华贵栉孔扇贝“南澳金贝”苗种培育技术规程

ICS65.150ICS65.150B51备案号：汕头市农业地方标准DB汕头市农业地方标准DB44DB440501/T***—2022华贵栉孔扇贝“南澳金贝”华贵栉孔扇贝“南澳金贝”苗种培育技术规程TechnicalspecificationforseedlingsbreedinginChlamysnobilis（送审稿）广东省汕头市质量技术监督局发布20XX-广东省汕头市质量技术监督局发布20XX-XX-XX实施20XX-XX-XX发布前言本标准按GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》进行编写。本标准的制定由汕头大学提出。本标准制定单位：汕头大学。本标准主要制定人：郑怀平、张洪宽。

华贵栉孔扇贝“南澳金贝”苗种培育技术规程范围本标准规定了华贵栉孔扇贝“南澳金贝”（Chlamysnobilis）苗种培育的术语和定义、培育条件、亲贝挑选、性腺强化促熟、人工催产、人工授精、受精卵孵化、选幼、幼虫培育、采苗、附着后管理、出池、优质种苗标准等内容。本标准适用于华贵栉孔扇贝“南澳金贝”苗种规模化培育过程。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB11607-89渔业水质标准NY5052-2001无公害食品海水养殖用水水质DB440500/T272—2017华贵栉孔扇贝“南澳金贝”种质标准3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1华贵栉孔扇贝“南澳金贝”Nan’aoGoldenScallop：贝壳、闭壳肌、外套膜均为金黄色的华贵栉孔扇贝。3.2眼点幼虫eye-spotlarvae：D形幼虫培养到8-10天时，在内脏团附近会出现一个黑色的眼点，此时的幼虫被称为眼点幼虫，也被称为早期壳顶幼虫，随着幼虫的发育，该眼点变圆变大。3.3变态metamorphosis：幼虫面盘消失、长出次生壳变为稚贝的生物学过程。3.4规格合格率certifiedsizerate：达到规格的苗种数量占苗种总数的百分比。3.5伤残死亡率woundedanddeathrate：壳残缺和死亡苗种数量占苗种总数的百分比。3.6出池苗规格sizeofspatmovedhatchingroom：壳长≥500μm的稚贝。3.7商品苗规格sizeofcommercialspat，壳长≥5.0mm的稚贝。4育苗条件4.1设备和材料：水泵设施、海水沉淀池、砂滤池、净化海水蓄水池、催产池、孵化池、育苗池、饵料保种室、饵料培育池、控温设施、充气设施、显微镜、附着基等。4.2水质：苗种培育过程中所用水为洁净砂滤海水，水源符合GB11607-89的规定，培育用水符合NY5052-2001的规定。5亲贝挑选参照《华贵栉孔扇贝“南澳金贝”种质标准》（DB440500/T272—2017）进行亲贝挑选。亲贝的贝壳、闭壳肌、外套膜均为金黄色，贝壳完整，壳长≥60.0mm，健康，性腺发育良好，卵巢为金黄色、精巢为白色或微黄色。雌、雄比例为3~4:1。6性腺强化促熟在室内采用三角褐指藻+亚心形扁藻+蛋黄+酵母粉混合投喂亲贝，每3个小时投喂1次，投喂量为每毫升水体三角褐指藻5×105个细胞、亚心形扁藻2×104个细胞，每立方水体10g鸡蛋黄和5g酵母粉，水温23-25℃，盐度30-32，连续微充气，每天全换水1次，暗光或弱光培养。培养5-7天，性腺更加饱满、成熟。7人工催产向每个个体的精巢或卵巢中注射0.02mM的5-羟色胺0.1mL，雌、雄分开放入加有1/3的砂滤海水产卵池中待产。