医学检验项目流程作业指导书

医学检验项目流程作业指导书TOC\o"1-2"\h\u31430第1章医学检验项目概述 4268411.1检验项目的分类与意义 4269501.1.1生化检验项目 4289281.1.2血液学检验项目 4174101.1.3免疫学检验项目 4155781.1.4微生物学检验项目 5111161.1.5分子生物学检验项目 521301.1.6其他检验项目 571681.2检验项目的选择与评估 5136441.2.1病情需要 5128221.2.2检验项目的敏感性和特异性 5206331.2.3检验方法 5106491.2.4成本效益 5264851.2.5患者意愿 5245741.2.6检验结果的解释和临床应用 531224第2章标本采集与处理 649812.1标本采集的基本原则 6312762.1.1合理性 6123352.1.2标准性 611802.1.3及时性 6176982.1.4安全性 698842.1.5舒适性 6173412.2常见标本类型及采集方法 6265262.2.1血液标本 626602.2.2尿液标本 6138942.2.3粪便标本 6306422.2.4咽拭子标本 679742.2.5痰液标本 6299002.3标本的运输与处理 787732.3.1运输 759632.3.2处理 726070第3章血液学检验 7162683.1血常规检验 7142943.1.1检验目的 7323573.1.2标本采集 775263.1.3检验方法 796103.1.4参考范围 7261353.1.5结果解读 7164343.2血型鉴定与交叉配血 7108913.2.1检验目的 8239873.2.2标本采集 864153.2.3检验方法 897763.2.4参考范围 8184623.2.5结果解读 8126903.3血液凝固功能检验 8179033.3.1检验目的 870043.3.2标本采集 854983.3.3检验方法 8251213.3.4参考范围 832233.3.5结果解读 822435第4章生化检验 9256384.1肝功能检验 9201914.1.1检验项目 947004.1.2标本采集 9244734.1.3检验方法 922284.1.4结果解读 948984.2肾功能检验 9312414.2.1检验项目 9113734.2.2标本采集 9130324.2.3检验方法 935034.2.4结果解读 974594.3血糖、血脂检验 1041254.3.1检验项目 1043814.3.2标本采集 1016724.3.3检验方法 10272504.3.4结果解读 1010726第5章免疫学检验 10171255.1传染病免疫学检验 10263735.1.1概述 1035165.1.2检验项目 10325115.1.3检验方法 11243045.2自身免疫性疾病免疫学检验 11143745.2.1概述 11176205.2.2检验项目 1129505.2.3检验方法 1141435.3肿瘤标志物检验 11233365.3.1概述 1114925.3.2检验项目 11245075.3.3检验方法 113640第6章微生物学检验 12123746.1基本微生物检验技术 12232066.1.1样本采集与运送 1275326.1.2微生物分离与纯化 12299336.1.3微生物染色技术 1282266.1.4微生物生化试验 1255776.2细菌鉴定与药敏试验 12270566.2.1细菌鉴定方法 12162166.2.2药敏试验原理 12149646.2.3药敏试验操作步骤 12174896.2.4药敏试验结果报告 1299446.3病毒检验 12270986.3.1病毒分离与培养 13246426.3.2病毒核酸检测 133046.3.3病毒血清学检测 1327236.3.4病毒基因序列分析 1332645第7章血清学检验 13111057.1感染性疾病血清学检验 1335097.1.1样本收集与处理 13257777.1.2检验项目 1358307.1.3检验方法 1322037.2自身免疫性疾病血清学检验 13213307.2.1样本收集与处理 13105547.2.2检验项目 133277.2.3检验方法 14143377.3肿瘤标志物血清学检验 14129627.3.1样本收集与处理 1451207.3.2检验项目 14130757.3.3检验方法 1410114第8章分子生物学检验 14173228.1基因扩增技术 14305948.1.1概述 1494688.1.2原理 14234858.1.3方法 15274888.1.4应用 1531878.2基因测序与基因分型 15138828.2.1概述 15233168.2.2原理 