兽医传染病学 布氏杆菌病

布鲁氏菌病（Brucellosis）1一、概述本病简称布病，是由布氏杆菌引起的一种人畜共患急性或慢性传染病，其特征是侵害生殖系统和关节，引起流产、不育及多种组织器官的炎症、坏死及肉芽肿。人布病又称地中海弛张热，马尔他热，波浪热或波状热，在家畜中，牛、羊、猪最常发生，且可传染给人和其它家畜。21814年Burnet首先描述“地中海弛张热”，1860年Marston对本病作了系统描述，且把伤寒与地中海弛张热区别开。1886年Bruce在马尔他岛从死于“马尔他热”的士兵脾脏中分离出“布鲁氏菌”，首次明确了该病的病原体。1897年Hughes根据本病的热型特征，建议称“波浪热”。后来，为纪念Bruce，学者们建议将该病取名为“布氏菌病”。1897年Wright与其同事发现病人血清与布鲁氏菌的培养物可发生凝集反应，称为Wright凝集反应，从而建立了迄今仍用的血清学诊断方法。我国古代医籍中对本病虽有描述，但直到1905年Boone于重庆对本病作正式报道。3本病广流行于世界各国，危害严重。我国目前在人、畜间仍有发生，给畜牧业和人类健康带来严重危害。我国东北和西北流行严重，主要是羊型、牛型和人型，广东、广西主要为猪型，内地多为牛、羊型.城郊多为奶牛感染。对郑州部分奶牛作本病调查，检出阳性病牛多头，病人2例，均有典型症状。近年有下降趋势。许多发达国家已无本病。4一、病原1.分类本病病原为布氏杆菌属，本菌主要有A、M抗原，制备单价A、M抗原可鉴别菌种。下分6个种，种下有生物型：马尔他布氏菌

英国，3个生物型主要是山羊、绵羊，其它动物次之(羊布氏菌)。有M、A抗原，两者之比为1∶20牛流产布氏菌丹麦，9个生物型，主要是牛，其它动物次之(牛布氏菌)。以A抗原为主，A与M之比为20∶15猪布氏菌

美国，5个生物型，主要是猪，其它次之。A与M之比为2:1绵羊布氏菌

新西兰，1个生物型，主要是绵羊，其它动物无。沙漠森林(沙林)鼠布氏菌

美国，1个生物型，主要是鼠犬布氏菌美国，1个生物型，主要是犬上述种和生物型的划分只是以宿主及致病性不同为依据，其他方面如形态、培养特性方面则无显著差异。人几乎对所有种均易感。6本菌DNA中的G+C含量为55-58%，单链DNA分子与同源DNA单链分子杂交率为100%，与异源单链DNA分子杂交率为80%以上(布鲁氏菌属内的细菌)。用核酸限制性内切酶消化布鲁氏菌DNA，牛种、羊种、犬种菌的电泳图谱较一致，但与绵羊附睾菌种有一定差别。通过对微孔蛋白基因（Omp2）的消化长度多肽性分析表明，6个菌种布氏菌的图谱差异可作为鉴别指标之一。7菌株间毒力差异布鲁氏菌不产生外毒素，但有毒性较强的内毒素。不同菌株间毒力差异较大羊布鲁氏菌毒力最强猪布鲁氏菌次之牛布鲁氏菌较弱。各型布鲁氏菌虽有其主要的宿主动物，但普遍存在宿主转移现象。82.形态特征0.5×1-2µm小型球杆状细菌，有荚膜，无芽孢，偶尔可见两极着色，在病料中单个或成丛存在，G-

93.体内分布特点存在于流产胎儿、胎衣、乳房及淋巴系统中，并随胎儿、胎衣、乳汁、尿液等排出。只是在发病初期和刚流产后才出现在血液中引起菌血症，平时则局限在生殖器官附近的淋巴结中及肝、脾、骨髓等组织器官中。布氏菌是典型的胞内寄生菌，可在巨噬细胞(Mφ)及上皮细胞内生存、繁殖，从而逃避宿主免疫系统及其药物的作用。104.培养布鲁氏菌为需氧菌，对营养要求较高，生长最佳温度为37℃，pH值为6.6-7.4

