TSATA 069-2024 甘蔗中3-硝基丙酸含量的测定液相色谱-质谱质谱法

ICS67.050CCSX04甘蔗中3-硝基丙酸含量的测定液相色谱-Determinationof3-nitropropionicacidinsugarcanebyliquidchromatography—tandemmassspeIT/SATA069—2024前言 2规范性引用文件 3术语和定义 4原理 5试剂和材料 试剂 试剂配制 标准品 标准溶液配制 材料 26仪器和设备 27分析步骤 2试样制备 2试样的提取和净化 2基质加标标准工作曲线溶液的制备 2仪器参考条件 28结果计算与表述 3定性测定 3定量测定 3空白试验 3结果计算 39精密度 410检出限、定量限 4附录A（资料性）标准工作曲线溶液中3-NPA的提取离子色谱图 5T/SATA069—2024本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由深圳市分析测试协会提出并归口。本文件起草单位：深圳市罗湖区疾病预防控制中心，深圳市龙华区疾病预防控制中心，深圳市盐田区疾病预防控制中心。本文件主要起草人：朱波、倪一平、叶小莉、赖少阳、叶敏、陈传德、罗兰、秦威振、曾楚莹、王露、谢雨彤。1T/SATA069—2024甘蔗中3-硝基丙酸含量的测定液相色谱-质谱/质谱法本文件规定了甘蔗中的3-硝基丙酸的液相色谱—质谱/质谱测定方法。本文件适用于甘蔗中3-硝基丙酸含量的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T27404实验室质量控制规范食品理化检测3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4原理利用乙腈振荡提取甘蔗样品中3-硝基丙酸（3-NPA提取液离心过滤，上清液经乙二胺-N-丙基（PSA）固相萃取柱净化浓缩后，用液相色谱-质谱/质谱法测定目标物，结果通过外标法进行定量。5试剂和材料除非另有说明，本文件所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。试剂5.1.1乙腈（C2H3N）：色谱纯。5.1.2甲醇（CH3OH）：色谱纯。5.1.3甲酸（CH2O2）：色谱纯。5.1.4氨水（NH4OH）。试剂配制5.2.11%氨水-甲醇溶液：吸取1.0mL氨水，用甲醇稀释至100mL，混匀。5.2.20.5%甲酸水溶液：吸取5.0mL甲酸，用水稀释至1000mL，混匀。标准品3-硝基丙酸（3-NPA，C8H5NO6，CAS：603-11-2）：纯度≥97.0%。标准溶液配制5.4.1标准储备液（100µg/mL）：称取3-硝基丙酸标准品0.01g（精确到0.0001g），用乙腈溶解后转移至100mL棕色容量瓶中，用乙腈定容，配制成质量浓度为100µg/mL的标准储备液，于-20℃条件下保存，有效期三个月。5.4.2标准使用液（1.00µg/mL）：准确量取标准储备液1.0mL至100mL容量瓶，用乙腈定容，配制成1.00µg/mL的标准使用液，临用时配制。2脱液于40℃水温中氮吹至近干，用0.5%甲酸水溶液定容至1.0mL得到待测样品(下文简称样品),时间/min53T/SATA069—2024557.4.1.5柱温：40℃。7.4.1.6进样量：5.0μL。7.4.2质谱参考条件7.4.2.1离子源：电喷雾离子源ESI，离子源温度550℃。7.4.2.2扫描模式：负离子扫描模式。7.4.2.3检测方式：多离子反应监测（MRM）。7.4.2.4喷雾电压：-4500V。7.4.2.5源内气：55psi。7.4.2.6辅助气：55psi。7.4.2.7其他质谱采集参数见表2：表23-NPA监测离子对参数注2：对于不同质谱仪，仪器参数可能存在差异，应对质谱参数进行优化以8结果计算与表述定性测定在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间与标准工作曲线溶液中对应的保留时间偏差在±2.5%之间，且样品图谱中定性离子的相对丰度与浓度接近的标准工作曲线溶液图谱中对应的定性离子的相对丰度的偏差不超过表3中规定的范围，则可判定为样品中检出目标物。表33-NPA定性测定的相对离子丰度及最大允许偏差要求>20-50>10-20定量测定以系列标准工作溶液的3-NPA信号峰面积为纵坐标，其溶液浓度为横坐标，进行线性回归拟合，得到浓度与信号峰面积的线性回归方程。利用该方程对样品中3-NPA的含量进行计算。标准工作曲线溶液中3-NPA的提取离子色谱图参见附录A。空白试验空白试验的样本除不加甘蔗样本外，均按照7.2的步骤进行操作。结果计算试样中3-NPA的含量按公式（1）计算：式中：X——试样中3-NPA的含量，单位为微克每千克(µg/kgc——样品中3-NPA的含量，单位为纳克每毫升（ng/mL4T/SATA069—2024v——样品定容体积，单位为毫升（mLm——试样的称样量，单位为克（gf——稀释倍数；1000——换算系数。计算结果保留三位有效数字。