生物工程与生物技术作业指导书

生物工程与生物技术作业指导书TOC\o"1-2"\h\u14069第1章绪论 3184421.1生物工程与生物技术概述 3141751.2发展历程与现状 4202411.3生物工程与生物技术的应用领域 411926第2章基因工程 4218032.1基因克隆与重组技术 4100342.1.1基因克隆的基本步骤 4246352.1.2基因重组技术的应用 5262242.2基因编辑技术 5173622.2.1CRISPR/Cas9基因编辑原理 540622.2.2基因编辑技术的应用 588502.3基因转移与转化技术 5234502.3.1基因转移技术 571772.3.2基因转化技术 670002.3.3基因转移与转化技术的应用 64616第3章蛋白质工程 6278513.1蛋白质表达与纯化 625583.1.1引言 6113013.1.2蛋白质表达系统 645773.1.3蛋白质纯化方法 640423.1.4实验操作步骤 634973.2蛋白质结构预测与设计 7241723.2.1引言 7147053.2.2蛋白质结构预测方法 7315253.2.3蛋白质设计方法 7198873.2.4实验操作步骤 780153.3蛋白质功能研究 7241033.3.1引言 761823.3.2蛋白质功能研究方法 744863.3.3实验操作步骤 820091第4章细胞工程 8324584.1细胞培养技术 8207394.1.1基本原理 899464.1.2方法 876784.1.3应用 8296994.2细胞融合与杂交技术 839254.2.1原理 9138724.2.2方法 993064.2.3应用 925884.3干细胞技术 9324594.3.1原理 9191464.3.2方法 9217194.3.3应用 926631第5章酶工程 9266565.1酶的来源与筛选 945545.1.1酶的来源 10210215.1.2酶的筛选 10265305.2酶的固定化技术 10144105.2.1固定化方法 1052745.2.2固定化酶的性质 10202255.3酶反应器设计与应用 11172095.3.1酶反应器设计 1120375.3.2酶反应器应用 1129322第6章发酵工程 11290886.1发酵过程与控制 11154366.1.1发酵过程概述 11141276.1.2发酵过程中的关键参数 11239956.1.3发酵过程控制策略 11278186.2发酵设备与工艺 1280836.2.1发酵设备类型 12290296.2.2发酵工艺流程 12243816.2.3发酵设备与工艺的优化 12171536.3发酵产品的提取与纯化 12190086.3.1发酵产品提取方法 12116626.3.2发酵产品纯化方法 1298446.3.3发酵产品提取与纯化工艺优化 1227011第7章生物制药 1252527.1生物药物的种类与制备 12324227.1.1种类 12265607.1.2制备 13151397.2生物药物的质量控制与评价 13177487.2.1质量控制 13185267.2.2质量评价 1336767.3生物药物的临床应用与前景 13295037.3.1临床应用 13295497.3.2前景 1411282第8章生物信息学 14177998.1基因组学与蛋白质组学 1487508.1.1基因组学 14306148.1.2蛋白质组学 14168918.2生物信息数据库与分析工具 1473948.2.1生物信息数据库 14205048.2.2生物信息分析工具 15215418.3基因表达谱分析 15293508.3.1实验方法 15194828.3.2数据处理与分析 1516906第9章环境生物技术 15137649.1废水处理与废弃物资源化 1511889.1.1废水处理技术 15229829.1.2废弃物资源化 1654499.2生物脱硫与生物降解 16290459.2.1生物脱硫技术 16129329.2.2生物降解 