SARS冠状病毒实验活动风险评估报告

SARS冠状病毒实验活动风险评估报告一、生物因子(一)一般特性SARS冠状病毒（SARS-CoV），属于冠状病毒科冠状病毒属，为单股正链RNA病毒。SARS-CoV基因组由大约30000个核苷酸组成，在已发现的RNA病毒中是最大的，与经典冠状病毒仅有约60%的同源性，但基因组的组织形式与其他冠状病毒相似。严重急性呼吸综合征（SevereAcuteRespiratorySyndromes），又称传染性非典型肺炎，简称SARS，是一种因感染SARS冠状病毒引起的呼吸系统传染性疾病。其主要通过近距离空气飞沫传播，以发热、头疼、肌肉酸痛、乏力，干咳少痰等为主要临床表现，严重者可出现呼吸窘迫。此病传染性强，病死率高。感染后，临床多表现为重症肺炎，且以发病快、症状重，以及进展迅速为特点。（二）来源SARS患者是主要的传染源，处于感染初期的患者的咳嗽症状最明显，这时也是最危险的传染源。不典型患者是比较难管理的传染源。这类患者并无异常表现，仅仅是胸部有病变，因而对于他们的诊断和管理就比较困难，也就容易流散在社会上造成疫情的蔓延。国内某些研究机构已经在果子狸体内分离到了与SARS冠状病毒基因结构相似的冠状病毒，但是还不能确定哪一种动物是SARS病毒的来源，需进行进一步研究；实验室保存的传染性SARS样品是需要倍加重视的传染源。另有研究发现，蝙蝠是类SARS病毒的自然宿主，蝙蝠携带冠状病毒，蝙蝠类SARS冠状病毒与人SARS冠状病毒基因组序列同源性大92%，揭示了蝙蝠是类SARS冠状病毒的自然宿主，并证明了冠状病毒与蝙蝠宿主存在协同进化关系，为SARS冠状病毒的宿主动物溯源提供了证据。（三）传染性SARS冠状病毒传染性极强，患者的传染性与其呼吸道症状呈正比，在传播过程常常会出现超级传染事件（SuperSpreadEvents，SSE），这个过程一般会导致20名以上的健康人被感染SARS冠状病毒。新加坡的5个超级传染事件一共使122名健康人感染了SARS冠状病毒；北京市的1个超级传染事件就感染了27名健康人。但没有证据表明超级传播者的病原具有特殊的生物学特性。（四）传播途径目前公认最主要的传播途径是：（1）呼吸道近距离的飞沫传播。在急性期患者咽拭子、痰标本中可以检测到很高水平的SARS冠状病毒，因此，在一定半径的空间内会存在病毒从而引起近距离呼吸道传播。气溶胶传播，即通过空气污染物气溶胶颗粒这一载体在空气中作为中距离传播，是经空气传播的另一种方式。含有病毒的分泌物可以在许多物体表面存活，因此，在一定意义上讲，与患者接触同一公共设施也会导致被感染。（2）肠道传播。WHO最近的研究成果显示，SARS冠状病毒能在腹泻患者的排泄物内存活多达4d，因此，不能排除经粪—口途径感染SARS的可能，也就是说被患者排泄物污染的水、食物和物品都可能造成感染。（3）血液传播和垂直传播。已经发现一些急性期患者伴有病毒血症。（五）易感性一般来说，人群普遍易感。从发病年龄分布来看，成年人比较多见，20～30岁的发病人数最多，而10岁以下的儿童发病人数最少。老年人的病死率最高，青壮年的死亡率则较低，这可能与老年人免疫力弱、机体调节不良有关。与SARS症状初期的病人的密切接触者是高危险人群之一。医护人员和病人家属与亲友在治疗、护理、陪护、探望病人时，同病人近距离接触次数多，接触时间长，如果防护措施不力，就很容易感染SARS冠状病毒。从事SARS冠状病毒相关实验室操作的工作人员和果子狸等野生动物饲养销售的人员，也可能被感染的高危人群。（六）潜伏期患者感染SARS冠状病毒后，约经过2周左右，一般2～12d的潜伏期，开始出现发热、咳嗽症状。感染初期患者的传染性较强，排毒量和排毒时间一般与病情轻重成正比。