检验科血清胱抑素C测定标准操作规程

玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-022版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20110701第2页共3页编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01血清胱抑素C测定标准操作规程1检验申请单独检验项目申请：血清胱抑素C测定(缩写CysC)；组合项目申请：肾功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定一天，普通冰箱中（2～8℃）稳定3天。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。3方法原理试剂中含有抗CysC多克隆抗体的胶体颗粒在546nm吸光度有最大吸收，当和样本中的CysC抗原发生凝集，在546nm吸光度发生变化，吸光度发生变化的幅度与CysC的浓度相关。根据工作曲线可以检测样本中的CysC含量。4试剂及其他用品4.1试剂：血清胱抑素C测定试剂盒，由北京利德曼生化股份有限公司出品。4.2试剂盒保存：未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定14天。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀，表明试剂已变质，不能继续使用。4.3试剂准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。4.4试剂盒主要成分：R1：缓冲液（PH＝6.7）；R2：含有抗人CysC的抗体。5校准品与校准模式5.1校准品：与试剂配套的校准品。5.2校准类型和校准点数目：非线性模式，6个校准点。5.3校准周期：校准间隔时间不限。但在：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。5.4校准液重建方法：校准液即开即用，无需特殊准备。6质控：换试剂定标，试剂换批换瓶做标本比对。7适用仪器适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器。8标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。9主要分析参数参见说明书。10结果计算计算标准液的吸光度的差值（A2－A1），建立标准液吸光度－浓度工作曲线。计算标本的吸光度差值，并在工作曲线上读取浓度值（mg/dL）。如标本的吸光度值大于标准液的最大值，则需稀释标本后，重新测量11检验结果的报告及范围11.1结果的报告11.1.1结果经审核后，确认准确无误后发出报告。11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2报告范围：0.2-8mg/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12操作性能12.1精密度：批内CV＜8.0%；总CV＜10%。12.2线性范围：0.2-8mg/L。12.3方法的有限性及干扰因素：内源性干扰物溶血为3g/L、乳糜＜5000FTU、黄疸200mg/L、对测试结果无明显影响。13参考范围及医学决定水平男性0-51岁:0.63-1.25mg/L，女性0-51岁：0.54-1.15mg/L。51岁以上:0.60-1.55mg/L14临床意义胱抑素C可由人体中所有的有核细胞产生,生成速度稳定、不受炎症、胆红素、溶血、三酰甘油等影响,CysC分子量低和等电点高,能从肾小球自由滤过,并在近曲小管上皮细胞内分解代谢.由于CysC的生成速度和血浓度稳定,不受其他病理变化影响,肾脏是其唯一的滤过和代谢器官,因此可作为测定肾小球滤过率(GFR)的一种理想的内源性指标.且随着检测方法的改进,已有大量研究证实CysC是优于尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)的内源性标记物,而CysC与GFR的相关性比Scr与GFR的相关性更为显著,是迄今为止基本满足理想内源性GFR标志物要求的内源性物质,是新近发展起来的评估肾功能的一种敏感性好、特异性高的指标,越来越受到广大临床工作者的重视.15结果审核以及分析与相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3相关项目：审核与血尿素、其他反映肾功能的指标如CR等的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16无威胁生命的“紧急值”及报告规定17有关引用程序与文件17.1Abbott自动生化分析仪仪器标准操作规程。17.2生