，初代分离培养时，需在含血清或马铃薯浸液等培养基中才能较好发育，生长缓慢，7-14d或更长时间长出肉眼可见的圆形菌落；多次继代培养后，24-72h即可长出菌落。在血液琼脂上形成圆形、灰白色、隆起的不溶血小菌落；在马铃薯琼脂斜面上2-3d后长出水溶性微棕色菌苔。115.抵抗力对外界环境抵抗力不强，对温热敏感，一般消毒药物均可将其杀灭。但在流产胎儿和组织中可存活数月（乳、毛、肉等）。胞外菌对链、庆大、卡那霉素敏感，对青霉素不敏感。12三、流行病学1.易感动物几乎所有的动物都易感，最易发病的是羊、牛，猪、鹿及人。试验动物中豚鼠，小鼠和鸽最易感，家兔次之。人对各型菌的易感性依次为羊型、猪型、牛型。女性比男性易感，青壮年比幼、老龄易感。132.传染源患病及带菌动物，特别是受感染孕畜，其流产及分娩时排泄大量病原造成污染，传播本病。对人来讲，羊是最危险的传染源，牛是主要传染源，猪是散发性布病传染源。在美国猪是主要传染源,我国则为羊、牛、猪。布氏杆菌病可由直接接触受染动物的分泌物和排泄物，饮用未经消毒的牛奶、羊奶或食入含有活的布氏杆菌的奶制品（如黄油和奶酪）而引起。罕有人与人间传播者。本病以农村较多，是肉制品加工者、兽医、农民和牧民的职业病。143.传播途径和方式

