结核病EC试验操作方法

结核EC皮肤试验及操作方法定义：人体在没有活动性结核病临床证据的情况下，出现由结核分枝杆菌抗原引起的人体免疫反应的一种持续性感染状态。健康人感染后：˜1、1%-2%的接触者发生临床结核病；˜2、约1/3成为LTBI；约5%-10%的LTBI一生中发展为活动性结核病人；3、在HIV感染者中结核病年发病率达到10%，一生中结核病的发病率为50%。

一般说LTBI诊断缺乏“金标准”结核潜伏感染结核感染诊断方法方法0102结核菌素试验（PPD）：假阳性可能性大，特别是NTM。γ干扰素释放试验（T-SPOT.TB)：需要实验室条件支撑，价格昂贵。抗原抗体检测：方法和设备的不同导致敏感度和特异度不同。0304重组结核杆菌融合蛋白（EC）：敏感度高、特异度强、操作简单。重组结核杆菌融合蛋白（EC）：是通过基因工程方法表达MTB特异的ESAT-6和CFP-10两种蛋白的融合蛋白。这两种蛋白在卡介苗菌株中缺失，诱导特异的迟发型变态反应，对潜伏性结核感染和菌阴肺结核的诊断具有重要意义，不受卡介苗的影响。概

念一、操作方法二、结果测量与判读三、不良反应的处理目

录一、操作方法76月龄及以上婴儿、儿童及65周岁以下成人。病原性阴性肺结核的临床辅助诊断。皮试结果不受卡介苗（BCG）接种和非结核分枝杆菌感染的影响，对儿童结核病诊断具有更好的诊断价值。适用对象8患急性传染病（如麻疹、百日咳、流行性感冒、肺炎等）、急性眼结合膜炎、急性中耳炎；有多种药物过敏反应史、癔症史者；患有全身性皮肤病；临床医生判定暂不适合进行EC皮肤试验的其它情况。禁忌症9一次性注射器（1ml规格，4-5号针头）

75%酒精及消毒棉签EC试剂

便携式冰桶或冰包经计量标定的测量卡尺

红色和黑色记号笔EC测试记录表

健康教育材料应急处理器材及药品等物品准备0.1%盐酸肾上腺素

尼可刹米、洛贝林地塞米松或氢化可的松琥珀酸钠

5%~10%葡萄糖溶液/生理盐水抗组胺类药物（

盐酸异丙嗪或苯海拉明

）

氧气简易呼吸器

气管插管用物气管切开包抢救药品及用物101、2~8℃冷藏保存。2、现场使用时，放在便携式冰桶或冰包中存放，但西林瓶不可直接放在冰上或泡在冰水中EC的保存111、在室内光线充足的环境下2、但避免在日光直接照射的地方进行操作操作环境12操作前准备确认受试者信息、询问健康状况，排除禁忌证。忌与卡介苗和其他生物制品同时注射。核对试剂名、剂量规格、批号及有效期，如有沉淀、瓶身破损及过期者不得使用，注射时应记录批号。检查试剂外观。重组结核杆菌融合蛋白（EC）试剂为无色澄明液体，无不溶物或杂质，如有颜色改变、沉淀、西林瓶破损等不得使用；过期试剂不得使用。操作者洗手并戴手套。13注射部位选择前臂掌侧中下1/3交界处，避开疤痕、血管和皱褶。如近期（2周内）做过EC皮肤试验，则选择在第一次注射部位斜上方3-4cm处，或取另一手臂。14操作步骤75%酒精消毒螺旋形消毒皮肤，直径5cm，待干。1ml注射器抽取0.1ml