哈佛大学公共卫生学院的库珀等人用“基本传染数R”来评价一种传染病的传播潜力，即R=2时就意味着一个患者可以传染两个健康人。通过分析香港和新加坡的疫情，发现SARS的基本传染数为2.7～3，远远低于艾滋病、水痘、天花等传染病。但是由于冠状病毒可能在呼吸道上皮细胞中增殖，局部病毒浓度较高，因此，在对病人进行口腔检查、气管插管时极易被感染，这也正是医务人员感染比例偏高的原因。（七）剂量—效应关系目前SARS冠状病毒感染人的剂量无报道，但由近距离经呼吸道飞沫传播是肯定的，而且经实验结果表明，SARS冠状病毒以1×105TCID50剂量经滴鼻感染恒河猴，导致出现非典型肺炎的病理性改变。（八）致病性感染SARS冠状病毒的病例临床表现为急性起病，自发病之日起，2～3周内病情都可处于进展状态，主要有以下三类症状：（1）发热及相关症状。常以发热为首发和主要症状，体温一般高于38℃，常呈持续性高热，可伴有畏寒、肌肉酸痛、关节酸痛、头痛、乏力。在早期，使用退烧药可有效退热；进入进展期，通常难以用退热药控制高热。使用糖皮质激素可对热型造成干扰。（2）呼吸系统症状可有咳嗽，多为干咳、少痰，少部分患者出现咽痛。常无上呼吸道卡他症状。可有胸闷，严重者渐出现呼吸加速、气促，甚至呼吸窘迫。呼吸困难和低氧血症多见于发病6～12d以后。（3）其他方面症状。部分患者出现腹泻、恶心、呕吐等消化道症状。（九）变异性SARS冠状病毒基因组从5’端到3’端依次为：5’-多聚酶-S-E-M-N-3’。5’端有甲基化帽子结构，其后是72个核苷酸的引导序列。基因组RNA约2/3为开放阅读框架（ORF）1a/1b，编码RNA多聚酶（Rep）。该蛋白直接从基因组RNA翻译，形成多蛋白前体，后者进一步被病毒主要蛋白酶3CLpro切割，主要负责病毒的转录和复制。Rep的下游有4个ORF，分别编码S、E、M、N四种结构蛋白，它们从亚基因组mRNA中翻译，亚基因组mRNA以不连续转录机制合成，其转录由转录调控序列（TRS）起始，后者保守序列为AAACGAAC。基因组3’端有polyA尾。目前的基因序列分析表明SARS冠状病毒的S基因尤其是S1区变异程度较高，N基因较为保守。基因组的突变率在0.4%～0.7%之间，研究结果分析没有发现病毒变异与临床病程发展之间有明确的联系。（十）稳定性病毒对有机溶剂敏感，乙醚4℃24h可完全灭活病毒，75%乙醇5min可使病毒失去活力，含氯的消毒剂5min可以灭活病毒。根据SARS冠状病毒对消毒剂的抵抗力，本实验选择75%乙醇溶液和0.5%有效氯浓度的次氯酸钠溶液用于SARS冠状病毒相关实验的消毒处理。病毒对温度敏感，随温度升高，其抵抗力下降，37℃可存活4d，56℃加热90min、75℃加热30min能够灭活病毒。紫外线照射60min可破坏病毒的感染性。在人体常见的三种排泄物（痰、粪便、尿液）和血液中，SARS病毒能长时间保持活力。在24℃条件下，在痰中和粪便中存活约5d，在尿液中存活约10d，在血液中可存活15d。在室内条件下，滤纸、棉布、木块、土壤、金属、塑料、玻璃等表面可存活3d。（十一）预防和治疗目前尚缺少针对SARS病毒的特异性治疗方法，临床上应以对症支持治疗和针对并发症的治疗为主。应避免盲目应用药物治疗，尤其应避免多种药物（如抗生素、抗病毒药、免疫调节剂、糖皮质激素等）长期、大剂量地应用。具体治疗方案详见原卫生部《传染性非典型肺炎<SARS>诊疗方案》。《中华人民共和国传染病防治法》已将SARS列为法定乙类传染病并参照甲类传染病进行管理。要针对传染源、传播途径、易感人群三个环节，采取以管理和控制传染源、预防控制医院内传播为主的综合性防治措施，努力做到“早发现、早报告、早隔离、早治疗”。特别是在SARS流行的情况下，要采取措施，确保“四早”措施落实到位。强调就地隔离、就地治疗，避免远距离传播。