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文档简介
选修1生物技术实践
一、选择题
1.下列有关果酒、果醋和腐乳制作的叙述,正确的是()
A.参与果酒发酵和果醋发酵的微生物都含有线粒体
B.果酒制成后只需将装置转移至温度较高的环境中即可制作果醋
C.在腐乳制作过程中必须有能生产蛋白酶的微生物参与
D.在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐渐减少盐量
2.能够测定样品活菌数的方法是()
A.稀释涂布平板法B.直接计数法
C.重量法D.比浊法
3.试分析下图中,与用海藻酸钠作载体制备固定化酵母细胞相似的是()
SISI
tdrldhl
AC
4.下列关于凝胶色谱法的说法正确的是()
A.是根据蛋白质对其他分子的亲和力来分离蛋白质的
B.凝胶是一些微小的无孔的球体,小球体都是由多糖类化合物构成的
C.相对分子质量较小的蛋白质的路程较长,但移动速度较快
D.相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快
5.下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确的有()
A.提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸储水涨破细胞
B.用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA不能去除蛋白质
C.蛋白质提取和分离过程中进行透析可以去除溶液中的DNA
D.蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化
6.在植物组织培养过程中,生长素和细胞分裂素的使用会影响实验结果。下列说
法正确的是()
A.两种激素用量的比例影响实验结果
B.两种激素使用的先后顺序影响实验结果
C.两种激素使用时的浓度影响实验结果
D.以上说法全部正确
7.夏天食品易腐烂,这是空气中微生物在食品中大量生长繁殖的结果。而放入冰
箱贮藏的食品,其腐烂的速度则慢得多,对这一现象最合理的解释是()
A.低温下,食品本身代谢速度减慢
B.低温下,微生物代谢速度减慢
C.隔绝空气,微生物和食品代谢速度减慢
D.缺乏光照,微生物的合成作用速度减慢
8.下列关于DNA的鉴定的说法,错误的是()
A.析出的DNA可用甲基绿进行染色,呈现绿色
B.二苯胺试剂会将DNA在沸水浴条件下染成蓝色
C.二苯胺试剂在使用时应现配现用
D.龙胆紫染液将DNA染成紫红色
9.某同学进行“加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果比较”课题研究。下列叙述错
误的是()
A.设计对照实验,分别使用蛋白酶洗衣粉和复合酶洗衣粉
B.洗衣粉用量、污渍种类和洗涤温度等无关变量全部相同且适宜
C.根据相同时间内污渍去除程度的差异得出实验结论
D.根据污渍完全洗净所需时间的差异得出实验结论
10.影响植物组织培养的因素包括以下哪些()
A.培养植物材料B.培养基组成成分
C.激素和环境因素D.以上全部
二、非选择题
n.某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A,研究人员
用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基成功筛选到能高效降解化
合物A的细菌。实验的主要步骤如下图所示,请分析回答:
污水池中振荡培养若干天后,测定接种
污泥样品各瓶中化合物A的含量固体
重复多次,直至获得目的菌
(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选_______,这种培养基属于
培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的o实验需要振
荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是。
(3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量_________的培养基,接入
新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量_______。
(4)转为固体培养时,常采用的方法接种,获得单菌落后继续筛选。
(5)若研究“目的菌”的生长规律,将单个菌落进行液体培养,可采用
的方法进行计数。若以一个大方格(体积为0.1nrn?)有25个中方格的计数板
为例进行计算,设五个中方格中总菌数为B,菌液稀释倍数为C,那么原菌液的
菌群密度为个/mL。
(6)实验结束时,使用过的培养基应该进行处理后,才能倒掉。
12.请分析回答下列问题:
(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有
灭菌、干热灭菌和灭菌。
(2)稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是()
①土壤取样②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提
取液③吸取01mL溶液进行平板涂布④依次稀释至10\10\10\10\
105、1()6、IO?稀释度
A.①②③④B.①③②④C.①②④③D.①④②③
(3)利用酵母菌将葡萄汁发酵后是否有酒精产生,可以用重铭酸钾来检验,在
酸性条件下,重铭酸钾与酒精反应呈现_______色。在发酵过程中,随着酒精度
的提高,发酵液逐渐呈现深红色,原因是
(4)从野生酵母菌群中分离纯化酵母菌,最常使用的接种方法是和
.两种。酵母菌适合生活在偏酸性环境,而放线菌则适合生活在偏碱性环
境中,分离二者所用的培养基称为。
(5)在腐乳制作的过程中,起主要作用的微生物是,腐乳的制作是多
种微生物的作用,微生物的作用是.0
(6)腐乳制作过程中影响其风味和品质的因素有哪些________。
①盐的用量②酒的种类和用量③发酵温度④发酵时间⑤辛香料的用量
