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第2节微生物的培育技术及应用第2课时微生物的选择培育和计数[基础检查]1.含氨苄西林的LB培育基在基因工程中有很重要的应用。该培育基能杀死一切不抗氨苄西林的细菌,只有对氨苄西林具有抗性的细菌才能正常生长繁殖。由其作用可知该培育基是一种()A.固体培育基 B.合成培育基C.自然培育基 D.选择培育基解析:该培育基由于含有氨苄西林,能杀死一切不抗氨苄西林的细菌,只有对氨苄西林具有抗性的细菌才能正常生长繁殖,即氨苄西林起到了选择作用。因此,该培育基是一种选择培育基。答案:D2.若要通过稀释涂布平板法分别纯化土壤中的微生物,其正确操作步骤是 ()①土壤取样②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,制备1×10倍稀释的土壤稀释液③吸取0.1mL土壤稀释液进行平板涂布④依次将土壤稀释液稀释为1×102、1×103、1×104、1×105、1×106、1×107倍稀释的溶液A.①②③④ B.①③②④C.①②④③ D.①④②③解析:稀释涂布平板法分别纯化土壤中微生物的正确操作步骤为:土壤取样;称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,制备1×10倍稀释的土壤稀释液;依次将土壤稀释液稀释为1×102、1×103、1×104、1×105、1×106、1×107倍稀释的溶液;吸取0.1mL土壤稀释液进行平板涂布。答案:C3.下列关于分别培育某种微生物的试验的叙述,正确的是 ()A.倒平板时为防止培育基溅到皿盖上,应打开培育皿将皿盖放到一边B.接种时为防止杂菌污染,接种前将涂布器在酒精中浸泡灭菌C.若菌液浓度过高无法得到单菌落,则须要稀释后再进行涂布D.接种后,将涂布器灼烧灭菌后,马上放入盛有酒精的烧杯中解析:倒平板时,不能打开培育皿并把皿盖放到一边,以免被微生物污染;接种时为防止杂菌污染,接种前应将涂布器灼烧灭菌;若菌液浓度过高无法得到单菌落,则须要稀释后再进行涂布;接种后,将涂布器灼烧灭菌,待冷却后再放入盛有酒精的烧杯中。答案:C4.用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时 ()①可以用相同的培育基②都须要运用接种环进行接种③都须要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A.①② B.③④ C.①③ D.②④解析:平板划线法或稀释涂布平板法都运用固体培育基,可以运用相同的培育基,①正确;平板划线法采纳接种环进行操作,而稀释涂布平板法采纳涂布器进行操作,②错误;纯化时,要进行无菌操作,须要在火焰旁接种,避开空气中的微生物混入培育基,③正确;平板划线法一般用于分别而不是计数,④错误。答案:C5.下列关于微生物分别和培育的叙述,错误的是()A.微生物培育基中加入牛肉膏和蛋白胨可以同时供应碳源和氮源B.测定土壤样品中的活菌数目,常用平板划线法C.培育基不肯定都运用高压蒸汽灭菌D.以尿素作为唯一氮源的培育基可以分别得到能分解尿素的细菌解析:牛肉膏和蛋白胨的主要成分是蛋白质,含有碳、氮元素,可以为微生物同时供应碳源和氮源;测定土壤样品中的活菌数目,常用稀释涂布平板法;培育基一般运用高压蒸汽灭菌,也可以采纳微孔滤膜过滤除菌;以尿素作为唯一氮源的培育基为选择培育基,只有能分解尿素的细菌才能在该培育基上生长繁殖。答案:B6.用稀释涂布平板法测定微生物数量时,统计到的菌落数与实际活菌数的关系是 ()A.