THBCIA 018-2023 谷子种传病害绿色控制技术规程

ICS65.020.99CCSB20Technicalregulationsforthegreencontrolofmilletseed-borndisea2023-12-31发布1本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准文件的结构和起草规则》、“国家标准化管理委员会民政部关于印发《团体标准管理规定》的通知（国标委联[2019]1号）”的要求和规定起草。本文件由河北省特色产业协会杂粮专业委员会提出。本文件由河北省特色产业协会归口。本文件起草单位：河北省农林科学院谷子研究所、中国作物学会粟类作物专业委员会、河北省特色产业协会杂粮专业委员会。本文件主要起草人：刘佳、董志平、白辉、李志勇、张梦雅、马继芳、王永芳、全建章、董立、刘磊、刘峰、梁国辉。本文件为首次发布。2T/HBCIA018-2023本文件规定了谷子种传病害绿色控制技术的术语和定义、病情分级、控制原则与控制技本文件适用于谷子种传病害的绿色标准化控制。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4404.1粮食作物种子第1部分：禾谷类GB/T8321农药合理使用准则NY/T393绿色食品农药使用准则NY/T1276农药安全使用规范总则DB13/T2338.3谷子抗病虫性鉴定技术规程第3部分：白发病DB13/T2338.4谷子抗病虫性鉴定技术规程第4部分：粒黑穗病DB13/T2338.5谷子抗病虫性鉴定技术规程第5部分：线虫病3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1谷子种传病害milletseed-borndisease以种子携带病原物传播为主的谷子病害。包括谷子白发病（Sclerosporagraminicola）、谷子线虫病（Aphelenchoidesbessyi）和谷子粒黑穗病（Ustilagocrameri），三种病害的症状和发生规律，见附录A。3.2无病种子cleaningproduction不携带谷子种传病害活体病原物的种子。3.3谷田清洁生产cleaningproduction清除田间病源的一种病害防治措施。将寄生在谷子或谷田野生寄主上的病原物，在扩散前将病部彻底清理出田间，并进行灭活处理。3T/HBCIA018-20234病情分级根据谷子种传白发病和线虫病发生程度，将谷田病情进行分级如下：5控制原则以生产和使用无病种子为前提，谷田清洁生产为重点，根据病情分级对不同发生程度的地块采用分级治理的原则。多措并举控制重病地块；种子处理等技术防控常发地块；谷田清洁生产控制零星发生地块；重点保护无病地块。实现地块病情逐年降级，由点到片再到面，逐步实现不用农药控制病害的目的。6控制技术6.1无病原种繁育无谷子种传病害的地块，或4年内没有种植谷子的地块，且周边500m之内没有谷子种植，或确保没有白发病或粒黑穗病发生。6.1.2种子处理6.1.2.1温汤浸种播种前，用55℃~56℃温水浸种10min，晾干后备用。6.1.2.2药剂处理根据种子携带病原种类选择适宜药剂对谷子原原种进行处理。白发病使用种子重量0.2%～0.3%的35%精甲霜灵种子处理乳剂进行拌种，线虫病使用种子重量0.2%～0.3%的40%辛硫磷乳油加水6%拌匀后闷种4h。如防线虫病兼白发病，先拌杀虫剂并闷种后再拌杀菌剂。药剂使用应符合NY/T1276规定。4T/HBCIA018-20236.1.3繁种田管理6.1.3.1中耕除草及时中耕除草，清除田间、地头的狗尾草、谷莠子等谷子种传病害野生寄主。抗除草剂谷子品种在3叶～5叶期应及时喷施相应除草剂。6.1.3.2谷田清洁生产生长季密切关注制种田零星病株的清理。白发病在孕穗期拔除灰背病株，抽穗初期拔除白尖病株，抽穗后拔除绿色刺猬头等；灌浆中期注意线虫病和粒黑穗病零星病株的拔除，并带到田外烧毁或深埋（＞30cm），确保生产的原种不携带种传病害的病原物。6.2无病良种繁育6.2.1地块选择6.2.2原种选择利用无病原种生产的不携带种传病原物的原种种子。6.2.3种子处理可用600g/L吡虫啉悬浮种衣剂或70%噻虫嗪种子处理可分散粉剂，按种子量的0.3%拌种，预防地下害虫和苗期病虫害。