高三生物一轮复习：微生物的培养技术及应用-实验题考点攻破

（14-2）微生物的培养技术及应用—高考生物一轮复习实验题考点攻破1.下列有关细菌纯化培养的说法，不正确的是()A.实验操作者接种前要用70％的酒精棉球擦手消毒B.每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌C.培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞的克隆D.分离并纯化硝化细菌时，培养基中需要添加氮源无需添加碳源2.幽门螺旋杆菌会分泌脲酶，能引起胃病的发生。在胃病患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养，实验基本步骤如下：配制培养基→灭菌→倒平板→X→培养→观察。下列叙述错误的是()A.常见的灭菌方法有湿热灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌B.题中X表示接种，脲酶分解尿素后会使培养基pH降低C.培养基灭菌冷却到50℃左右倒平板，平板冷凝后应将其倒置D.以尿素为唯一氮源的培养基可初步筛选出幽门螺旋杆菌3.分散的微生物在适宜的固体培养基表面繁殖形成的肉眼可见的、有一定形态结构的细胞群体，称为纯培养物。获取纯培养物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列有关这两种方法的说法，错误的是()A.这两种方法的关键都是要防止杂菌污染以保证获得培养物的纯度B.这两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置进行培养C.接种环和涂布器均需要在火焰上灼烧，且涂布器灼烧前需用酒精引燃D.用稀释涂布平板法统计菌落数目时，所获得的数据往往比实际值大4.分离、纯化细菌的实验中，平板划线法接种（甲）及培养结果（乙）如图所示，a、b、c、d是划线的四个区域。下列叙述正确的是()A.实验所用培养基一般用干热灭菌法进行灭菌B.图中d区域的划线操作是从c区域划线的末端开始的C.为了防止杂菌污染，接种环灼烧后立即蘸取菌液进行划线D.图示划线接种过程中至少需要对接种环灼烧5次5.金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物，其具有耐高盐的特性，在环境中分布广泛。下列叙述错误的是()A.如果从粪便中检测到金黄色葡萄球菌，说明被金黄色葡萄球菌感染B.培养过金黄色葡萄球菌的培养基要灭菌后才能丢弃C.分离样品中的金黄色葡萄球菌时，用高盐液体培养基培养不能增加该菌的浓度D.在固体选择培养基上采用平板划线法接种，可获得金黄色葡萄球菌的纯培养物6.生活饮用水中大肠杆菌超标会引起肠道外感染和急性腹泻，严重时会危及生命。某研究小组利用表中的培养基对生活饮用水中的大肠杆菌进行培养和计数，下列叙述正确的是()成分蛋白胨蔗糖乳糖K2HPO4显色剂（伊红—亚甲蓝）琼脂含量10.0g5.0g2.0g2.0g0.2g12.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mLA.按照用途划分，该培养基属于选择培养基B.配置培养基时，应先进行灭菌后再调节pH值C.计数时，应采用稀释涂布平板法进行接种D.为防止杂菌污染，应向培养基中添加适量抗生素7.下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述错误的是()A.实验室里可用化学药物或紫外线对物体表面或空气进行消毒B.步骤①倒平板时需将培养皿的盖拿开，以便将锥形瓶中的培养基倒入C.步骤②接种环、接种针等用具应在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧灭菌D.步骤③操作过程中，需灼烧接种环6次，在恒温培养箱中培养时需要将平板倒置8.日前微博传言手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多，为辨别真伪，两电视台利用微生物培养技术进行实验，过程及结果如图。下列叙述错误的是()A.本实验采用稀释涂布平板法接种B.本实验不需要设置对照组实验C.本实验使用的培养基应含有水、碳源、氮源和无机盐D.两个报道结果不同，可能是因为取样环境不同9.某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是()A.在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品B.将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测C.将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落D.比较对照组和实验组的菌斑大小，实验组病原菌菌斑越大表明内生菌抗性效果越好10.