（十二）事故分析迄今为止，国内外共报道多起实验室感染事件。2003年9月，由于不当的实验程序导致西尼罗病毒样本与SARS冠状病毒在BSL-3实验室里交叉感染，新加坡国立大学一名27岁的研究生感染SARS冠状病毒；2003年12月，台湾军方医学院防非典研究所BSL-4实验室里，一名研究人员在处理含有SARS冠状病毒废弃物时，违规打开密封门，在此过程中感染SARS冠状病毒；2004年3～4月，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所研究人员采用未经证实有效的灭活方法在BSL-3实验室灭活SARS冠状病毒后，将其带到普通实验室，而未经完全灭活的病毒，感染了本实验室两名工作人员，引起发病，并造成社会上的再次传染，共感染10人，其中一人死亡。二、风险评估与风险控制（一）实验室活动BSL-3实验室从事SARS冠状病毒的实验活动包括病毒核酸检测、病毒分离培养和血清抗体微量中和试验。1.病毒核酸检测实验存在的风险和控制措施（见表8-15）表8-15病毒核酸检测实验存在的风施险和控制措施名称实验操作可能风险发生概率发生范围控制措施残留风险核酸提取1.标本转移至生物安全柜离心管掉落破裂或破碎，感染性物质溅出，同时可能产生气溶胶低生物安全柜内标本处理时要动作轻柔，应事先在操作台面铺含有5000mg/L有效氯的次氯酸钠纱布。一旦发生上述意外，马上将污染的纱布或纸弃入含5000mg/L有效氯的次氯酸钠的消毒缸内及立即消毒台面及更换新的纱布或吸水纸低2.标本振荡和挤压产生气溶胶和溅出液体低生物安全柜内标本处理时要动作轻柔，应事先在操作台面铺含有5000mg/L有效氯的次氯酸钠纱布。一旦发生上述意外，马上将污染的纱布或纸弃入含5000mg/L有效氯的次氯酸钠的消毒缸内及立即消毒台面及更换新的纱布或吸水纸低3.标本离心产生气溶胶或破裂溢出低生物安全柜内或离心机实验室采用带有安全套盖的离心套筒，如离心过程中发生收集管破裂，应关闭电源，在生物安全柜内处理相关感染性物质，彻底清洁和消毒离心机套桶。如果在不带有安全套筒的离心机操作，离心过程中发生收集管破裂时，应关闭电源并且保持离心机盖子关闭30min。如果在机器停止运行后发生了破裂，离心机盖应立即关闭并保持30min，并及时通知本实验室生物安全员采取相应措施低4.标本转移离心管1.离心管开盖时液体溅出，离心管滑落，打翻标本2.标本转移时，吸头漏液3.加样时，感染性液体溅出，污染离心管外部、手臂或生物安全柜台面低生物安全柜内1.在操作时，动作要小心，以防开盖时离心管滑落、打翻或溅出2.使用移液器时，确保吸头与移液器连接紧密3.样品打开前进行短暂离心，去除样品管盖上的残留，避免开盖时样品溅出4.使用带滤芯的吸管，动作要轻缓。若滴落在生物安全柜台面，应及时消毒处理，以5000mg/L有效氯的次氯酸钠纱布、75%的酒精纱布处理。若手接触感染材料，用75%的酒精消毒后脱去最外层的手套，换一副新手套，并用75%的酒精纱布擦拭管壁，将污染的纱布放在生物安全柜内的垃圾袋内，封口后移出生物安全柜，进行高压处理低2.SARS病毒分离实验操作风险识别与控制（见表8-16）表8-16SARS病毒分离实验操作风险识别与控制措施名称实验操作可能风险发生概率发生范围控制措施残留风险接种前标本处理1.标本转移至生物安全柜离心管掉落破裂或破碎，感染性物质溅出，同时可能产生气溶胶低生物安全柜内标本处理时要动作轻柔，应事先在操作台面铺含有5000mg/L有效氯的次氯酸钠纱布。一旦发生上述意外，马上将污染的纱布或纸弃入含5000mg/L有效氯的次氯酸钠的消毒缸内及立即消毒台面及更换新的纱布或吸水纸低2.标本振荡和挤压产生气溶胶和溅出液体低生物安全柜内标本处理时要动作轻柔，应事先在操作台面铺含有5000mg/L有效氯的次氯酸钠纱布。