6.2.4繁种田管理6.2.4.1中耕除草6.2.4.2谷田清洁生产6.2.5良种病原检测种子取样参照GB/T3543.2执行。检测技术见附录B。发现种子携带种传病害的病原物5T/HBCIA018-2023则不能作为无病种子使用。6.3大田控制根据谷子种传白发病、线虫病在当地的发生情况，因地制宜选用下列相应病情级别的控制技术。6.3.1重病地块控制6.3.1.1土壤深翻谷子收获后深翻25cm～30cm。6.3.1.2轮作倒茬实行4年以上轮作。选择玉米、高粱、大豆、花生、蔬菜、甘薯、油料等非寄主作物进行轮作。6.3.1.3优选抗病品种种植的抗病品种应符合DB13/T2338.3、或DB13/T2338.5的规定。6.3.1.4优选无病良种禁止从病区调运种子，优先选用无种传病害的良种。种子质量应符合GB4404.1的规定。6.3.1.5种子处理没能选用无种传病害的良种，则需要选用农药对谷子种子进行处理，方法同6.1.2.2。6.3.1.6适期播种、浅播春谷气温稳定在15℃以上时适期播种，根据土壤墒情和谷子品种生育期，可以适期晚播。有条件地区采用地膜覆盖促进出苗。夏谷区抢墒早播，保证土壤墒情、适当浅播，加快谷子出苗速度。6.3.1.7中耕除草6.3.1.8谷田清洁生产6T/HBCIA018-20236.3.2常发地块控制6.3.2.1轮作倒茬实行2年～3年轮作。选择轮作倒茬的非寄主作物同6.2.1.2。6.3.2.2优选抗病品种6.3.2.3优选无病良种6.3.2.4种子处理6.3.2,5适期晚播、浅播6.3.2.6中耕除草6.3.2.7谷田清洁生产6.3.3零星发病地块控制6.3.3.1优选无病良种6.3.3.2种子处理7T/HBCIA018-20236.3.3.3中耕除草6.3.3.4谷田清洁生产6.3.4无病地块保护6.3.4.1优选无病良种6.3.4.2种子处理8T/HBCIA018-2023（资料性附录）A.1谷子白发病症状及发生规律A.1.1谷子白发病症状谷子白发病是系统侵染性病害，从种子发芽到穗期陆续显现症状。主要症状有：（1）芽死：种子发芽过程中被谷子白发病病菌侵染，幼芽变色扭曲，严重时导致腐烂，造成芽死，不能出土，从而引起缺苗断垄。（2）灰背和黄斑：从二叶期至拔节期陆续显现灰背苗，有系统灰背和黄斑灰背两种。系统灰背植株叶片正面产生与叶脉平行的苍白色或黄白色条纹，背面密生粉状白色霉层（病菌的孢子囊及孢囊梗黄斑灰背在叶正面出现形状不规则的油浸状黄斑，病斑背面有白色霉层，有时甚至出现褐色或深褐色边缘。植株越大，症状越明显。其中，系统灰背后期变成“枪杆”比例大，黄斑灰背变成“枪杆”比例小。（3）白尖、枪杆和白发：灰背病株继续发展，抽穗前，植株顶部2～3片叶丛生，叶尖或全叶黄白，心叶抽出后呈卷筒状直立，黄白色，形成“白尖”；以后病株逐渐变成深褐色，枯死，直立田间，称为“枪杆”；枪杆顶部的叶片组织纵向分裂为细丝，内部包被的黄褐色卵孢子粉末散落，剩下的灰白色卷曲如头发状的叶脉组织残余，即“白发”，是谷子白发病的典型症状。（4）刺猬头：又称看谷老，发生于穗期。病穗短缩、肥肿，小花内外颖变长，呈小卷叶状，全穗蓬松，宛如鸡毛帚或刺猬。初为绿色或带红晕，后变褐色，组织破裂，也能散出大量卵孢子。病穗不结实或部分结实。A.1.2谷子白发病发生规律谷子白发病病菌以卵孢子在种子表面、土壤中或未腐熟粪肥上越冬。卵孢子在土壤中可存活2年～3年，是主要初侵染源。病菌侵染谷子主要发生在幼芽期。种子萌发时，土壤中或种子表面的卵孢子也同时萌发，以芽管侵入谷子胚芽鞘，引起死亡或定殖其中，随着生长点的分化和发育，菌丝达到叶部或穗部，病株陆续出现灰背、白尖、枪杆、白发、刺猬头等症状。灰背时期孢子囊和游动孢子借气流和雨水传播，进行再侵染，形成灰背和局部黄斑症状。孢子囊进入心叶，也可形成白发症状。低温种子萌发和幼苗出土速度慢，发病重。土壤墒情差，播种深时，发病重。大气温湿度影响再侵染，田间饱和湿度，特别是有水滴的条件和20℃~25℃气温适于孢子囊生长，有利于孢子囊和游动孢子再侵染。不同品种对谷子白发病抗性有差异。9图1谷子白发病发生规律A.2.1谷子线虫病症状A.2.2谷子线虫病发生规律土壤中或室内的线虫至少能存活3年以上。