16106439.3生态修复技术 1694479.3.1污染土壤修复技术 1691729.3.2水体生态修复技术 16238069.3.3空气质量改善技术 16137269.3.4生态系统恢复技术 1628053第10章生物技术的伦理与法规 172191610.1生物技术伦理问题 171163310.1.1伦理问题的内涵 173049710.1.2生物技术伦理原则 172552810.1.3我国生物技术伦理现状与挑战 171879710.2生物技术法规与政策 171550410.2.1生物技术法规体系 171697810.2.2生物技术政策发展 172860710.2.3生物技术法规与政策的完善 172222110.3生物技术的知识产权保护与转让 18443910.3.1生物技术知识产权概述 18653610.3.2生物技术知识产权保护现状 18120310.3.3生物技术知识产权转让与运用 183031610.3.4生物技术知识产权保护与转让的挑战与对策 18第1章绪论1.1生物工程与生物技术概述生物工程与生物技术是20世纪后半叶兴起的一门综合性边缘学科，涉及生物学、生物化学、分子生物学、遗传学、细胞学、微生物学、化学、物理学、数学和计算机科学等多个学科领域。它以生物体或其组成部分为研究对象，运用工程学原理与技术手段，进行生物系统的设计、构建、调控和应用，旨在为人类社会的发展提供可持续的技术解决方案。生物工程主要关注生物过程的设计与优化，包括生物反应器设计、生物过程控制、生物分离与纯化技术等。而生物技术则侧重于生物体或其基因的改造与应用，包括基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程和蛋白质工程等。1.2发展历程与现状生物工程与生物技术的发展历程可以追溯到20世纪50年代，当时科学家们开始研究生物体内的遗传物质DNA，并逐渐揭示其结构与功能。此后，分子生物学、遗传工程等技术的突破，生物工程与生物技术得到了迅速发展。在我国，生物工程与生物技术的研究始于20世纪70年代，经过几十年的发展，已经取得了举世瞩目的成果。目前我国在基因工程、细胞工程、酶工程等领域的研究处于国际先进水平，部分成果已实现产业化。1.3生物工程与生物技术的应用领域生物工程与生物技术的应用领域广泛，涵盖以下几个方面：（1）医药卫生：生物技术在药物研发、基因治疗、疫苗制备、生物制药等方面具有重要作用，为人类健康事业作出了巨大贡献。（2）农业：生物工程与生物技术在转基因作物、生物农药、生物肥料、优良品种选育等方面具有广泛应用，为我国农业现代化提供了有力支持。（3）环境保护：生物技术在污水处理、废气治理、生物修复等方面具有显著效果，有助于解决环境污染问题。（4）食品工业：生物技术在食品加工、食品安全检测、功能性食品开发等方面具有重要应用价值。（5）能源领域：生物工程与生物技术在生物燃料、生物油、生物气等可再生能源的研发与生产中发挥着重要作用。生物工程与生物技术还广泛应用于生物材料、生物信息、生物制造等领域，为我国经济社会发展提供了有力支撑。第2章基因工程2.1基因克隆与重组技术基因克隆是指通过特定的实验方法，获得具有特定基因序列的DNA片段，并在宿主细胞中进行大量复制的过程。基因重组技术则是指将不同来源的DNA片段进行体外连接，构建成新的DNA分子的方法。2.1.1基因克隆的基本步骤（1）提取目的基因：利用限制性内切酶切割含有目的基因的DNA，获得目的基因片段。（2）载体选择与制备：选择适当的载体，如质粒、噬菌体或人工染色体等，并进行适当修饰，使其具备克隆基因的条件。（3）连接目的基因与载体：利用DNA连接酶将目的基因与载体连接，形成重组DNA分子。（4）转化宿主细胞：将重组DNA分子导入宿主细胞，使其在细胞内进行复制和表达。（5）筛选与鉴定：通过特定的筛选方法，从大量转化细胞中筛选出含有重组DNA的细胞，并进行进一步的鉴定。2.1.2基因重组技术的应用基因重组技术在生物工程与生物技术领域具有广泛的应用，如基因功能研究、基因治疗、疫苗研发等。