A.①②③④⑤B.①②③C.①②⑤D.③④
13.下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径,请据图回答有关问题:
①
②
(1)选用的材料合适与否是能否成功诱导出花粉植株的重要因素,一般来说选
用期的花粉可提高成功率。选择花粉时,一般要通过_________
来确定花粉是否处于合适的发育期,这时需要对花粉的细胞核进行染色,常用的
染色剂是。
(2)上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中。
(3)胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规
则,是一种高度的薄壁细胞,胚状体与发育形成
的胚有类似的结构,即具有胚芽、胚轴和胚根。
(4)无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素,请说明下列各项需要消毒,
还是需要灭菌。①培养基,②培养皿,③接种环,④花蕾,⑤实验操作者的双手,
⑥三角锥形瓶。(填编号)需要灭菌,(填编号)需要消毒。
(5)试管苗移栽到土壤前,通常要进行壮苗处理,应如何壮苗?
14.请回答下列与实验室提取芳香油有关的问题:
(1)植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、和。
(2)芳香油溶解性的特点是不溶于,易溶于,因此可用
作为提取剂来提取芳香油。
(3)橘子果实含有芳香油,通常可用作为材料提取芳香油,而且提取
时往往选用新鲜的材料,理由是。
(4)对材料压榨后可得到糊状液体,为除去其中的固体物获得乳状液可采用的
方法是。
(5)得到的乳状液加入氯化钠并放置一段时间后,芳香油将分布于液体的
层,原因是-加入氯化钠的作用是o
(6)从乳状液中分离得到的芳香油中要加入无水硫酸钠,此试剂的作用是o
15.(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑、
和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选
择、、等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。
(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行
(消毒、灭菌);操作者的双手需进行清洗和o
(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近
实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的。
(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进
行初步的O
(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基
应采用的检测方法是。
(6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及培养物必须经过_______处理
后才能丢弃,以防止培养物的扩散。
16.育种工作者常采用花药培养的方法,使花粉粒发育为单倍体植株。下面是采
用水稻的花药进行培养过程的流程:选取水稻花药一对花蕾消毒一接种和培养一
植物体。请回答下列问题:
(1)选取的水稻花药应为期,此时细胞核由中央移向细胞一侧,花药
培养成功率最高。
(2)通过花药培养产生单倍体植株一般有两种途径:一种是花粉通过________
阶段发育为植株;另一种是在诱导培养基上先形成,再将其诱导分化成
植株。
(3)试管苗形成过程中,必须从培养基中获得和小分子有机物质等营
养物质。要促进花粉细胞分裂和生长,培养基中应有和两类植
物激素。
(4)若接种过花药的培养基上出现了污染,则可能的原因有
.。(至少写出两条)
17.如下表所示为某微生物培养基的配方,请回答:
成分含量
NaNO33g
K2HPO41g
KC10.5g
MgSO4-7H2O0.5g
FeSO40.01g
(CH2O)30g
H2O1000mL
青霉素0.1万单位
(1)依物理性质,该培养基属于培养基。
(2)该培养基中的碳源是。不论何种培养基,在各成分都溶化后分装
前,要进行的是调整pH和,倒平板时,一般需冷却至________左右,
在________附近操作。
(3)若用该培养液培养纤维素分解菌,应除去的物质是,应加入的碳
源是,为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入染料,形成
________色复合物,若产生________,则证明有纤维素分解菌存在。
18.PCR技术是把某一DNA片段在酶的作用下,在体外合成许多相同片段的一种
方法,利用它能快速而特异的扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段;电泳
技术则是在外电场作用下,利用分子携带的净电荷不同,把待测分子的混合物放
在一定的介质(如琼脂糖凝胶)中进行分离和分析的实验技术,利用它可分离氨
基酸、多肽、蛋白质、核甘酸、核酸等物质作亲子鉴定。图中是电泳装置及相应
电泳结果。
待测混合物
㈠负极厚脂强凝胶(+)正极+
缓冲液
图1电泳前图2电泳进行中
MCFiFzF3F4
图4DNA指纹图谱
图3某氨基酸(M代表母亲C代表儿子)
混合物电泳结果
F1~F4代表待测男性
(1)电泳和叶绿体色素分离采用的纸层析法比较,后者使用的介质是,
叶绿体中的色素能够在滤纸上彼此分离开的原因是^
(2)PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,依据的原理是
(3)图3是把含21个氨基酸的多肽进行水解,得到的氨基酸混合物进行电泳的
结果,据图可推知该多肽由_____种氨基酸构成。
(4)图4通过提取某小孩和其母亲以及待测定的四位男性的DNA,分别由酶处
理后,生成含有若干DNA片段,并进行扩增得到的混合物,然后进行电泳所得
到的一组DNA指纹图谱。请分析:Fi〜F4中,谁是该小孩真正生物学上的父亲?