菌落数等于或大于实际活菌数B.菌落数等于或小于实际活菌数C.菌落数大于或小于实际活菌数D.菌落数等于实际活菌数解析:采纳稀释涂布平板法获得的菌落有可能是由一个或多个细胞形成的,所以统计到的菌落数往往等于或小于实际的活菌数。答案:B7.用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目时,在某稀释度下某同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数,最接近样品中菌体数真实值的是 ()A.菌落数最多的平板 B.菌落数最少的平板C.菌落数适中的平板 D.若干个平板菌落数的平均值解析:用稀释涂布平板法对样品中活菌数进行统计,只是一种估测,依据此方法的过程可知,在某一稀释度下涂布的平板活菌数具有肯定的偶然性,并不是肯定匀称的,所以若干个平板菌落数的平均值比较接近样品中活菌数的真实值。答案:D8.下列培育基中,能选择出分解尿素的细菌的是()A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水解析:在以尿素为唯一氮源的培育基中,只有能合成脲酶的细菌才能在该培育基中生长,而且欲将分解尿素的细菌分别出来,培育基的配方中应加有凝固剂和碳源。答案:A9.某同学利用稀释涂布平板法进行土壤微生物的数量测定,该同学首先将得到的1mL土壤样液稀释100倍,然后取0.1mL稀释液匀称地涂布在培育基表面,重复3个平板,在相宜条件下培育一段时间后,3个平板上的菌落数分别为71、73和75。下列叙述错误的是 ()A.可得出该土壤样液中活菌数大约为7.3×107个/LB.此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低C.一般选择菌落数在30~300的平板进行计数D.显微镜干脆计数法统计的都是稀释液中活菌数解析:稀释涂布平板法一般选用菌落数为30~300的平板进行计数,故稀释100倍的菌落数分别为71、73和75的每升土壤溶液中的活菌数为(71+73+75)÷3÷0.1×100×1000=7.3×107(个);由于两个或多个细胞可能形成一个菌落,因此统计的菌落数往往比实际的活菌数目低;显微镜干脆计数法统计的都是稀释液中全部微生物个体的数目,包括死菌。答案:D10.图甲是稀释涂布平板法中的部分操作,图乙是平板划线法的操作结果。下列叙述中错误的是 ()甲乙A.图甲中,涂布前要将涂布器灼烧,冷却后才能涂布菌液B.对于浓度较高的菌液,假如稀释倍数仅为1×102,那么,所得的菌落不肯定是由单一的细胞或孢子繁殖而成C.图乙的培育皿中所得的菌落都是目的菌落,无须进行进一步的鉴定筛选D.图乙中连续划线的起点是上一次划线的末端解析:图甲中,涂布前要将涂布器灼烧,冷却后才能进行涂布操作,否则会杀死菌种;对于浓度较高的菌液,稀释倍数仅为1×102,由于稀释倍数不够,所得菌落也可能是多个细胞连在一起,会导致所得的菌落不肯定由单一的细胞或孢子繁殖而成;图乙中所得菌落不肯定都是目的菌落,须要进一步的鉴定筛选;在划线时,每次划线应当从上一次划线的末端起先。答案:C11.某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物汲取和利用。请分析回答下列问题。(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,缘由是前者能产生。分解尿素的细菌不能以CO2作为碳源,但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是