2.2基因编辑技术基因编辑技术是指通过特定酶类对DNA分子进行精确修饰的技术。CRISPR/Cas9系统作为一种高效、简便的基因编辑工具，得到了广泛关注。2.2.1CRISPR/Cas9基因编辑原理CRISPR/Cas9系统由CRISPR序列和Cas9蛋白组成。CRISPR序列是一段含有重复序列的DNA片段，与目标DNA序列互补的向导RNA（gRNA）与Cas9蛋白结合后，引导Cas9蛋白识别并切割目标DNA序列。2.2.2基因编辑技术的应用基因编辑技术在生物工程与生物技术领域具有广泛的应用，如基因功能研究、基因治疗、农业育种等。2.3基因转移与转化技术基因转移与转化技术是指将外源基因导入目标细胞，使其在细胞内表达的技术。2.3.1基因转移技术（1）病毒介导的基因转移：利用病毒载体将外源基因导入宿主细胞。（2）非病毒介导的基因转移：如脂质体介导的基因转移、电穿孔法、基因枪法等。2.3.2基因转化技术基因转化技术主要用于植物细胞，主要包括农杆菌介导的转化、基因枪法、花粉管通道法等。2.3.3基因转移与转化技术的应用基因转移与转化技术在生物工程与生物技术领域具有广泛的应用，如基因治疗、基因工程疫苗、农业育种等。通过这些技术，可以实现对生物体遗传特性的精确调控，为人类健康和农业生产提供重要支持。第3章蛋白质工程3.1蛋白质表达与纯化3.1.1引言蛋白质表达与纯化是生物工程与生物技术领域中的关键环节，对于研究蛋白质的结构、功能及其相互作用具有重要意义。本节主要介绍蛋白质表达与纯化的基本原理及实验操作。3.1.2蛋白质表达系统（1）原核表达系统（2）真核表达系统（3）酵母表达系统（4）昆虫细胞表达系统（5）哺乳动物细胞表达系统3.1.3蛋白质纯化方法（1）亲和色谱法（2）离子交换色谱法（3）凝胶过滤色谱法（4）离心分离法（5）其他纯化方法3.1.4实验操作步骤（1）选择合适的表达系统（2）构建表达载体（3）转化或转染表达宿主细胞（4）诱导蛋白质表达（5）蛋白质纯化（6）蛋白质浓度测定与活性分析3.2蛋白质结构预测与设计3.2.1引言蛋白质结构预测与设计是生物信息学领域的一个重要分支，对于解析蛋白质功能、发觉药物靶点及设计蛋白质类药物具有重要意义。3.2.2蛋白质结构预测方法（1）同源建模法（2）折叠识别法（3）自由建模法（4）蛋白质结构预测评估3.2.3蛋白质设计方法（1）点突变设计（2）片段替换设计（3）蛋白质复合物设计（4）蛋白质稳定化设计3.2.4实验操作步骤（1）收集同源蛋白质序列（2）构建蛋白质模型（3）模型评估与优化（4）蛋白质设计（5）实验验证3.3蛋白质功能研究3.3.1引言蛋白质功能研究是生物科学领域的研究重点，对于揭示生命现象、疾病发生机制以及开发新药具有重要意义。3.3.2蛋白质功能研究方法（1）生物化学方法（2）细胞生物学方法（3）分子生物学方法（4）生物信息学方法3.3.3实验操作步骤（1）蛋白质表达与纯化（2）蛋白质活性分析（3）蛋白质相互作用研究（4）蛋白质功能验证实验（5）蛋白质功能研究案例分析第4章细胞工程4.1细胞培养技术细胞培养技术是生物工程与生物技术领域的重要基础技术之一。本节主要介绍细胞培养的基本原理、方法及其在生物工程中的应用。4.1.1基本原理细胞培养是模拟生物体内环境，在体外为细胞提供适宜的营养、气体、温度和pH等条件，使细胞能够在无菌条件下生长、繁殖的技术。细胞培养的关键在于维持细胞的生长、分化和功能。4.1.2方法（1）原代培养：从组织中分离出细胞，将其置于培养瓶中，在适宜的条件下使其贴壁生长。（2）传代培养：将原代培养细胞进行分离、纯化，然后重新接种至新的培养容器中，继续培养。（3）悬浮培养：将细胞悬浮于液体培养基中，使细胞在摇床上进行三维生长。4.1.3应用细胞培养技术在生物工程领域具有广泛的应用，如药物筛选、病毒疫苗制备、细胞治疗等。4.2细胞融合与杂交技术细胞融合与杂交技术是将两个或多个细胞合并成一个细胞，从而产生具有新特性的细胞。