坐位。扎上止血带，时间最好不超过半分钟，用75%乙醇棉球消毒采血部位待干。用血常规真空负压管抽血（内有EDTA-K2抗凝剂），抽完后立即混匀，防止标本凝固。【样本测定】1.样本编号、登记、置混匀器上充分混匀。2.选择全血模式测定：在“准备测量”状态下按下〔SAMPLENO〕健，在样本号码光标点闪处，以数字健输入样本号码，按下〔ENTER〕健。3.将试管塞取下，将吸液管插入样本中，按开始开关。此时屏幕显示“正在吸引”。4.蜂鸣器“笛笛”响两