15272418.2.3方法 15218668.2.4应用 15208208.3分子生物学检验在临床诊断中的应用 15202268.3.1病原体检测 16187278.3.2遗传性疾病诊断 16273558.3.3肿瘤分子诊断 16225968.3.4个性化医疗 16203988.3.5疾病风险评估 1617651第9章组织病理学检验 16172229.1组织制片技术 1671269.1.1取样与固定 1635209.1.2脱水与透明 1688719.1.3包埋 16193749.1.4切片 16251699.1.5粘片与烤片 17200839.2组织染色技术 1726569.2.1常规染色 17256779.2.2特殊染色 17167299.2.3免疫组化染色 17281399.3组织病理诊断 17206109.3.1诊断依据 1755109.3.2诊断步骤 17202449.3.3诊断报告 1723498第10章质量控制与实验室安全 172047610.1实验室质量控制 17437910.1.1质量控制原则 172830010.1.2质量控制措施 171791810.1.3质量控制记录 181479710.2实验室生物安全 182140810.2.1生物安全原则 181518810.2.2生物安全措施 182607610.2.3意外处理 183219910.3实验室废物处理与环境保护 183128010.3.1废物处理原则 182263910.3.2废物处理措施 18907510.3.3环境保护 19第1章医学检验项目概述1.1检验项目的分类与意义医学检验项目根据其检测对象、目的和性质可分为以下几类：1.1.1生化检验项目生化检验项目主要针对人体血液、尿液等生物样本中的各种生化指标进行检测。这类检验项目对于评估器官功能、诊断疾病、监测治疗效果等方面具有重要意义。1.1.2血液学检验项目血液学检验项目涉及血液细胞的数量、形态、成分等方面的检测。通过这些检验项目，可以诊断血液系统疾病、感染性疾病、肿瘤等。1.1.3免疫学检验项目免疫学检验项目主要针对人体免疫系统及其相关指标进行检测，包括病毒、细菌、真菌等病原微生物及其抗体、细胞因子等。这类检验项目对于诊断感染性疾病、自身免疫性疾病等具有重要价值。1.1.4微生物学检验项目微生物学检验项目主要针对病原微生物进行检测，包括细菌、病毒、真菌等。通过这些检验项目，可以为感染性疾病的诊断、治疗和预防提供依据。1.1.5分子生物学检验项目分子生物学检验项目利用分子生物学技术，针对基因、DNA、RNA等分子水平进行检测。这类检验项目在遗传性疾病、肿瘤、感染性疾病等方面具有较高的诊断价值。1.1.6其他检验项目其他检验项目包括细胞学检验、尿液检验、粪便检验等，它们在诊断相应疾病方面具有一定的辅助作用。1.2检验项目的选择与评估在选择和评估医学检验项目时，应考虑以下几个方面：1.2.1病情需要根据患者的病情、症状、体征以及相关病史，选择具有针对性的检验项目，以提高诊断准确性。1.2.2检验项目的敏感性和特异性选择敏感性高、特异性强的检验项目，以提高检测结果的可靠性。1.2.3检验方法了解不同检验方法的优缺点，选择操作简便、结果稳定、重复性好的方法。1.2.4成本效益在保证检验质量的前提下，考虑检验项目的成本效益，合理配置医疗资源。1.2.5患者意愿尊重患者意愿，充分沟通，保证患者理解和接受检验项目。1.2.6检验结果的解释和临床应用检验结果应结合患者的具体病情进行解释，为临床诊断、治疗和预防提供有力支持。通过以上方面的综合考虑，合理选择和评估医学检验项目，为患者提供高效、准确的诊断服务。第2章标本采集与处理2.1标本采集的基本原则2.1.1合理性标本采集应基于临床诊断和治疗需求，选择合理的检验项目，避免不必要的检验。2.1.2标准性严格按照国家及行业标准进行标本采集，保证采集过程规范、准确。2.1.3及时性采集标本应及时送达实验室，保证检验结果准确可靠。2.1.4安全性在标本采集过程中，应遵循无菌操作原则，保证患者和医护人员的安全。2.1.5舒适性在标本采集过程中，尽量减轻患者的不适感，提高患者的配合度。2.2常见标本类型及采集方法2.2.1血液标本（1）静脉血采集：选择合适的静脉，采用无菌穿刺法采集静脉血。（2）动脉血采集：选择合适的动脉，采用无菌穿刺法采集动脉血。（3）毛细血管血采集：采用指尖或耳垂等部位，用无菌消毒针刺破皮肤，采集毛细血管血。2.2.2尿液标本采集晨起第一次尿液，充分混匀后，用无菌容器收集。2.2.3粪便标本采集粪便标本时，应避免尿液、卫生纸等杂质污染，用无菌容器收集。2.2.4咽拭子标本采用无菌长棉签，在患者咽部轻轻擦拭，将采集到的分泌物置于无菌试管中。2.2.5痰液标本指导患者深呼吸后，用力咳嗽，收集痰液于无菌容器中。