T-TBD 001-2024 液体发酵装置技术操作规程

ICS65.080CCSB15TBDTechnicaloperationprocedureofliquidfermentationequipmentIT/TBD001—2024本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由河北神威环境治理有限公司提出。本文件由保定市肥料协会归口。本文件起草单位：河北神威环境治理有限公司、保定市肥料协会、保定瑞沃斯环境科技有限公司、绿尧河北生物科技有限公司、河北健地宝生物科技有限公司、河北科豪生物科技有限公司、河北航农农业科技有限公司、河北库克生物科技有限公司。本文件主要起草人：江洋、孟庆伟、沙瑞光、李高生、戈文赞、刘海研、聂永斌、郭建波。1T/TBD001—2024液体发酵装置技术操作规程本文件规定了发酵企业在使用发酵罐的过程中所涉及的操作使用程序等内容。本文件适用于发酵企业空消、实消等工作。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1空消在投料前，气路、料路、发酵罐等必须用饱和蒸汽进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系统处于无菌状态。3.2实消实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程。4基本要求4.1在发酵罐开机使用之前，应先检查电源是否正常，空压机、蒸汽发生器、循环水系统是否能正常工作。4.2检查整系统上的阀门、接头及紧固螺钉是否拧紧。4.3开动空压机，用0.15MPa压力，检查发酵罐、过滤器、管路、阀门的密封性能是否良好，有无泄漏。4.4溶氧仪、pH仪等应根据使用说明书进行检查、校正。4.5上岗人员对上述发酵罐的各项内容必须能熟练操作。5方法与步骤5.1空气过滤系统的空消5.1.1关闭空气系统进空气阀门（即空气预过滤器后的进气阀门切勿忘掉！防止蒸汽进入空气气源系统，损坏气源管路和设备。2T/TBD001—20245.1.2打开蒸汽过滤器的小排汽阀及进口蒸汽阀门，冷凝水排尽后微开此排水阀。5.1.3打开空气精过滤器下面的小排汽阀，打开其前面的进蒸汽的阀门，往空气管路通入蒸汽。进蒸汽首先通过空气精过滤器下面的排水阀排出，待冷凝水排尽后，微开此排水间，使其达到并保持0.10一0.11MPa，然后开始人工记时，保证灭菌时间持续20-30分钟。5.1.4灭菌时间到后，关闭空气精过滤器前面的进蒸汽的阀门，在精过滤器上的压力降到零以前立即打开空气精过滤器前面的进空气的阀门（如操作不及，可先关掉过滤器上相关的排气阀，待通入空气后再打开这些阀门通入压缩空气。吹空气过滤系统10一20分钟，然后将精过滤器后的阀门关闭及微开过滤器排气阀，使空气过滤系统始终保持正压备用。5.2发酵罐空消5.2.1打开夹套上口的排空阀以及夹套下口的排污阀，排尽发酵罐夹套内的冷水。同时打开发醉罐出料阀，排尽罐内的余水，关好空气阀门第一阀门。5.2.2打开罐底出料口及罐内进气口、视镜蒸汽吹口、移种取样口上的进蒸汽阀门，使蒸汽通过这些阀门进入发酵罐，并从罐顶排气口持出。5.2.3微开出料阀、发酵罐上各排气口、空气过滤系统出口阀后的小排气口（对发酵罐还需旋松接种口盖，使蒸汽从盖上小孔喷出），这些操作可有效防止出现灭菌死角。5.2.4调整罐顶排气阀，使罐压达到并保特0.11一0.13MPa，温度121一123℃,维持时间40-60分钟。5.2.5空消结束，按照"由近而远的原则"关上各蒸汽进阀及所有相关排气阀、排气口，但保持罐顶排气口打开，使罐内与大气相通，防止突然冷却时罐内产生负压，损坏罐体。5.2.6注意事项：空气过滤器和发酵罐，灭菌过程中过滤器的表压应在0.11左右，最好不高于0.13MPa，过高可能会损坏滤芯；灭菌后要用压缩空气将介质吹干，缓慢通气；气流要适当，太小吹不干，过大容易将介质顶翻，造成空气走短路而带菌。5.3实消5.3.1空消结束后，按工艺要求配好培养基，一般以罐体全容积的70％左右为宜，泡沫多的培养基需加入少量消泡剂。考虑到冷凝水和接种量的因素，加水后的容积一般为罐体全容积的60％左右。5.3.2在加入培养基时，打开罐内进气口的进空气阀，往罐内通入空气并打开显示屏上的机械搅拌，转速在80rpm左右，使罐内物料均匀混合，对50L发酵罐物料加好后，旋上接种口。5.3.3缓慢打开夹套上口的蒸汽进气阀门，小开夹套下口的排污阀，预热罐内培养基，当罐内温度升到90一100℃,关上进气口的进空气阀，关上夹套进蒸汽阀门和排污阀，打开夹套上口排空阀。然后打开罐底出料口及罐内进气口上的进蒸汽阀门，往罐内通入蒸汽，关小罐项排气阀。5.3.4当罐温达到100℃左右时，最好关掉搅拌系统，延长机械密封使用寿命。微开出料阀、发酵罐上各排气口、空气过滤系统出口阀后的小排气口，对50L发酵罐，旋松接种口盖，使蒸汽从盖上小孔喷出。3T/TBD001—20245.3.5调整控制好罐上蒸汽进汽和排气阀的开度，使罐内压力维持在0.11一0.13MPa，温度控制在121一125℃,推持时间根据工艺要求而定，一般灭菌30分钟左右，点击屏幕（灭菌30分）。5.3.6灭菌时间到后，关闭罐顶除排气阀以外所有排气口，然后按照"由近而远的原则"关闭进汽阀及管路上的小排气阀，待罐内压力降到0.05Mpa时打开罐内进气口进空气阀。5.3.7打开夹套上口灭菌冷却水的排水阀，再打开夹套下口进水阀，通入冷却水点击屏幕冷水阀，开始降温）。5.3.8调节好空气进、排气阀门的开度，保持罐压为0.05Mpa。当罐温降至100度以下时可关闭夹套下口进水阀，打开自动进水阀、打开（显示屏上的自动控温，点按"发酵启动"按钮，开始自动冷却并保温。5.3.9注意事项：夹层升温