一旦发生上述意外，马上将污染的纱布或纸弃入含5000mg/L有效氯的次氯酸钠的消毒缸内及立即消毒台面及更换新的纱布或吸水纸低3.标本离心产生气溶胶或破裂溢出低生物安全柜内或离心机实验室采用带有安全套盖的离心套筒，如离心过程中发生收集管破裂，应关闭电源，在生物安全柜内处理相关感染性物质，彻底清洁和消毒离心机套桶。如果在不带有安全套筒的离心机操作，离心过程中发生收集管破裂时，应关闭电源并且保持离心机盖子关闭30min。如果在机器停止运行后发生了破裂，离心机盖应立即关闭并保持30min，并及时通知本实验室生物安全员采取相应措施低4.标本转移至离心管1.离心管开盖时液体溅出，离心管滑落，打翻标本2.标本转移时，吸头漏液3.加样时，感染性液体溅出，污染离心管外部、手臂或生物安全柜台面低生物安全柜内1.在操作时，动作要轻缓，以防开盖时离心管滑落、打翻或溅出2.使用移液器时，确保吸头与移液器连接紧密，吸取或吹打液体时动作要轻缓3.样品打开前进行短暂离心，去除样品管盖上的残留，避免开盖时样品溅出4.使用带滤芯的吸管，动作要轻缓。若滴落在生物安全柜台面，应及时消毒处理，以5000mg/L有效氯的次氯酸钠纱布、75%的酒精纱布处理。若手接触感染材料，用75%的酒精消毒后脱去最外层的手套，换一副新手套，并用75%的酒精纱布擦拭管壁，将污染的纱布放在生物安全柜内的垃圾袋内，封口后移出生物安全柜，进行高压处理低接种细胞过程1.吸取处理后标本接种细胞标本滴落台面或抽吸的过程形成气溶胶低生物安全柜内使用带滤芯的吸管，动作要轻缓。若滴落在生物安全柜台面，应及时消毒处理，以5000mg/L有效氯的次氯酸钠纱布、75%的酒精纱布处理。若手接触感染材料，用75%的酒精消毒后脱去最外层的手套，换一副新手套，并用75%的酒精纱布擦拭管壁，将污染的纱布放在生物安全柜内的垃圾袋内，封口后移出生物安全柜，进行高压处理低2.移至孵箱孵育接种后培养瓶跌落形成气溶胶低实验室核心区将培养瓶口拧紧，转移时使用转移托盘低3.孵育后Hank’s液清洗细胞形成气溶胶，清洗液溅洒低生物安全柜内操作时在生物安全柜内放好带有消毒液的纱布。用带滤芯的吸管，动作要轻缓。若滴落在生物安全柜台面应及时消毒处理，以5000mg/L有效氯的次氯酸钠纱布、75%的酒精纱布处理。若手接触感染材料，用75%的酒精消毒后脱去最外层的手套，换一副新手套低4.加生长液形成气溶胶低生物安全柜内加生长液时动作轻柔，避免对着细胞生长面加液，加液后及时将瓶口拧紧或盖上培养板板盖低培养观察1.显微镜观察培养物移动过程跌落导致溢出或形成气溶胶低实验室核心区为避免大量病毒产生危害，一次病毒培养体积不超过100mL。将培养瓶口拧紧，放置托盘中，移动时轻缓，注意安全。大量培养物溢出时，停止实验，先用一块布或纸巾盖上，再把消毒剂倒到上面，实验人员先退出实验室，至少静置30min，然后才可把布和纸巾等物品清理走低2.培养箱内培养过程形成气溶胶低培养箱内放在CO2孵箱内的病毒培养瓶需拧紧，密封袋包装，并放在托盘上，以防止污染孵箱低培养物收获细胞培养物的收获分装分装过程滴落台面，污染管壁，冻存管封口不严低生物安全柜内为避免大量病毒产生危害，一次病毒培养体积不超过100mL。操作时在生物安全柜内放好带有消毒液的纱布。若滴落在生物安全柜台面，应及时消毒处理，以5000mg/L有效氯的次氯酸钠纱布、75%的酒精纱布处理。分装病毒时应使用带垫圈、密封效果好的旋盖管，分装时注意安全，确保病毒不污染管外壁，管外壁经75%医用酒精纱布擦拭后方可移出生物安全柜低3.微量中和实验存在的风险和控制措施（见表8-17）表8-17微量中和实验存在的风险和控制措施名称实验操作可能风险发生概率发生范围控制措施残留风险微量中和试验在96孔板中加入已知滴度的病毒产生气溶胶和溅出液体低生物安全柜内加病毒时动作轻柔，应事先在操作台面铺含有5000mg/L有效氯的次氯酸钠纱布。