本节主要介绍细胞融合与杂交技术的原理、方法及其应用。4.2.1原理细胞融合与杂交技术基于细胞膜的流动性，通过物理、化学或生物方法诱导细胞融合，使不同细胞间的遗传物质混合，产生具有新特性的细胞。4.2.2方法（1）物理方法：如电融合、振动融合等。（2）化学方法：如聚乙二醇（PEG）诱导融合。（3）生物方法：如利用病毒或细胞融合蛋白诱导融合。4.2.3应用细胞融合与杂交技术在生物工程领域应用广泛，如生产单克隆抗体、制备杂交瘤细胞、基因治疗等。4.3干细胞技术干细胞技术是利用干细胞的自我更新和分化潜能，对其进行分离、培养和诱导分化，以实现细胞替代治疗和疾病模型构建等目的。本节主要介绍干细胞技术的原理、方法及其应用。4.3.1原理干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。根据其来源和分化潜能，可分为胚胎干细胞（ESC）、成体干细胞（ASC）和诱导多能干细胞（iPSC）。4.3.2方法（1）干细胞的分离与纯化：如流式细胞术、磁性细胞分选等。（2）干细胞的培养：如胚胎干细胞培养、成体干细胞培养等。（3）干细胞的诱导分化：如利用化学物质、生长因子和基因工程等方法诱导干细胞分化。4.3.3应用干细胞技术在生物工程领域具有广泛的应用前景，如组织工程、再生医学、疾病模型构建等。干细胞技术还为研究发育生物学和疾病机制提供了重要手段。第5章酶工程5.1酶的来源与筛选酶作为生物催化剂，在生物工程与生物技术领域具有重要作用。本节主要介绍酶的来源及筛选方法。5.1.1酶的来源酶主要来源于微生物、植物和动物。微生物酶具有种类多、产量高、易于培养和遗传改造等特点，是酶工程的主要来源。植物和动物酶则在特定应用领域具有重要价值。5.1.2酶的筛选酶的筛选主要包括以下几个步骤：（1）样品采集：从不同来源的生物体中采集样本，如土壤、水体、植物和动物组织等。（2）菌种分离与纯化：采用平板划线法、液体稀释法等方法对微生物进行分离纯化。（3）初筛：通过观察菌落形态、透明圈大小等特征，初步筛选出具有潜在价值的酶产生菌株。（4）复筛：对初筛获得的菌株进行发酵培养，测定酶活性和稳定性，进一步筛选出高功能的酶。5.2酶的固定化技术固定化酶是将酶与载体结合，形成具有特定功能的固定化酶体系。本节主要介绍酶的固定化技术。5.2.1固定化方法固定化酶的方法主要包括物理吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。（1）物理吸附法：利用载体表面的吸附作用，将酶固定在载体上。（2）共价偶联法：通过酶与载体表面的活性基团发生共价键结合，实现酶的固定化。（3）交联法：利用双功能交联剂将酶分子相互连接，形成网状结构。（4）包埋法：将酶包裹在载体内部，形成固定化酶颗粒。5.2.2固定化酶的性质固定化酶具有以下性质：（1）稳定性：固定化酶的稳定性较游离酶有所提高，可重复使用多次。（2）活性：固定化酶的活性受载体性质、固定化方法和条件等因素影响。（3）选择性：固定化酶对底物具有较好的选择性，有利于提高反应特异性。5.3酶反应器设计与应用酶反应器是酶催化反应的场所，本节主要介绍酶反应器的设计与应用。5.3.1酶反应器设计酶反应器设计应考虑以下因素：（1）反应器类型：根据反应类型和特点，选择合适的反应器类型，如搅拌反应器、固定床反应器等。（2）固定化酶载体：选择适宜的载体材料，提高酶的固定化效果。（3）操作条件：优化反应温度、pH、底物浓度等操作条件，提高酶反应功能。5.3.2酶反应器应用酶反应器在生物工程与生物技术领域具有广泛的应用，主要包括以下几个方面：（1）生物制药：利用酶反应器生产抗生素、激素、疫苗等生物制品。（2）生物催化：利用酶反应器进行有机合成、手性拆分等反应。（3）环境保护：利用酶反应器处理废水、废气等污染物。（4）生物检测：利用酶反应器进行生物传感器、快速检测等应用。第6章发酵工程6.1发酵过程与控制6.1.1发酵过程概述发酵过程是生物工程与生物技术领域的重要组成部分，主要通过微生物在适宜的条件下进行代谢活动，生产各类生物制品。