细胞培养技术学习通超星期末考试答案章节答案2024年VIP

细胞培养技术学习通超星期末考试章节答案2024年动物细胞培养

答案:从动物活体体内取出相关的组织，用机械或消化的方法分散成单细胞悬液，在体外模拟体内环境下,使之生长和生存，并维持其结构和功能的方法。动物组织培养

答案:从生物体内取出活的组织（多指组织块）在体外进行培养的方法。组织培养的对象在体外可发生分化并保持组织的结构和功能，但不具备器官的结构与功能。为什么在细胞培养过程中要保证最大程度的无菌？

答案:有害物侵入人体内或代谢产物积累时，由于体内存在着强大的免疫系统和解毒器官（肝脏等），对它们可进行抵抗和消除，使细胞不受危害。当细胞被置于体外培养后，便失去了对微生物和有害物质的抵抗能力，一旦被污染或自身代谢物积累等，可导致细胞死亡。因此，培养环境无毒和无菌是培养细胞的首要条件。在卡氏瓶原理的启发下,出现了试管培养,继而又出现了多种类型的（

）、培养皿和（

）的培养。从20世纪40年代开始，大多数培养工作都过渡到用（

）培养。

答案:培养瓶;多孔培养板;瓶子体外培养（或组织培养）主要包括（

）、（

）、（

）三种类型

答案:细胞培养;组织培养;器官培养5.早期细胞培养采用（

）培养基，现在广泛采用添加（

）的（

）培养基，近二十年来，动物细胞培养基朝着（

）培养基的方向发展。

答案:天然;血清;人工合成;无血清在（）原理的启发下，出现了多种类型培养瓶、多孔培养板的培养。

答案:卡式瓶Harrison开创了动物组织和细胞培养的先河并建立（）。

答案:单玻片悬滴培养法细胞周期

答案:即一个母细胞分裂结束后形成的细胞至其下一次再分裂结束形成两个子细胞的这段时期。贴壁型细胞

答案:在体外动物细胞培养过程中，必须贴附于支持物表面才能生长的细胞。什么是培养细胞的一代生存期？培养细胞的一代生存期可分为哪几个阶段？各有何特点？

答案:指的是从细胞接种到下一次再传代接种的一段时间。每代细胞一般要经过三个生长阶段：潜伏期、指数生长期和停滞期（平顶期）。潜伏期：有代谢活动，基本没有细胞分裂，时间6~24小时。指数生长期：细胞数量成倍增长，代谢活动旺盛，最适合实验研究阶段，持续时间3~5天，培养基营养物质被消化，颜色变黄。停滞期：细胞不增殖，但仍有代谢活动，需要进行传代挽救。细胞培养的平台期与衰退期是否一样，若不一样，主要的区别在哪？

答案:不一样。平台期：当细胞长满瓶壁后，细胞数量达到饱和密度，会产生接触抑制和密度抑制，细胞就会停止增殖，进入停滞期。此时细胞数量持平，也称平顶期。衰退期：传代到一定代数，细胞的生命活动明显减弱，但增殖很慢或不增殖，难长满培养面，即使换液也无济于事，直至衰退，死亡。贴壁型细胞主要的形态分类有（

）、（

）、（

）和（

）。

答案:成纤维细胞型;上皮细胞型;游走细胞型;多形细胞型体外培养的动物细胞其生长方式主要有（

）和（

）两种，分别称为（

）和（

）。

答案:贴壁生长;悬浮生长;贴壁型细胞;悬浮型细胞细胞在体外生长时具有一些特点，其中主要是（

）、（

）和（

）。

答案:细胞贴附;接触抑制;密度依赖性细胞培养操作间经紫外线照射消毒和化学消毒后要开窗通风，减小对操作员的危害。

答案:错无菌操作间专用于无菌操作、细胞培养,要求清洁、干燥、无菌、不通风，局部空气洁净度要达到百级以下。

答案:对动物细胞体外培养的营养要求有（

）①氨基酸②碳水化合物③无毒、无菌④

无机盐⑤适宜温度

⑥维生素⑦促生长因子

⑧微生物次级代谢产物⑨微量元素⑩氧气和二氧化碳

答案:①②④⑥⑦⑨体外动物细胞培养过程中，下列那个物质常作为必含的能量物质（

）

答案:葡萄糖人体细胞培养的标准温度为（

）

答案:36.5℃±0.5℃细胞培养中塑料制品主要采用（

）方法进行灭菌，人工合成培养基采用（

）方式进行灭菌

答案:紫外线消毒;膜过滤消毒细胞培养用品的包装主要包括（

）和（

）两种类型。

答案:局部包装;全包装玻璃器皿的清洗程序主要包括（

）、（

）、（

）和（

）

答案:浸泡;刷洗;浸酸;冲洗培养细胞的传代培养

答案:将原细胞培养瓶中的细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。下列属于培养细胞污染的类型有（