一旦发生上述意外，马上将污染的纱布或纸弃入含5000mg/L有效氯的次氯酸钠的消毒缸内及立即消毒台面并更换新的纱布或吸水纸低病毒和抗体混匀产生气溶胶和溅出液体低生物安全柜内混匀时动作轻柔，应事先在操作台面铺含有5000mg/L有效氯的次氯酸钠纱布。一旦发生上述意外，马上将污染的纱布或纸弃入含5000mg/L有效氯的次氯酸钠的消毒缸内及立即消毒台面及更换新的纱布或吸水纸低96孔细胞培养板的转移细胞板跌落而产生气溶胶低实验核心区使用细胞托盘转运细胞板，发生细胞板意外跌落时，将含有5000mg/L有效氯的次氯酸钠纱布覆盖污染区，并用次氯酸钠消毒剂喷洒污染区及周边，作用半小时左右后，将污染的纱布和细胞板放于垃圾袋内进行高压处理；实验室核心区疑有气溶胶污染时，需用过氧化氢消毒器进行室内空气消毒，并按照程序进行意外事故报告低（二）设施设备设施设备中，生物安全柜、培养箱、离心机、振荡器、冰箱、高压灭菌器的可能风险以及控制措施见表8-18。表8-18设施、设备使用中的可能风险及控制措施仪器名称可能风险发生可能性后果描述控制措施生物安全柜气流异常不大可能对实验人员及实验室的高度危险操作培训，设备定期维护。使用时，观察窗不要抬得过高；柜内尽量少放仪器和物品，不要阻塞后面气口处的空气流通；禁止在柜内使用酒精灯；在柜内的所有工作都要在工作台中央或后部进行，并且通过观察窗能看见柜内的操作；尽量减少操作者后面的人员走动，操作者不要频繁移动及挥动手臂以免破坏定向气流；前面的空气栅格不要被吸管或其他材料挡住；生物安全柜的风扇在工作开始前及操作结束后至少要再运行5min培养箱二氧化碳泄漏；电源短路；培养物产生气溶胶可能性低人员接触污染1.每次使用二氧化碳培养箱时，注意观察二氧化碳气表以及培养箱显示是否正常，确保电源线连接正常，电源线周围无液体存在2.定期更换二氧化碳培养箱的空气滤膜3.严格规范操作，定期检查离心机离心管发生破裂而气溶胶释放可能性低人员接触污染配备有安全套筒的离心机，可把它转移到生物安全柜内处理振荡器产生气溶胶、泄漏和容器破裂可能性低人员样品接触污染必须使用塑料的器皿，因为玻璃可能会破裂而释放出感染性物质，而且可能伤及操作者。在操作结束后，容器应在生物安全柜里才能重新开启冰箱保存管泄漏可能性极低人员样品接触污染操作培训，做好个人防护高压灭菌器人员接触高温部位，发生烫伤可能性中等人员发生烫伤操作培训，做好个人防护（三）人员1.健康监护和健康状况评估实验人员、辅助人员、后勤保障人员上岗前应建立个人健康档案，进行定期的健康体检和相应的免疫接种。人员的健康状况应当符合实验室的安全工作要求。从事SARS冠状病毒研究的实验室工作人员必须在身体状况良好的情况下，才能进入BSL-3实验室工作，出现下列情况时不能进入:患发热性疾病；感冒、上呼吸道感染，或其他导致抵抗力下降的情况；妊娠；已经在实验室控制区域内连续工作4h以上，或其他原因造成的疲劳状态；心理素质不稳定的也尽量避免进入实验室；未经充分专业操作技能培训的人员。SARS冠状病毒实验人员的健康监护从开始进行实验当日开始，直至实验结束后最长潜伏期结束，期间应每日早晚测量体温并观察相应症状并记录。若操作者或其所在实验室的工作人员在此期间出现发热、体温高于38℃等类似症状，则应被视为可能发生实验室感染，应立即报告实验室负责人，采取早发现、早报告、早隔离、早治疗以控制管理传染源为主的综合性防治措施。对疑似感染者，采取严格的隔离防护措施，送至指定医院就诊，并做好转运过程的安全隔离和防护、消毒工作。另外的措施有实验活动前采集本底血清样本，实验活动期间每天测体温，必要时采集血液样本进行前后对比检测，以确定是否感染。2.