2.3标本的运输与处理2.3.1运输（1）运输过程中，应保持标本的稳定，避免剧烈晃动。（2）根据标本类型，选择适当的运输温度和湿度，保证标本质量。2.3.2处理（1）收到标本后，应及时进行登记、核对信息，保证无误。（2）按照实验室检验项目的要求，对标本进行预处理，如离心、分离血清等。（3）在规定时间内完成检验，保证检验结果的准确性。（4）对检验后的标本进行妥善处理，防止交叉感染和环境污染。第3章血液学检验3.1血常规检验3.1.1检验目的血常规检验旨在评估患者血液中的红细胞、白细胞、血小板等主要血细胞数量及形态，为临床诊断提供重要依据。3.1.2标本采集采集静脉血23ml，置于含有EDTAK2的抗凝管中，充分混合。3.1.3检验方法采用自动血液分析仪进行检测，对红细胞、白细胞、血小板等参数进行计数和分类。3.1.4参考范围具体参考范围如下（成年男性及女性）：（1）红细胞计数：4.05.5×10^6/μl；（2）白细胞计数：4.010.0×10^3/μl；（3）血小板计数：150400×10^3/μl。3.1.5结果解读根据检验结果，分析红细胞、白细胞、血小板等参数的异常情况，结合患者临床症状，为临床诊断提供参考。3.2血型鉴定与交叉配血3.2.1检验目的血型鉴定旨在确定患者的ABO血型和Rh血型，交叉配血用于检测患者血清中是否存在与供血者红细胞发生凝集反应的抗体，以保证输血安全。3.2.2标本采集采集静脉血23ml，置于干燥管中。3.2.3检验方法采用玻片法或微柱法进行血型鉴定；交叉配血采用盐水介质法和酶介质法。3.2.4参考范围ABO血型分为A型、B型、AB型、O型；Rh血型分为Rh阳性和Rh阴性。3.2.5结果解读根据血型鉴定结果，确定患者血型；交叉配血结果阴性表示可以输血，阳性则表示不能输血。3.3血液凝固功能检验3.3.1检验目的血液凝固功能检验用于评估患者血液凝固和纤溶系统的功能，为诊断出血性疾病和血栓性疾病提供依据。3.3.2标本采集采集静脉血23ml，置于含有枸橼酸钠的抗凝管中，充分混合。3.3.3检验方法采用凝固法、发色底物法、免疫学法等对PT、APTT、TT、FIB、D二聚体等指标进行检测。3.3.4参考范围具体参考范围如下（成年男性及女性）：（1）PT：1114秒；（2）APTT：2535秒；（3）TT：1421秒；（4）FIB：24g/L；（5）D二聚体：00.5mg/L。3.3.5结果解读根据检验结果，分析血液凝固功能指标的变化，结合患者临床症状，为临床诊断和治疗提供参考。第4章生化检验4.1肝功能检验4.1.1检验项目肝功能检验主要包括丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）等指标。4.1.2标本采集采集空腹静脉血，采血时应避免溶血、凝血等影响检验结果的因素。4.1.3检验方法采用自动化生化分析仪进行检测，严格按照仪器操作规程进行。4.1.4结果解读（1）丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）升高，提示肝细胞受损；（2）碱性磷酸酶（ALP）升高，可能与胆道阻塞、骨骼疾病等相关；（3）总胆红素（TBIL）和直接胆红素（DBIL）升高，提示肝脏代谢和排泄胆红素的能力下降。4.2肾功能检验4.2.1检验项目肾功能检验主要包括血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、尿酸（UA）、内生肌酐清除率（Ccr）等指标。4.2.2标本采集采集空腹静脉血，采血时应避免溶血、凝血等影响检验结果的因素。4.2.3检验方法采用自动化生化分析仪进行检测，严格按照仪器操作规程进行。4.2.4结果解读（1）血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）升高，提示肾功能受损；（2）尿酸（UA）升高，可能与痛风、肾脏疾病等相关；（3）内生肌酐清除率（Ccr）降低，提示肾小球滤过功能减退。4.3血糖、血脂检验4.3.1检验项目血糖、血脂检验主要包括空腹血糖（FPG）、餐后2小时血糖（2hPG）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）等指标。4.3.2标本采集采集空腹静脉血，采血时应避免溶血、凝血等影响检验结果的因素。4.3.3检验方法采用自动化生化分析仪进行检测，严格按照仪器操作规程进行。4.3.4结果解读（1）空腹血糖（FPG）和餐后2小时血糖（2hPG）升高，提示糖尿病；（2）总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）升高，提示血脂异常；（3）高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）降低，低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）升高，提示心血管疾病风险增加。