岛津LC液相色谱操作SOP

PAGEPAGE5岛津LC-10A高效液相色谱仪操作规程仪器组成：岛津LC-10A高效液相色谱仪由泵系统，蒸发光散射检测器（空气泵）、N2000工作站组成（见图1）。各部件相互连接，且分别有各自的开关，色谱柱按规定方向连接并密封严密。开机前先检查上次使用登记情况和仪器状态。检查色谱柱是否适用于本次试验，仪器是否完好，仪器的开关位置是否处于关闭位置。图1把滤器浸入经过滤和脱气后的10%甲醇水溶液中（见图2）。接通电源，打开泵电源的开关（见图3）。逆时针旋转泵的排气阀（见图4），按func键，选择FLOW设置流速为1ml/min(若输入错误，按back键返回重新进行操作)，按Enter键确认，按purge键进行排气，观察出口处呈连续液体流出，并且无气泡再产生时，再按purge键停止排气，顺时针旋转泵的排气阀（色谱泵设置自动停止排气时间，若操作时间超过规定时间，会自动停止排气，则只需关闭泵的排气阀即可）。按func键，选择FLOW设置流速为样品分析所需的流速，按Enter键确认，按pump键，用甲醇水溶液冲洗30min以平衡色谱柱，同时观察压力指示应稳定，用干燥滤纸的边缘检查色谱柱连接处是否有渗漏。按pump键停止泵运行，转移滤器至样品分析用流动相中。逆时针旋转泵的排气阀,按purge键进行排气。观察出口处呈连续液体流出，并且无气泡再产生时，再按purge键停止排气，顺时针旋转泵的排气阀。按pump键用样品分析用流动相冲洗30min。滤器泵电源图2图3滤器泵电源排气阀图4图5排气阀在用流动相冲洗色谱柱的过程中，打开蒸发光散射检测器电源（见图5），仪器自动进入初始界面，屏幕显示（见图6）。按MENU键，进入温度设置界面（见图7），通过◄►键移动光标并根据需要按▲▼键输入Te温度设置值（见图8）后，按ENTER键进入气体流量设置界面（见图9），通过◄►键移动光标并根据需要按▲▼键输入F流速设置值后按ENTER键，屏幕将显示S、T、F、P均＝0（见图10）。打开空气泵电源（见图11），至输出压力表显示在0.4-0.5MPa范围内。按蒸发光散射检测器的RUN键和VALVE键，显示灯亮（见图12）。当T（温度）达到设定值后，按泵的pump键停止泵运行，连接色谱柱与检测器通路（见图13），逆时针旋转泵的排气阀,按purge键进行排气，再按purge键停止排气，顺时针旋转泵的排气阀,继续按pump键运行泵。UnimicroTechELSDV1.0UnimicroTechELSDV1.0SettingTeTe=000图6图7图8图9图10放液钮输出压力表图11图12放液钮输出压力表谱图采集谱图采集图13图14开启电脑，点击桌面“蒸发光散射检测器程序”（见图14），程序打开后，设置满屏时间（样品出峰后间隔一段时间至基线走平）和满屏量程，点击工具栏“谱图采集”，开始数据采集。观察图谱基线成一横向直线后代表仪器稳定，准备进样。用微量进样器抽取样品少量（检测时采用浓度先低后高，先对照品后样品的原则），冲洗进样器及针头、过滤头三次，液体丢弃。抽取样品适量，将进样器内的气泡排空，直插入进样器的底部，进样手柄调整至“Inject”位置，注入少量液体至排液口出现液滴以完成进样装置的润洗。调整进样手柄至“Load”位置，注入样品后扳动进样手柄至“Inject”位置，完成一次进样（见图15）。再次进样前，取下进样器按照上面操作要求进行。进样器图15进样器进样完成后，马上点击电脑工具栏的“谱图采集”，每次采样完毕后将文件存入指定的位置，进行数据处理。分析完毕后，更换滤器至经过滤和脱气后的10%甲醇水溶液冲洗30分钟左右（如使用缓冲盐溶液做为流动相，则需要用水或不同浓度的甲醇水溶液冲洗，时间可适当延长），再更换至甲醇溶液中冲洗30分钟左右至柱压至原始状态，操作步骤同第3条。关闭泵电源，约5分钟后，检测器内的液体消失，然后持续按下空气泵的“放液钮”（见图11），有大量空气跑出，至“输出压力”指示为0时，停止按动“放液钮”，关闭空气泵电源。待检测器上的P显示为0时，按VOLVE关闭仪器内部气路，按