人员资质和培训实验人员、辅助人员、后勤保障人员上岗前均须接受严格的生物安全，以及相关操作的技术培训，包括实验室设施、设备、个人防护、实验操作等培训。同时，必须熟悉和严格遵守实验室的管理要求。SARS病毒实验操作人员风险识别与控制明细表见表8-19.表8-19SARS病毒实验操作人员风险识别与控制措施潜在风险因素发生可能性后果严重性控制措施实验人员技术水平技术培训不足或操作不熟练导致误操作低严重实验人员需接受相关技术培训并考核合格后方能上岗，定期进行相关培训及演练人员健康水平实验人员身体状况不佳或患有基础疾病低中实验室工作人员每年参加体检，预留本底血清标本；实验人员进入BSL-3实验室前需测量体温，体温高于37℃者不能进入未经授权人员未经授权人员进入BSL-3实验室低严重进入BSL-3实验室须得到相关部门和实验室负责人的批准，应详细登记出入时间，并保证2名以上的人员同时进入（四）意外事件、事故带来的风险SARS冠状病毒实验的安全防护重点是实验操作过程中尽量减少气溶胶的产生和相关人员的呼吸道的保护，如佩戴N95口罩等，防止通过吸入气溶胶而感染。1.临床标本的处理对疑似SARS冠状病毒感染的病人的咽拭子、肺组织和血液标本，这些标本当中有可能含活病毒，但浓度不详。对此类临床标本的操作都必须在实验室生物安全柜内操作，实验操作人员按三级防护级别进行个体防护。2.涉及活病毒的操作涉及活病毒的操作是指如病毒分离、组织培养、TCID50测定、中和试验、间接免疫荧光实验等，以及SARS冠状病毒抗原、抗体检测前，对血清进行56℃水浴90min灭活处理，以及SARS冠状病毒电镜标本制作，超薄切片标本甲醛、锇酸固定前的实验。此类实验必须在生物安全三级实验室的生物安全柜内进行。实验操作人员按三级防护级别进行个人防护。3.已灭活的病毒或标本的操作已灭活的病毒或血清标本等用于病毒特异性核酸、抗原、抗体检测和电镜切片的观察实验时，可在BSL-2实验室进行操作。实验操作人员按二级防护级尽量使用塑料材质的实验物品，避免使用尖锐物品和利器。必须使用时应倒放在耐扎的容器内，使用后收集在特定的带盖的锐器容器内保存至最后作消毒处理或销毁。禁止将使用后的一次性针头重新套上针头套。严格禁止用手直接接触使用后的针头、刀片等锐器。禁止徒手处理破损或打碎的玻璃器材。对于实验室的台面，应当对其锐角进行处理，如加装桌角保护器或对桌角进行打磨等，使桌角保持光滑，避免割伤皮肤。4.实验室操作后的消毒措施涉及临床标本和活病毒的实验操作，在实验完毕后用含0.5％有效氯的次氯酸钠消毒剂溶液擦拭工作台面、生物安全柜内壁及台面，实验器材表面用70％酒精擦拭后移出生物安全柜。废弃物在实验室内121℃高压处理30min后才允许运出实验室。在BSL-2实验室中进行核酸扩增、抗体检测等实验时，为了确保安全，实验过程中产生的废液和使用过的耗材等都必须用含10％有效氯的次氯酸钠消毒液浸泡30min后，才允许运出实验室，并存放在指定的存放点进行集中处理。5.标本接种处理量的控制出于安全考虑以及便于操作，如果处理临床标本以备接种，每次操作的标本不应超过20份。如果处理经过扩增后的标本，病毒的原始容积≤2.5mL/份时，每次操作的标本不能超过10份；2.5～10.5mL/份时，每次实验的标本不能超过5份；＞10.5mL/份时，每次操作的标本不能超过3份。（五）其他风险控制其他风险主要包括对化学、物理、辐射、电器和水灾、火灾等自然灾害等的引起的风险。1.化学风险应熟知实验涉及的试剂的化学品安全说明书（MSDS），本实验过程中可能接触免疫学检测中的酸、碱，抗原片制备过程中的固定试剂，远离火源，通风良好，应注意操作轻缓，防止溅落而接触皮肤。如发生皮肤接触，应停止实验，在做好紧急处置后，撤离实验区，用大量水冲洗，如有需要应就医。2.物理风险如破损器皿的刺伤