第5章免疫学检验5.1传染病免疫学检验5.1.1概述传染病免疫学检验是对各类传染病进行诊断、监测和免疫效果评价的重要手段。本节主要介绍常见传染病的免疫学检验方法。5.1.2检验项目（1）乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）检测（2）乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）检测（3）乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）检测（4）乙型肝炎病毒e抗体（HBeAb）检测（5）乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）检测（6）丙型肝炎病毒抗体（AntiHCV）检测（7）人类免疫缺陷病毒抗体（AntiHIV）检测（8）梅毒螺旋体抗体（AntiTreponemapallidum）检测（9）淋球菌抗体（AntiNeisseriagonorrhoeae）检测5.1.3检验方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光法（IFA）、化学发光免疫分析法（CLIA）等方法进行检测。5.2自身免疫性疾病免疫学检验5.2.1概述自身免疫性疾病免疫学检验是对自身免疫性疾病进行诊断、分型和监测病情活动程度的重要手段。本节主要介绍常见自身免疫性疾病的免疫学检验方法。5.2.2检验项目（1）抗核抗体（ANA）检测（2）抗双链DNA抗体（AntidsDNA）检测（3）抗磷脂抗体（Antiphospholipid）检测（4）抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）检测（5）抗平滑肌抗体（ASMA）检测（6）抗线粒体抗体（AMA）检测（7）抗Ro/SSA和抗La/SSB抗体检测5.2.3检验方法采用间接免疫荧光法（IIF）、ELISA、CLIA等方法进行检测。5.3肿瘤标志物检验5.3.1概述肿瘤标志物检验是对肿瘤进行早期发觉、诊断、疗效评价和预后评估的重要手段。本节主要介绍常见肿瘤标志物的检验方法。5.3.2检验项目（1）甲胎蛋白（AFP）检测（2）癌胚抗原（CEA）检测（3）糖类抗原199（CA199）检测（4）糖类抗原125（CA125）检测（5）前列腺特异性抗原（PSA）检测（6）人绒毛膜促性腺激素（hCG）检测5.3.3检验方法采用ELISA、CLIA、放射免疫测定法（RIA）等方法进行检测。第6章微生物学检验6.1基本微生物检验技术6.1.1样本采集与运送本节主要介绍微生物检验中样本的正确采集、保存及运送方法，保证样本中微生物的存活与完整性。6.1.2微生物分离与纯化介绍微生物分离与纯化的基本方法，包括平板划线法、液体稀释法等，以及不同微生物的适宜培养条件。6.1.3微生物染色技术阐述微生物染色技术的原理及操作方法，包括革兰氏染色、抗酸染色等，以助于微生物的观察与初步鉴定。6.1.4微生物生化试验介绍微生物生化试验的基本原理，包括糖发酵试验、氧化还原试验等，用于鉴定微生物的代谢特征。6.2细菌鉴定与药敏试验6.2.1细菌鉴定方法本节阐述细菌鉴定的常用方法，包括表型鉴定、分子生物学鉴定等，以提高细菌鉴定的准确性。6.2.2药敏试验原理介绍药敏试验的基本原理，包括微量肉汤稀释法、纸片扩散法等，用于检测细菌对不同抗生素的敏感性。6.2.3药敏试验操作步骤详细描述药敏试验的操作步骤，包括制备菌液、接种、贴药敏纸片、培养及结果判读等。6.2.4药敏试验结果报告介绍药敏试验结果的报告方法，包括敏感、中介、耐药等，以及不同抗生素的药效分类。6.3病毒检验6.3.1病毒分离与培养阐述病毒分离与培养的基本方法，包括细胞培养、鸡胚接种等，以及病毒生长的观察与鉴定。6.3.2病毒核酸检测介绍病毒核酸检测的常用方法，如PCR、实时荧光定量PCR等，以提高病毒检测的敏感性和特异性。6.3.3病毒血清学检测阐述病毒血清学检测的原理及方法，包括免疫荧光、酶联免疫吸附试验等，用于检测病毒感染及其免疫反应。6.3.4病毒基因序列分析介绍病毒基因序列分析的原理及操作流程，包括基因扩增、序列测定、生物信息学分析等，为病毒变异监测提供技术支持。第7章血清学检验7.1感染性疾病血清学检验7.1.1样本收集与处理在感染性疾病血清学检验中，应严格按照规范收集患者静脉血样本。