细胞间管理规范

细胞间管理实施条例一层流1。进入细胞间换鞋(肺科要求换鞋两次)，或穿戴鞋套。2。穿白大褂，戴口罩帽子，戴手套,手套喷75％酒精。3。任何试剂、耗材及物品用75%酒精消毒，擦干净表面灰尘后方可进入细胞间。4．即使只是瞬间拿试剂等操作，只要进入细胞间，必须穿衣戴帽.5.细胞间要求每天紫外照射灭菌,30min以上。二生物安全柜的使用紫外照射20-30分钟灭菌.酒精灯酒精不能低于最低刻度标尺，及时补充。酒精灯按程序灭活，记得重复开盖再盖好，防止爆炸.使用完毕清理废液缸，擦桌面，所有移液枪调回最大值,任何培养皿,管子不得留置于安全柜中。使用过后除清理超净台,还要清理真空泵,瓶内体积不能超过2/3.注意真空泵不带滤膜，所以用后必须清理，清洗过程如下：结束实验时，用真空泵吸入75％的酒精，去除并清洗管子的液体.将真空泵内液体倾倒进废液收集桶,用清水涮洗。用酒精内外喷释壁，加入少量84消毒液，放置原处。预约（1)门口登记本预约,请合理估计使用时间进行预约。若约了后又不用,请及时擦除。（2）上一个使用完毕的同学,清理超净台,紫外照射，进行正计时。(3）若提早用完，如果方便请口头通知下一位同学。8:00HHH9:00

表示从8：01分开始，到9：59分结束，包括自己照台的时间.如果约台后超过45分钟未使用,后面约台的同学或未约台的同学可直接使用.三配液及公共试剂分装配液及公共试剂分装必须遵循节约的原则，严禁浪费。细胞间公共液体将分配到个人进行分装。FBS：刘银Glutamine:刘海玲TE：李子依、吴秋P/S：蒋征负责试剂分装的同学,应及时检查分装试剂的库存，及时订购该试剂。当分装试剂不足时，其他同学有必要提醒该试剂负责人进行分装.细胞所需培养试剂及血清尽量避免反复冻融。培养液分装后用抗酒精笔标记。配液操作及分装操作必须严格执行30分钟紫外消毒，配液及分装公共试剂前禁止一切其他操作.每人独立使用自己的培养基，PBS，必须标明姓名、开启及配制日期。所有自己配制的培养基要标明：试剂名称,姓名，日期.所有试剂培养基都要用封口膜封好.四值日原则上每周一人值日，同学之间也可以自行组合，两两一组,值日时间相应增长。不能够保证值日生每天等到最后一名同学做完实验离开，所以，每天最后一名离开实验室的同学，有义务处理不能过夜的垃圾等。每周一交班擦桌子，及柜子表面。清空所有垃圾桶。处理废旧橡皮筋。加满75％酒精桶和95%酒精桶。检查84消毒液的用量。处理病毒垃圾（每周1-2次)。补充枪头盒，EP管盒及其它耗材，并及时订购缺少的耗材。通知下一组值日同学，下一组值日同学可检查上一组完成情况，若没达到相关要求可拒绝接班,并可投诉至陈嘉瑜处。每天及时清洁垃圾筐，固体垃圾及液体垃圾在细胞间不过夜。最后一名做实验的同学在值日生不在的情况下，有义务进行垃圾清理。清理空枪头盒收纳箱，一般内容物最好不要超过2/3.及时添加新的枪头盒,EP管盒及其它耗材。及时添加酒精喷壶内的75%酒精,若75%酒精桶或95%酒精桶内的酒精用完也需及时配置并添加。值日同学负责检查耗材,通知相关负责人进行耗材的订取。请值日同学认真完成相关工作,为大家创造良好实验环境。由于值日工作量较大，也请其他同学能自觉维护细胞间的整洁，不要乱扔枪头，及时捡起地上杂物.如发现相关耗材的缺少,可提醒值日同学进行添加。五大扫除大扫除时,跟随张帆老师实验室同时进行，时间为每周4下午6点30分。原则上，在肺科做实验的都应加入。1清理桌面及仪器外部（包括桌面，冰箱,培养箱，超净台，离心机）2超净台内部清洁3清理冰箱旧冰4水浴锅，刷烧杯5鞋架，刷鞋底6刷洗真空泵玻璃瓶7离心平衡管对整齐,包括内容水的刻度校准8地面杂物，包括超净台的脚支架的清洁,及冰箱、培养箱后面的死角9换新的白大褂10扫地，吸尘，拖地(包括超净台底下，培养箱后，冰箱后面）11照紫外30min.通风1小时12更换病毒处理桶的耗材,并查看84消毒液情况六病毒处理:病毒污染的耗材统一放入84消毒液浸泡处理（盖底分离），病毒液倒入收集罐加入84消毒液。培养皿盖如未被污染无需进行消毒。对于医用注射器,请拔出助推器后进行浸泡处理。不要简单的吸入消毒液，造成以后处理还需将液体推出.每周大扫除时将其捞出，依普通实验垃圾处理。浸泡桶每月至少更换1次新鲜84消毒液.病毒实验较多时,相应增加更换84消毒液的次数.七细胞间其它注意事项显微镜使用:观察细胞时，短暂离开,可将光源调制最暗，使用过后将电源关闭。晚上最后离开的同学请注意检查显微镜开关，并将电源关闭。培养基相关：培养液及其它试剂用完后及时放入冰箱，不要过夜放置在外。放入水浴锅加热的培养液等均需写上名字。瓶装培养液母液如DMEM、1640等需写明瓶盖打开人,打开时间，是否公用等信息。个人配置和使用的瓶装液体，也需写明拥有人，配置时间。配置完后请尽快使用，减少浪费.不用的液体请及时处理，不要占用公用空间。培养箱相关：开培养箱时，禁止对培养箱说话培养操作过程中有液体洒出随手就擦干细胞间内外门不能同时开，及时关闭出口处的门。干净的dish集中于储物箱中，一条未用完,请勿开行新的.及时清理计数板，不能过夜