为什么?。
(5)电泳过程中分子的迁移速率除了与本身所带的净电荷的多少有关外,你认
为还与什么因素有关?(至少列出一种)
参考答案
一、选择题
1.C解析:酵母菌是真核生物,含有线粒体,醋酸菌是原核生物,无线粒体;
果酒制作要求果酒发酵过程中温度为18〜25℃,而醋酸发酵的温度为30〜
35℃,且醋酸菌是需氧型,在果醋发酵过程中,还需充足的氧气;在腐乳制作
过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与,因为豆腐的主要成分为蛋白质;为防
止杂菌污染,在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加应增加盐量。
2.A解析:直接计数法是利用特定的细菌计数板,在显微镜下计算一定容积里
样品中微生物的数量,不能区分死菌与活菌。重量法是用于微生物生长测定的一
种方法,有湿重和干重,测蛋白质和DNA含量反映细胞的物质量。比浊法是在
一定范围内,菌的悬液中细胞浓度与浑浊度成正比,即与光密度成正比,菌越多,
光密度越大。活菌在适宜培养基和良好生长条件下通过生长形成菌落,此法又称
活菌计数法。
3.D解析:本题考查了固定化细胞的方法。A是吸附法,常用于将酶固定;B
是载体结合法,多用于酶的固定;C和D是包埋法,C一般是将酶包埋在细微网
格里,D是包埋在凝胶中。制备固定化酵母细胞用的是包埋法,即将酵母菌包埋
在海藻酸钠制成的凝胶中,所以与D相似。
4.D解析:凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质有效方法。所用
的凝胶实际上是一些微小的多孔球体,这些小球体大多数是由多糖类化合物构成
的,在小球体内部有许多贯穿的通道,当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,
相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;
而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,
路程较短,移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。
5.D解析:在提取DNA时,一般动物细胞采用蒸储水涨破法,植物细胞因为
有细胞壁,需要首先去掉细胞壁;用2moi/L的NaCl溶液溶解DNA,然后过滤
出蛋白质,再降低NaCl溶液的浓度,析出DNA;DNA和蛋白质样品都是带负
电荷的,从负极向正极移动,移动的距离都和样品的分子质量有关;选项C中
透析用以除去小分子物质,而DNA是大分子物质,故不能用透析将其除去;D
是常规方法比如用十二烷基磺酸钠,可以根据其分子大小及所带电荷性质进行分
离纯化。
6.D解析:生长素用量与细胞分裂素用量比值高时,有利于根的分化,抑制芽
的形成;比值低时,有利于芽的分化,抑制根的形成;比值适中时,促进愈伤组
织的生长。先使用生长素,后使用细胞分裂素有利于细胞分裂,但细胞不分化;
先使用细胞分裂素,后使用生长素,细胞既分裂也分化;同时使用两种激素,分
化频率提高。
7.B解析:本题考查影响微生物代谢的条件。夏天温度适宜,微生物作用容易
引起食品腐烂,如果将食品放入冰箱内,由于温度比较低,微生物代谢速度慢,
所以食品腐烂的速度减慢。
8.D解析:甲基绿能将DNA染成绿色。二苯胺试剂要现用现配,否则会影响
鉴定效果。用二苯胺试剂进行DNA鉴定时应先将DNA溶于适宜浓度的NaCl
溶液中,加入适量二苯胺试剂,沸水浴加热5min,冷却后蓝色更明显。龙胆紫
染液是将染色体染成紫红色。
9.A解析:比较加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果,设计对照实验时,应该
用蛋白酶洗衣粉和普通洗衣粉进行对照。
10.D解析:不同的植物组织培养的难易程度差别很大,同一种植物,幼嫩的材