多途径、多方式传播，可经消化道(最常见)、呼吸道、皮肤、粘膜感染、交配。人有80-90﹪为皮肤感染。吸血昆虫（蜱的叮咬，在蜱体内存活时间较长）也是重要的传播媒介。呼吸道感染者多为皮毛工人及实验室人员。15人感染布病的传染途径牧民接羔为主要传染途径，兽医为病畜接生也极易感染。剥牛羊皮、剪打羊毛、挤乳、切病畜肉、屠宰病畜、儿童玩羊等均可受染，病菌从接触处的破损皮肤进入人体。实验室工作人员常可由皮肤、黏膜感染细菌。进食染菌的生乳、乳制品和未煮沸病畜肉类时，病菌可自消化道进入体内。病菌也可通过呼吸道黏膜、眼结膜和性器官黏膜而发生感染。164.流行特点在动物中本病有一定的季节性，主要发生于产仔季节。人则表现为职业性。新疫区及初次怀孕感染者表现为流产，老疫区及流产后再次怀孕时表现胎衣不下17传染源及传播途径18三、发病机理侵入——淋巴结——被吞噬——胞内繁殖——原发病灶——再次进入血液——菌血症——临诊症状，同时又被吞噬——再次菌血症——散布至各组织器官——败血症或毒血症；同时随粪、尿排出。少数动物可清除病原体不引起病变，细菌常在48h内死亡，而大多数则通常终生带菌，生存于单核吞噬系统及乳房。进入绒毛膜上皮增殖，产生胎盘炎，并使绒毛渐进性坏死，产生纤维素性脓性分泌物，胎儿胎盘与母体胎盘松离，发生流产。在绒毛膜与子宫黏膜间扩散，致子宫内膜炎。进入胎衣、胎儿引起病变。流产胎儿消化道及肺可分离出布菌，其他组织通常则无菌。主要是细菌本身，而无毒素19抵抗力低而早期大量感染时，则流产发生于妊娠早期，反之，常见晚期流产甚至正常分娩。蛋白外衣保护它在胞内生存并传染全身，可逃避免疫系统而长期生存。赤藓醇（erythritol）是布菌的有力生长刺激物，雄性生殖器也含有赤藓醇，这就解释了睾丸内传染局限化。布鲁氏菌利用赤藓醇优先于利用葡萄糖，说明雄性及妊娠母畜生殖系统中赤藓醇的存在，使细菌得到大量繁殖，在流产后的子宫内，布鲁氏菌存在时间不长，数日后消失，这可以解释为赤藓醇只有在妊娠子宫中才大量存在。20四、症状潜伏期短者2周，长者半年以上。除人外，本病为慢性或隐性感染居多，因此没有特征症状，虽然流产、关节炎、不孕症等均为可见症状，但与其它因素引起的这类症状无明显不同。有意义的是流产多发生怀孕后期。21四、症状1.流产牛、猪、羊最容易看到的症状是流产，但既无特异性，也非必然性。主要表现神郁、食减、起卧不安，外生殖道及乳房发炎，表现肿胀、潮红、粘膜上有粟粒状结节，并排出淡黄、灰白、灰褐色、粘脓性污浊分泌物，2-3天后产出死胎或弱胎。流产后排出暗红、灰白色粘液，腥臭。牛多发生在孕后6-8个月，羊多在3-4个月，猪多在1-3个月。22【布病】母牛流产，产出发育不完全的胎儿，全身肿胀，有出血斑23化脓性子宫内膜炎，子宫出现粟粒性病变(在黏膜深层)24252.胎衣滞留、子宫内膜炎流产过或慢性感染的动物往往发生胎衣滞留，多见于羊和牛，特别是山羊，而猪很少发生胎衣滞留。因胎衣滞留而易引起子宫内膜炎，牛还可发生子宫蓄脓，很难治愈，即或治愈，也多失去繁殖能力。3.乳房炎主要见于牛和羊，轻者仅表现产奶数量及质量下降，严重者表现乳房肿、硬，产奶停止。后者尤甚。26胎衣滞留,子宫内膜炎↘↓274.睾丸炎除马外，其他雄性动物均可发生2829北美驯鹿5.关节炎牛羊多见，病畜关节肿胀疼痛，特别是后肢。30膝、腕等关节炎、滑膜囊炎，偶见鞘膜炎316.人类症状本病是《传染病防制法》规定的乙类病，已波及160多个国家和地区。病畜是主要传染源，经消化道或皮肤和黏膜伤口传染。临诊表现复杂，有急性、亚急性和慢性之分。32急性和亚急性者有菌血症，体温呈波浪热或长期低热、寒战、盗汗、全身不适；关节炎、神经痛；肝、脾、淋巴结肿大。慢性则睾丸炎、附睾炎、卵巢炎、输卵管炎及子宫内膜炎等，孕妇可能流产。慢性者通常无菌血症，但可持续多年。有些短期急性发作后可康复，有的则反复发作；33皮肤感染伤口感染全身感染34五、病理变化主要是胎儿胎衣和母体子宫的变化，各种动物基本相同。1.胎儿病理变化皮下、粘膜下浆膜下胶样浸润，浆膜上有纤维蛋白，胸腔、腹腔也有纤维蛋白，并有淡或暗红色积液，胃中有微黄或白色粘液和絮状物；消化道、膀胱粘膜及其它组织有不同程度出血点；肝、脾、淋巴结肿大并有坏死灶。胎死时间较长，则可见干尸胎即木乃伊。35五、病理变化——1.胎儿病理变化皮下、粘膜下浆膜下胶样浸润，浆膜上有纤维蛋白，胸腔、腹腔也有纤维蛋白，并有淡或暗红色积液，胃中有微黄或白色粘液和絮状物；消化道、膀胱粘膜及其它组织有不同程度出血点；肝、脾、淋巴结肿大并有坏死灶。胎死时间较长，则可见干尸胎即木乃伊。36五、病理变化——2.胎衣有黄色胶冻样物，被覆纤维蛋白或脓汁，有时水肿、变厚、并有出血点。37五、病理变化——3.母体子宫绒毛膜充血、肿大、覆有黄绿色渗出物，腥臭难闻；粘膜发炎、肿胀、覆有脓汁，子宫增厚如皮革状，输卵管水肿。母猪少见上述子宫变化，主要表现粘膜表面有许多小结节，内含干酪样物或脓汁。人的病变特点是全身各组织器官均可产生增生性炎症。383940牛胎衣停滞，分娩后胎衣未排出(母牛分娩后经过8~12小时仍排不出胎衣。正常情况下，母牛在分娩后3~5小时即可排出胎衣。)4142六、诊断1.流行病学与临床诊断2.细菌学诊断涂片镜检细菌的分离鉴定(危险)动物接种3.血清学诊断4.鉴别诊断伪狂犬病、乙型脑炎、钩端螺旋体病、衣原体病、沙门氏菌病等。43诊断重点应放在微生物学与免疫学诊断上采样：最好采集整个胎儿，或单取其胃（肠），要扎紧。母畜胎衣、子宫分泌物、乳汁，局部脓肿液。44动物试验