(答出两点即可)。

(2)为了筛选出能分解尿素的细菌,在配制培育基时,应选择(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的缘由是

(3)用来筛选分解尿素细菌的培育基中含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用是

(答出两点即可)。

解析:(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,缘由是前者能产生分解尿素的脲酶。分解尿素的细菌不能以CO2作为碳源,但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是为细胞生命活动供应能量,为其他有机物的合成供应原料。(2)为了筛选出能分解尿素的细菌,在配制培育基时,应选择尿素作为唯一氮源,不选择其他两组的缘由是能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用。(3)用来筛选分解尿素细菌的培育基中含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用是为细菌生长供应无机盐,还可以作为缓冲剂使细胞生长过程中pH保持稳定。答案:(1)脲酶为细胞生命活动供应能量,为其他有机物的合成供应原料(2)尿素能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用(3)为细菌生长供应无机盐,作为缓冲剂使细胞生长过程中pH保持稳定[拓展应用]12.用来推断选择培育基是否起到了选择作用的比照是 ()A.未接种的选择培育基B.未接种的牛肉膏蛋白胨培育基C.接种了的牛肉膏蛋白胨培育基D.接种了的选择培育基解析:将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培育基上生长的菌落数目应明显多于选择培育基上的数目,因此牛肉膏蛋白胨培育基是比照组。比照试验遵循的原则是单一变量,所以牛肉膏蛋白胨培育基须要与选择培育基一样接种、培育。答案:C13.为验证“手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多”的真假,某科学小组利用微生物培育技术进行试验,过程及结果如下。下列叙述错误的是 ()A.该试验采纳稀释涂布平板法接种B.该试验不须要设置比照组C.该试验运用的培育基应含有水、碳源、氮源和无机盐D.两个结果不同,可能是因为取样环境不同解析:该试验的接种方法为稀释涂布平板法;该试验须要设置空白比照,以体现培育基是否被污染和被污染的程度,以确保试验过程的牢靠性;微生物培育基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐;不同环境中的细菌数目不同,题图所示结果不同的缘由可能是取样环境不同。答案:B14.右上图表示从土壤中分别能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的试验过程。下列与该试验相关的叙述错误的是 ()A.试验中所用的培育基①②③④均属于选择培育基B.图中过程Ⅰ、过程Ⅱ实现了对目标微生物的稀释C.统计培育基⑤中的菌落数并不肯定代表接种到④上的活菌数D.在⑤处培育基上形成菌落的微生物同化作用类型为异养型解析:选择培育基可用于筛选具有特定代谢特点的微生物,从土壤中筛选出能降解对羟基苯甲酸的微生物,须要以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培育基。依据所学学问,结合题图可知,该试验过程包括筛选→扩大培育→纯化→鉴定。从混合物中分别某种微生物要用选择培育基,须要在培育基中加入特定的物质,如对羟基苯甲酸,在该培育基中所须要的微生物能大量繁殖。试验中所用的培育基①②③④均属于选择培育基,目的是筛选能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物。图中Ⅰ、Ⅱ过程的目的是增大降解对羟基苯甲酸微生物的含量。稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理是:当样品的稀释度足够高时,培育基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推想出样品中大约含有多少活菌,当两个或多个细胞连在一起生长时,培育基上统计到的是一个菌落,所以统计培育基⑤中的菌落数并不肯定代表接种到④上的活菌数;在培育基⑤上形成菌落的微生物同化作用类型为异养型,因为微生物所利用的唯一碳源对羟基苯甲酸是有机物。答案:B15.(2024·高州)用纸片扩散法测定某细菌对各种抗生素敏感性的试验,是在某细菌匀称分布的平板上铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培育。图示为培育的结果,其中抑菌圈是在纸片四周出现的透亮区域。下列分析正确的是 ()A.在图示固体培育基上可用平板划线法或稀释涂布平板法接种该细菌B.未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生抗性变异C.形成的抑菌圈较小的缘由可能是微生物对药物较敏感D.不同抗生素在平板上的扩散速率不同会对试验结果造成影响解析:纸片扩散法是药敏试验的一种常用方法,它将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上,纸片所含的药物汲取平板中的水分溶解后便不断向纸片四周区域扩散,形成递减的浓度梯度,在纸片四周抑菌浓度范围内的细菌生长被抑制,形成透亮的抑菌圈。在固体培育基上可用稀释涂布平板法接种测试菌;测试菌在接触抗生素之前已发生抗性变异;微生物对药物较敏感,形成的抑菌圈应较大;纸片所含的药物汲取平板中的水分溶解后便不断向纸片四周区域扩散,不同抗生素在平板上的扩散速率不同会对试验结果造成影响。答案:D16.混凝土开裂造成的渗漏问题困扰着工程界。近年来,科研人员开发出利用巴氏芽孢杆菌产生的脲酶将尿素分解出碳酸根离子,与环境中的钙离子结合生成碳酸钙晶体沉积于开裂部位,从而实现对混凝土裂缝的修复。巴氏芽孢杆菌广泛分布在土壤、堆肥以及污水中,它在强碱性培育液中生长良好。科研人员分别高效产脲酶的巴氏芽孢杆菌的培育基成分如下表所示,据此分析回答下列问题。成分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10g尿素1g琼脂15g水定容至1000mL(1)该培育基中含有的四类养分成分是。配制培育基的过程中须要将pH调成强碱性,调整pH的操作应当在灭菌(选填“之前”或“之后”),缘由是