本节将介绍发酵过程的基本原理及关键参数。6.1.2发酵过程中的关键参数发酵过程中的关键参数包括温度、pH、溶氧、转速等。这些参数对微生物的生长、代谢及产物合成具有重要影响。6.1.3发酵过程控制策略为实现高效、稳定的发酵过程，需对关键参数进行精确控制。本节将介绍发酵过程控制策略，包括开环控制、闭环控制及智能控制等。6.2发酵设备与工艺6.2.1发酵设备类型发酵设备主要包括机械搅拌式发酵罐、气升式发酵罐、塔式发酵罐等。本节将介绍各类发酵设备的特点及应用。6.2.2发酵工艺流程发酵工艺流程包括菌种选育、种子培养、发酵、产品提取与纯化等环节。本节将详细阐述发酵工艺流程及其优化方法。6.2.3发酵设备与工艺的优化为提高发酵过程的生产效率，需要对发酵设备与工艺进行优化。本节将介绍发酵设备与工艺的优化方法，如参数优化、设备改造等。6.3发酵产品的提取与纯化6.3.1发酵产品提取方法发酵产品提取方法包括溶剂萃取、水相萃取、超临界流体萃取等。本节将介绍各类提取方法的特点及应用。6.3.2发酵产品纯化方法发酵产品纯化方法主要包括离子交换、凝胶过滤、亲和层析等。本节将阐述这些纯化方法的原理及其在发酵产品中的应用。6.3.3发酵产品提取与纯化工艺优化为提高发酵产品的质量和收率，需要对提取与纯化工艺进行优化。本节将介绍工艺优化方法，如参数调整、工艺组合等。第7章生物制药7.1生物药物的种类与制备生物药物是一类以生物技术为基础，利用生物体或其组成部分作为原料，通过现代生物工程技术制备的药物。其主要种类包括蛋白质药物、抗体药物、基因工程药物、细胞治疗产品等。7.1.1种类（1）蛋白质药物：如胰岛素、生长激素、干扰素等；（2）抗体药物：如利妥昔单抗、曲妥珠单抗等；（3）基因工程药物：如重组人胰岛素、重组人干扰素等；（4）细胞治疗产品：如CART细胞、干细胞治疗产品等。7.1.2制备生物药物的制备过程主要包括以下几个步骤：（1）表达载体的构建：将目的基因插入表达载体，获得重组载体；（2）基因转录与翻译：将重组载体转化至宿主细胞，进行转录与翻译，获得蛋白质产物；（3）蛋白质的纯化：通过离子交换、凝胶过滤等方法对蛋白质进行纯化；（4）蛋白质的修饰与活化：对蛋白质进行糖基化、羟基化等修饰，提高其稳定性和活性；（5）制剂制备：将纯化后的蛋白质与适宜的辅料混合，制备成制剂。7.2生物药物的质量控制与评价生物药物的质量控制与评价是保证药物安全、有效、可控的关键环节。其主要内容包括以下几个方面：7.2.1质量控制（1）原料质量控制：对原料药的纯度、含量、稳定性等指标进行检测；（2）过程质量控制：对生产过程中的细胞库、发酵过程、纯化过程等进行监控；（3）制剂质量控制：对制剂的外观、含量、纯度、稳定性等指标进行检测。7.2.2质量评价（1）安全性评价：对药物的毒理学、免疫原性等进行评价；（2）有效性评价：通过药理学、药代动力学等试验，评价药物的疗效；（3）质量控制评价：对药物的质量标准、检测方法等进行评价。7.3生物药物的临床应用与前景生物药物在临床上的应用范围广泛，涉及内分泌、肿瘤、心血管等多个领域。生物技术的不断发展，生物药物在医药领域的地位日益重要。7.3.1临床应用（1）肿瘤治疗：如抗体药物、细胞治疗产品等在肿瘤治疗中的应用；（2）免疫系统疾病治疗：如生物制剂在类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等疾病的治疗；（3）遗传性疾病治疗：如酶替代疗法在罕见遗传性疾病的治疗。7.3.2前景生物技术的不断进步，生物药物的研发和生产将更加高效、经济。未来生物药物的发展方向包括：（1）个性化治疗：根据患者基因型、病情等制定个体化治疗方案；（2）联合用药：多种生物药物的联合使用，提高疗效；（3）新型生物药物研发：如抗体药物偶联物（ADC）、细胞治疗产品等。第8章生物信息学8.1基因组学与蛋白质组学基因组学是研究生物体整个基因组的结构与功能的一门学科，它关注基因组水平上的基因组成、排列顺序、表达调控以及与表型的关联。