最易感动物为豚鼠，接种两只豚鼠，腹腔或皮下接种10-20天后，心脏采血作血清凝集试验，如滴度在1:5以上，可判阳性，阴性豚鼠继续培养，4周后采血做血清凝集试验，然后扑杀，无细菌分离出，只要有一只豚鼠的滴度在1:5以上，可诊断为布鲁氏菌病。45血清学试验方法很多，各有利弊，我国规定用试管凝集，平板凝集和补反试验无疫牛群用乳环状试验羊群则多作变态反应。46⑴血清凝集试验操作简便、应用广泛。①试管凝集试验我国生产的布鲁氏菌凝集抗原，是按联合国世界卫生组织和粮农组织布鲁氏菌病专家委员会规定的标准标定的，可用凝集价来表示被检血清所含的凝集素单位。47最近几年对城市奶牛和进出口牛的布鲁氏菌检疫则严格按照国际兽疫局（1982）规定的标准进行，即未接种过布鲁氏菌苗的牛，血清凝集价必须少于30IU/ml才认为阴性，3-

6月龄时接种过布鲁氏菌苗的牛，凝集价必须少于80IU/ml方认为阴性。48对未出现过布鲁氏菌病的场，凝集出现阳性，则隔3～4周重检，如血清凝集（素）价未上升，则宣布该场为布鲁氏菌病检验为“－”。如重检时血清凝集价上升，除隔离、消毒外，仍作分离培养，有待于进一步确诊。过去发生过布鲁氏菌病的场，作凝集试验，如1:100，则定为“+”，如1:50++，3～4周检查出阳性，则予以淘汰。49②平板凝集试验在平板凝集试验中，抗原0.03ml。0.08ml血清量的反应相当于试管法中的1:25血清稀释液的反应，0.04ml相当于1:50，0.02ml相当于1:100，0.01ml相当于1:200。在0.02ml量中的凝集反应判为阳性，在0.04ml中出现反应的判为可疑。50⑵全乳环状试验加1滴经苏木紫（或四氮唑红色）染色的环乳抗原，振荡放37℃水浴箱1小时，观察，如出现红色（四氮唑）蓝色（苏木紫）则为“+”。51影响因素：①奶酸度，酸度高，不反应。②观察迟，假阳性出现。③抗原太浓，敏感度降低，太淡，敏感度又偏高。52ELISA(EnzymeLinkedImmunosorbentAssay)

MilkRingTest(antibodydetectioninmilk)