）

答案:微生物的污染;病毒的污染;化学物质的污染;不同细胞交叉污染消化法进行传代细胞操作时最需要关注的是（

）

答案:传代时机;消化时间;接种数量

动物细胞原代培养主要的两种方法是（

）

答案:组织块法;消化法微生物污染的主要途径（

）

答案:空气;器材和试剂;操作;组织样本细胞冻存与复苏的原则：（

）

答案:慢冻快融培养细胞的冻存液长利用二甲基亚砜作为冻存保护剂，其使用浓度范围为（

）

答案:5%~15%真菌污染培养细胞的现象不包括（

）

答案:肉眼可见培养液浑浊下列注意事项是原代培养操作中不需要注意的（

）

答案:保证二氧化碳培养箱的快拿快放，快速翻转细胞培养瓶下面不可能引起细胞发生化学污染的物品是：（

）

答案:浸泡玻璃器皿的酸缸细胞培养的常规观察不包括：（）

答案:细胞亚显微结构什么是CHO细胞，CHO表达系统的主要特点是什么？

答案:CHO细胞又称中国仓鼠细胞。①表达的蛋白质在分子结构、理化特性和生物学功能等方面最接近于天然蛋白分子；②细胞既可以贴壁生长，又可以悬浮生长，且有较高地耐受剪切力和渗透压能力；③具有重组基因的高效扩增和表达能力，外源蛋白的整合稳定；④具有产物胞外分泌功能，便于下游产物分离纯化，并且很少分泌自身的内源蛋白。气升式生物反应器必须有中央导流管才能使得液体和气体循环。

答案:错搅拌式生物反应器不适合悬浮细胞生长

答案:错悬浮细胞培养工艺中的核心技术是细胞的悬浮驯化

答案:对单克隆抗体是专门识别某一特定抗原表位的抗体。

答案:对动物细胞大规模培养的一般流程不包括最后的产品的分离纯化

答案:错根据动物细胞的培养特性不同，可采用（

）、（

）、（

）等三种培养方法进行大规模培养。

答案:贴壁培养;悬浮培养;固定化培养动物细胞大规模培养技术是指在人工条件下（除满足培养过程的必需的营养要求外，还要进行pH和溶氧的最佳控制），在（

）中（

）大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。

答案:细胞生物反应器；生物反应器;高密度下列关于中空纤维培养法叙述错误的是（

）

答案:为细胞提供二维的生长空间抗原决定簇

答案:抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构。单克隆抗体

答案:仅由一种B淋巴细胞克隆产生的，理化性状高度均一、组成均一、只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子，称单克隆抗体。下列不是细胞融合常用的方法是（

）

答案:细胞培养牛雄性胚胎中存在特异性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培养液中加H-Y单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是（

）

答案:用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体在HAT培养系统中能够稳定生长的细胞有（

）

答案:骨髓瘤细胞与淋巴细胞融合细胞用于制备单克隆抗体的骨髓瘤细胞不具有以下哪一特点（

）

答案:自身可分泌免疫球蛋白单克隆抗体的特征表述不正确的是（

）

答案:针对多种抗原决定簇杂交瘤细胞的冻存均采用液氮保存的温度是（

）

答案:-196℃叶酸的拮抗剂是（

）

答案:氨基蝶呤在HAT培养基中,()可利用培养基中的次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T)在次黄嘌呤磷酸核糖转化酶和胸腺嘧啶核苷激酶的催化下通过补救合成途径合成DNA。

答案:杂交瘤细胞;淋巴细胞杂交瘤技术中,细胞融合前,需要制备哪三种细胞?()

答案:脾细胞;骨髓瘤细胞;饲养细胞应用单克隆抗体制作的商品化试剂盒广泛应用于:()。

答案:病原微生物抗原、抗体的检测;肿瘤抗原的检测;免疫细胞及其亚群的的检测;激素和细胞因子的测定为了防止制备好的杂交瘤细胞停止分泌抗体,需要做到:()。

答案:应用倒置显微镜经常检查细胞的生长状况;大量保持和补充液氮冻存的细胞原管;定期进行再克隆杂交瘤技术所使用的抗体检测方法有()。

答案:酶联免疫吸附法;间接免疫荧光法;放射免疫法;双向扩散法用于单抗生产的骨髓瘤细胞株一般缺乏哪两种酶,使其不能通过补救途径合成DNA:()。

答案:TK;HGPRT由一种B细胞克隆所产生的只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子成为单克隆抗体,它相对于多克隆抗体具有以下哪些特点()。

答案:特异性强;灵敏度高;纯度高下列属于可大规模培养的动物细胞的有:()。

答案:人二倍体细胞;CHO细胞;BHK-21细胞;Vero细胞固定化培养常用的方法有()。

答案:吸附培养;微囊化培养;包埋培养下列属于微载体选取要求的有:()。

答案:表面适于细胞附着、伸展和增值;材料无毒性,不与培养基中的化学成分反应;不吸收营养成分;直径尽可能小,且尽可能均一动物细胞大规模培养时,需要人工控制的条件包括()。

答案:pH;溶氧;温度;搅拌速度冻存细胞时要缓慢冷冻,主要原因有()。

答案:细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻时,细胞内外的水分会很快形成冰晶。;冰晶的形成会引起细胞脱水,从而使细胞局部电解质浓度增高,pH值发生改变,部分蛋白发生变性,导致细胞出现代谢障碍。;在冷冻中易破坏细胞膜上的类脂蛋白复合体,从而改变细胞膜的通透性,使细胞内容物流失。;冰晶体积膨胀易造成DNA的空间构型发生不可逆的损伤性变化,引起细胞死亡。造成细胞复苏失败的原因可能有:()。

答案:冻存时细胞数量少或生长状态不良;细胞受细菌或支原体污染;液氮罐保管不善;复苏方法不得当;复苏时培养条件改变悬浮生长的细胞一般采用什么方法进行传代?()