(2)巴氏芽孢杆菌能够产生脲酶的根本缘由是

,

该培育基能够分别出巴氏芽孢杆菌的缘由是

(3)若对初步分别的巴氏芽孢杆菌进一步分别、纯化并计数,应选用的接种工具是。

(4)欲进一步探究所分别出的巴氏芽孢杆菌的最适pH,请写出试验思路:

解析:(1)依据题表分析,该培育基中含有碳源、氮源、水、无机盐四类养分成分;调整pH所用的溶液也须要进行灭菌处理(避开调整pH的溶液污染灭菌后的培育基),所以调整pH应当在灭菌之前进行。(2)巴氏芽孢杆菌能够产生脲酶的根本缘由是巴氏芽孢杆菌含有限制脲酶合成的基因;由于该培育基以尿素为唯一氮源,而巴氏芽孢杆菌具有较强的分解尿素的实力,所以该培育基能够分别出巴氏芽孢杆菌。(3)若对初步分别的巴氏芽孢杆菌进一步分别、纯化并计数,应选用稀释涂布平板法,接种工具是涂布器。(4)欲进一步探究所分别出的巴氏芽孢杆菌的最适pH,应当配制具有相同梯度的不同pH的上述培育基培育等量巴氏芽孢杆菌,一段时间后,视察菌落数目,长出菌落最多的一组的pH即为最适pH。答案:(1)碳源、氮源、水、无机盐之前避开调整pH的溶液污染灭菌后的培育基(2)含有限制脲酶合成的基因尿素为唯一氮源,巴氏芽孢杆菌具有较强的分解尿素的实力(3)涂布器(4)配制具有相同梯度的不同pH的上述培育基,培育等量巴氏芽孢杆菌,一段时间后,视察菌落数目,长出菌落最多的一组的pH即为最适pH探究实践课:土壤中分解尿素的细菌的分别与计数一、试验目的对土壤中分解尿素的细菌进行分别和计数。探讨培育基对微生物的选择作用,进行微生物数量的测定。二、试验原理1.分别原理。绝大多数微生物都能利用葡萄糖,但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作为唯一氮源的选择培育基,可以从土壤中分别出分解尿素的细菌。2.计数原理。稀释涂布平板法常用来统计样品中的活菌数目。当样品的稀释度足够高时,培育基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推想出样品中大约含有多少活菌。三、试验材料尿素、琼脂、葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、酒精(体积分数为70%)、酒精灯、取样纸袋、铁铲、锥形瓶、试管、记号笔、微量移液器等。四、探究过程序号步骤试验操作1土壤取样选择酸碱度接近中性的潮湿土壤,先铲去表层土,然后从距地表3~8cm的土壤层取样,将样品装入打算好的纸袋中2制备培育基依据配方配制选择培育基,同时配制牛肉膏蛋白胨培育基3接种样品稀释将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀,取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中,依次等比稀释至1×107倍涂布平板将1×103~1×107倍稀释的稀释液分别涂布到平板上4培育与视察将涂布好的培育皿放在30~37℃的温度下培育1~2d,每隔24h统计一次菌落数目5细菌的计数当菌落数目稳定时,选取菌落数为30~300的平板进行计数。在同一稀释度下,至少对3个平板进行重复计数,然后求出平均值6计算依据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目五、试验操作1.操作提示。(1)严格依据无菌操作的方法,进行规范操作。取土样时用的铁铲和取样纸袋在运用前都须要灭菌。操作完成后,肯定要洗手。(2)稀释土样时,每次从试管中吸取稀释液前都要充分摇匀,以获得较为精确的计数结果。(3)将涂布器从酒精中取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后放在火焰上灼烧。不要将过热的涂布器放在盛有酒精的烧杯中,以免引燃酒精。(4)本试验运用的平板和试管较多,为了避开混淆,最好在运用前做好标记。2.试验报告。试验时间某年某月某日。试验地点试验室。试验环境常温、常压、无菌等。试验结果试验记录稀释倍数牛肉膏蛋白胨培育基菌落数/个选择培育基菌落数/个选择培育基平均菌落数/个试验结论在××(稀释倍数)的稀释液中分别出××个能分解尿素的细菌,由此可以推想每克土样中分解尿素的细菌数。试验反思胜利之处该试验设置了比照与重复试验,使试验结果更加精确。