53⑶补体结合试验补体结合试验，操作复杂。牛感染布鲁氏菌，通常在10-20天出现补体结合反应。①接种19号菌苗的牛，凝集反应消失较晚（注射后9个月尚未完全消失），补体结合反应消失较早（注射后3个月变为阴性或可疑）。②自然感染的牛与此不同，凝集反应与补体结合反应经常相伴出现。54⑷变态反应羊、猪：布鲁氏菌水解素，经被检动物尾根皮内注射，或肘关节皮肤较薄部位注射，24、48小时观察，有无发热，肿胀而判断。部分病牛康复后，相当长时期内仍保持阳性变态反应，因此根据变态反应实行防制措施时，将有一部分已康复的牛被当作病牛处理。55免、检、杀!七、防制1.检疫淘汰凝集试验每年进行1-2次检疫，淘汰阳性动物，使之净化。在未感染畜群中，控制本病传入的最好办法是自繁自养，必须引进种畜或补充畜群时，要严格执行检疫，即将牲畜隔离饲养两个月，同时进行布鲁氏菌病的检查，全群两次免疫生物学检查为阴性者，才可以与原有牲畜接触。清净的畜群，还应定期检疫（至少每年一次），一经发现，即应淘汰，也可将查出的阳性畜隔离饲养，继续利用，阴性者作为假定健康畜继续观察检疫，经1年以上无阳性（初期1个月检查1次，2-3次后，可6个月检查1次）出现者，且已正常分娩，即可认为是无病牛群。562.培育健康畜群在检疫的基础上，利用人工哺乳方法建立健康畜群，尤其适合于奶牛，培养健康畜群最好从幼畜着手，由犊牛培育健康牛群，可以与培养无结核病牛群结合进行，即病牛所产犊牛立刻隔离，用母牛初乳人工饲喂5-10d，此后喂以健康牛乳或巴氏灭菌乳，在第5、9个月各进行l次免疫生物学检查，全部阴性时即可认为健康犊牛。培养健康羔羊群则在羔羊断乳后隔离饲养，一个月内做2次免疫生物学试验，如有阳性除淘汰外再继续检疫一个月，至全群阴性，则可认为健康羔羊群。仔猪在断乳后即隔离饲养，第2、4月龄各检验一次，如全为阴性即可视为健康仔猪。573.疫苗接种布鲁氏菌病的免疫是以细胞免疫为主，其保护宿主抵抗流产布鲁氏菌的细胞免疫作用机理是：特异的T细胞与流产布鲁氏菌抗原反应，产生淋巴因子，提高了巨噬细胞活性，从而消除了细胞内的细菌。国际上多用活苗，如牛19号苗、羊菌RevI苗，也有使用灭活苗的，如牛流产45/20苗和羊菌53H38苗等。我国主要使用猪2号弱毒活苗和羊5号弱毒活苗。猪2号弱毒活苗（简称S2苗）是我国选育的一种优良菌苗。对山羊、绵羊、猪和牛都有较好的免疫效力。毒力稳定，使用安全，免疫力好，饮水、口服和气雾免疫已经收到良好效果。可注射、饮水或气雾，间隔一个月免疫2次，可保护两年以上。羊5号弱毒活苗（简称M5苗）也是我国选育的，可用于绵羊、山羊、牛和鹿的免疫。羊5号苗气雾免疫已获成功。58流产19号苗效果良好，但免疫谱窄，对绵羊免疫力差，对山羊和猪无免疫力，还引起流产，我国已停止生产。疫苗本应只给免疫生物学检查阴性牲畜接种，但牧区受实际条件限制，通过实验，在羊群中不检验即进行布鲁氏菌病的免疫接种，已收到较好的效果。应当指出的是，各种弱毒活苗对人仍有一定毒力，因此有关人员应做好自身防护。对狗布鲁氏菌感染尚未研究出有效疫苗。人的预防要注意职业性感染，凡在养殖、屠宰、加工厂工作者及兽医、实验室人员须严守防护制度，尤其产仔季节更要注意；乳肉食品须灭菌后食用；必要时可皮上划痕接种104－M苗，每年一次。接种前应进行变态反