2025年高考生物一轮复习讲义（新人教版）-第十单元　课时练57　微生物的培养技术与应用含答案及解析

一、选择题1．(2024·重庆高三联考)熔喷布的主要成分是聚丙烯，会对环境造成污染。某科研小组从土壤中分离到一种能分解聚丙烯的细菌。下列说法正确的是()A．配制固体培养基时，需要在无菌的环境中进行B．制备培养基时需要先将培养基的pH调节至中性或弱碱性C．从土壤中分离能分解聚丙烯的细菌，可采用平板划线法进行分离与计数D．纯化培养时，在培养皿皿盖做标记后倒置在恒温培养箱中静置培养2．(2023·淮安高三模拟)如图为实验室中酵母菌纯培养过程的部分操作步骤，下列说法正确的是()A．微生物的纯培养物就是指不含代谢废物的微生物培养物B．步骤①中，用手触摸估计培养基冷却至室温后开始倒平板C．步骤①使用的培养基制备过程是先调pH再灭菌D．③到④过程中，每次划线后都需要灼烧接种环并蘸取菌液3．(2021·山东，14)解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是()A．甲菌属于解脂菌B．实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源C．可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比D．该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力4．(2023·山东，15)平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是()A．不含氮源的平板不能用于微生物培养B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物5．(2024·咸阳高三调研)为加速我国北方冬春季秸秆原位还田的腐化过程，研究人员以冻牛粪为材料筛选出耐低温(10℃)的纤维素降解菌。下列相关叙述正确的是()A．选用冻牛粪为材料与其富含纤维素及含耐低温微生物有关B．初筛菌种前，要利用固体培养基在37℃条件下扩大培养目标菌种C．用于筛选的培养基是加入刚果红染料的牛肉膏蛋白胨培养基D．应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化6．(2024·湖北宜荆荆恩四市高三联考)营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。如图是科研人员利用影印法(用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上)初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。下列相关说法错误的是()A．①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养B．进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基上，再“复印”至基本培养基上C．氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选D．统计菌落种类和数量时要每隔一定时间观察统计一次，直到各类菌落数目稳定为止7．(2024·长春高三调研)研究人员拟从土壤样品中分离出高效降解甲醇的酵母菌并进行大量培养，操作流程如下。下列相关叙述错误的是()A．为保证无菌操作，接种环使用前必须灼烧灭菌B．平板浇注分离法适宜于厌氧型或兼性厌氧型的微生物的分离和计数C．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母菌细胞中甲醇的含量D．为了获得甲醇耐受酵母菌，可通过逐步提高培养基中甲醇的浓度来实现8．(2024·武汉高三检测)空气细菌总数测定主要有自然沉降法和撞击法。自然沉降法是让空气中的细菌自然降至琼脂平板表面，撞击法是将一定量空气以较高的流速喷射撞击到琼脂平板上，空气中的细菌即留滞在琼脂表面。关于自然沉降法和撞击法，下列分析错误的是()A．用于检测空气中细菌总数时都需对不同方位和高度的空气进行采样B．撞击法对洁净空气中细菌总数的测定比自然沉降法更准确C．两种方法均可使用无选择性的牛肉膏蛋白胨培养基D．用两种方法取样后在琼脂平板上形成的菌落均为单菌落9．为筛选出可高效抑制番茄枯萎病菌(一类真菌)的土壤芽孢杆菌菌株，科研人员从土壤中采集、分离、筛选芽孢杆菌菌株作为待测菌株，并采用平板对峙培养法观察各待测菌株的抑菌能力。如图为研究过程示意图，下列叙述错误的是()A．过程①常利用移液器取0.1mL菌液涂布平板B．过程②可根据芽孢杆菌菌落的形态、颜色进行挑选C．若甲、乙、丙三个平板的平均菌落数为12个，则10g土样中芽孢杆菌约有1.2×109个D．实验筛选出的菌株仍需进行大田种植试验以检测防治效果二、非选择题10．大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12～38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。请回答下列问题：(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以__________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于________培养基。(2)配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是_________________________________________________________________________________________________________________。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是________________。(3)为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株________，理由是______________________________________________________________________________________________________________________________________。菌株秸秆总重(g)秸秆残重(g)秸秆失重(%)纤维素降解率(%)A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.3211.(2024·南京高三调研)生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答问题：KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10g尿素1g琼脂15g溶解后蒸馏水定容到1000mL(1)本实验所使用的培养基按功能来分应为______培养基，原理是_______________________________________________________________________________________。