EC。使注射器刻度和针尖斜面一致向上。托住受试者的前臂并绷紧皮肤。将针尖平放在绷紧皮肤上，稍向下压，与皮肤呈5°-10°（几乎平行）。针尖斜面刺入部分后，沿表皮平行进入，至不见针孔即可。一手固定针头，一手推药，缓慢准确地注射0.1ml（含5UEC）。注射完毕，以边旋转90度边后退方式拔针。15操作步骤注射后产生直径约6-10mm大小可见白色圆形隆起的皮丘（橘皮样小丘），并显露毛孔，边界清楚。16操作后告知告知受试者，保持注射局部干燥、清洁，不要在注射部位洗、擦，特别注意避免衣服袖口在注射局部的摩擦。告知受试者局部出现瘙痒、红肿、水泡时的处理方法。告知受试者在注射后48~72小时返回看结果（如不能返回看结果，告知受试者按照标准方法摆放测量卡尺拍摄照片传给操作者或者指定人员）。嘱受试者原地休息，观察30分钟后，如无不适方可离开，如出现不适需及时进行处理。17注意事项试剂打开30分钟未用完，或抽取超过30分钟，应当废弃。废弃方法按照医疗废物有关规定执行。一人一针，注射器和针头一次性使用后按医疗废弃物处理，不可作其他注射之用。合并有严重疾病、急性发热性疾病者使用本品请遵医嘱。二、结果测量和判读19观察时间于注射后48-72小时检查注射部位反应以48小时观察结果最佳20结果查验注意事项光线要充足，避免光线直接照射影响视线。看反应时，衣袖要解开，胳膊稍弯曲使肌肉放松，保证看反应的标准性。看反应前，应先找到针眼，以免误将未注射手臂当作阴性反应处理。反应明显者，可直接标记测量，反应不明显者，需用食指轻轻抚摸后测量。21红晕、硬结的测量端平被注射者手臂。见到红晕时，用红色记号笔标记红晕横径和纵径测量点，用食指轻轻触摸注射部位，找到硬结边缘，用黑色记号笔标记硬结横径和纵径测量点，最后用刻度尺测量红晕和硬结的横径及纵径的毫米（mm）数。22结果判读1、以红晕或硬结平均直径大者为判断标准。2、反应平均直径：（横径+纵径）/2

≥

5mm

为阳性反应。如：（16+20）/2=18mm。3、不论反应平均直径大小，凡有水泡、坏死、淋巴管炎者均属强阳性反应。23记录记录以下内容：（1）重组结核杆菌融合蛋白（EC）试剂信息：批号、有效期；受试者使用同一个批号和相同的有效期，登记在同一页上，如更换新的批号，另换新的一页；受试者信息：姓名、性别、年龄，受试者联系方式；注射信息：注射时间（应精确到小时）、注射人员签名（为受试者进行注射的医疗卫生保健人员）；查验反应信息：查验反应时间（精确到小时）、结果：包括红晕、硬结大小（记录横径和纵径）、皮肤强反应需要分别记录水泡、溃疡、坏死、淋巴管炎等；查验反应人员签名等。24结果记录

表3.1EC-ST检查记录表

试剂批号：有效期：序号姓名性别年龄（周岁）注射时间（月日时）红晕/硬结直径（横径*纵径，mm）水泡/溃疡/坏死/淋巴管炎查验反应时间（月日时）受试者联系电话注射人员签名查验反应人员签名

红晕16×20

水泡

25假阳性反应1、假阳性反应是指机体进行皮肤试验EC试验时应该为阴性结果，但受多种因素的影响，使检测结果成为阳性，该阳性称为假阳性反应。2、可能的原因有：同一部位重叠试验（复强作用）；皮肤紫外线照射；测量误差。26假阴性反应假阴性反应是指机体已受结核分枝杆菌感染，进行EC试验应该为阳性结果，但受多种因素的影响，使检测结果成为阴性。可能的原因有：机体处于变态反应窗前期：机体在感染结核分枝杆菌后4~8周内，细胞免疫尚未建立，这段时间称为“变态反应窗前期”。重症结核病患者：如血行播散性结核病、结核性脑膜炎、干酪性肺炎患者，因传递免疫作用的致敏淋巴细胞减少，可使变态反应暂时受到抑制。病毒感染或急性传染病患者，如：AIDS（艾滋病）、麻疹、猩红热、伤寒、水痘、腮腺炎、风疹、病毒性肝炎等。结节病、肿瘤、营养不良等，影响机体免疫系统功能受损等情况。27影响因素在人体皮肤试验中，有许多因素可能削弱或者增强EC试验的反应强度。故在进行EC试验的操作和结果判断时，要注意避免受到各种因素的影响。28导致试验结果减弱的因素个体因素微生物感染：病毒感染，如麻疹、腮腺炎、水痘等；细菌感染，如伤寒、布鲁氏菌病、重症结核病等；霉菌感染，如南美芽生菌等；活病毒疫苗预防接种，如麻疹、脊髓灰质炎疫苗等；代谢紊乱，如慢性肾炎；营养不良，如严重蛋白质缺乏；淋巴系统疾病，如霍奇金病、淋巴瘤、结节病等；药物，如皮质类固醇、免疫抑制剂等；年龄，如新生儿、老年人；应激状态，如外科手术、烧伤、精神病患者、移植物抗宿主反应等。29导致试验结果减弱的因素试剂的影响试剂生产质量不符合质量要求；试剂没有在冷藏条件运输和保存，化学变性；试剂过期使用等。30导致试验结果减弱的因素注射和查验反应的影响注入剂量不足0.1mL（5U）；西林瓶开启后放置时间超过30分钟，抽入针管后放置时间超过30分钟；注射时暴露在强阳光下进行操作；查验反应的技术不熟练、不标准，特别是触摸硬结时用力过重或过清；