蛋白质组学则致力于研究生物体内所有蛋白质的表达、修饰、结构及其相互作用。本节将重点介绍基因组学与蛋白质组学的基本概念、研究方法及其在生物信息学中的应用。8.1.1基因组学基因组学研究主要包括基因组测序、基因注释、比较基因组学等方面。基因组测序技术发展迅速，已从第一代Sanger测序发展到第三代单分子测序技术。基因注释是对基因组序列进行功能预测的过程，涉及到基因预测、转录本预测、蛋白质功能预测等。比较基因组学通过对不同物种基因组的比较分析，揭示基因组演化、基因家族扩张与收缩等现象。8.1.2蛋白质组学蛋白质组学研究主要包括蛋白质表达谱分析、蛋白质相互作用网络、蛋白质结构预测等方面。蛋白质表达谱分析技术有二维凝胶电泳、质谱等，可对蛋白质的表达水平、翻译后修饰等进行定量分析。蛋白质相互作用网络有助于揭示生物体内蛋白质的功能与调控机制。蛋白质结构预测则有助于理解蛋白质功能与疾病的关系。8.2生物信息数据库与分析工具生物信息数据库与分析工具是生物信息学研究的核心资源，为科研人员提供大量的生物数据及分析方法。本节主要介绍常用的生物信息数据库和分析工具。8.2.1生物信息数据库生物信息数据库包括基因组数据库、蛋白质数据库、表达谱数据库等。基因组数据库如NCBI的GenBank、Ensembl等，收录了大量的基因组序列及其注释信息。蛋白质数据库如UniProt、ProteinDataBank（PDB）等，提供了蛋白质序列、结构等信息。表达谱数据库如GEO（GeneExpressionOmnibus）、ArrayExpress等，收录了各种基因表达数据。8.2.2生物信息分析工具生物信息分析工具包括序列比对工具、基因预测工具、系统发育分析工具等。序列比对工具如BLAST、ClustalOmega等，用于比较生物序列的相似性。基因预测工具如GeneMark、Augustus等，可对基因组序列进行基因预测。系统发育分析工具如MEGA、PhyML等，用于构建生物物种之间的进化关系。8.3基因表达谱分析基因表达谱分析是研究生物体在不同生理、病理状态下基因表达变化的重要手段。本节主要介绍基因表达谱的实验方法、数据处理与分析技术。8.3.1实验方法基因表达谱实验方法主要包括基于杂交技术的微阵列（Microarray）和基于测序技术的转录组测序（RNASeq）。微阵列实验通过荧光标记的样本与基因芯片杂交，检测基因表达水平。RNASeq则利用高通量测序技术，对转录本进行定量分析。8.3.2数据处理与分析基因表达谱数据处理与分析主要包括数据预处理、差异表达基因筛选、功能富集分析等。数据预处理包括原始数据质控、背景校正、标准化等。差异表达基因筛选通常采用统计方法如t检验、FDR等。功能富集分析可揭示差异表达基因在生物学功能、信号通路等方面的特点。通过以上分析，研究者可以深入挖掘生物信息学数据，揭示基因表达调控机制，为生物工程与生物技术的研究提供有力支持。第9章环境生物技术9.1废水处理与废弃物资源化9.1.1废水处理技术本节主要介绍废水处理的基本原理、技术方法及其在生物工程与生物技术领域的应用。内容包括物理、化学和生物方法在废水处理中的应用，重点讨论活性污泥法、生物膜法等生物处理技术的工艺流程及其优化。9.1.2废弃物资源化本节主要探讨废弃物资源化的技术手段，包括厌氧消化、好氧消化等方法在生物质能、有机肥等方面的应用。同时分析废弃物资源化过程中的关键技术问题及其解决方案。9.2生物脱硫与生物降解9.2.1生物脱硫技术本节重点介绍生物脱硫技术的原理、工艺及其在环境保护领域的应用。内容包括微生物脱硫、生物过滤法等生物脱硫技术的机理研究，以及生物脱硫技术在煤炭、石油等行业的应用案例。9.2.2生物降解本节主要阐述生物降解技术的原理、方法及其在环境治理中的应用。包括有机污染物、塑料等难降解物质的生物降解途径，以及生物降解技术在土壤修复、水体治理等方面的应用。9.3生态修复技术9.3.1污染土壤修复技术本节主要介绍污染土壤修复的基本原理、技术方法及其在生物工程与生