料容易培养,植物激素的种类、浓度、使用先后顺序、培养基中的营养物质、pH、
温度、光照等条件对植物的组织培养都有影响。
二、非选择题
11.(1)目的菌选择
(2)化合物A异养需氧型
(3)减少增加
(4)平板划线
(5)定期取样50000B-C
(6)灭菌
解析:题干中首先说明了A是有机物,后来在培养基中又增加了磷酸盐、镁盐
以及微量元素,通过比较各培养瓶中A的多少,选出“目的菌”,由此可推出“目
的菌”所需碳源和氮源来自A,是异养型。培养液中的微生物计数通常采用显微
镜直接计数法,原菌液的菌数为B/5X25,换算成1mL菌液中的总菌数为50
OOOBC(个)。获得“目的菌”后,先进行扩大培养,培养过程中及培养结束后注
意灭菌。
12.(1)灼烧高压蒸汽(2)C
(3)灰绿红葡萄皮的色素进入发酵液
(4)平板划线法稀释涂布平板法选择培养基
(5)毛霉协同微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子的
肽和氨基酸;脂肪酶将脂肪水解成甘油和脂肪酸
(6)A
解析:酒精可使蛋白质变性而使细胞死亡。在发酵过程中,随酒精浓度增大,死
亡的葡萄皮细胞中的色素从细胞中释放出来,使发酵液颜色出现深红色。常用平
板划线法和稀释涂布平板法从野生种群中分离纯化酵母菌。在腐乳制作过程中,
有许多微生物参与,其作用是产生水解酶,将蛋白质、脂肪水解得到小分子营养
物质。毛霉是在腐乳制作过程中起主要作用的微生物。
13.(1)单核镜检(显微镜观察)醋酸洋红
(2)激素的种类及其浓度配比
(3)液泡化正常受精卵(或受精卵)
(4)①②③⑥④⑤
(5)将试管苗移栽到经消毒过的培养基中生活一段时间,等幼苗长壮后再移栽
到土壤中
解析:(1)单核期花粉对离体刺激敏感,选用该期花粉可提高培养的成功率;选
择花粉时可用显微镜观察、筛选;对花粉细胞核染色应选择碱性染料,常用醋酸
洋红。(2)细胞培养成植株的两条途径取决于植物激素的种类及比例,尤其是生
长素和细胞分裂素。(3)愈伤组织细胞的特点为细胞排列疏松无规则、高度液泡
化;胚状体是具有与胚相似的根或芽的结构。(4)灭菌对象为培养基和实验器材,
消毒对象为要保持活性的材料和实验者自身。(5)壮苗即使试管苗逐步适应外界
环境的做法。
14.(1)蒸储法萃取法
(2)水有机溶剂有机溶剂
(3)橘子皮芳香油含量较高
(4)过滤
(5)上油层的密度比水层小增加水层密度,使油和水分层
(6)吸收芳香油中残留的水分
解析:本题考查芳香油的性质与提取方法。植物芳香油的提取方法有压榨法、蒸
储法和萃取法。根据芳香油的不同特点,采取不同的提取方法。橘皮精油的提取
往往采用压榨法,压榨后,需要过滤、静置,最后分离。
15.(1)温度酸碱度易培养生活周期短(2)灭菌消毒(3)比例合
适(4)鉴定(或分类)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的
时间,观察培养基上是否有菌落产生(6)灭菌
解析:大肠杆菌体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短,
常作为遗传学研究的实验材料。微生物培养操作过程中要保证在无菌条件下进
行。
16.(1)单核(2)胚状体丛芽(3)无机盐或矿质元素生长素细胞分
裂素(4)①培养基灭菌不彻底;②花蕾消毒不彻底;③接种时操作不规范等
解析:(1)选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。在花粉的发
育过程中,单核期细胞核由中央移向细胞的一侧,花药培养成功率最高。选择单
核期以前的花药接种,质地幼嫩,极易破碎;选择单核期以后的花药接种,花瓣
已有些松动,又给材料的消毒带来困难。(2)通过花药培养产生花粉植株(即单
倍体植株)一般有两种途径,一种是花粉通过胚状体阶段
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