不足之处个别细菌菌落生长时连在一起,计数时不易区分,导致试验结果偏小。3.试验拓展。为什么分别不同的微生物要采纳不同的稀释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗?提示:土壤中各类微生物的数量不同。土壤中细菌的总量远远大于土壤中能分解尿素的细菌的数量,因此选用的稀释范围不同。试验评价1.尿素是尿素分解菌的氮源,因此在配制培育基时 ()A.葡萄糖在培育基中越多越好B.尿素分解菌有固氮实力,故培育基中只需无机氮C.尿素在培育基中越少越好D.尿素分解菌无固氮实力,故培育基中应加入尿素作为氮源解析:尿素既可以作为尿素分解菌的氮源,也可以作为其碳源,所以葡萄糖在培育基中并不是越多越好;尿素分解菌没有固氮实力,故培育基中须要添加尿素作为氮源;添加尿素的目的是筛选尿素分解菌,其他微生物不能很好地生活在该培育基上,但尿素在培育基中不是越少越好,过少就失去选择作用,过多又会使细胞失水死亡。答案:D2.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分别与计数”试验的叙述,错误的是 ()A.用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培育基培育尿素分解菌,指示剂不变红B.分解尿素的细菌能产生脲酶,将尿素分解产生NH3和CO2C.统计尿素分解菌的数目时,以菌落数为30~300的平板进行计数D.将试验组和比照组平板倒置,30~37℃恒温培育1~2天解析:用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培育基培育尿素分解菌,尿素分解菌将尿素分解为NH3和CO2,会使培育基碱性增加,指示剂变红。统计尿素分解菌的数目时,以菌落数为30~300的平板进行计数。为解除培育基制备过程中可能造成的污染,应设置不接种菌液的比照组平板,而后将试验组和比照组的平板倒置,防止皿盖上的冷凝水珠滴落在培育基上,造成污染;细菌一般须要30~37℃恒温培育1~2天。答案:A3.下列是关于“土壤中分解尿素的细菌的分别与计数”试验操作的叙述,其中错误的是 ()A.利用稀释涂布平板法精确估计细菌数目的关键是适当的稀释度B.若要推断选择培育基是否起到了选择作用,须要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培育基作为比照C.在土壤中分解尿素的细菌的分别和计数试验中,应采纳稀释涂布平板法D.计数时应选择菌落数为30~300的平板,求平均值进行计数解析:利用稀释涂布平板法精确估计细菌数目的关键是适当的稀释度,稀释倍数太低,菌落太多会长在一起,稀释倍数太高,平板上菌落数目过少,不宜进行计数;若要推断选择培育基是否起到了选择作用,需设置接种没有选择作用的牛肉膏蛋白胨培育基作为比照;在土壤中分解尿素的细菌的分别和计数试验中,应采纳稀释涂布平板法;计数时通常选择菌落数在30~300的试验组平板进行计数。答案:B4.下图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程,下列叙述错误的是 ()A.能产生脲酶的细菌可以分解利用尿素B.图中逐级稀释的程度会干脆影响细菌培育基上的菌落数量C.培育基中可添加KH2PO4、Na2HPO4以供应无机盐和作为缓冲剂D.培育基①应以尿素为唯一氮源,培育基②的作用是纯化培育产脲酶细菌解析:酶具有专一性,能产生脲酶的细菌可以分解利用尿素;稀释度越低,细菌培育基上菌落数越多,稀释度越高,细菌培育基上菌落数越少,所以逐级稀释的程度会干脆影响细菌培育基上的菌落数量;细菌的生长繁殖须要无机盐,培育基中添加KH2PO4、Na2HPO4可以供应无机盐,同时也可以作为缓冲剂;培育基①为选择培育基,以尿素作为唯一氮源,培育基②为鉴别培育基,培育基中可加入酚红指示剂,依据菌落四周指示剂是否变红来鉴别细菌。答案:D5.测定土壤中的细菌数量一般选用1×104、1×105和1×106倍稀释的稀释液进行平板培育,而测定真菌的数量一般选用1×102、1×103和1×104倍稀释的稀释液进行平板培育,其缘由是 ()A.细菌个体小,真菌个体大B.细菌易稀释,真菌不易稀释C.细菌在土壤中数量比真菌多D.随机的,没有缘由解析:土壤中的微生物70%~90%是细菌,真菌的数量要比细菌少。