查验反应后记录错误等。31导致试验结果增强的因素复强作用：复强作用系指已经致敏的机体第二次进行皮肤试验时，反应较第一次增强。这种现象可发生在第一次皮试后1周，或最迟至数月或若干年以后发生，可发生在任何年龄。为避免复强作用可能产生的影响，如需要在近期内重复进行试验时，应选择不同手臂或同一手臂的不同部位进行注射。32阳性反应的意义温度：与常温比较，皮试处加温可使EC试验阳性率及强阳性率增加，从而影响观察结果。因此在做EC试验时要嘱咐受试者72小时内皮试部位不要用温热水浸泡。月经周期：研究显示月经周期内做试验可使阳性率增加，在女性受试者试验阳性时应注意此因素。三、不良反应及处理局部出现水泡、坏死、淋巴管炎。水泡的发生率为3.82%，坏死的发生率为0.06%，淋巴管炎的发生率为3.26%局部强阳性反应二次皮试全身反应主要为发热，局部反应主要为注射部位瘙痒、疼痛，发生率较第一次皮试未见明显增加二次皮试安全性注射部位瘙痒，(＜12.84%)；常见：瘀点(＜4.17%)、注射部位痛（＜1.04%）局部不良反应发热（＜2.08%）、乏力（＜1.28%）、疼痛（＜3.13%）、尿蛋白检出（＜1.04%）全身不良反应不良反应不良反应全身不良反应：发热、头痛、乏力：轻度无需特殊处理，高热者对症处理，并做好观察，头痛、乏力一般可以自行缓解。过敏反应：全身皮肤瘙痒，部分可出现皮疹，极少数出现过敏性休克，可服用抗组胺药；过敏性休克，需及时抢救，必要时皮下注射0.1％肾上腺素0.5-1.0ml不良反应处理局部不良反应：红肿、硬结不需处理，水泡、溃疡、坏死及淋巴管炎应做适当处理；

水泡：小水泡保持局部清洁、干燥，避免抓挠；大水泡，用空针将水泡内液体抽出，保持局部清洁，用消毒纱布包扎，以免污染。溃疡或坏死：保持局部清洁，涂擦外用地塞米松（0.05%）或肤轻松软膏（0.025%），并覆盖无菌纱布，以防感染。

淋巴管炎：患肢限制活动，早期可热敷缓解症状。

病灶反应：个别患者会发生反应性病灶周围炎，一周内可自行消退。

注射部位瘙痒和疼痛：对发生注瘙痒者，可用0.5%碘伏棉签擦拭，告诫病人勿抓、挠，出现疼痛，不必特殊处理不良反应处理

不含酒精消毒液消毒

注射器将水泡戳破

棉签将渗出液擀压

局部敷利福平粉剂利福平既是一线抗结核药，又是广谱抗生素，所以首选利福平局部皮肤护理时间06-02（敷1次）创面大小22x22mm局部情况坏死处水泡干瘪，触之即痛时间06-05（敷3次）创面大小13x12mm局部情况表皮褪去，不痛时间06-03（敷2次）创面大小17x17mm局部情况水泡全部干瘪，按压疼痛时间06-07（敷4次）创面大小10x10mm局部情况结痂，不痛效果对比PPD检测EC检测临床意义--未接种卡介苗或接种后阴转，未感染MTB+-卡介苗接种后维持阳性，未感染MTB+/-+感染MTB两者双臂对照临床意义EC+PPD的联合检