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备案号:DB11DB11/T829—2011白菜品种纯度及真实性分子检测方法MethodsofidentifyingvarietalpurityandgenuinenessofChinesecabbagebyusingmolecularmarkers北京市质量技术监督局发布 本标准规定了结球白菜和不结球白菜种子品种纯度及真实性鉴定的SSR、用和适宜的反应条件下,根据模板序列设计的两条引物分别与模板DNA两条链上相应的一段生退火而相互结合,接着在DNA聚合酶的作用下以四种脱氧核糖核苷酸(d伸。然后不断重复变性、退火和延伸这一循环过程,使欲扩增的基因片段呈几何简单重复序列(SSR)和内部简单重复序列(ISSR)广5仪器设备及耗材5.1.2水浴锅(0℃~100℃)。5.1.8冰箱(最低温度-20℃)。离心管(0.2mL、0.5mL、1.5mL、2.0mL)、枪头(10μL、200μL、1mL)、96孔PCR板、一次性手),7.1.1应优先选用核心引物库中的引物。当不能满足7.3.1白菜品种纯度检测常用的SSR引物名称及序列参见附录B。 —子和标准样品中各随机数取一定数量种子(保证10株— 9检测结果鉴定SSR电泳谱带带型的一致性,计数供检样品种子粒数(株数)和非本):——引物位点差异≥2,判定两个品种为不同品),),D.1.2将1.5mL离心管置于80℃~90℃水浴锅中水浴10min,水浴过程中混匀2~3次。将提取的白菜样品DNA适当稀释,用紫外分光光度计在凹槽一端,将梳子齿向外,轻轻的插入梳子,使夹紧。在正极槽(下槽)和负极槽(上槽)中分别加在20μlPCR扩增产物中加入5μL6倍非变性加样缓冲液,混匀。用吸球吹吸加
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