样品的稀释度越高,在平板上生成的菌落数量就越少。在实际操作中,通常选用肯定稀释范围的样品液进行培育,以保证获得的菌落数为30~300,适于平板计数,所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。答案:C6.某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物汲取和利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌的分别和计数的相关叙述,正确的是 ()A.分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2作为碳源的B.倒平板时应将打开的培育皿盖放到一边,以免培育基溅到皿盖上C.培育基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定D.若试验组菌落平均数为37个/平板,空白比照平板上有3个菌落,则本组菌落数的平均值为34个/平板解析:分解尿素的细菌是异养型,不能以CO2作为碳源;倒平板时,正确的做法是用拇指和食指将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,将培育基倒入培育皿,马上盖上皿盖;无机盐可以作为缓冲剂保持细胞生长环境的pH稳定,所以培育基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定;在完全正确的操作状况下,空白比照组中不应出现菌落,若空白比照组出现菌落,说明操作过程中存在微生物污染,属于试验失误,全部试验数据均不应采纳。答案:C7.在做分别分解尿素的细菌试验时,甲同学从对应1×106倍稀释的培育基上筛选出大约120个菌落,而其他同学只选择出大约20个菌落。下列有关叙述错误的是 ()A.可以将甲同学配制的培育基在不加土样的状况下进行培育作为空白比照,以证明培育基是否受到污染B.让其他同学用与甲同学一样的土壤进行试验,假如结果与甲同学一样,则可以证明甲同学无误C.甲同学出现这种结果的缘由可能是土样不同,也可能是操作过程出了问题D.A、B选项的试验思路都遵循了试验的比照原则和平行重复原则解析:污染可能是培育基灭菌不彻底或操作过程没有保证无菌操作,可以将甲同学配制的培育基在不加土样的状况下进行培育作为空白比照,以证明培育基是否受到污染;让其他同学用与甲同学一样的土壤进行试验,假如结果与甲同学一样,则可以证明甲同学操作正确;甲同学获得的菌落数远大于其他同学,可能是由于所取的土样不同,也可能是操作过程被污染;A选项的试验思路遵循了试验的比照原则,B选项的试验思路遵循了试验的重复性原则。答案:D8.尿素是一种重要的氮肥,但是不能被农作物干脆汲取,只有被土壤中的细菌分解成氨后才能被植物利用。某试验小组要完成课题“从土壤中分别出能分解尿素的细菌”,问答下列问题。(1)在该试验中,配制培育基须要以作为唯一氮源。该培育基中(填“须要”或“不须要”)添加葡萄糖,缘由是。若要验证该培育基具有选择作用,须要设置

作为比照,当时,即可说明该培育基具有选择作用。

(2)在接种前须要对样品进行稀释处理,以保证获得菌落数在范围适于计数的平板。测定土壤中细菌的数目,一般选用1×104、1×105、1×106倍的稀释液进行平板培育,若测定放线菌数量,则须要采纳与此不一样的稀释倍数,缘由是。

(3)在进行试验时,甲同学从对应1×106倍稀释的培育基中筛选出大约200个菌落,但是其他同学在同样稀释度下只筛选出大约90个菌落,若甲同学的结果有问题,则可能的缘由是。

解析:(1)在该试验中,配制培育基须要以尿素作为唯一氮源,该培育基中须要添加葡萄糖,缘由是尿素分解菌为异养微生物,不能利用无机碳源,只能利用现成的有机碳源;若要验证该培育基具有选择作用,须要设置基础培育基作为比照,即接种相同菌液的牛肉膏蛋白胨培育基,在相同条件下培育,当牛肉膏蛋白胨培育基上的菌落数明显多于该培育基上的菌落数时,即可说明该培育基具有选择作用。(2)在接种前须要对样品进行稀释处理,以保证获得菌落数在30~300范围适于计数的平板;土壤中各类微生物的数量是不同的,所

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