答案:直接吹打传代;离心分离法传代培养细胞的常规观察项目有:()。

答案:培养液的变化;细胞生长情况;细胞形态;有无微生物污染微生物的污染可以通过下列哪些途径发生:()。

答案:空气;器材及试剂;实验操作;组织样本下列属于消化培养法优点的有()。

答案:可以很快得到大量活细胞;可在短时间内生长成片;原代细胞产量高所谓培养细胞生命期,是指细胞在培养中持续增殖和生长的时间,大致可以分为哪三个阶段:()。

答案:原代培养期;传代培养期;衰退期下列属于体外培养细胞的生长特点的是()。

答案:细胞贴附;接触抑制;密度依赖性下列属于优质血清的标准表现有()。

答案:透明清亮;土黄色或棕黄色;无沉淀或极少量沉淀,比较粘稠下列属于物理灭菌法的有()。

答案:紫外线照射;干热灭菌;湿热灭菌;过滤除菌下列动物细胞培养用品,需要采用全包装的有:()。

答案:胶塞;解剖剪动物细胞培养实验室常用的设备有:()。

答案:消毒设备;无菌操作设备;细胞观察设备;细胞和试剂存储设备动物细胞培养技术的应用领域相当广泛,下面属于其应用领域的有:()。

答案:基础研究;临床医学;动物育种;生物制品生产体外培养的三种类型包括:()。

答案:细胞培养;组织培养;器官培养单克隆抗体与多克隆抗体有何区别？

答案:单克隆抗体：由一个B细胞克隆所产生的针对一种它能识别的抗原决定簇的的单一性抗体。多克隆抗体：指抗原入侵机体（由于抗原包含多个抗原决定簇）后，刺激具有相应抗原受体的不同淋巴细胞增殖分化，而产生的多种抗体的混合物。可见单克隆抗体与多克隆抗体的主要区别在于其抗体种类是否单一，而不是抗体数量的多少。在选择微载体中有何要求？

答案:首先是微载体表面性质要适于细胞附着、伸展和增殖，其次微载体材料要没有毒性，且不会与培养基成分发生化学反应，也不会吸收培养基中的营养成分。其次，微载体的直径最好控制在60-250nm之间，还要有良好的光学透明性，以便于观察。除此之外还必须能够承受120摄氏度的高温，以便可以高压蒸汽灭菌。细胞冻存时，如何实现慢冻？

答案:可以采用以下两种方式：人工传统降温：冻存管置于4℃10min→-20℃30min→-80℃16-18小时（或过夜，最长放置时间不要超过一个月）→转移至液氮长期储存。

程序降温盒降温：这种降温盒可实现每分钟1℃自主梯度降温，大大提高冻存细胞的存活率。冻存管置于细胞冻存盒（冻存盒需要提前预冷至4℃，需检查其内异丙醇或其他液体是否足量）后放于-80℃冰箱16-18小时（或过夜，最长放置时间不要超过一个月）→转移至液氮长期储存。细胞培养的污染途径主要有哪些？

答案:空气

空气是微生物传播的最主要途径。减少空气流动是防止污染的重要环节。器材及试剂

器材清洗消毒不彻底或培养用液等灭菌不彻底使污物残留或导致细菌污染。操作

无菌观念不强、动作不准确、交叉使用吸管或培养液等导致细胞交叉污染。组织样本

组织样本如还有微生物或手术时消毒使用的碘酒等可造成污染或影响细胞生长，这也是原代培养失败的主要原因之一。怎样辨别培养的动物细胞生长情况是否良好？

答案:首先，我们可以通过肉眼观察培养基的颜色变化及澄清度，若培养基溶液为浅黄色且澄清透明，此时我们可以初步断定细胞没有受到微生物的污染，进而我们可以使用倒置显微镜来观察细胞生长情况，生长状况良好的细胞会表现为明亮、均质、透明度大；而生长状态不好或已经进入衰亡期的细胞，在胞质中常出现发暗、有黑色颗粒、脂滴、空泡、形态不整及边缘不齐等现象。原代培养细胞首次传代时一般要特别注意哪几个方面？

答案:1．传代时机：待细胞生长到足以覆盖瓶底壁的大部分表面后再传代。2．消化时间：传代时，不同的细胞有不同的消化时间，因而要根据需要注意观察并及时进行处理。原代培养的细胞较传代培养的细胞消化时间相对较长。3．接种数量：首次传代时细胞接种数量要多一些，使细胞能尽快适应新环境而利于细胞生存和增殖。请简要说说如何判断血清的好坏？

答案:好的血清应该是透明清亮，土黄色或棕黄色，无沉淀或极少量沉淀，比较粘稠。如发现血清浑浊、不透明、含许多沉淀物，说明血清污染或血清中的蛋白变性；若血清呈棕红色，说明血清中的血红蛋白含量太高，取材时有溶血现象；如果摇晃时感觉液体稀薄，说明血清中掺入的生理盐水太多。如果要进一步了解血清的质量，则应连续培养某些细胞，观察细胞的生长状况。动物细胞培养用品的清洗和包装要注意哪些事项？