样本收集后，应及时离心分离血清，并避免溶血、污染等影响检验结果的因素。7.1.2检验项目感染性疾病血清学检验主要包括以下项目：1）病毒感染：如乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒等；2）细菌感染：如沙门氏菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌等；3）其他微生物感染：如支原体、衣原体、立克次体等。7.1.3检验方法感染性疾病血清学检验主要采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光技术（IFT）、免疫印迹（Westernblot）等方法。7.2自身免疫性疾病血清学检验7.2.1样本收集与处理自身免疫性疾病血清学检验的样本收集与处理同7.1.1节。7.2.2检验项目自身免疫性疾病血清学检验主要包括以下项目：1）抗核抗体（ANA）；2）抗双链DNA抗体（antidsDNA）；3）抗磷脂抗体（APA）；4）抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）等。7.2.3检验方法自身免疫性疾病血清学检验主要采用间接免疫荧光法（IIF）、ELISA、免疫印迹等方法。7.3肿瘤标志物血清学检验7.3.1样本收集与处理肿瘤标志物血清学检验的样本收集与处理同7.1.1节。7.3.2检验项目肿瘤标志物血清学检验主要包括以下项目：1）甲胎蛋白（AFP）；2）癌胚抗原（CEA）；3）糖类抗原199（CA199）；4）糖类抗原153（CA153）；5）前列腺特异性抗原（PSA）等。7.3.3检验方法肿瘤标志物血清学检验主要采用ELISA、电化学发光免疫分析法（ECLIA）、放射免疫测定法（RIA）等方法。第8章分子生物学检验8.1基因扩增技术8.1.1概述基因扩增技术是一种重要的分子生物学技术，通过对特定DNA序列进行大量复制，从而实现对目标基因的检测和分析。本节主要介绍聚合酶链反应（PCR）的基本原理及其在医学检验中的应用。8.1.2原理基因扩增技术基于DNA双链复制原理，利用DNA聚合酶、引物和四种脱氧核苷酸，对目标DNA序列进行大量复制。8.1.3方法（1）PCR反应体系的建立：包括模板DNA、引物、dNTPs、DNA聚合酶等组分的添加和优化。（2）PCR反应程序：包括变性、退火、延伸等步骤的设置和循环次数的确定。（3）PCR产物的检测：通过琼脂糖凝胶电泳、荧光定量等方法对PCR产物进行分析。8.1.4应用基因扩增技术在医学检验领域具有广泛的应用，包括病原体检测、遗传性疾病诊断、肿瘤分子诊断等。8.2基因测序与基因分型8.2.1概述基因测序和基因分型是分子生物学检验的重要组成部分，通过分析个体的基因序列和基因型，为临床诊断和疾病研究提供重要信息。8.2.2原理基因测序：采用高通量测序技术，对DNA分子进行测序，获得个体的基因序列信息。基因分型：通过对特定基因位点的分析，确定个体的基因型，从而评估其遗传特征。8.2.3方法（1）基因测序：包括Sanger测序、Illumina测序、IonTorrent测序等。（2）基因分型：包括PCRRFLP、PCRSSP、基因芯片等方法。8.2.4应用（1）基因测序：在肿瘤个体化治疗、新生儿遗传性疾病筛查等领域具有重要作用。（2）基因分型：在疾病风险评估、药物基因组学、免疫遗传学等方面具有广泛应用。8.3分子生物学检验在临床诊断中的应用8.3.1病原体检测分子生物学检验技术可快速、准确地检测病原体，如病毒、细菌、真菌等，为临床诊断和治疗提供依据。8.3.2遗传性疾病诊断通过基因测序和基因分型，可发觉遗传性疾病的致病基因，为临床诊断和治疗提供重要参考。8.3.3肿瘤分子诊断分子生物学检验技术可检测肿瘤相关基因的突变和表达水平，为肿瘤的早期诊断、预后评估和个体化治疗提供依据。8.3.4个性化医疗基于个体基因差异，分子生物学检验技术可指导药物治疗方案的选择，实现个性化医疗。8.3.5疾病风险评估通过分析遗传因素，分子生物学检验技术可用于评估个体患某些疾病的风险，为预防策略的制定提供依据。第9章组织病理学检验9.1组织制片技术9.1.1取样与固定组织样本在取得后应立即进行固定处理，以保持其原有结构和抗原性。固定液通常选用10%中性缓冲甲醛溶液，固定时间为1224小时。9.1.2脱水与透明固定后的组织样本需经过脱水处理，使用梯度酒精进行脱水，最后进行透明处理，以便于切片。透明剂一般选用二甲苯。9.1.3包埋将脱水和透明的组织样本嵌入包埋剂中，形成组织块，以便于切片。常用的包埋剂有石蜡和聚乙二醇。9.1.4切片使用切片机将组织块切成薄片，厚度一般为46微米。切片应平整、无皱褶、无刀痕。9.1.5粘片与烤片将切好的组织切片粘贴于载玻片上