谷子病原线虫为外寄生，谷子播种后，在谷粒、高温(25℃~30℃)能促使线虫更为活跃，若此时雨水较多，植物体表存在水膜，线虫可在A.3谷子粒黑穗病症状及发生规律A.3.1谷子粒黑穗病症状冬孢子附着在种子表面越冬，谷子播种后冬孢子萌发，从谷子胚芽鞘侵入图3谷子粒黑穗病发生规律T/HBCIA018-2023（资料性附录）B.1谷子种子带白发病病菌检测B.1.1检测方法取谷子种子1.5g放入试管中，加入无菌水3mL，充分搅拌，取出种子，将洗脱水离心，抽取下部少许，在显微镜10×10倍下观察，若有橘黄色白发病病原孢子，说明种子带菌。试验重复3次。为了更加精准检测，或者进一步证明以上镜检的病原孢子是白发病菌，可以采用分子检测技术。另取1.5g谷子种子进行脱皮，将种皮放入研钵内，加入液氮充分研碎，采用CTAB方法提取基因组DNA。利用谷子白发病病菌特异性引物Sg-28S-403-F/Sg-28S-1221-R对基因组DNA进行PCR扩增，利用1.2%琼脂糖凝胶进行电泳检测。检测到819bp的特异性扩增片段则谷子种子带白发病病菌。试验重复3次。B.1.2谷子白发病病菌特异性引物Sg-28S-403-F：5'-ACCGAATCGTTTCCAGTGTC-3'Sg-28S-1221-R：5'-TTCCCCGAATCCTCTAATCA-3'B.1.3PCR扩增体系与程序25μLPCR反应体系：2×EsTaqMasterMix12.5μL、模板DNA2.0μL、10μmol/L上下游引物各1μL、灭菌ddH2O8.5μL。PCR扩增程序：94℃预变性2min；94℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环反应；最后72℃再延伸5min。B.1.4PCR扩增片段核苷酸序列ACCGAATCGTTTCCAGTGTCTATAATCTGCGATATATTTCATCGGCGAATGTGTGCGTGCGTGTACTATGGCAGCGGCTTTTTGGCTGCGCTTGGTATGTGTGCTGTGCTTCCTTGCTGGTGCCCTGTATTGTGGTGGGACGCCAATGTCAGTTCGTAAACCGCGGGAAATGACTACCGAGGAGGTAAGGCTTACGCTTGCGTTTGTCTGTTATATCTTGGTGGACGAGTAGTTGTGGTTGGGACTGAGGTGCCTACAACGTGCTTTTGAGTGGGACTGCGTCTCCGTGTGCGCCGTGTGCGGATAGCTTGCTATATGCGTGTGGTTGTGTATGGATTGATGCGGACTTTAACTTGTTGCCGTTCGGGACGTTGGCGAAATGGAGCGATTTGACCCGTCTTGAAACACGGACCAAGGAGTCTAACATGTGTGCAAGTGTTAGGGTGTCGAAACCCGGACGCGTAATTAACGTGAAGGGCAGCGCAAGCTGTCTGAGGTAGGAAACGTTGCGGACTTCGGTCTGCGATGTGGCACTATCGACCGATCATGAACCTTCGTGGTGAAAGATTTGAGTTTGAGCACATATGTTGGTACCCGAAAGATGGTGAACTATGCCTGAGTAGAGTGAAGCCT/HBCIA018-2023AGGGGAAACTCTGGTGGAAGCTCGTAGCGATTCTGACGTGCAAATCGATCGTTGAACTTGGGTATAGGGGCGAAAGACTAATCGAACCATCTAGTAGCTGGTTCCCTCCGAAATCTCCCTCAGGATAGCAACAACTTATTTACGATAGTTTTATGAGGTAAAGCGAATGATTAGAGGATTCGGGGAAB.2谷子种子带病原线虫检测B.2.1检测方法用普通医用纱布包裹谷子种子1.5g、在20mL无菌水中浸泡4h，将浸泡液离心后吸出底部1mL洗脱液至计数板，在显微镜4×10倍下观察并进行线虫计数。试验重复3次。为了进一步验证该线虫是谷子病原线虫，吸出其中的线虫，使用“酶裂解”法提取线虫DNA，通过线虫特异性引物GU-F/GU-R进行PCR扩增，利用1.2%琼脂糖凝胶进行电泳检测，检测到245bp