答案:清洗注意事项：（1）冲洗时要流水振荡冲洗，方法是：每瓶灌2/3容积的自来水，振荡后倒掉，重复8-10次。（2）浸泡、酸泡的器皿内要充满液体，不得有气泡。包装注意事项：（1）手指与器材接触面积要小，手指不能触及器材的使用端；（2）封闭器材使用端，标记器材手持端；（3）小包装；（4）玻璃管道口（尖吸管、移液管手持端等）加棉花。超净工作台和二氧化碳培养箱在使用时需要注意什么？

答案:1.超净工作台使用超净工作台时应注意：（1）使用净化工作台前先以紫外线灭菌灯照射30～50min处理净化工作区内积存的微生物，关闭灭菌灯后应启动风机使之运转两分钟后再进行无菌操作；（2）超净工作台内切勿放有机溶剂；（3）如试剂滴洒于超净工作台上，请及时清洁；（4）实验结束请用75%乙醇清洁台面。2.二氧化碳培养箱使用二氧化碳培养箱时应注意：（1）保持培养箱内空气干净，主要措施如下：存放于箱内的培养瓶先用酒精棉擦拭干净；定期对培养箱内壁及其附件进行酒精消毒，酒精消毒后用无菌干纱布将内壁及附件酒精擦除干净，待箱内酒精挥发干净后，再开启加热开关；（2）培养液若洒在培养箱内要及时用75%酒精清洁，以防细菌污染；（3）培养箱内水盘每周消毒、换无菌蒸馏水一次；（4）随时注意二氧化碳压力表的刻度显示，及时更换气瓶。单克隆抗体是由一种（

）克隆所产生的只针对某一特定（

）的抗体分子。

答案:B细胞;抗原决定簇动物细胞大规模培养技术是指在人工条件（除满足培养过程必需的营养要求外，还要进行pH和溶氧的最佳控制）下，在（

）中（

）大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。

答案:细胞生物反应器；动物细胞生物反应器;高密度贴壁依赖性细胞传代时采用(

)传代,而悬浮培养的细胞在传代时采用(

)或直接传代。

答案:酶消化法；消化法；消化；酶消化;离心法传代；离心法;离心传代；离心传代法体外培养的细胞在贴附底物上(

)时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的(

)。此时,瓶壁上形成的细胞层数是(

)。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是(

)。

答案:连接成片、相互接触；相互接触；连接成片;接触抑制;单层;胰蛋白酶细胞培养实验前实验者的皮肤主要用1%的新洁尔灭或(

)来消毒灭菌,实验室地面采用来苏尔定期拖洗消毒,培养室空气可以用乳酸蒸气或(

)。

答案:75%酒精;紫外线照射消毒在利用超净台工作时,应着(

)的清洁工作服。进入原代培养室需彻底洗手还要戴(

)、着消毒衣帽。

答案:长袖;口罩体外培养主要包括(

)、(

)和(

)三种类型。

答案:细胞培养;组织培养;器官培养植物组织细胞培养基pH值常用（

）或（

）调节培养基pH至所定的数值。

答案:0.1-1mol/L

NaOH；0.1-1NNaOH;0.1-1mol/L

HCl；0.1-1NHCl对贴壁依赖性细胞来说,判断是否需要传代的主要指标就是培养物是否已基本(

)培养瓶(皿)的底壁。一般来说原代培养物未达到支持物(

)的表面积,不要急于传代。

答案:长满；覆盖;80%一般培养液中均含有(

)作为指示成分,以此来显示培养液的pH值。

答案:酚红微生物的污染可通过多种途径发生,主要包括(

)、器材及试剂、(

)、组织样本等途径。

答案:空气;操作用B细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要过程包括：（

），（

），细胞融合和杂交瘤细胞的筛选，阳性杂交瘤细胞的筛选，阳性杂交瘤细胞的克隆及其检测，杂交瘤细胞株的冻存和单克隆抗体的大量制备，要经过几个月的一系列实验。

答案:动物免疫;脾细胞、骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备在细胞融合过程中瘤细胞株应用最多的是（