(2)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有__________________________________________________________________________________。(3)实验是否需要振荡培养来提高溶氧量：______(填“是”或“否”)，原因是____________。转为固体培养时，常采用__________________________法接种，获得单菌落后继续筛选。(4)若在稀释倍数为105的三个培养基中，菌落数分别是156、174、183，则每克内容物中尿素分解菌的数目为__________个。(5)为证明分离得到的细菌是否可以分解尿素，可在培养基中加入________指示剂，看指示剂是否______________。(6)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24～48h，观察并统计具有红色环带的菌落数，结果见表，其中合理的稀释倍数为________。稀释倍数103104105106107菌落数>500367248361812.菌落总数可作为判定食品被污染程度的标志，也可以用于观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对送检样品进行卫生学评估提供证据。下图是某样品培养简化流程图，请分析回答下列问题：(1)该营养琼脂培养基配制过程中，其基本步骤包括按照培养基配方准确计算、称量、溶化、调节pH、____________________法灭菌等。然后将培养基放入47℃水浴锅保温，选择此温度的理由是______________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)实验过程中须将样品剪碎并使用均质器10000r·min－1处理1min，其目的是__________________________________。从水浴锅取出营养琼脂培养基倒平板适量，稍冷却后移液0.2mL样品于培养皿进行涂布，涂布时可______________，使涂布更均匀。(3)本实验用菌落计数的原理是基于__________________________________，运用这种方法统计的结果往往较实际值偏________。具体培养结果如下表。选取菌落数30～300的培养皿作为菌落总数的测定标准。当只有一个稀释浓度的平均菌落数符合此范围，以该培养皿菌落数×稀释倍数报告。当有两个浓度菌落值在30～300之间，报告结果由二者菌落数比值决定，若比值不大于2，则取平均数，且菌落数大于100取两位有效数字，两位之后的数值四舍五入；若比值大于2，则报告稀释度较低(稀释次数越多，稀释度越高)的培养皿菌落数。请填写例次3中“？”处的菌落总数为________。例次不同稀释度平均菌落数两稀释度菌落数之比菌落总数/[CFU/mL(g)]10－110－210－31136516420—1640022760295461.63800032890271602.2？(4)利用鲜奶进行工业生产酸奶时，不能使用______污染的鲜奶为原料，否则会使乳酸菌生长受到限制；利用________法可以除去鲜奶中的白细胞、杂菌和其他肉眼可见的异物，取其上清液用于发酵制酸奶。(5)密封良好的泡菜坛内有时会长一层白膜，这些白膜是____________(填“乳酸菌”或“酵母菌”)繁殖产生的。在泡菜腌制过程中坛、蔬菜等均未进行严格灭菌，而在发酵过程中一般不会出现其他杂菌大量繁殖，其原因是________(填序号)。①发酵的原料中缺乏杂菌生长需要的各种营养物质②发酵过程的温度不适合杂菌的生长③乳酸菌产生较多乳酸，许多好氧菌被杀死④在自然界中乳酸菌占优势

课时练57微生物的培养技术与应用1．B2．C[由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，A错误；步骤①中，用手触摸估计培养基冷却至50℃左右时，开始倒平板，B错误；③到④过程中，每次划线后对接种环进行灼烧处理，是为了杀死接种环上残留的菌种，使划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，不需要重新蘸取菌液，D错误。]3．B[乙菌菌落周围没有出现深蓝色，说明乙菌不能产生脂肪酶，不能利用脂肪为其供能，但乙菌可以在培养基上生存，说明该培养基不是以脂肪为唯一碳源，B错误。]4．D[不含氮源的平板可用于固氮菌的培养，A错误；平板涂布时涂布器使用前必须先浸在酒精中，然后在火焰上灼烧灭菌，这种操作属于灭菌，B错误；使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，C错误；脲酶可以催化尿素分解，在以尿素为唯一氮源的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素进行生长繁殖，D正确。]5．A6．B[进行②过程培养时，为了防止将完全培养基中特定营养成分带入基本培养基，应先将丝绒布“复印”至基本培养基上，再“复印”至完全培养基上，B错误。]7．C[挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定培养液中甲醇的含量，C错误。]8．D[由于上述两种方法都是对空气中细菌总数进行测定，在琼脂平板上形成的菌落有多种，不一定都是单菌落，D错误。]9．C[若甲、乙、丙三个平板的平均菌落数为12个，平均菌落数是12个不符合30～300的菌落计数要求，C错误。]10．(1)纤维素选择(2)杀死培养基中的所有微生物(微生物和芽孢、孢子)不接种培养(或空白培养)(3)C接种C菌株后秸秆失重最多，纤维素降解率最大解析(1)在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以纤维素为唯一碳源的固体培养基上进行培养；培养基从功能上分类可分为选择培养基和鉴别培养基，故该培养基从功能上分类属于选择培养基。(2)为检测灭菌效果可对培养基进行空白培养，即将未接种的培养基在适宜条件下培养一段时间，若在适宜条件下培养基中无菌落出现，说明培养基灭菌彻底，否则说明培养基灭菌不彻底。(3)测定酶活力时可以用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的生成量来表示。由表格可知，在适宜的条件下，C菌株在相同的温度和时间下，秸秆失重最多，纤维素降解率最大，说明该菌株的纤维素分解菌产生的纤维素酶活力最大。11．(1)选择只有能合成脲酶的细菌才能分解尿素，才能在该培养基上生长(2)为细菌生长提供无机盐、作为缓冲剂维持细胞生长过程中pH的稳定(3)否瘤胃中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡平板划线法或稀释涂布平板(4)1.71×108(5)酚红变红(6)106或105