所有雄性亲贝可放入一个产卵池中，雌性亲贝则按每平方米10个放入不同的产卵池中。水温25-26℃，盐度30-32，连续微充气。约10分钟后，亲贝就开始排精或排卵。排放20分钟后，即可移走亲贝。8人工授精从含有精液的产卵池中舀取适量的精液加入含有卵子的产卵池中进行人工授精，边加精液边搅拌。水温25-26℃，盐度30-32。5分钟后，移取少量水体显微镜下检查，每个卵子周围4-5个精子即可。如发现精子不够，可继续添加少量精液，继续开展人工授精；如精子过多，可添加新鲜的砂滤海水进行稀释。9受精卵孵化当卵子完全受精20分钟后，用新鲜的砂滤海水注满产卵池，开始受精卵孵化。镜检计数受精卵密度，保持在40-50个/ml水体，如过多，则需要分入其他的孵化池中进行孵化。水温25-28℃，盐度30-32，连续微充气，暗光或弱光孵化。24小时后，受精卵可孵化为D形幼虫。10选幼受精卵孵化为D形幼虫后，停止充气，暗光或弱光对D形幼虫进行选幼。30分钟后，用300目筛绢网收集孵化池水体中上层的D形幼虫，放入清洁的育苗池中添加新鲜的砂滤海水进行幼虫培育。11幼虫培育11.1育苗池深度：1.8-2m。11.2气石位置和数量：气石距水面2/1-1/3处；气石数量为1个/m2。11.3室内光线：暗光或弱光，光照强度<100lux。11.4水温和盐度：水温25-28℃，盐度30-32。11.5幼虫密度：D形幼虫为3-4个/ml水体，眼点幼虫为1-2个ml水体。11.6幼虫饵料及投喂量：前3天为金藻（球等鞭金藻或湛江叉鞭金藻），从第一天的1次/天逐渐增加到第3天的3次/天，投饵量（藻细胞/ml水体）从第一天的1000个逐渐增加到5000个；第4-7天投喂金藻和扁藻，投饵次数为3次/天，投饵量（藻细胞/ml水体）从8000个逐渐增加到10000个；第7天后投喂金藻、扁藻和硅藻（小新月菱形藻或威氏海链藻或牟氏角毛藻），投饵次数为4次/天，投饵量（藻细胞/ml水体）为12000-15000个。8-9天幼虫出现眼点即达到眼点幼虫。11.7换水、倒池和充气：幼虫培育期间不换水、不倒池，连续微充气，并严禁使用抗生素。11.8日常观察：每日早晚两次抽样镜检观察幼虫的摄食和发育情况，每2天测量和记录幼虫生长和存活1次。12采苗12.1采苗时间：当眼点幼虫达到30%以上，应立即倒池并投放附着基进行采苗。12.2附着基种类：聚乙烯网片或棕绳；聚乙烯帘片可反复使用、棕绳只能使用1次。12.3附着基处理：棕绳需要经过捶打、0.05%NaOH浸泡、煮沸、再浸泡等处理后才能使用，使用前要剪短为1.5-2m长的短绳并绕成捆；新的聚乙烯网片需用0.05%NaOH浸泡、捶打、搓洗干净，旧的聚乙烯网片无需NaOH溶液浸泡，洗刷干净后即可使用。附着基投放期均在洁净的淡水中浸泡1天。12.4附着基投放数量：根据眼点幼虫的数量投放附着基，一般按10个/m2的数量进行投放。12.5附着基投放位置：棕绳可以垂直悬挂于育苗池中，聚乙烯网片则需要用聚乙烯细绳拴着一块坠石投放于育苗池中，附着基底部距水面1/3-1/2。13附着后管理13.1加大换水量：投放附着基后适当加大换水量，每天换水1次，减少充气量，每天检查幼虫附着变态情况。13.2增加投饵量：饵料以硅藻为主，投饵量（藻细胞/ml水体）为3万个逐渐增加到10万个。投放附着基约1周后，95%的幼虫可变态为稚贝，继续培育10天左右，稚贝的壳长≥500µm，达到出池苗规格。13出池将附有稚贝的附着基按每袋1个放入60目的聚乙烯网袋中出池销售，或选择天气晴朗的傍晚移到风平浪静的海湾进行保