烟草的多糖含量偏高是造成烟叶原料品质不高的重要因素，微生物在烟叶醇化阶段可有效降低烟草的多糖含量。为提高烟叶质量，科研人员筛选出S1～S5微生物菌株，并测定其相关酶活力，结果如图所示。下列说法正确的是()A.筛选获得S1～S5微生物菌株时，应以淀粉为唯一碳源B.用平板划线法分离单菌落前需对培养液进行稀释C.用S1单菌落培养获得的纯培养物对烟叶进行醇化效果最好D.烟叶醇化发酵应在低温下进行，以抑制杂菌繁殖11.儿茶素（C）具弱抗菌性，研究人员用药物M与儿茶素形成配合物M-C，以增强其抗菌效果。为确定配合物M-C的最佳组分配比，用不同组分配比的配合物M-C处理滤纸片，置于布满菌落的培养基中，结果如图所示。下列叙述错误的是()编号M-C的组分配比11:121:231:341:451:5A.该实验可利用稀释涂布平板法将菌种接种到培养基上B.该实验自变量是M-C的组分配比，因变量为抑菌圈的大小C.该实验中应将配制好的培养基倒入平板后高压蒸汽灭菌D.该实验结果表明不同M-C组分配比的配合物抑菌效果不同12.某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示，回答下列问题。（1）在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是____。不同的菌种，在相同的培养条件下，菌落的形状、大小和____一般不同，若将菌T接种在含有____（一种染料）的培养基上进行培养，培养基中会出现以这些菌为中心的大小不等的透明圈。（2）采用液体培养基培养酵母菌，通常可采用____法对培养基进行灭菌。在使用该方法时，为了达到良好的灭菌效果，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下维持____来灭菌。（3）将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是____。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是____。发酵液中的乙醇可用____溶液检测。（4）本实验收集的淋洗液中的____可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式有节约粮食、____等优点（写出1点即可）。

答案以及解析1.答案：C解析：A、对操作者的衣着和手要进行消毒，一般实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒，A正确；B、最后一个划线区之前接种时，每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌，杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目减少。最后一个区划线结束后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌，防止菌种污染环境，B正确；C、培养基上的单个菌落也可能由两个连在一起的细菌细胞分裂而来，C错误；D、硝化细菌为化能自养型微生物，分离并纯化硝化细菌时，培养基中需要添加氮源无需添加碳源，D正确。故选：C。2.答案：B解析：A、常见的灭菌方法有湿热灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌，A正确；B、题中X表示接种，幽门螺旋杆菌能分泌脲酶，脲酶分解尿素产生氨，会使培养基pH升高，B错误；C、待培养基灭菌冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，为了防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，所以平板冷凝后应将其倒置，C正确；D、在以尿素为唯一氮源的培养基上，只有能分泌脲酶的微生物可以生长，可初步筛选出幽门螺旋杆菌，D正确。故选B。3.答案：D解析：A、获得纯培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，故两种纯化方法都要防止杂菌污染，A正确；B、为验证培养基是否被污染，两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置，在培养箱中进行培养，B正确；C、接种环和涂布器均需要在火焰上灼烧，接种环可直接灼烧灭菌，涂布器要沾少量酒精在火焰上引燃进行灼烧灭菌，C正确；D、当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故用稀释涂布平板法进行微生物的计数时，所获得的数据往往比实际值小，D错误。故选D。4.