）

细胞株。

答案:SP2/0细胞融合过程中使用的促融剂主要是（

），其分子量为（

）均可用，工作浓度范围通常为（

）。

答案:聚乙二醇；PEG;1000～6000;30％～50％制备单克隆抗体的融合是指将免疫小鼠的（

）和（

）融合。

答案:B淋巴细胞；脾细胞;骨髓瘤细胞细胞融合培养时加入（

）选择培养基，目的是保证只有杂交瘤细胞的生长。

答案:HAT在动物细胞大规模培养技术中，能为细胞提供贴附表面的培养基质目前主要有转瓶、（

）、（

）和（

）。

答案:微载体;中空纤维;细胞工厂无论何种动物细胞培养，就操作方式来讲，大规模培养可分为：分批式、（

）、（

）、连续式和（

）。

答案:流加式;半连续式;灌流式染色法测定细胞活性时，（

）能阻止染料进入细胞内，而（

）没有这种功能。所以，（

）不会被染色，（

）会被染色。请选择下面的正确字母填入上述空白处：A.活细胞；B.死细胞。

答案:A;B;A;BMTT法检测细胞活性时，（

）线粒体中的脱氢酶能使外源性的四唑盐还原为难溶性的（

）色结晶物并沉积在细胞中，而（

）则没有这种功能。在一定细胞数量范围内，蓝紫色结晶物形成的量与（

）数成正比。请选择下面的正确字母填入上述空白处：A.活细胞；B.蓝紫色；C.死细胞。

答案:A;B;C;A从其他实验室购买的细胞株,经过(

)稳定传代后,应该及时冻存。

答案:一至二次;1-2次；一到两次；一至两次细胞冻存时，常用的冷冻保护剂有（

）和甘油。（

）对大部分细胞无毒性作用，在细胞冻存液中被广泛使用，其常用的最终浓度为（

）。

答案:DMSO；二甲基亚砜;DMSO；二甲基亚砜;0.1细胞冻存最常用的设备是（

）。

答案:液氮罐原代培养细胞一经传代后便改称做(

)。一般情况下当传代(

)左右,细胞增殖逐渐缓慢,以至完全停止,细胞进入(

)。

答案:细胞系;10~50次;衰退期培养器皿中细胞过少或过密都会影响细胞的生长、增殖,这种现象称为(

)。

答案:密度依赖性原代培养方法最基本和常用的有两种:(

)培养法和(

)培养法。

答案:组织块；组织块培养法;消化；消化培养法从体内取出细胞或组织的第一次培养,称为(

)。

答案:原代培养BSS中文名称为(

),具有维持渗透压、PH值等作用,常用作洗涤组织和细胞以及配制各种培养用液的基础溶液。BSS种类很多,常用的有(

)、(

)

和PBS。

答案:平衡盐溶液;Hanks液；Hanks溶液;D-Hanks液；D-Hanks溶液血清就是作为一种添加成分与合成培养基混合使用,最常用的浓度是(

)。

答案:10%动物细胞培养的合成培养基除需添加血清,为防止污染,培养基中还要添加抗生素,有的细胞(如上皮细胞)还要添加(

),添加了以上物质的动物细胞培养基称为(

)。

答案:谷氨酰胺;完全培养基人工合成培养基和酶液采用(

)方式进行除菌。

答案:滤过消毒；滤过除菌；过滤消毒；过滤除菌超净工作台台面先用(

)擦拭,用紫外线消毒至少(

)min,然后启动超净台(

)和照明灯。

答案:75%酒精;30;风机二氧化碳培养箱通常使用条件为(

)

答案:37℃、5%

二氧化碳；37℃、5%CO2观察培养瓶内的培养物,要用(

)显微镜。

答案:倒置在无菌操作时,首先要点燃(

)。

答案:酒精灯早期细胞培养采用(

)培养基,现在广泛采用添加(

)的(

)培养基,近二十年来,动物细胞培养基朝着(

)培养基的方向发展。

答案:天然;血清;人工合成；合成;无血清Wave、NBS、Applikon等公司在原有的技术基础上，推出了各种类型的一次性生物反应器。

答案:对动物细胞生物反应器与微生物生物反应器的搅拌器及通气方式没有区别。（

）

答案:错下面哪种动物细胞生物反应器是模拟细胞在体内生长的三维状态而建立的一种体外培养系统？

答案:中空纤维生物反应器下面哪种动物细胞生物反应器采用喷射空气供氧，氧传递速率高？（

）

答案:气升式生物反应器下面哪种动物细胞生物反应器既可以培养悬浮生长的细胞，又可以培养贴壁依赖性的细胞?（

）

答案:中空纤维生物反应器下面哪个不是动物细胞生物反应器？（

）

答案:光照生物反应器在笼式通气搅拌式生物反应器的基础上，开发出的动物细胞生物反应器是（

）

答案:篮式通气搅拌式生物反应器下面哪种动物细胞生物反应器比较适合进行微载体培养？（

）

答案:篮式通气搅拌式生物反应器下面与细胞的筛选驯化不相符的是：（

）

答案:提高目标生物制品的稳定性和表达量（

）一般用于小量培养到大规模培养的过渡阶段，或作为生物反应器接种细胞准备的一条途径。

答案:转瓶培养（

）管壁表面有许多海绵状多孔结构，细胞能在上面贴壁生长。

答案:中空纤维将贴壁培养和悬浮培养优点结合起来的动物细胞大规模培养方法是(

)：

答案:微载体培养固定化培养的适用对象：（

）

答案:贴壁依赖型细胞和非贴壁依赖型细胞选择微载体时，应注意的是（

）:(1)微载体表面性质要适应于细胞吸附；(2)微载体材料本身无毒性

；(3)微载体直径尽可能小；(4)能承受高温，以便高温灭菌

；(5)要有良好的透光性

答案:(1)(2)(3)(4)(5)下列不属于动物细胞大规模培养中贴壁培养的是（

）。

答案:微囊化培养（

）的培养小室通过两条垂直的管道（供应管）分别在两个相邻角处互相连接，所以培养液可在各小室间流动。

答案:细胞工厂下列关于中空纤维培养法叙述错误的是（

）。

答案:为细胞提供二维的生长空间转瓶培养过程中，转瓶不断旋转，使细胞交替接触培养液和空气，从而提供较好的传质和传热条件。

答案:对动物细胞大规模培养技术是指在人工条件下，在细胞生物反应器中低密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。

答案:错动物细胞大规模培养已成功应用于生产疫苗、蛋白质因子、免疫调节剂及单克隆抗体。（

）

答案:对能为细胞提供贴附表面的培养方式目前主要有旋转瓶培养、中空纤维培养、微囊化培养、微载体等。（

）

答案:错根据动物细胞的培养特性不同，可分为旋转瓶培养、中空纤维培养、细胞工厂培养等。（

）

答案:错/star3/origin/5004528fda9ae7d235f8d7884c380551.png

答案:原代培养和传代培养转瓶培养的优点不包括：（

）

答案:劳动强度小原代培养的细胞较传代培养的细胞消化时间相对较短。

答案:错上皮细胞型细胞彼此紧密相连,因为相互拥挤而呈现“铺路石”状。(

)

