《月季的花药培养》复习课件

课题2月季的花药培养1．花药培养产生花粉植株有两条途径：一是

胚状体途径，二是愈伤组织途径，这两

种途径主要取决于激素的种类及浓度配比。

2．影响花药培养的主要因素是材料的选择与培养基的组成。3．选择单核靠边期的花药培养成功率最高。4．确定花粉发育时期的方法有醋酸洋红法(最常用)和焙花青—铬矾法(花粉细胞核不易着色时)。花粉发育与花药离体培养1．被子植物的花粉发育(1)花粉：由

经过

分裂形成的

的生殖细胞。

(2)花粉发育过程及特点：小孢子母细胞↓

：4个单倍体细胞连在一起花粉母细胞减数单倍体小孢子四分体时期单核靠边期原生质双核期：细胞中含有

和

，它们

分别形成一个

和一个

，其中

的生殖细胞形成

花粉管细胞核生殖细胞核营养细胞生殖细胞两个精子↓(3)被子植物花粉的发育过程图示：2．产生花粉植株的两种途径(1)过程图示：(2)形成原因：主要取决于培养基中

的种类及其

。激素浓度配比3．影响花药培养的因素(1)主要因素：①材料的选择：a．不同植物的诱导成功率

。

b．就同一种植物来说，花期早期时的花药比

的更容易产生花粉植株。

c．一般来说，在单核期，细胞核

的时期，花药培养成功率最高。很不相同后期由中央移向细胞一侧②培养基的组成：培养基的

对花药培养也有影响。生长条件低温预处理成分及比例1．花粉发育时期的单核期细胞具有哪些特征？提示：细胞含有浓厚的原生质，核位于细胞的中央；随着细胞不断长大，细胞核由中央移向细胞一侧并分裂成一个生殖细胞核和一个花粉管细胞核，进而形成两个细胞——营养细胞和生殖细胞。2．选取材料时，为什么要选取处于适宜时期花药？提示：因为：①花粉发育的过程中，只有某一时期对离体刺激敏感；②选择单核期以前的花蕾接种，质地幼嫩，极易破损；选择单核期以后的花药接种，花瓣已有松动，又给材料的消毒带来困难。1．花粉发育的“四分体”与动物细胞减数分裂过程中“四分体”的比较

(1)被子植物花粉发育过程中的“四分体”是指由1个花粉母细胞经过减数分裂产生的连在一起的4个单倍体细胞，即“四分体”中的“四”指的是4个小孢子细胞。(2)减数分裂中的“四分体”是指在联会状态下的一对同源染色体，因为含有4条染色单体，所以叫做“四分体”，即“四分体”中的“四”指的是4条染色单体。2．菊花茎段组织培养与月季花药培养比较项目内容菊花组织培养月季的花药培养理论依据细胞的全能性基本过程脱分化→再分化外植体细胞类型体细胞生殖细胞项目内容菊花组织培养月季的花药培养操作流程制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培选材→消毒→接种→培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育影响因素选材、营养、激素、pH、温度、阳光等培养结果正常植株单倍体植株生殖方式无性生殖有性生殖可育性可育高度不育，秋水仙素处理，使染色体加倍后可育花药培养的操作过程镜检醋酸洋红焙花青­铬矾花丝酒精25℃左右分化培养基倍性变化1．在剥离花药时，为什么要尽量不损伤花药，还要彻底去除花丝？提示：损伤花药接种后容易从受伤部位产生愈伤组织；与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。2．培养形成的植株还需要怎样处理才能发育成正常植株？为什么要作进一步的鉴定和筛选？提示：(1)用秋水仙素处理幼苗。(2)因为花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化。1．镜检花粉发育时期的方法比较醋酸洋红法焙花青­铬矾法不同点方法的使用常用的方法花粉细胞核不易着色时，使用该方法步骤将花药放在载玻片上→滴1滴1%醋酸洋红→用镊柄捣碎花药→盖上盖玻片→镜检花药在卡诺氏固定液中固定20min→取出，放在载玻片上→焙花青­铬矾溶液染色→盖上盖玻片→镜检现象花粉细胞核染成深红色花粉细胞核染成蓝黑色相同点都可通过镜检来确定花粉是否处于适宜的发育期2．花粉植株出现染色体组数目变化的原因分析在花药培养过程中，尤其是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体组数目的变化，其原因有以下几个方面：(1)花粉细胞的融合。(2)接种花粉过程中混有小孢子母细胞。(3)在材料的低温预处理时低温抑制了纺锤体的形成。(4)在双核期时，生殖细胞核和花粉管细胞核并没有形成两个细胞，而是两个核发生了融合。例一：关于被子植物花粉的形成，说法正确的是(

)A．花粉的发育要经历四分体期、单核期和双核期B．花粉是花粉母细胞经有丝分裂形成的C．花粉发育经历的四分体期和减数第一次分裂的四分体时期的含义相同D．花粉母细胞形成花粉粒中精子的过程是一系列减数分裂的过程[解析]

花粉是花粉母细胞经减数分裂及有丝分裂形成的，经历四分体期、单核期和双核期等阶段。花粉粒中的生殖细胞经有丝分裂产生2个精子。四分体期指4个小孢子连在一起，而减数分裂的四分体时期是指同源染色体配对后，1个四分体含4条染色单体的阶段。[答案]

A例二：下列有关花药离体培养的几种说法，错误的是(

)A．材料的选择最常用的方法是焙花青­铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色B．材料消毒时需先用酒精浸泡，然后用氯化汞或次氯酸钙溶液浸泡，最后用无菌水冲洗C．接种花药后一段时间内不需要光照，但幼小植株形成后需要光照D．若接种的花药长出愈伤组织或形成胚状体后，要适时转换培养基，以便进一步分化成再生植株[解析