答案：D解析：A、实验所用培养基一般用湿热灭菌法（高压蒸汽灭菌）进行灭菌，A错误；B、图中a对应的区域出现了单菌落，d区域菌落最多，因此a区域应该为划线的最终区域，d区域为划线的起始区域，即图中c区域的划线操作是从d区域划线的末端开始的，B错误；C、接种环灼烧后需适当冷却再蘸取菌液进行划线，避免将菌种烫死，C错误；D、蘸取菌液前需要灼烧一次接种环，之后在c、b、a区域划线前都要灼烧接种环，以保证菌种来自上一次划线的末端，划线结束后也要灼烧接种环，防止接种环上的菌种污染环境、感染接种者，因此接种过程中至少需要对接种环灼烧5次，D正确。故选D。5.答案：C解析：A、金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物，因此可从食物和人的粪便中分离得到金黄色葡萄球菌，A正确;B、使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，B正确;C、金黄色葡萄球菌可在盐浓度接近8%的环境中生长，具有耐高盐的特性，因此分离样品中的金黄色葡萄球菌时，用高盐液体培养基培养可以增加该菌的浓度，C错误;D、对微生物进行分离、纯化可用平板划线法或稀释涂布法，因此，在固体选择培养基上采用平板划线法接种，可获得金黄色葡萄球菌的纯培养物，D正确。6.答案：C解析：A、该培养基中含伊红—亚甲蓝显色剂，根据用途划分该培养基属于鉴别培养基，A错误；B、在配制培养基时应先调节pH值，再灭菌后倒平板，B错误；C、稀释涂布平板法进行接种可以用来计数，C正确；D、不可以在培养基中添加抗生素，以免影响大肠杆菌的生长，D错误。故选C。7.答案：B解析：A、常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法和紫外线消毒等，实验室里可用化学药物或紫外线对物体表面或空气进行消毒，A正确；B、步骤①倒平板时，用拇指和食指将培养皿打开一条缝隙，以便将锥形瓶中的培养基倒入，B错误；C、步骤②接种环、接种针等用具应在酒精灯火焰的外焰部位即充分燃烧层灼烧灭菌，C正确；D、步骤③操作过程中，划线5次，需灼烧接种环6次，在恒温培养箱中培养时需要将平板倒置，D正确。故选B。8.答案：B解析：A、由图可知，本实验采用稀释涂布平板法接种，A正确；B、为了防止杂菌污染，本实验需要设置对照组实验，B错误；C、本实验使用的培养基应含有水、碳源、氮源和无机盐，C正确；D、通过观察菌落的形态、大小，可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物，两电台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，可能是手机的取样和马桶的取样都不相同，D正确。故选B。9.答案：C解析：稀释涂布平板法可用于分离微生物。将无菌检测合格的样品研磨,经稀释涂布平板法分离能获得内生菌的单菌落,C正确。10.答案：C解析：A、根据题图信息可知，科研人员筛选出的S1∼S5微生物菌株均能降低烟草中的多糖含量，但不能确定该微生物是否利用淀粉为碳源，A错误；B、用平板划线法分离单菌落直接使用未经稀释的微生物样本进行划线操作即可达到分离目的，B错误；C、据图分析可知，科研人员筛选出的S1∼S5微生物菌株均能降低烟草中的多糖含量，S1微生物对降低烟草的多糖酶活力比其他四种都强，故用S1单菌落培养获得的纯培养物对烟叶进行醇化效果最好，C正确。D、酶催化化学反应需要适宜的温度，烟叶醇化发酵应在适宜的温度下进行，D错误。故选C。11.答案：C解析：A、利用涂布平板法将菌种接种到培养基上，菌落均匀分布，便于观察菌落的生长状况，A正确；B、据表可知，本实验的自变量是M-C的组分配比，因变量为抑菌圈的大小，B正确；C、应将配制好的培养基高压蒸汽灭菌后再倒平板，C错误；D、不同M-C组分配比的抑菌圈大小不一样，表明配合物中不同M-C组分配比抑菌效果不同，D正确。故选C。12.答案：（1）菌T能够分泌纤维素酶；颜色；刚果红（2）高压蒸汽灭菌；15～30min（3）制造无氧环境；排出二氧化碳；酸性的重铬酸钾（4）葡萄糖；废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广等解析：（1）菌T能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖，因此在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解。不同种类的细菌形成的菌落不同，菌落特征包括菌落的大小、形状、颜色及菌落的隆起程度，不同的菌种，在相同的培养条件下，菌落的形状、大小和颜色一般不同。刚果红是一种染料，它可以与纤维素形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加刚果红时，刚果红与纤维素形成红色复合物；而当纤维素被菌T分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。（2）常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，在使用高压蒸汽灭菌时，为了达到良好的灭菌