答案:对细胞培养瓶外的污染物,一般情况下无需处理。(

)

答案:错细胞代谢旺盛,酸性物质积累,致营养液pH值下降,颜色变紫,需换液或传代处理。

答案:错处于停滞期的细胞可通过传代进行挽救,但处于生命衰退期的细胞会不可逆的向死亡方向发展。(

)

答案:对液氮渗透性很弱,所以当人体皮肤接触液氮时,不易受到严重冻伤。(

)

答案:错细胞冻存时,常采用二甲基亚砜(DMSO)作保护剂。(

)

答案:对细胞活性检测是了解不同药物、生物活性物质等对细胞作用效果的一种简单、直观的手段。

答案:对体外培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,因此体外培养的细胞要在体外持续地培养就必须传代。

答案:对细胞被微生物污染后,若镜下观察菌体形态呈卵形,散在细胞周边和细胞之间生长,可判断为细菌污染。(

)

答案:错贴附生长的细胞在外形上一般与体内无明显不同。(

)

答案:错台盼蓝法镜下计数时,遇见2个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算。

答案:对细胞复苏应采用快速融化的方法,

这样可以保证细胞内结晶在很短的时间内被融化,避免形成胞内再结晶,从而对细胞造成损害。(

)

答案:错细胞复苏失败与液氮罐中液氮的容量保管没有关系。(

)

答案:错原代培养时,因小鼠毛中有很多微生物,应使用75%的酒精长时消毒。(

)

答案:错有些贴壁依赖性细胞在体外进行培养时,细胞质常向外伸出2-3个长短不同的突起,细胞形态有梭形、扇形或不规则三角形,具有这种细胞形态的细胞归入成纤维细胞型。(

)

答案:对原代培养最基本、最常用的方法有组织块培养法和消化培养法两种。(

)

答案:对原代培养时,常采用颈椎脱臼法处死小鼠。(

)

答案:对细胞系的维持是通过换液、传代、再换液、再传代实现的。

答案:错常用的细胞计数法有血球计数板计数法和自动细胞计数仪计数法。(

)

答案:对WST-1溶液4℃避光只能保存一周,-20℃避光可以保存半年,建议使用时适当分装,尽量避免反复冻融。

答案:对液氮温度低达-196℃,能长时间保存细胞活力,理论上在液氮内细胞的储存时间是无限的。(

)

答案:对原代培养物首次传代时细胞接种数量要多一些,使细胞能尽快适应新环境而利于细胞生存和增殖

答案:对取材时要剔除脂肪、神经组织、坏死组织等等。(

)

答案:对一般来说,成熟个体较胚胎组织容易培养,正常组织较肿瘤组织容易培养。(

)

答案:错因受支原体污染的培养液常不发生混浊,细胞病理变化多数情况下表现轻微或不显著,所以支原体污染细胞后,不易察觉而被忽视。(

)

答案:对半悬浮生长细胞贴壁不牢,可用直接吹打法使细胞从瓶壁脱落下来,进行传代。

答案:对生长状况不好的细胞,用显微镜观察时,折光性变强,轮廓不清,边缘整齐,细胞发暗、胞质中常出现空泡、脂滴、颗粒样物质,细胞之间空隙加大。(

)

答案:错抗生素联合使用比单独使用效果好。预防性应用比污染后使用效果好。(

)

答案:对细胞培养实验中,为防止交叉污染,实验器材和培养用液不能混用。(

)

答案:对原代培养取材的基本要求只有无菌取材、器材锋利两个要点。(

)

答案:错细胞复苏整个操作都需在无菌条件下进行,严防污染。

答案:对将冻存在液氮或者-70℃冰箱中的细胞解冻之后重新培养,使细胞恢复生长,这个过程就叫细胞复苏。(

)

答案:对细菌和霉菌的污染多发生在传代、换液或其它实验操作之后,因而在进行上述操作后24~48

h要密切注意是否有污染发生。(

)

答案:对细胞冻存时,于4℃及-20℃可放置一个月。(

)

答案:错已发生细菌污染,再使用抗生素,常难根除。有价值的细胞被污染后,可试用5~10倍常用剂量,作用24~28小时,再换入常规培养液中,有时可奏效。(

)

答案:对细胞复苏时,要在1min内使冻存的细胞解冻。(

)

答案:对在电镜下可观察到污染物多分布在细胞周围和细胞间隙,有的直接吸附在细胞表面膜上,但在细胞基质内未见,可判断为支原体污染。(

)

答案:对台盼蓝法检测细胞活性时,死细胞圆形透明,活细胞染成蓝色,用活细胞占计数细胞中的百分比表示细胞活力。

答案:错细胞体外培养,其生长方式可以分为贴壁生长、悬浮生长和兼性贴壁生长三种。(

)

答案:对鼠胚组织取材极为不便,不易培养,价格昂贵,实验室不经常使用。(

)

答案:错MTT在细胞活性检测的实际应用中比WST-1、WST-8等更加简单、快速、准确。

答案:错在细胞培养过程中,加入培养瓶的细胞数量都应在一定的范围内,细胞才能达到其最佳生长状态。(

)

答案:对分离液体性原代细胞悬液时,可采用长时间高速离心。(

)

答案:错细胞系指经多次传代成功后所繁殖的细胞群体。

答案:错从体内取出细胞或组织的第一次培养,称为(

)。

答案:原代培养观察培养瓶内的培养物,要用(

)显微镜。

答案:倒置细胞转化的标志之一是细胞可能获得(

),也称不死性,即细胞获持久性增殖能力,这样的细胞群体称(

)细胞系,也称(

)细胞系。

答案:永生性;无限;连续下面不可能引起细胞发生化学污染的物品是:(

)

答案:浸泡玻璃器皿的酸缸下列关于培养细胞生命期说法正确的是:(

)

答案:所谓培养细胞生命期,是指细胞在培养中持续增殖和生长的时间。下列不属于贴壁生长的体外培养细胞的形态类型是:(

)

答案:放射细胞型MTT法的检测波长为(

)。

答案:570nm一般原代细胞传代按(

)接种,细胞系传代按(

)接种。

答案:1:2;1:4细胞冻存和复苏的基本原则是:(

)

答案:慢冻快融为了除去漂浮的组织块和残留的血细胞,原代培养多少天后需换液一次:(

)

答案:3-5天应根据细胞对营养的要求选择不同的培养液对细胞进行复苏,一般细胞复苏时常用(

)。

答案:DMEM培养液MTT经活细胞线粒体脱氢酶转化成的有色物质不溶于水,对其进行定量分析时,需加入(

)溶解后方能测定。

答案:二甲基亚砜传代和换液后,如果发现培养液很快变黄,不可能由以下哪个因素造成:

答案:培养器皿没有洗干净,有碱性残留物细胞复苏时,水浴温度为:(

)

答案:38~40℃下面哪项不是消化法培养原代细胞的优点?(

)

答案:操作比较简单正常新鲜的培养液为(

),这种颜色代表培养液的pH值大约为7.2~7.4。

答案:红色或橙红色细胞培养过程中,使用胰蛋白酶的目的是(

)

答案:使动物组织分散成单个细胞进行培养下列不属于悬浮型细胞的是:(

)

答案:神经细胞WST-1溶液测定细胞活性时不需注意以下哪个事项?(

)

答案:酶标仪测定前,需加入二甲基亚砜溶解有色转化物方能测定关于细胞系维持注意事项错误的是:(

)

答案:抹去原始编号,重新标记在组织块培养时,下面哪种操作或方法不利使组织块粘贴牢固?

答案:及时更换培养液下面哪项不是组织块法培养原代细胞的优点?(

)

答案:细胞生长较快台盼蓝法检测细胞活性时,细胞悬液和台盼蓝染液的添加比例为(

)。

答案:1:1各种细胞系都应在传代期的(

)进行充足的冻存储备。

答案:早期细胞复苏次日,最好换液,目的是:(

)

答案:弃去漂浮的死亡细胞下面哪种试剂可用于终止胰蛋白酶的消化作用?(

)

答案:含小牛血清的培养液细胞经荧光染色剂Hoechst

33258染色后,在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之荧光小点,证明有(

)污染。

答案:支原体生长状况良好的细胞,不具备下面哪项镜下观察特征?(

)

答案:折光性弱体外培养动物细胞的一代生长过程为

。(

)

答案:游离期

、贴壁期、潜伏期、指数生长期、停滞期细胞冻存的最佳浓度为(

)。

答案:5×

~

1

×个/ml下面哪个冻存液的配方是正确的?(

)

答案:90%血清+10%

DMSO细胞培养过程中由于细胞的代谢活动,酸性物质增多,pH值下降,培养液变成(

)

。

答案:黄色使用液氮冻存细胞时,应定期查看液氮余量,确保罐内液体高度没过重要样品,最少时,液氮不可少于罐体容积的(

)。

答案:三分之一细胞冻存的最佳时期为(

)。

答案:对数生长期快速检验细胞冷冻和复苏效果的方法是(

)。

答案:细胞活性检测细胞复苏失败的因素不包括(

)

答案:将细胞从液氮罐中拿出时,用镊子挟持冻存管镜下观察细胞培养物,可见丝状、管状或树枝状菌丝,并悬浮飘荡在培养液中,可判断为(

)污染。

答案:真菌(

)污染的典型特征是细胞培养液短期内变黄且明显浑浊。(

)

答案:细菌肉眼观察细胞培养物,短期内未见培养液混浊,但在培养液中有白色或浅黄色漂浮物,可判断为(

)污染。

答案:真菌一般来说原代培养物未达到支持物(

)的表面积,不要急于传代。

答案:80%动物细胞培养所需的气体中没有二氧化碳。

答案:错手或相对较脏的物品不能经过开放的瓶口上方,瓶口最易污染,加液时如吸管尖碰到瓶口,则应将吸管丢掉。

答案:对动物细胞培养是指将动物活体体内取出的组织用机械或消化的方法分散成单细胞悬液，然后放在模拟体内生存环境的体外环境中，进行孵育培养，使其生存和生长的方法。

答案:错体外培养动物细胞对营养要求很高,需要氨基酸、维生素、激素、生长因子等。

答案:对细胞培养在细胞生物学、遗传学、药理学、病毒学上都有广泛应用

。

答案:对动物细胞培养操作简便易于检测实验结果。

答案:对早期细胞培养常用天然培养基例如:胎汁、血浆、血清。

答案:对无菌操作间专用于无菌操作、细胞培养,

要求清洁、干燥、无菌、不通风,局部空气洁净度要达到百级以下。

答案:对浸泡、煮沸、酸泡的器皿内要充满液体,不得有气泡。

答案:对培养器材包装时,手指与器材接触面积要小,手指不能触及器材的使用端。

答案:对配制消化液要用Hanks液。

答案:错旋转管培养法开创了细胞培养的先河。

答案:错血清可以直接从-20℃放到室温中解冻。

答案:错动物细胞培养用水应使用在太阳光下晾晒四周的三蒸水。

答案:错培养器材包装时,玻璃管道口(尖吸管、移液管手持端等)加棉花。

答案:对细胞培养用到的每种试剂都要精确并且无细菌危害。

答案:错合成培养基仍缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要，只能维持细胞的基本生存需要，所以又称为基础培养基。

答案:对细胞培养操作间经紫外线照射消毒和化学消毒后要开窗通风,减小对操作员的危害。

答案:错无菌操作时,开启、关闭长有细胞的培养瓶时,火焰灭菌时间要长。

答案:错射线消毒主要指使用X射线和高速粒子加速器等发出的辐射进行消毒,适用于消毒量大和不适做高压或滤过等方法消毒的培养用品,如塑料制品等,由于一般实验室不具备射线发射条件,故很少采用。

答案:对在培养动物细胞时需加入血清。

答案:对无菌操作时,不能用手触及已消毒器皿。

答案:对一切培养用品都要有固定的存放地点。培养用品与非培养用品应严格分开;已消毒与未消毒品应严格分开存放。

答案:对D-Hanks液和PBS都不含钙镁离子,有利于细胞的分散,因此常用来配制胰蛋白酶等组织消化液。

答案:对准备室主要用于培养器皿的洗涤、消毒、培养物的准备和物资保存等。

答案:对冲洗器皿时不需要流水振荡冲洗。

答案:错二氧化碳培养箱内水盘每周消毒、换无菌蒸馏水一次。

答案:对目前在细胞培养中最常用的是将青霉素(常用浓度是100

U/ml)与链霉素(100μg/ml)混合使用,俗称双抗液,加入所用的培养基中。

答案:对无菌操作时的一切操作,如安装吸管帽、打开或封闭瓶口等,都需在火焰近处并经过烧灼进行。

答案:对各种培养用液后,试剂瓶上都要有标签,标签注上名称、浓度和制备日期即可。

答案:错由于动物细胞没有细胞壁,所以对营养要求并不苛刻。

答案:错细胞所需气体主要是氧和二氧化碳，氧参与三羧酸循环，二氧化碳主要与维持培养基的pH有直接关系。

答案:对缓冲间常设于无菌室外,

3~5m2即可,要求清洁、干燥和不通风,

并设置紫外灯(距地面不超过3m)等必要的环境消毒设备。

答案:错培养器材包装时,封闭器材手持端,标记器材使用端。

答案:错现今国内外都普遍使用市售商品干粉合成培养基,除专门从事培养基的研究者外,各实验室已无必要再自己配制培养基。

答案:对培养室是进行细胞培养及各种无菌操作的区域,其位置最好设在阳面。

答案:错无菌操作时,吸管使用前其使用端要火焰消毒,吸取过营养液后的吸管可再用火焰烧灼。

答案:错天花板、地板和四周墙壁要光滑无死角不易在墙角堆积灰尘,以便定期清洁和消毒。

答案:对体外培养只有组织培养一种方法。

答案:错在超净工作台的紫外灯开启前,可将细胞培养的实验器材移入,但(

)不能在紫外灯下直接照射,需在操作时随手携入。

答案:培养用液和培养细胞湿热消毒所用设备是(

)

答案:高压蒸汽灭菌锅在动物细胞培养基中除必须的成份外,往往还需要加些液体,下列物质不能加的是(

)。

答案:氨水动物细胞培养玻璃器皿的清洗包括(

):(1)浸泡

(2)刷洗

(3)浸酸

(4)冲洗

答案:(1)(2)(3)(4)Hanks液在动物细胞培养操作中的作用是(

)。

答案:洗涤组织细胞在动物培养液中往往不需要加入的物质是(

)

答案:尿素要想使动物细胞更好地繁殖、生长,需在合成培养基中补加小牛血清,其浓度为(

)。

答案:5-20%下面哪种培养用液(

)可以不采用滤过除菌方式?

答案:D-Hanks液动物细胞培养中最常使用(

)孔径的滤膜进行滤过除菌。

答案:0.22μm在(

)原理的启发下,出现了多种类型培养瓶、多孔培养板的培养。

答案:卡式瓶若不使用二氧化碳培养箱,将会导致培养液(

)

。

答案:碱性增强动物细胞培养基(液)的除菌方法为(

)

答案:过滤除菌动物细胞培养液中一般都以(

)作为必含的能源物质。

答案:葡萄糖动物细胞培养中,抗生素消毒主要适用于(

)消毒。

答案:培养用液人体细胞培养的标准温度为(

)

答案:36.5℃±0.5℃培养动物细胞无需加入的营养成分是(

)。

答案:肾上腺素安装正压除菌滤器时以下操作正确的是(

)

答案:滤膜在使用前需经三蒸水浸泡过夜动物细胞培养的